一种角膜的脱细胞方法与流程

本发明涉及角膜脱细胞技术领域，尤其涉及一种角膜的脱细胞方法。

背景技术：

近年来，随着脱细胞技术的快速发展，将异种角膜进行脱细胞除去免疫原性物质之后所获得的角膜基质具有与人角膜基质类似的组织结构、生物物理特性和光学性能，成为人类角膜移植的最佳替代物，尤其是将动物角膜进行脱细胞获得的角膜基质，来源广泛，为角膜移植在临床上的应用提供了保障。

在现有技术中，通常将角膜置于容器中在振荡下通过脱细胞试剂进行脱细胞，在处理过程中，所述角膜与容器的器壁发生碰撞，容易损坏角膜，并且，在振荡过程中，难以保证角膜与脱细胞试剂始终充分接触，因此，角膜的脱细胞效率较低。

技术实现要素：

本发明的实施例提供一种角膜的脱细胞方法，该方法简单易操作，且能够在最温和的环境下提高角膜的脱细胞效率。

为达到上述目的，本发明的实施例采用如下技术方案：

本发明实施例提供一种角膜的脱细胞方法，包括：

步骤1)将角膜与脱细胞试剂装入真空袋中，排除空气，获得真空包装角膜；

步骤2)将所述真空包装角膜置于摇床中进行振荡，对角膜进行脱细胞。

优选的，所述步骤1)具体包括：

将真空袋开口打开并固定，将所述角膜与所述脱细胞试剂混合并注入所述真空袋中，将所述脱细胞试剂液面以上的空气挤出，并对所述真空袋进行密封。

优选的，所述步骤2)还包括至少一次换液过程，所述换热过程包括：

将所述真空袋剪破，用镊子将所述角膜夹出，并执行所述步骤1)。

可选的，每1mL脱细胞试剂对应装置1-2个角膜。

可选的，所述真空袋的长×宽为5cm×5cm。

可选的，所述真空袋的材质为聚乙烯。

可选的，所述角膜由角膜本体以及连接在所述角膜本体边缘一周的巩膜构成。

可选的，所述角膜通过如下方法获取：

摘取动物眼球，在所述动物眼球的巩膜上距离角膜缘预设距离处设定切点，从所述切点处沿角膜缘的方向将角膜本体从所述眼球上剪切下来；

将所获得的角膜本体上附带的虹膜撕除，获得角膜。

本发明实施例提供了一种角膜的脱细胞方法，通过将角膜与脱细胞试剂装入真空袋中，并排除空气，获得真空包装角膜，在对所述角膜进行脱细胞时，将所述真空包装角膜置于摇床中进行振荡，该方法简单易操作，且角膜能够与所述脱细胞试剂充分接触，同时，还能够避免角膜与固体容器发生碰撞，防止角膜发生损伤，因此，本发明实施例能够在最温和的环境下提高角膜的脱细胞效率。克服了现有技术中在振荡下对角膜进行脱细胞时，角膜与固体容器发生碰撞而使得角膜容易损伤，且脱细胞效率较低的缺陷。

附图说明

图1为本发明实施例提供的一种角膜的脱细胞方法的流程示意图；

图2为本发明实施例提供的一种角膜的获取方法的流程示意图。

具体实施方式

下面结合附图对本发明实施例提供的一种角膜的脱细胞方法进行详细描述。

本发明实施例提供一种角膜的脱细胞方法，参见图1，包括：

步骤1)将角膜与脱细胞试剂装入真空袋中，排除空气，获得真空包装角膜；

步骤2)将所述真空包装角膜置于摇床中进行振荡，对角膜进行脱细胞。

本发明实施例提供了一种角膜的脱细胞方法，通过将角膜与脱细胞试剂装入真空袋中，并排除空气，获得真空包装角膜，在对角膜进行脱细胞时，将所述真空包装角膜置于摇床中进行振荡，该方法简单易操作，角膜能够与所述脱细胞试剂充分接触，同时，还能够避免角膜与固体容器发生碰撞，防止角膜发生损伤，因此，本发明实施例能够在最温和的环境下提高角膜的脱细胞效率。克服了现有技术中在振荡下对角膜进行脱细胞时，角膜与固体容器发生碰撞而使得角膜容易损伤，且脱细胞效率较低的缺陷。

其中，对所述步骤1)的具体操作不做限定，只要能够获得真空包装角膜即可。

本发明的一优选实施例中，所述步骤1)具体包括：

将真空袋开口打开并固定，将所述角膜与所述脱细胞试剂混合并注入所述真空袋中，将所述脱细胞试剂液面以上的空气挤出，并对所述真空袋进行密封。

在本发明实施例中，操作简单方便，可实施性强。

其中，对所述角膜的数量和所述脱细胞试剂的体积之间的比例关系不做限定。

优选的，每1mL脱细胞试剂对应装置1-2个角膜。这样，通过对真空袋中的角膜进行挤压，能够使角膜不贴壁，使得角膜与所述脱细胞试剂在振荡下能够充分接触。

其中，对所述真空袋的大小不做限定，一般来讲，真空袋越大，所能够盛放的脱细胞试剂越多，反之，则所能够盛放的角膜数量就越少。

为了便于生产的进行，采用在市场上可以采购到的真空袋对所述角膜进行包装，能够节省人力、物力。优选的，所述真空袋的长×宽为5cm×5cm。

进一步优选的，当所述真空袋的长×宽为5cm×5cm时，所述角膜的个数为1-20个。在制作成真空包装角膜之后，能够使角膜与所述脱细胞试剂充分接触，避免角膜数量过大而发生贴壁。

其中，对所述真空袋的材质也不做限定，优选的，所述真空袋的材质为聚乙烯。一方面，现有的市场上可以采购的真空袋通常为聚乙烯塑料制成；另一方面，针对角膜来说，聚乙烯相对于其他的真空包装材料还具有毒性低，污染小的特点，并且，所述聚乙烯的透明性较好，便于观察所述角膜的脱细胞情况。

其中，对所述角膜的具体结构不做限定，所述角膜可以为通常所说的角膜，为透明的凸球形结构。

本发明的一实施例中，所述角膜由角膜本体以及连接在所述角膜本体边缘一周的巩膜构成。在本发明实施例中，由于巩膜由致密的胶原和弹力纤维构成，因此，在对所述角膜进行溶胀，为脱细胞做准备时，巩膜能够抑制角膜本体急剧胀大，避免了角膜本体的胶原基质的过度拉伸和膨胀，保护了角膜本体的胶原结构。

其中，对所述巩膜的宽度不做限定。只要所述角膜在溶胀时，在所述巩膜的束缚下能够减缓角膜本体的胶原基质的拉伸和膨胀即可。

本发明的一实施例中，所述巩膜的宽度为2-3mm。将所述巩膜的宽度保持在上述范围内，能够确保所述角膜本体的细胞得以充分溶胀的情况下，抑制所述角膜本体的胶原基质急剧膨胀，为所述角膜脱细胞做准备。

其中，对所述角膜的获取方法不做限定。只要能够将角膜本体以边缘附带巩膜的方式从眼球上分离下来即可。

本发明的一实施例中，参见图2，所述角膜通过如下方法获取：

步骤01)摘取动物眼球，在所述动物眼球的巩膜上距离角膜缘预设距离处设定切点，从所述切点处沿角膜缘的方向将角膜本体从所述动物眼球上剪切下来；

步骤02)将所获得的角膜本体上附带的虹膜撕除，获得角膜。

在本发明实施例中，该获取方法取材快速高效，不伤害角膜，且能够最大程度上去除多余组织，所获得的角膜由角膜本体和连接在所述角膜本体边缘一周的巩膜构成，在对该角膜进行脱细胞时，巩膜能够抑制角膜本体急剧胀大，避免角膜本体的胶原基质过度拉伸和膨胀，能够保护角膜本体的胶原结构。

其中，对所述动物的种类不做限定，所述动物可以为牛、羊或者是猪。

由于猪角膜与人角膜在组织结构、生物物理特性和光学特性上较为接近，且猪角膜相对于牛、羊来说更为安全，成本较低。优选的，所述动物眼球为猪眼球。

其中，对所述预设距离不做限定，为了最大程度上去除所述动物眼球上的多余组织，确保所述角膜本体的细胞得以充分溶胀的情况下，避免所述角膜本体的胶原基质的过度拉伸和膨胀。优选的，所述预设距离为2-3mm。

其中，对从所述切点处沿角膜缘的方向将角膜本体从所述动物眼球上剪切下来的具体操作不做限定。只要能够将角膜本体以边缘附带巩膜的形式从所述动物眼球上剪切下来即可

本发明的一优选实施例中，从所述切点处沿角膜缘的方向将角膜本体从所述动物眼球上剪切下来具体包括：

在所述切点处沿所述角膜缘的方向扎一切口，从所述切口处沿所述角膜缘的方向进行剪切。

在本发明实施例中，通过设置切口，方便剪切操作的进行。

其中，对所述切口的长度不做限定，只要在剪切时所采用的剪切工具能够伸入所述切口即可。

本发明的一实施例中，所述切口的长度为2-10mm。当切口的长度在该范围内时，便于角膜弯剪的伸入，操作方便快捷。

本发明的一优选实施例中，所述步骤2)还包括至少一次换液过程，所述换液过程包括：

将所述真空包装角膜的真空袋剪破，用镊子将所述角膜夹出，并执行所述步骤1)。

在本发明实施例中，通过对角膜进行换液，一方面，能够适应整个脱细胞过程中对脱细胞试剂的要求，在现有技术中，在对角膜进行脱细胞之前，往往对角膜通过溶胀进行前处理，这时，所述脱细胞试剂可以为溶胀溶剂，在溶胀完成后，可以将溶胀溶剂更换为脱细胞溶剂，当然，随着现有的脱细胞技术的不断成熟，在对所述角膜进行溶胀时，通常也需要换液，通过换液能够对溶胀溶剂进行不断更新，提高溶胀效果，并能有效去除残留物质。

以上所述，仅为本发明的具体实施方式，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，可轻易想到变化或替换，都应涵盖在本发明的保护范围之内。因此，本发明的保护范围应以所述权利要求的保护范围为准。