本申请要求以下四个美国临时专利申请的优先权，其各自于2015年9月8日提交：62/215,628；62/215633；62/215636；和62/215,673，它们中的每一篇通过引用整体并入本文。
发明领域
本申请涉及使用代谢型谷氨酸受体(mglur)的非选择性激活剂对行为障碍的治疗，以及在一个或多个mglur网络基因中具有遗传改变如拷贝数变异(cnv)的受试者中的行为障碍的诊断和治疗，。
背景和概述
行为障碍包括一组儿童的行为和情绪问题，导致他们很难遵循规则并以社会接受的方式行事。行为障碍的特征是重复的行为模式，这些行为模式违反了他人的权利或违反了社会规则。具有行为障碍的儿童和青少年表现出对人和动物的侵略行为；破坏财产；欺骗，撒谎或偷窃；和/或严重违反适龄规则。可能导致行为行为障碍发展的因素包括脑损伤、虐待儿童、遗传易感性、学业失败和创伤性生活经历(americanacademyofchild&adolescentpsychiatry：conductdisorders(2013)andercanes，etal.childadolescpsychiatrymenthealth.5(1)：10(2011))。
在美国，行为障碍的估计终生患病率为9.5％，其中男性多于女性(参见nockmk，etal.psychol.med.36(5)：699-710(2006))。行为障碍的症状，如侵略和反社会行为，是导致美国儿童和青少年精神病转诊的主要问题。许多有行为障碍的儿童和青少年也有情绪障碍、焦虑、创伤后应激障碍(ptsd)、药物滥用、注意力缺陷多动障碍(adhd)或学习障碍等并存状况。没有接受治疗的患有行为障碍的儿童和青少年可能在成年时表现出反社会行为，并且作为成年人与工作场所和关系方面仍然存在困难。儿童期或青少年时期的行为障碍与相关精神障碍、法律问题和过早死亡率的风险增加有关。
目前，使用一种或多种评定量表来诊断行为障碍，例如waschbuschdaassessment14(1)：65-74(2007)中所述的行为障碍评定量表(cdrs))，其已经在5-12岁患者中得到验证，并已被证明适用于行为障碍的临床研究。或者，由于异常行为检查表(abc)已被广泛使用，所以可以使用异常行为检查表(abc)(参见sansonesmjautismdevdisord42(7)：1377-1392(2012))来评估品行障碍，已经显示治疗有问题的行为的药物的临床敏感性，并可用于智力缺陷患者。
行为和心理治疗通常有助于帮助患有行为障碍的患者表达和控制愤怒(参见americanacademyofchild&adolescentpsychiatry：conductdisorders(2013))。药物治疗还可以帮助患有行为障碍的患者控制抑郁、冲动控制和adhd。在儿童和青少年中，虽然抗精神病药物的功效尚未证实，但是可以使用抗精神病药物来试图控制行为障碍的侵袭性症状(totejan，intjneuropsychopharmacol17(7)：1095-105(2014))。在患有行为障碍的儿童和青少年中使用抗精神病药物可以减少侵略；然而，它们的应用也引起了副作用，例如催乳素水平的变化(参见jamesacadvpsychiatrtreat16：63-75(2010)和ercan2011))。目前，针对有行为障碍的儿童和青少年的药物治疗选择有限，只有在行为治疗和家庭干预不能提供益处时才考虑这些治疗。
概述
发明人研究了超过800名被诊断患有行为障碍的患者的基因型，并发现这些患者在一个或多个代谢型谷氨酸受体(mglur)网络基因中具有遗传改变的频率显着高于健康对照。mglur网络基因中的遗传改变频率还在该焦虑症群体中明显高于没有其他神经心理障碍的对照群体。
因此，本文提供了治疗受试者中的行为障碍的方法，其包括向受试者施用有效量的代谢型谷氨酸受体(mglur)的非选择性活化剂，由此治疗行为障碍。在一些实施方案中，受试者在mglur网络基因中具有至少一种遗传改变如拷贝数变异(cnv)或单核苷酸变异(snv)。
本文还提供了治疗行为障碍的方法，其包括将有效量的代谢型谷氨酸受体(mglur)的非选择性活化剂施用于在mglur网络基因中具有至少一个遗传改变例如cnv的受试者，由此治疗行为障碍。在一些实施方案中，当受试者在mglur网络基因中具有cnv时，cnv是重复或缺失。
还提供了治疗受试者中行为障碍的方法，包括从遗传筛选获得结果，其确定受试者是否在mglur网络基因中具有遗传改变，并且如果结果显示受试者在mglur网络基因中具有至少一种遗传改变，通过施用有效量的mglur的非选择性活化剂来治疗受试者。
在一些实施方案中，提供了用于治疗行为障碍的方法，其包括向受试者施用有效量的代谢型谷氨酸受体(mglur)的非选择性激活剂，其中所述受试者具有至少一种行为障碍症状，由此治疗行为障碍。在一些实施方案中，提供了用于治疗行为障碍的方法，包括向受试者施用有效量的代谢型谷氨酸受体(mglur)的非选择性激活剂，其中所述受试者具有至少一种行为障碍症状和在mglur网络基因中的至少一种遗传变异，由此治疗行为障碍。本领域技术人员可以例如通过参考精神障碍诊断和统计手册第五版(dsm-5)(2013)来识别行为障碍的症状。症状包括违反他人的基本权利或主要社会规范的持续的、重复的行为模式。
在上述方法的一些实施方案中，mglur的非选择性活化剂是法索西坦，如法索西坦单水合物(ns-105或nfc-1)。在一些实施方案中，法索西坦以50mg、100mg、150mg、200mg、250mg、300mg、350mg或400mg的剂量施用，其中剂量每天施用一次、两次或三次。在一些实施方案中，法索西坦以50-400mg、100-400mg或200-400mg的剂量施用，并且每天施用一次、两次或三次。在一些实施方案中，法索西坦以200-400mg，如200mg、300mg或400mg的剂量施用，并且每天施用两次。
在一些实施方案中，该方法包括考虑筛选的结果以确定受试者是否具有遗传改变，例如mglur网络基因中的cnv。在上述方法的一些实施方案中，受试者在至少1、2、3、4、5、6、7、8、9或10个mglur网络基因中具有cnv。在一些实施方案中，mglur网络基因中的cnv通过从所述受试者获得包含核酸的样品并对所述样品进行筛选确定，所述筛选在第1层mglur网络基因的至少5、6、7、8、9、10、15、20、30、40、50、60、70或全部中评估cnv。在一些实施方案中mglur网络基因中的cnv通过从所述受试者获得包含核酸的样品并对所述样品进行筛选确定，所述筛选在第2层mglur网络基因的至少50、至少100、至少150、至少175或全部中评估cnv。在一些实施方案中mglur网络基因中的cnv通过从所述受试者获得包含核酸的样品并对所述样品进行筛选确定，所述筛选在第3层mglur网络基因的至少50、至少100、至少200、至少300、至少400、至少500或全部中评估cnv。在一些实施方案中，所述筛选不在grm1、grm2、grm3、grm4、grm5、grm6、grm7或grm8的一项或多项中评估cnv。在一些实施方案中，所述受试者在grm1、grm2、grm3、grm4、grm5、grm6、grm7或grm8的一项或多项中不具有cnv。
在上述方法的一些实施方案中，受试者有反社会人格障碍
。在一些实施方案中，受试者是儿童或青少年受试者，如年龄在5-17、5-8、8-17、8-12或12-18、13-18或12-17之间。在其他实施方案中，受试者是成人。在上述方法的一些实施方案中，mglur的非选择性活化剂与另一种药物组合施用，如抗精神病药物或非药物疗法。在一些实施方案中，非药物疗法可以包括脑刺激，例如迷走神经刺激、重复经颅磁刺激、磁性癫痫疗法或深部脑刺激。
在一些实施方案中，受试者的注意力不集中、多动和/或冲动的症状减轻。在一些实施方案中，攻击性或反社会行为的症状减轻。在一些实施方案中，所述方法减少其他行为症状，例如情绪障碍或睡眠障碍。在一些实施方案中，所述方法还包括在施用期间或之后评估症状例如侵袭性或反社会行为以及注意力不集中、过度活跃和/或冲动，例如以确定受试者中一种或多种症状是否已减轻。在一些方法中，这种评估可以基于康纳的综合行为评定量表来执行。在一些实施方案中，所述方法进一步包括在施用期间或之后获得受试者的严重性或改善的临床总体印象。在一些实施方案中，所述方法可以改善受试者的临床整体改善评分。例如，在用激活剂治疗1周后，例如治疗2周，3周或4周后，这种症状可能减少。
本文还提供了在受试者中诊断行为障碍的方法，其包括从受试者分离包含核酸的样品，在至少一个mglur网络基因中分析所述样品遗传改变的存在或不存在，和如果所述受试者在mglur网络基因中具有至少一个遗传改变则诊断焦虑症。还提供了用于诊断受试者中行为障碍的方法，其包括从受试者分离包含核酸的样品，从所述样品分离核酸，分析所述样品中所述核酸在至少一个mglur网络基因中遗传改变的存在或不存在，如果在mglur网络基因中检测到至少一种遗传改变，则将所述受试者鉴定为具有行为障碍。还提供了用于将受试者鉴定为具有行为障碍的方法，其包括从患者获得样品，任选从所述样品分离核酸，任选扩增所述核酸，并分析所述样品中所述核酸在至少一个mglur网络基因中遗传改变如cnv的存在或不存在，其中如果在mglur网络基因中检测到至少一种遗传改变如cnv，则将所述受试者鉴定为具有行为障碍。此外，本发明还提供了在受试者中诊断行为障碍的方法，其包括分析关于一个或多个mglur网络基因的遗传信息，任选将所述受试者的信息与不具有行为障碍的对照受试者比较，且如果所述遗传信息表明所述受试者在mglur网络基因中具有至少一种遗传改变则诊断行为障碍。
本文还提供了在受试者中确认行为障碍诊断的方法，其包括通过不包括检测或分析mglur网络基因中遗传改变的方法从诊断患有行为障碍的受试者获得包含核酸的样品；任选扩增所述样品中的所述核酸；和确定所述受试者在mglur网络基因中是否具有至少一种遗传改变，如cnv，且如果所述受试者在mglur网络基因中具有至少一种遗传改变则确认行为障碍的诊断。
在任何上述方法中，在mglur网络基因中分析至少一种遗传改变的存在或不存在包括使用下述方法：微阵列、全基因组测序、外显子组测序、靶向测序、fish、比较基因组杂交、基因组作图或其他使用下一代测序、sanger测序、pcr或taqman技术的方法。
在一些实施方案中，受试者在1个、2个或多个mglur网络基因中具有cnv。在一些实施方案中，所述方法包括通过将所述样品进行筛选检测mglur网络基因中的cnv，所述筛选在至少2、3、4、5、6、7、8、9或10mglur网络基因中评估cnv。在一些实施方案中，mglur网络基因中的cnv通过将所述样品进行筛选确定，所述筛选在第1层mglur网络基因中的至少5、6、7、8、9、10、15、20、30、40、50、60、70或全部中评估cnv。在一些实施方案中，mglur网络基因中的cnv通过将所述样品进行筛选确定，所述筛选在第2层mglur网络基因中的至少50、至少100、至少150、至少175或全部中评估cnv。在一些实施方案中，mglur网络基因中的cnv通过将所述样品进行筛选确定，所述筛选在第3层mglur网络基因中的至少50、至少100、至少200、至少300、至少400、至少500或全部中评估cnv。
在上述方法的一些实施方案中，subjecthasantisocialpersonalitydisorder.在一些实施方案中，受试者是儿童或青少年受试者，如年龄在5-17、5-8、8-17、8-12或12-18、13-18或12-17之间。在一些实施方案中，确定mglur网络基因中至少一项遗传改变存在或不存在的筛选方法包括使用下述方法：微阵列、全基因组测序、外显子组测序、靶向测序、fish、比较基因组杂交、基因组作图或其他使用下一代测序、sanger测序、pcr或taqman技术的方法。
在一些实施方案中，在所述受试者中未评估grm1、grm2、grm3、grm4、grm5、grm6、grm7或grm8的一项或多项中的遗传改变或cnv。在一些实施方案中，所述受试者在grm1、grm2、grm3、grm4、grm5、grm6、grm7或grm8的一项或多项中不具有cnv。在一些实施方案中，所述受试者在grm1、grm2、grm3、grm4、grm5、grm6、grm7或grm8的任何中不具有cnv。
在本概述的前述段落中描述的任何方法和实施方案中，受试者可具有行为障碍以及一种或多种共病病况，例如注意力缺陷多动障碍(adhd)、对立违抗障碍(odd)、自闭症、图雷特综合征、焦虑症、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、发育障碍、运动障碍、情绪障碍或抑郁症。在其他情况下，受试者不具有下述一项或多项：adhd、odd、自闭症、图雷特综合征、焦虑症、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、发育障碍、运动障碍、情绪障碍或抑郁症。在其他情况下，受试者不具有下述任何：adhd、odd、自闭症、行为障碍、图雷特综合征、焦虑症、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、发育障碍、运动障碍、情绪障碍或抑郁症。在一些实施方案中，焦虑症受试者不具有ocd、恐惧症或抑郁症的任何。
在一些实施方案中，受试者患有焦虑的共病症状，并且在一些情况下，该方法减轻了焦虑症状。在一些实施方案中，受试者患有ocd，并且在一些情况下，该方法减轻ocd症状。在某些情况下，受试者患有抓搔症的共病症状如皮肤过度抓搔，并且该方法减轻了这些症状。在一些实施方案中，所述受试者患有一种或多种共病发育障碍，并且在一些情况下，所述方法降低与所述发育障碍相关的症状的严重程度。
在本文的任何方法中，受试者可能具有adhd以及行为障碍。在本文的任何方法中，受试者可以在用激活剂治疗至少1周后，例如至少2周，至少3周或至少4周后具有一种或多种以下表型变化：(a)所述受试者具有控制愤怒的症状且所述愤怒控制的症状减少；(b)所述受试者具有破坏性行为的症状且所述破坏性行为的症状减少；(c)所述受试者的cgi减少至少1或至少2；1、2、3或4周治疗后所述受试者的cgi评分为1或2；(d)1、2、3或4周治疗后所述受试者的cgi-s评分为1；所述受试者的adhd评定量表评分减少至少25％，如至少30％、至少35％或至少40％；(e)所述受试者具有注意迟钝的症状且所述注意迟钝的症状减少；所述受试者具有活动过度的症状且所述活动过度的症状减少；(f)所述受试者具有冲动的症状且所述冲动的症状减少；(g)所述受试者具有odd的症状如愤怒和烦躁、辩论和反抗，和/或报复且所述odd的症状减少；(h)所述受试者具有焦虑的症状且所述焦虑的症状减少；(i)所述受试者具有图雷特综合征的症状，且所述图雷特综合征的症状减少；(j)所述受试者具有自闭症的症状，且所述自闭症的症状减少；和(k)所述受试者具有运动障碍的症状，且所述运动障碍的症状减少。
在一个实施方案中，提供了用于诊断mglur相关病症的方法，其中如果检测到mglur网络基因中的至少一种遗传改变，则诊断受试者患有mglur相关病症。
附图简述
图1显示了来自患有行为障碍、抑郁症、强迫症(ocd)和恐惧症的患者的样本数量，这些患者包括在旨在评估mglur网络基因遗传改变的基因分型研究中。只有完全基因分型的患者样本才包括在数据分析中。
图2显示了包含在第1层基因集中的mglur网络基因。这些基因与基于cytoscapehumaninteractome的mglur基因(grm1-8)具有2度的蛋白质-蛋白质相互作用，cytoscapehumaninteractome是用于将生物分子相互作用网络与高通量数据整合的软件(如shannonp(2003)genomeresearch13：2498-2504所述)。第1层基因组包括76个基因。在人类基因组版本18(hg18)和人类基因组版本19(hg19)中列出了第1层中每个基因的确切位置。另外，对于hg19，列出了确切的基因位置加上500千碱基(即，从感兴趣基因之前500千碱基到之后500千碱基之间的范围)。还列出了起始单核苷酸多态性(startsnp)(即位于感兴趣基因之前500千碱基的snp)和endsnp(即位于感兴趣基因之后500千碱基的snp)。mglur的基因本身被称为“grm”。扩展区域(即500kg上下游)常常含有调控元件，并且如果受到cnv的影响，可与cnv位于基因序列本身中对基因表达和功能具有相同的影响。
图3显示了包括在第2层基因集中的mglur网络基因。这些基因与基于cytoscapehumaninteractome的mglur基因(grm1-8)具有2度的蛋白质-蛋白质相互作用，但是排除了来自第1层的基因。第2层基因集包括197个基因。人类基因组版本18(hg18)和人类基因组版本19(hg19)中列出了第2层中每个基因的确切位置。另外，对于hg19，列出了确切的基因位置加上500千碱基(即，从感兴趣基因之前500千碱基到之后500千碱基之间的范围)。还列出了hg19中的起始单核苷酸多态性(startsnp)(即位于感兴趣基因之前的500千碱基的snp)和endsnp(即位于感兴趣基因之后500千碱基的snp)。
图4显示了第3层基因集内的基因。包括使用互补基因查询与基于cytoscapehumaninteractome的mglur基因具有2度蛋白质-蛋白质相互作用的基因。包含在第1层和第2层中的基因不包括在层3中。第3层基因集包括599个基因。第3层中每个基因的确切位置在人类基因组版本18(hg18)和人类基因组版本19(hg19)中均列出。另外，对于hg19，列出了确切的基因位置加上500千碱基(即，从感兴趣基因之前500千碱基到500千碱基之间的范围)。还列出了在hg19中的startsnp(即位于目标基因之前500千碱基的snp)和endsnp(即位于目标基因之后500千碱基的snp)。
图5显示了来自完全基因分型的861名行为障碍患者；完全基因分型的95位抑郁症患者；完全基因分型的150位ocd患者；和完全基因分型的55位恐惧症患者样品中含有层基因(mglur网络基因)的拷贝数变异(cnv)出现的数目。需要注意的是，一些患者具有多于一个含有mglur网络基因的cnv出现
图6显示了具有在层1、层1+2或层1+2+3mglur网络基因集合内具有cnv的具有行为障碍、抑郁、ocd或恐惧症的完全基因分型的患者的百分比。
实施方案的说明
定义
除包括在本小节中的定义，术语的进一步定义穿插在整个文本中。
在本发明中，除非上下文另外明确指出，否则“一”或“一个”意指“至少一个”或“一个或多个”等。除非另有说明，否则术语“或”意味着“和/或”。然而，在多项从属权利要求的情况下，仅在替代方案中使用术语“或”指回多于一个前述的权利要求。
“mglur”或代谢型谷氨酸受体是指在神经组织中表达的称为mglur1、mglur2、mglur3、mglur4、mglur5、mglur6、mglur7和mglur8的八种谷氨酸受体之一。他们的基因缩写为grm1至grm8。mglur蛋白是g蛋白偶联受体。它们通常被分为三个亚组，包括mglur1和mglur5的组i受体被归类为慢兴奋性受体。组ii包括mglur2和mglur3。组iii包括mglur4、mglur6、mglur7和mglur8。组ii和iii被归类为慢性抑制性受体。mglur与离子型glur或iglur不同，它们是离子通道相关的谷氨酸受体，被归类为快速兴奋性受体。
出于本发明的目的，“mglur网络基因”不仅包含mglur基因grm1、grm2、grm3、grm4、grm5、grm6、grm7和grm8，而且还包括本文在图2-4中列举的其他基因中的每一个以及图2-4中列举的调节基因的dna区域。另外，“mglur网络蛋白质”是由mglur网络基因编码的蛋白质。
mglur网络基因分为三个子集：1级、2级和3级(见图2-4)。图2所示的第1层mglur网络基因包含76个基因，包括一些grm基因本身以及许多其他基因。如图3所示，第2层mglur网络基因包含197个基因，并排除了第1层基因。
第1层和第2层一起包括在“主要mglur网络”中。mglur基因的“主要网络”还包括基因4-sep，loc642393和loc653098，总共276个基因。评估4-sep、loc642393和loc653098基因目前存在技术困难。因此，它们不包括在层1和层2中，虽然它们被包括在本发明的基因的主要网络中。层1和层2的基因不同之处在于，在先前对患有精神障碍的受试者的基因分型研究中记录了层1基因的改变。
如图4所示，第3层mglur网络基因包含基于由cytoscape软件提供的合并的人类相互作用组的mglur网络远端部分的599个基因(shannonp等(2003)genomeresearch13：2498-2504)，并排除了1层和2层基因。因此，层3基因是“远端mglur网络”的一部分。除了层3基因，基因loc285147、loc147004和loc93444也包含在“远端mglur网络”中，尽管由于技术上的困难在本研究中尚未对其进行评估并且不包括在层3中。
如本文所用的“遗传改变”意指基因的dna中或在调节基因的dna中的任何改变，例如，可以导致与从未改变的dna产生的基因产物相比功能上改变的基因产物。例如，功能变化可以是不同的表达水平(上调或下调)或者一种或多种生物活动的损失或变化。遗传改变包括但不限于拷贝数变异(cnv)、单核苷酸变异(snv)(在本文中也称为单核苷酸多态性(snp))、移码突变或任何其他碱基对的取代、插入和缺失。
与参照基因组相比，“拷贝数变异”或“cnv”是包含基因、多个基因、基因片段或调节基因的dna区域的dna片段的重复或缺失。在一些实施方案中，cnv基于来自正常二倍体状态的变化来确定。在一些实施方案中，cnv代表涉及1千碱基(kb)或更大的dna片段的拷贝数变化。本文所述的cnv不包括由转座元件的插入/缺失引起的那些变体(例如，6-kbkpni重复序列)。因此，cnv这个术语涵盖诸如大规模拷贝数变异体(lcv；iafrate等人2004)、拷贝数多态性(cnp；sebat等人2004)和中等大小变体(isv；tuzun等人2005)，但不是反转录转座子插入的术语。
“cnv缺失”或“缺失cnv”或类似术语是指其中基因或基因片段被缺失的cnv。“cnv复制”或“复制cnv”或类似术语是指与正常参照基因组中发现的单拷贝相比，基因或基因片段以至少两个，可能多于两个的拷贝存在的cnv。
如本文所述，“样品”指来自受试者的样品，其可以被测试，例如，在一种或多种mglur网络蛋白中cnv的存在。样品可以包含细胞，并且其可以包含体液，例如血液、血清、血浆、脑脊髓液、尿液、唾液、泪液、胸膜液等。
“行为障碍”在“精神障碍诊断与统计手册”第五版(dsm-5)(2013)中被定义为一种持续的、重复的行为模式，违反了他人的基本权利或主要社会规范。通常，在成人之前(即年龄小于18岁)的患者中诊断出行为障碍。行为障碍的诊断可能基于社会、学术或职业功能的显着损害。目前，使用一种或多种评定量表来诊断行为障碍，例如cdrs(waschbusch2007)或abc(sansone2012)。行为障碍患者也可能有注意力不集中、多动、焦虑、情绪和睡眠障碍。
dsm-5(2013年)将“反社会人格障碍”定义为无视并侵犯他人权利的普遍模式，该模式至少年满18周岁且在15岁以前出现症状。因此，反社会人格障碍可以在成年后在儿童或青少年时期表现出与行为障碍症状相一致的个体中进行后来诊断。反社会人格障碍患者以前可能在儿童期或青春期时被诊断为行为障碍。在本申请中，患有行为障碍的患者包括年龄超过18岁且先前被诊断为行为障碍的受试者。在本申请中，患有行为障碍的患者还包括年龄在18岁以上，未被诊断为儿童或青少年时有行为障碍，但在儿童或青少年时表现出与行为障碍一致的症状的患者。因此，在本申请中，反社会人格障碍被包括在行为障碍的定义中。
术语“受试者”和“患者”可互换地用于指代人。术语“儿童受试者”或“儿童患者”可互换使用，指年龄小于18岁的人。“成人患者”或“成人受试者”是指18岁或以上的人。“青春期患者”或“青春期受试者”通常为约12至18岁，例如12至17岁或13至18岁。
行为障碍的诊断方法
在一些实施方案中，本发明包括诊断受试者的行为障碍的方法，其包括分析受试者的遗传信息以确定受试者是否在至少一种mglur网络基因中具有遗传变异，并且如果发现遗传变异则诊断受试者为行为障碍。在一些实施方案中，受试者具有行为障碍但不具有下述任何：adhd、对立违抗障碍(odd)、自闭症、情绪障碍、焦虑症、图雷特综合征、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、运动障碍、发育障碍或抑郁症。在一些实施方案中，所述受试者患有行为障碍并且还下述一项或多项：adhd、对立违抗障碍(odd)、自闭症、情绪障碍、焦虑症、图雷特综合征、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、运动障碍、发育障碍或抑郁症。
本文中的“发育障碍”包括例如根据国际疾病分类第9版(世界卫生组织)的代码为299.80、299.90、315.2，315.39、315.4、315.5、315.8和315.9，并且可能影响学习，协调和言语等行为。
“抓搔症”也称为皮肤搔痒症或皮肤搔痒症，是在自己的皮肤上引起过度搔抓而导致损伤程度的病症，包括在正常皮肤抓搔以及真实或想象的皮肤缺陷如痣、雀斑或痤疮。
在其他实施方案中，本发明包括确认受试者中的行为障碍的诊断。如本文所用，“确认行为障碍的诊断”是指诊断已经被诊断为行为障碍的受试者。在这个实施方案中，确认行为障碍的诊断方法包括通过不包括分析mglur网络基因的方法分析已经被诊断为具有行为障碍的受试者的遗传信息，以确定受试者是否具有至少一种mglur网络基因的遗传变异，以及如果发现至少一种mglur网络基因的遗传变异，则确认对品行障碍的诊断。在一些实施方案中，受试者具有行为障碍但不具有下述任何：adhd、对立违抗障碍(odd)、自闭症、情绪障碍、焦虑症、图雷特综合征、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、运动障碍、发育障碍或抑郁症。在一些实施方案中，所述对象患有行为障碍并且还有下述一项或多项：adhd、对立违抗障碍(odd)、自闭症、情绪障碍、焦虑症、图雷特综合征、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、运动障碍、发育障碍或抑郁症。
在其他实施方案中，本发明包括确认不患有adhd、对立违抗障碍(odd)、自闭症、情绪障碍、焦虑症、图雷特综合征、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、运动障碍、发育障碍或抑郁症的受试者中行为障碍的诊断，其包括通过不包含分析mglur网络基因的方法分析已被诊断为具有行为障碍的受试者的遗传信息，以确定受试者是否具有至少一种mglur网络基因中的遗传变异，并且如果发现至少一种mglur网络基因中的遗传变异，则确认对行为障碍的诊断。
在一个实施方案中，如果检测到mglur网络基因中的至少一个cnv、snv、移码突变或任何其他碱基对取代、插入、缺失或重复，则诊断和/或确认行为障碍。在其他实施方案中，如果检测到第1层mglur网络基因中至少有一个cnv、snv、移码突变或任何其他碱基对取代、插入、缺失或重复，则诊断和/或确认行为障碍。在另一个实施方案中，如果检测到第2层mglur网络基因中至少有一个cnv、snv、移码突变或任何其他碱基对取代、插入、重复或缺失，则诊断和/或确认行为障碍。在其他实施方案中，如果检测到第3层mglur网络基因中至少有一个cnv、snv、移码突变或任何其他碱基对取代、插入、重复或缺失，则诊断和/或确认行为障碍。
诊断或确认行为障碍的诊断可基于或证实在发现层1、层2和/或层3mglur网络基因中的遗传改变。遗传改变可能是cnv。cnv可能是包含编码和控制/调节mglur网络基因的一些或全部dna的dna区域的重复或缺失。在另一个实施方案中，在不患有adhd、对立违抗障碍(odd)、自闭症、情绪障碍、焦虑症、图雷特综合征、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、运动障碍、发育障碍或抑郁症的患者中诊断或确认行为障碍的诊断。在一些实施方案中，在患有adhd、对立违抗障碍(odd)、自闭症、情绪障碍、焦虑症、图雷特综合征、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、运动障碍、发育障碍或抑郁症的患者中诊断或确认行为障碍的诊断。
在一些实施方案中，对行为障碍的诊断或确认是基于mglur网络基因的拷贝数偏离正常二倍体状态的发现。在一些实施方案中，对行为障碍的诊断或确认是基于指示cnv缺失的0或1个拷贝数。在一些实施方案中，对行为障碍的诊断或确认是基于指示cnv重复的3个或更多的拷贝数。在一些实施方案中，在没有adhd、对立违抗障碍(odd)、自闭症、情绪障碍、焦虑症、图雷特综合征、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、运动障碍、发育障碍或抑郁症的患者中通过0或1的拷贝数或通过3或更多的拷贝数或通过偏离二倍体状态对行为障碍进行诊断或确认。
在其他实施方案中，在患有adhd、对立违抗障碍(odd)、自闭症、情绪障碍、焦虑症、图雷特综合征、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、运动障碍、发育障碍或抑郁症的患者中通过0或1的拷贝数或通过3或更多的拷贝数或通过偏离二倍体状态对行为障碍进行诊断或确认。在另一个实施方案中，在不患有adhd、对立违抗障碍(odd)、自闭症、情绪障碍、焦虑症、图雷特综合征、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、运动障碍、发育障碍或抑郁症的患者中通过0或1的拷贝数或通过3或更多的拷贝数或通过偏离二倍体状态对行为障碍进行诊断或确认。
在一些实施方案中，如果检测到mglur网络基因中的至少两个cnv，则诊断更严重形式的行为障碍。在一个实施方案中，如果检测到mglur网络基因中的至少两个cnv，则将不具有adhd、对立违抗障碍(odd)、自闭症、情绪障碍、焦虑症、图雷特综合征、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、运动障碍、发育障碍或抑郁症的患者诊断为更严重形式的行为障碍。
在一个实施方案中，诊断和/或确认行为障碍的方法包括：
从受试者获得含核酸样品；
任选地扩增核酸；
任选标记核酸样品；
将核酸应用于包含mglur网络基因的一种或多种核酸的固体支持物，其中所述核酸任选地包含mglur网络基因的snp；
去除任何未结合的核酸样品；和
检测与固体支持物上的核酸结合的任何核酸，
其中如果检测到结合的核酸，则所述受试者被诊断或确认为具有行为障碍。在一个实施方案中，所述方法还包括如果分析发现测试样品不同于对照或标准，则将任何结合的核酸与标准或对照进行比较并诊断或确认行为障碍。在该方法的另一个实施方案中，患有行为障碍的患者不具有下述任何：adhd、对立违抗障碍(odd)、自闭症、情绪障碍、焦虑症、图雷特综合征、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、运动障碍、发育障碍或抑郁症。在一些实施方案中，患有行为障碍的患者患有下述一项或多项：adhd、对立违抗障碍(odd)、自闭症、情绪障碍、焦虑症、图雷特综合征、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、运动障碍、发育障碍或抑郁症。
在本发明的每种诊断、确认和治疗方法中，受试者可能患有行为障碍但不具有adhd、对立违抗障碍(odd)、自闭症、情绪障碍、焦虑症、图雷特综合征、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、运动障碍、发育障碍或抑郁症。在本发明的其他诊断、确证和治疗方法中，受试者患有行为障碍和下述一项或多项：adhd、对立违抗障碍(odd)、自闭症、情绪障碍、焦虑症、图雷特综合征、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、运动障碍、发育障碍或抑郁症。
治疗焦虑症的方法和用途
本文包括治疗受试者中的焦虑症的方法，其包括施用有效量的非选择性mglur激活剂。如本文所用，术语“治疗”包括任何给予受试者中疾病或病症的治疗剂的施用或应用，并且包括抑制疾病、阻止疾病发展、减轻疾病症状或防止疾病或疾病症状的发生或复发。在一些实施方案中，如果反社会行为有所改善，违反其他权利发生的减少或与法律冲突减少，则认为治疗了行为障碍。
通常将mglur蛋白质置于三个亚组中，包括mglur1和mglur5的组i受体被归类为慢兴奋性受体。组ii包括mglur2和mglur3。组iii包括mglur4、mglur6、mglur7和mglur8。组ii和iii被归类为慢性抑制性受体。
mglur与离子型glur或iglur不同，它们是离子通道相关的谷氨酸受体，被归类为快速兴奋性受体。
“mglurs的非选择性激活剂”是指激活来自i、ii和iii类中多于一种的mglur的分子。因此，mglur的非选择性激活剂可以提供对mglur网络的一般刺激。这与可能仅显着激活单个mglur例如mglur5的特定mglur激活剂相反。非选择性mglur激活剂包括例如非选择性mglur激动剂。
在一些实施方案中，非选择性mglur激活剂是“法索西坦”。法索西坦是在体外研究中可以刺激组i和组ii/iiimglur的促智(即认知增强)药物。(见hirouchim等(2000)europeanjoumalofpharmacology387：9-17)。法索西坦可以通过激活组imglur来刺激腺苷酸环化酶活性，同时它也可以通过刺激组ii和iii的mglur抑制腺苷酸环化酶活性。(okam等，(1997)brainresearch754：121-130)。已经观察到法索西坦的高生物利用度(79％-97％)，其中在以前的人类研究中具有5-6.5小时的半衰期(参见malykhag等人(2010)drugs70(3)：287-312)。法索西坦是共享五碳氧代吡咯烷酮环的化学物质的赛他坦家族的成员。
法索西坦的结构是：
本文所用的术语“法索西坦”包括法索西坦分子的药学上可接受的水合物和任何固态、无定形或结晶形式。例如，这里的法索西坦这个术语包括如nfc-1的形式：法索西坦单水合物。除了nfc-1，法索西坦也被称为c-ns-105、ns105、ns-105和lam-105。
nfc-1先前在痴呆相关认知障碍的i-iii期临床试验中进行了研究，但在iii期试验中对痴呆没有足够的疗效。这些试验证明nfc-1对于这些适应症通常安全且耐受性良好。iii期数据表明，nfc-1对脑梗塞患者和具有脑血管疾病成人痴呆患者的精神症状表现出有益的作用。
在治疗实施方案的每种方法中，代谢型谷氨酸受体正变构调节剂、代谢型谷氨酸受体负变构调节剂或速激肽-3/神经激肽-3受体(tacr-3/nk3r)拮抗剂可单独或与如mglurs的非选择性激活剂组合施用，例如至mglur网络基因中具有改变的受试者。在一些实施方案中，治疗剂包括adx63365、adx50938、adx71149、amn082、1-(杂)芳基-3-氨基-吡咯烷衍生物、ly341495、adx48621、gsk1144814或sb223412。
本文还包括治疗行为障碍的方法，其包括将非选择性mglur活化剂如法索西坦给予在至少一种mglur网络基因中具有遗传改变的受试者。在一些实施方案中，该受试者患有焦虑症但不具有adhd、odd、自闭症、行为障碍、自闭症、图雷特综合征、焦虑症、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、发育障碍、运动障碍、情绪障碍或抑郁症，而在其他实施方案中，受试者患有行为障碍以及下述下述至少一项：adhd、odd、行为障碍、自闭症、图雷特综合征、焦虑症、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、发育障碍、运动障碍、情绪障碍或抑郁症。
在一些实施方案中，治疗方法包括鉴定或诊断受试者在至少一种mglur网络基因中具有遗传改变，并将非选择性mglur活化剂如法索西坦施用至所鉴定或诊断的受试者。在一些实施方案中，受试者患有行为障碍，但不具有adhd、odd、行为障碍、自闭症、图雷特综合征、焦虑症、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、发育障碍、运动障碍、情绪障碍或抑郁症。在其他实施方案中，受试者患有行为障碍以及一项或多项神经心理障碍如adhd、odd、行为障碍、自闭症、图雷特综合征、焦虑症、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、发育障碍、运动障碍、情绪障碍或抑郁症。
在治疗本发明实施方案的每种方法中，非选择性mglur活化剂可以改善可能在患有行为障碍的患者中看到的注意力不集中、活动过度、焦虑、情绪和睡眠障碍的症状。它也可能减少侵略和/或反社会行为的症状。
一些实施方案包括治疗行为障碍的方法，其包括鉴定或诊断受试者在至少一种mglur网络基因中具有遗传改变，并将有效量的mglur的非选择性激活剂如法索西坦施用至所鉴定或诊断的受试者。在一些实施方案中，受试者具有行为障碍，但不具有下述任何：adhd、对立违抗障碍(odd)、自闭症、情绪障碍、焦虑症、图雷特综合征、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、运动障碍、发育障碍或抑郁症。在其他实施方案中，受试者患有行为障碍以及一种或多种神经心理障碍，例如adhd、对立违抗障碍(odd)、自闭症、情绪障碍、焦虑症、图雷特综合征、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、运动障碍、发育障碍或抑郁症。
在治疗本发明实施方案的每种方法中，受试者可具有行为障碍，但不具有一种或多种神经心理障碍，例如adhd，odd，自闭症、情绪障碍，焦虑症，图雷特综合征，恐怖症和抑郁症。
在一个实施方案中，将非选择性mglur活化剂(例如法索西坦)施用于具有行为障碍且已被证实在mglur网络基因中具有至少一种遗传改变的受试者。遗传改变可能在第1层mglur网络基因中。遗传改变可能在第2层mglur网络基因中。遗传改变可能在第3层mglur网络基因中。遗传改变可能是多于一个的遗传改变，并且多于一个的改变可能在层1、2或3中之一，或者以层的任何组合。
一些实施方案包括治疗行为障碍的方法，其包括获得关于受试者的mglur网络基因的遗传信息，并且如果受试者在第1层的mglur网络基因中具有至少一个遗传改变如cnv，则施用有效量的非选择性mglur激活剂如法索西坦。
其他实施方案包括治疗行为障碍的方法，其包括获得关于受试者的mglur网络基因的遗传信息，并且如果受试者在1层mglur网络基因中具有至少一个遗传改变(例如cnv)，则施用mglur的非选择性激活剂例如法索西坦。其他实施方案包括治疗行为障碍的方法，其包括获得关于受试者的mglur网络基因的遗传信息，并且如果受试者在第2层mglur网络基因中具有至少一个遗传改变，例如cnv，则施用mglur的非选择性激活剂例如法索西坦。还有其他实施方案包括治疗品行障碍的方法，包括获得关于受试者的mglur网络基因的遗传信息，并且如果受试者在第3层mglur网络基因中具有至少一个遗传改变(例如cnv)，则施用mglur的非选择性激活剂例如法索西坦。可以通过施用mglur的非选择性激活剂如法索西坦来治疗在任何一个层级中或在三个层级中的任何一个的组合中具有超过一个cnv的受试者。在一些实施方案中，可以治疗具有行为障碍但不具有adhd、对立违抗障碍(odd)、自闭症、情绪障碍、焦虑症、图雷特综合征、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、运动障碍、发育障碍或抑郁症的受试者。在本发明的其他治疗方法实施方案中，除行为障碍外，受试者患有一种或多种神经心理疾病，如adhd、对立违抗障碍(odd)、自闭症、情绪障碍、焦虑症、图雷特综合征、恐怖症、强迫症(ocd)、难以控制愤怒、破坏性行为症状、抓搔症、运动障碍、发育障碍或抑郁症。
确定遗传改变是否存在的方法
任何生物样品都可用于确定mglur网络基因改变的存在或不存在，包括但不限于血液、尿液、血清、洗胃液、cns液体、任何类型的细胞(如脑细胞、白细胞、单核细胞)或身体组织。可以提取dna的任何生物来源材料可以用于确定mglur网络基因改变的存在或不存在。样本可能是新鲜收集的，或者样本可能以前已经收集用于任何用途/目的，并存储到遗传改变测试的时间。之前为不同目的而纯化的dna也可以使用。
已知用于确定遗传改变的各种方法，包括以下：
单核苷酸变异(snv)/单核苷酸多态性(snp)基因分型
在mglur网络基因中确定患者是否具有遗传改变，例如cnv，可以通过snv/snp基因分型，使用snv/snp基因分型阵列(诸如可从illumina或affymetrix商购的那些)进行。本文中也可互换地称为“单核苷酸多态性(snp)”的“单核苷酸变异(snv)”是指其中dna中的单个碱基不同于该位置处的通常碱基的变化。数百万的snv已被编入人类基因组。一些snv是基因组的正常变异，而另一些则与疾病有关。虽然特定snv可能与疾病状态或易感性相关，但也可以进行高密度snv基因分型，由此snv的测序信息可用于确定个体的独特基因组成。
在snv基因分型中，可以通过将互补dna探针与snv位点杂交来确定snv。snv基因分型工具可以使用各种平台，以适应不同的样品通量、复用能力和化学性质。在高密度snv阵列中，数十万个探针排列在小芯片上，使得在芯片上处理目标dna时，可以同时询问多个snv。通过确定样品中的靶dna与阵列上的探针(或冗余探针)的杂交量，可以确定特定的snv等位基因。使用阵列进行snv基因分型可以对snv进行大规模的询问。
当分析cnv时，在分析了snv之后，可以使用计算机程序来操纵snv数据以获得cnv数据。然后penncnv或类似程序可用于检测整个基因组中的信号模式并鉴定具有拷贝数变化的连续遗传标记。(参见wangk等，(june2008)coldspringharbprotoc))。penncnv允许检测cnv的千碱基分辨率。(参见wangk等(nov2007)genomeres.17(11)：1665-74)。
在cnv分析中，将snv基因分型数据与正常二倍体dna的行为进行比较。该软件使用snv基因分型数据来确定信号强度数据和snv等位基因比率分布，然后使用这些数据来确定何时偏离指示cnv的dna正常二倍体条件。这部分通过使用logrratio(lrr)来完成，lrr是对snv的两个等位基因的总信号强度的标准化测量(wang2008)。如果软件检测到强度(lrr)趋势低于0的连续snv区域，则表明cnv缺失。如果软件检测到强度(lrr)趋势高于0的连续snv区域，则表示cnv重复。如果与二倍体dna的行为相比没有观察到lrr的变化，则该序列处于正常的二倍体状态而不存在cnv。该软件还使用b等位基因频率(baf)，这是当cnv缺失或重复时等位基因丢失或获得而改变的两个等位基因的等位基因强度比的标准化测量。例如，cnv缺失通过lrr值的减少和baf值中缺乏杂合体来指示。相比之下，cnv复制通过lrr值的增加和杂合基因型baf簇分裂为两个不同的簇而表明。该软件自动计算lrr和baf以检测全基因组snv数据的cnv缺失和重复。同时分析强度和基因型数据准确定义了正常的二倍体状态并确定了cnv。
阵列平台，如来自illumina、affymetrix和agilent的那些可用于snv基因分型。定制阵列也可以基于本文描述的数据来设计和使用。
比较基因组杂交
比较基因组杂交(cgh)是另一种可用于评估如cnv的遗传改变的方法。与使用竞争性荧光原位杂交(fish)的参照样品相比，cgh是用于分析如cnv的遗传改变的分子细胞遗传学方法。从患者和参照源分离dna，并在dna变性后用荧光分子(即荧光团)独立标记。将荧光团与所得样品的杂交沿着每条染色体的长度进行比较以鉴定两个来源之间的染色体差异。颜色不匹配表示特定区域中测试样本中材料的获得或损失，而颜色的匹配表明遗传改变如特定区域的测试样本和参考样本之间的拷贝数没有差异。在某些实施方案中，荧光团不是天然存在的。
全基因组测序、全外显子测序和靶向测序
全基因组测序、全外显子组测序或靶向测序也可用于分析遗传改变如cnv。全基因组测序(wholegenomesequencing)(也称为全基因组测序(fullgenomesequencing)、完整的基因组测序(completegenomesequencing)或全基因组测序(entiregenomesequencing))涉及物种全基因组的测序，包括编码或不编码蛋白质的基因。相比之下，全外显子组测序仅对基因组中的蛋白质编码基因(大约1％的基因组)进行测序。靶向测序涉及仅选择基因组部分的测序。
本领域技术人员知道使用从受试者纯化的dna进行全基因组、全外显子组或靶向测序的广泛范围的技术。类似的技术可以用于不同类型的测序。用于全基因组测序的技术包括纳米孔技术、荧光团技术、dna纳米球技术和焦磷酸测序(即通过合成测序)。特别是，下一代测序(ngs)涉及数百万个dna小片段的测序，然后使用生物信息学分析将来自片段的测序数据拼接在一起。
由于整个外显子组测序不需要像全基因组测序那样大量的dna测序，因此可以使用更广泛的技术。整个外显子组测序的方法包括聚合酶链式反应方法、ngs方法、分子倒置探针、使用微阵列的杂交捕获、溶液内捕获和经典sanger测序。靶向测序允许为特定基因提供序列数据而不是整个基因组，并且可以使用用于其他类型测序的任何技术，包括含有用于测序感兴趣基因测序的材料的专用微阵列。
其他确定遗传改变的方法
采用基因组图谱技术的bionano或opgen等专利方法也可用于评估遗传改变，如cnv。
标准分子生物学方法如定量聚合酶链式反应(pcr)、液滴pcr和taqman探针(即设计用于增加定量pcr特异性的水解探针)可用于评估遗传改变如cnv。荧光原位杂交(fish)探针也可用于评估遗传改变，如cnv。患者中存在的遗传改变如cnv的分析不受用于确定如cnv的遗传改变的确切方法的限制。
基于cnv数据的行为障碍诊断方法
在一些实施方案中，遗传改变是snv或cnv。在mglur网络基因中发现的与行为障碍相关的snv或cnv如层1、层2或层3所列的基因或这些基因的集合示于图2-4。
在一些实施方案中，使用mglur网络基因的基因集合分析来自患有或怀疑患有行为障碍的患者的样品。在一些实施方案中，确定这些基因集合或组合中cnv重复或缺失的存在。在一些实施方案中，确定了图1所示的第1层基因中的cnv。在一些实施方案中，评估第1层基因的至少10、至少20、至少30、至少40、至少50、至少60、至少70或全部76个的组合的cnv的存在。在任何这样的基因组合中，可以从分析集合中排除个体、特定的第1层基因。例如，任何或所有的grm1-8都可能被排除在组合之外。
在一些实施方案中，分析如图3所示的层2基因遗传改变例如cnv的存在。第2层基因是那些与mglur紧密相关，但不包含在第1层中的基因。
在一些实施方案中，第2层基因与第1层基因一起评估。在一些实施方案中，评估了至少100个层2的基因，而在一些实施方案中，评估了至少150或197个层2的基因。在一些实施方案中，可以从用于评估的基因集合中排除个体，特定的第2层基因。
在一些实施方案中，对图4所示的599个层3的基因进行遗传改变如cnv的评估。在一些实施方案中，方法3基因与第1层和/或第2层基因一起评估。在一些实施方案中，评估至少100个层3的基因，而在一些实施方案中，评估至少150、200、250、300、350、400、450或599个层3的基因。在一些实施方式中，可以从用于评估的基因集合中排除个体，特定的第3层基因。
施用方法和组合疗法
在一些实施方案中，调节mglur信号的药物是法索西坦或法索西坦单水合物(也称为c-ns-105、nfc1、ns105或lam-105)。
剂量
在一些实施方案中，法索西坦可作为法索西坦单水合物(nfc-1)施用。在一些实施方案中，法索西坦可经口施用(即口服)。在一些实施方案中，法索西坦可作为胶囊施用。在一些实施方案中，法索西坦胶囊可包含50、60、70、80、90、100、110、120、125、130、135、140、145、150、155、160、165、170、175、180、185、190、195或200mg的法索西坦单水合物。在一些实施方案中，法索西坦可每日一次或每日两次给药。在一些实施方案中，每日法索西坦的剂量可以是50mg每日一次、100mg每日一次、200mg每日一次、400mg每日一次、50mg每日两次、100mg每日两次、200mg每日两次或400mg每日两次。在一些实施方案中，使用一系列剂量递增调整法索西坦的剂量。在一些实施方案中，将药物水平或临床响应的药代动力学数据用于确定剂量的变化。在一些实施方案中，不使用法索西坦的剂量递增。在一些实施方案中，受试者以预期在没有剂量递增方案的情况下临床有效的剂量的法索西坦治疗。
组合疗法
在一些实施方案中，法索西坦与其他药物组合用于治疗行为障碍。与法索西坦组合使用的其他药物可以是抗精神病药物(如氟哌啶醇，氯丙嗪，氨磺必利，阿立哌唑，阿塞那平，绿脓素，氯氮平，伊潘立酮，lurasidone，melperone，奥氮平，帕潘立酮，喹硫平，利培酮，sertindole，舒必利，齐拉西酮或佐替平)。
在一些实施方案中、法索西坦可以与非药物治疗组合使用，如心理疗法或脑刺激疗法。在一些实施方案中，法索西坦与脑刺激组合使用，所述脑刺激可以是迷走神经刺激、重复经颅磁刺激、磁性癫痫疗法，深部脑刺激或任何其他涉及通过电、磁或植入物调节脑功能的疗法。
制品
在一些实施方案中，本发明包含可用于本文所述的方法和治疗中使用的制品。在一个实施方案中，制品是用于检测图1-3中列出的一些或全部mglur网络基因(即层1-3)中的遗传改变的固体支持物或微阵列。(参见本文表1-3提供不同mglur网络相关snp的起始和终止位置。这些信息可能对构建微阵列有用。)在一些实施方案中，在相同的固体支持物或微阵列内评估包含在多层中的基因。在一些实施例中，排除某些mglur网络基因。在一些实施方案中，grm基因被排除。
因此，例如，在测定mglur网络基因以确定一种或多种基因中是否存在遗传改变(例如cnv)的一些实施方案中，使用包含适当探针的固体支持物或微阵列如芯片上来确定10、20、30、40、50、60、70或所有层1基因中的遗传改变的存在。在一些实施方案中，探针被标记。在一些实施方案中，探针用非天然组分标记。在一些实施方案中，固体支持物或微阵列还可以包括适当的探针用于确定至少10、20、30、50、100、150或全部层2基因中遗传改变的存在。在一些实施方案中，其可进一步包括适当的探针用于确定至少10、20、50、100、200、300、400、500或所有层3基因中遗传改变的存在。例如，可以使用这种固体支持物、微阵列或芯片来确定层1、层1+2或层1+2+3mglur基因网络中遗传改变如cnv或snv的存在，作为治疗adhd或22q缺失和/或重复患者的方法的一部分。
在一些实施例中，制品是针对来自层1、2和/或3的感兴趣的mglur网络基因的一组探针。在一些实施方案中，探针是标记的。类似地，可以制造一组探针用于确定10、20、30、40、50、60、70或所有的层1基因中遗传改变的存在。在一些实施方案中，可检测的标记是非天然存在的。在一些实施方案中，可以制造探针以确定至少10、20、30、50、100、150或所有层2基因中遗传改变的存在。在一些实施方案中，探针可进一步包括用于确定至少10、20、50、100、200、300、400、500或所有层3基因中遗传改变的存在的那些。这些各种探针组可以用于确定层1、层1+2或层1+2+3mglur基因网络中遗传改变如cnv或snv的存在，作为治疗adhd或22q缺失和/或重复患者的方法的一部分。
实施例
实施例1.来自患有行为障碍的患者样品中包含cnv出现的mglur网络基因的富集
在患有行为障碍、恐惧症、抑郁症和强迫症(ocd)的患者中进行了mglur网络基因潜在富集的研究。鉴于mglur及其信号网络的关键作用，mglur网络基因拷贝数的变化可能为精神疾病的诊断或治疗提供新的方法。之前，如eliaetal.，naturegenetics，44(1)：78-84(2012))所述，进行了在adhd患者中富集的拷贝数变异的大规模基因组关联研究。elia的研究纳入了约2,493名adhd患者和约9222名对照者，他们都是欧洲裔，年龄介于6至18岁之间。这项研究指出，对照组中含有mglur网络基因的cnv的发生率为1.2％，并且该发生率在adhd患者中升高至11.3％。
本研究样本是根据icp-9代码选择，用于诊断费城儿童医院(chop)接受电子健康记录的儿童和青少年。所有受试者都由进入行为障碍、抑郁症、强迫症(ocd)或恐怖症诊断的小儿精神病专家进行评估。图1显示了在每个行为障碍、抑郁症、强迫症和恐怖症组中分析的患者样本数量。如图1所示，每组的某些患者被完全基因分型。来自完全基因分型的患者的数据被用于分析。
使用单核苷酸变体(snv)/单核苷酸多态性(snp)基因型数据来确定cnv。snv基因分型提供了使用大量snv标记物来提供高密度snv基因分型数据的个体的基因指纹(参见wangk，eta1.(nov2007)genomeres.17(11)：1665-74)。在本研究中使用humanhap550genotypingbeadchiptm(illumina)或human610-quadv1.0beadchiptm(illumina)。对于这两个芯片，分析了相同的520个snv；因此，这两款芯片的数据是可以互换的。标准的生产商方案用于所有基因分型测定。illumina读取器用于所有实验。
用penncnv软件分析来自每个完全基因分型的患者样品的snv基因分型数据以确定信号强度数据和snv等位基因比率分布。这些数据然后经由同时分析强度和基因型数据来确定cnv(如之前在wang2008中所述)。使用该分析，指示连续snv丢失的区域的数据导致cnv缺失的出现。指示连续snv的获得的区域的数据导致cnv重复的出现。一个人可能有多种cnv缺失/重复，或可能没有任何cnv。
如前所述，开发了3层的mglur网络基因。图2-4显示了包含在三个基因集合中的基因-图2中的第1层(76个基因)、图3中的第2层(197个基因)和图4中的第3层(599个基因)。注意这些基因集合是非包含的，所以一个基因只包含在一个单独的层中。
图5显示不同患者组的每个mglur基因层中cnv出现数量的数据。cnv可能是重复或缺失。数据表明，与患有抑郁症、ocd和恐惧症的患者相比，来自患有行为障碍的患者的样品中每个mglur网络基因基因集合的cnv出现的数量更大。
图6显示了每个mglur网络基因集合中的cnv出现(重复或缺失)的患者百分比。这些数据表明，与健康对照或患有抑郁症、恐惧症或ocd患者相比，在每个mglur网络基因集合中具有相当高百分比的行为障碍患者具有cnv出现。具有在mglur网络基因中的cnv的患者的控制频率之前已经在一项对欧洲血统的9,000多名对照进行的大型研究中估计为1.2％(参见elia)。根据本研究的数据，ocd、恐怖症或抑郁症患者的cnv在1层突变阳性的频率低于1.6％，而对于1层突变阳性受试者，行为障碍患者中的cnv频率为11.3％对于1层和2层都为阳性的受试者为16.59％且对于1、2和3层突变阳性的受试者为34.94％。参见图6。图5-6所示，行为障碍患者mglur网络基因改变显着富集。因此，重点调节mglur基因网络的诊断和治疗在患有行为障碍的患者中可以是特别有效的。
实施例2.来自行为障碍患者样品的cnv中含有的mglur网络基因的分析
我们接下来分析了来自861名完全基因分型的患有行为障碍的患者的基因分型数据，以鉴定与cnv相关的基因。包含在这组925位患者的cnv中的mglur网络基因作为mglur网络中包含在cnv内的基因的实例呈现为重复或缺失。
表1显示来自行为障碍患者的代表性cnv的数据，其中第1层mglur网络基因位于患者样品中的cnv内或其附近。cnv可导致影响位于cnv外但在cnv附近的基因转录的结构改变。因此，分析中纳入了位于cnv的500,000个碱基对内的一个层内的mglur网络基因。当列出的cnv中包含mglur网络基因时，将其标记为“与基因距离”值为0。当mglur网络基因包含在靠近cnv但不在其中的位置时，将以“与基因距离”值大于0给出。
表1列出了cnv所在的染色体，其起始和终止位置与人类基因组19版(hg19)相关。位于cnv内的snp的数目被标记为“numsnp”，并且cnv的长度以碱基对记录。还提供了cnv的startsnp和endsnp。
“状态，cn”栏表示cnv导致的拷贝数。由于正常的人类dna(即没有cnv)应该是二倍体的，并且将具有2的“状态，cn”。具有0或1的“状态，cn”的cnv表示拷贝数缺失。相反，具有三个或更多“状态，cn”的cnv表示拷贝数重复。
置信度值表示cnv出现正确的相对置信度。此分析中包含的所有cnv都具有正的置信度值，表明cnv出现的正确的可能性很高。对于大多数cnv，观察到15或更大的值，并且基于qpcr和taqman基因分型验证被认为在cnv出现中具有极高的置信度。
在表1中，“mglur基因”栏列出了所列cnv内第1层内的特定mglur网络基因。对表1进行分类以显示包含给定第1层mglur网络基因中的所有cnv。本研究中一些第1层基因可能来自不同患者的多个cnv，导致这些特定mglur网络基因的多行。一些第1层基因可能不是来自这个特定患者群体的cnv中。
表2显示了来自特定cnv的数据，其中包含第1层或第2层mglur网络基因。表2的组织遵循表1。“mglur基因”栏列出了所列cnv内包含的层1或层2内的特定mglur网络基因。对表2进行分类以显示包括给定的第1层或第2层mglur网络基因的所有cnv。在研究中，一些层1或层2的基因可能来自不同患者的多个cnv中，导致这些特定基因的多行。一些层1或层2基因可能不是来自这个特定患者群体的cnv中。
表3显示了来自特定cnv的数据，其中包含层1、2或3mglur网络基因。表3的组织遵循表1和表2中的内容。“mglur基因”栏列出了列出的cnv内包含的层1、层2或层3内的特定mglur网络基因。对表3进行分类以显示包括给定的层1、2或3mglur网络基因的所有cnv。在研究中，一些层1、2或3的基因可能来自不同患者的多个cnv，导致这些特定mglur网络基因的多行。一些层1、2或3的基因可能不是来自这个特定患者群体的cnv中。
总之，表1-3中的数据表明，行为障碍患者的cnv中存在各层中包含的各种mglur网络基因。如果对一个更大的行为障碍表型患者群体进行基因分型，层1、层2或层3中的所有基因都会显示行为障碍患者中cnv的富集。
实施例3.使用法索西坦单水合物(nfc-1)治疗在mglur网络基因中具有cnv的adhd患者和对行为障碍的影响
进行了开放性ib期临床试验，旨在研究nfc-1(法索西坦单水合物)在12至17岁之间之前诊断患有adhd且在mglur网络基因中具有至少一种遗传改变的青少年受试者中的安全性、药代动力学和疗效。
该研究包括30名年龄在12至17岁之间的任何血统或种族的adhd受试者，其体重在其年龄的第5至第95百分位数内，并且被判断健康状况良好。如果受试者在mglur网络基因中具有至少一个拷贝数变异(缺失或复制)形式的至少一个遗传改变(其可能破坏该基因的功能)，则可能对受试者进行基因分型并将其包括在试验中。30名受试者中的17名在第1层mglur网络基因中具有cnv，而7名受试者在第2层基因中具有cnv，且6名在第三层基因中具有。在登记时，几个试验受试者显示出共病表型的证据，包括两名患有复发性抽搐的受试者。
排除标准包括研究者认为，这可能会使研究结果混淆或可能妨碍他们完成研究的患有临床重大疾病(精神或身体)的受试者，怀孕或哺乳的受试者，有药物滥用史对非法药物测试阳性的受试者，饮用含酒精饮料的受试者，或研究者对其合规性或适用性另有关注的受试者。
包含法索西坦单水合物作为活性成分的50mg或200mg的nfc-1胶囊和包含微纤维素的安慰剂胶囊用于该研究。试验的设计是电话筛查(1天)，登记阶段(1至2天)，目前使用adhd药物(1-14天)的受试者的洗出阶段，药代动力学(pk)评估(2天)，然后是剂量递增阶段(35天)，并在最后一次剂量后约四周进行随访电话访问，最多127天。在研究之前的洗出阶段期间停止所有adhd药物治疗。刺激剂的洗脱期为2-3天，而对于阿托西汀或去甲肾上腺素能激动剂的洗脱期为10-12天。在研究期间没有开始新的adhd药物治疗。
在初始洗脱期和pk和初始安全性评估之后，试验的剂量递增阶段持续5周。在第1周期间，所有受试者每天两次施用安慰剂胶囊。在安慰剂治疗一周后，患者以50mgbidnfc-1开始治疗1周。如果来自法索西坦的先前剂量水平的安全性和响应性数据表明它是合适的，则将受试者递增至下一个更高剂量(100、200或400mg)。在试验的剩余3周内，对50mgbid剂量显示出耐受性以及对药物的响应的受试者将维持在该水平。
在接下来的一周内，对50mgbid剂量显示出耐受但缺乏响应或部分响应的受试者将被移至下一更高剂量100mg。在接下来的一周内，表现出100mg耐受但缺乏响应或部分响应的受试者将被移至200mg剂量，而那些在100mg时表现出耐受和响应的受试者将在剩余试验保持在100mg。类似地，上升至200mg剂量显示耐受和响应的受试者在试验的最后一周保持在200mg，而显示耐受但缺乏响应或部分响应的那些在最后一周被转移至400mg剂量。在30名试验受试者中，3名接受最大剂量100mg，9名接受最大剂量200mg，其余18名接受最大剂量400mg。
虽然该研究并非专门针对行为障碍症状，但两名研究对象符合行为障碍的行为标准，在评估行为障碍症状的14个范德比尔特量表项目27-40中的至少两个中得分为2或3。这两个受试者中的一个未完成该研究。另一个表现为基于范德比尔特项目27-40的行为障碍症状的改善，其在第1周和第5周之间从16减少到12。
实施例4.使用法索西坦单水合物(nfc-1)治疗在mglur网络基因中具有cnv的adhd患者和对强迫症状的影响
在实施例3中描述的开放标签ib期临床试验中测试的30个adhd受试者中，8个具有强迫症(ocd)的症状。其中一个抽搐的受试者也有强迫症的症状。在所有8名受试者中，在使用nfc-1治疗期间，ocd症状得到改善。
一名患有ocd的受试者也有耳刮(即皮肤抓搔症)历史，导致溃疡出血。在nfc-1治疗期间出血性溃疡愈合，表明在nfc-1治疗期间受试者的皮肤抓搔症症状减轻。
实施例5.与mglur网络cnv相关的表型研究
共有1,000名年龄在6-17岁的adhd患者参加了试验，以考虑可能与第1层或第2层mglur网络基因中的cnv相关的表型。研究地点收集了唾液中的dna样本。然后对每个dna样品进行dna提取，基因测序和dna的生物库保存。
基因测序结果与病史一起用于评估基因型(基于基因测序)和表型(基于临床医生对受试者父母/监护人进行的访谈)。受试者具有精神疾病诊断与统计手册第5版(dsm-v)定义的adhd。
单一临床医生向受试者的父母或法定监护人提供了一系列与可能的行为或健康表型相关的问题。对于每一个人的表型，父母/监护人都被问到：“这是目前的问题吗？”并且收集到是或否的答案。临床医生确定是和否响应的频率以生成表型数据。
该研究发现，具有1层或2层mglur网络基因cnv的adhd受试者中父母认为将愤怒控制作为目前问题的流行率为58.9％，而没有这种mglur网络基因cnv的adhd受试者仅为47.4％。该差异是统计学显著的(比值比为1.59，p＝0.003)。这种比值比大于1意味着比不具有该cnv的那些当前愤怒控制问题在具有1层或2层mglur网络基因cnv的adhd受试者中父母认为更高的流行率。
在具有1层或2层mglur网络基因cnv的adhd受试者中破坏性行为作为目前父母关心的问题的流行率为57.1％，在没有这种mglur网络基因cnv的adhd受试者中为43.9％。这种差异也具有统计学意义(比值比为1.70，p＜0.001)，表明相比不具有突变的那些，具有mglur网络基因突变的adhd受试者中父母认为目前破坏性行为问题更高的流行率。
实施例6：具有共病病症的adhd受试者中mglur网络基因的拷贝数变异
对来自2707名已知adhd儿科受试者(平均年龄约10-10.5岁)的样品在550/610illumina芯片上进行基因分型以确定它们是否在1层或2层基因中具有一个或多个cnv。2707名受试者包括759名女性和1778名非裔美国人或白种人男性(分别为1063和1483人)。2707名受试者中有430名(16.9％)在mglur1层或2层基因中至少有一个cnv。
根据世界卫生组织国际疾病分类第9版(icd-9)，还对2707名受试者的记录进行了检查，以确定他们是否有共病诊断。在2707名受试者中，1902名(约70％)具有共病，而805名没有。1902名具有共病的受试者中，约30％有多种共病，约20％有两种以上共病，而较小百分比具有多种共病。
表4列出了最常见的共病，每种共病发生在多于100名受试者中。表格列出了icd-9代码中的共病，并提供了2707名受试者(标题为“n”)和每种共病症状或障碍的名称。
表4
表4中的共病倾向于聚集成几个不同的群体：与焦虑、易于或情绪有关的障碍；流行的发育障碍；不太普遍的发育障碍；和自闭症及相关病症。
然后合并基因型数据和共病数据以确定在1层或2层mglur网络基因中具有cnv的受试者多少还具有共病。发现有316名患有这种cnv的受试者也至少有一种共病(约18％的cnv阳性受试者或约12％的总受试者)，而114名在1层或2层mglur网络基因中不具有cnv的受试者具有至少一种共病(约15％的cnv阴性受试者或约4％的总受试者)。这一差异显示p值为0.118。因此，共病在cnv阳性中总体上比在cnv阴性受试者中更常见。当只考虑识别白种人的受试者时，mglurcnv与adhd共病之间存在高度显着的相关性。具体而言，1483名受试者中有218名在1层或2层mglur网络基因中至少有1种cnv，而在218名受试者中，169名也有共病，而49名没有。该差异显示p值为0.004。