技术领域：
本发明涉及一种玛卡有效成分的集成提取方法，属生物技术领域。
背景技术：
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玛卡(maca)属十字花科(cruciferae)独行菜属(lepidiummeyeniiwalp)1年生或2年生草本植物，原产于海拔3500-4500m的南美安第斯山脉，已有上千年的历史，是当地不可缺少的作物之一。玛卡能耐低温、大风，可以在无肥料、缺氧、昼夜温差大、长期冰封的恶劣条件下生长，玛卡含有丰富的蛋白质、氨基酸、矿物质、多糖等营养物质和玛卡烯、玛卡酰胺等生物碱活性成分，是药食同源植物，传统上常常用于增强精力、抗疲劳、改善性功能、提高生育能力、治疗女性更年期综合症，玛卡中有多种有效成分，而目前现有的玛卡中提取有效成分的工艺，只是从玛卡中提取1种或2种有效成分，而对其他有效成分没有提取，随药渣倒掉，造成玛卡资源的浪费。
技术实现要素：
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针对上述问题，本发明要解决的技术问题是提供一种玛卡有效成分的集成提取方法。
本发明的玛卡有效成分的集成提取方法具体步骤为：步骤一：玛卡经粉碎，过30-80目筛得玛卡粉；
步骤二：将步骤一中筛得的玛卡粉加8-12倍含量的95％-无水乙醇进行一次回流，回流提取1-4次，每次回流时间为1-4小时，分离得玛卡乙醇提取液和一次固相渣，回收乙醇得一次流浸膏，干燥得粉状固体，粉状固体中含玛卡烯、玛卡酰胺；
步骤三：将步骤二中的分离得到的一次固相渣加8-12倍含40％-60％的乙醇液进行二次回流，回流提取2-3次，每次回流时间为1-4小时，分离得乙醇液和二次固相渣，回收乙醇得二次流浸膏，将二次流浸膏合并加入步骤二中制备的一次流浸膏然后一起进行干燥；
步骤四：将步骤三中分离得到的二次固相渣加8-25倍纯水，在80-100℃下搅拌提取2-3次，每次1-4小时，分离得玛卡水提液和滤渣，将水提液浓缩液，干燥，得玛卡水提物即多糖；
步骤五：将步骤四中的分离得到的滤渣加8-12倍的纯水，加温至70℃-95℃，用naoh液调ph至8.5-10.5，搅拌提取30min-120min，降温至40℃-55℃，接着调ph至7.5-9.0，加复合蛋白酶，其中蛋白总量占5％，搅拌酶解3-6h，调ph至5.0-7.0，升温至70℃-95℃，然后灭酶10-30min后分离得玛卡酶解液和滤渣，滤渣丢弃，将酶解液经活性炭精制为精制液，精制液经过浓缩、干燥后得玛卡蛋白肽。
本发明的有益效果：此工艺较为简单，实用，玛卡经粉碎后用乙醇回流提取玛卡烯、玛卡酰胺；渣用纯水搅拌提取玛卡多糖；提取多糖后的渣加纯水、调ph，加热提取玛卡蛋白，再用复合蛋白酶酶解制备玛卡肽，这样玛卡中的所有活性成分全部被提取，使玛卡资源得到充分利用。适合中药提取或天然活性成分提取企业应用。
附图说明：
为了易于说明，本发明由下述的具体实施及附图作以详细描述。
图1为本发明的制备流程结构示意图。
具体实施方式：
如图1所示，本具体实施方式采用以下技术方案：所述的玛卡有效成分的集成提取方法具体步骤为：步骤一：玛卡经粉碎，过30-80目筛得玛卡粉；
步骤二：将步骤一中筛得的玛卡粉加8-12倍含量的95％-无水乙醇进行一次回流，回流提取1-4次，每次回流时间为1-4小时，分离得玛卡乙醇提取液和一次固相渣，回收乙醇得一次流浸膏，干燥得粉状固体，粉状固体中含玛卡烯、玛卡酰胺；
步骤三：将步骤二中的分离得到的一次固相渣加8-12倍含40％-60％的乙醇液进行二次回流，回流提取2-3次，每次回流时间为1-4小时，分离得乙醇液和二次固相渣，回收乙醇得二次流浸膏，将二次流浸膏合并加入步骤二中制备的一次流浸膏然后一起进行干燥；
步骤四：将步骤三中分离得到的二次固相渣加8-25倍纯水，在80-100℃下搅拌提取2-3次，每次1-4小时，分离得玛卡水提液和滤渣，将水提液浓缩液，干燥，得玛卡水提物即多糖；
步骤五：将步骤四中的分离得到的滤渣加8-12倍的纯水，加温至70℃-95℃，用naoh液调ph至8.5-10.5，搅拌提取30min-120min，降温至40℃-55℃，接着调ph至7.5-9.0，加复合蛋白酶，其中蛋白总量占5％，搅拌酶解3-6h，调ph至5.0-7.0，升温至70℃-95℃，然后灭酶10-30min后分离得玛卡酶解液和滤渣，滤渣丢弃，将酶解液经活性炭精制为精制液，精制液经过浓缩、干燥后得玛卡蛋白肽。
实施例：
步骤一：选用秘鲁产玛卡经粉碎过60目得玛卡粉；
步骤二：取玛卡粉80g，加800m195％乙醇回流提取1.5h，分离得玛卡乙醇提取液，渣再加95％乙醇重复提取1-2次，每次1.5h分离得乙醇提取液和渣，将玛卡乙醇提取液合并，回收乙醇，得玛卡乙醇提取流浸膏；
步骤三：将步骤二中分离得的渣加800m150％乙醇回流提取2h；分离得玛卡乙醇液提取液，渣再加50％乙醇回流提取1-2次，每次2h，分离得玛卡乙醇提取液和渣；合并玛卡乙醇液提取液，回收乙醇，得玛卡乙醇提取流浸膏；将步骤二中的乙醇液液提取流浸膏和玛卡乙醇提取物流浸膏合并干燥，得33.68g，提取率为42.1％；
步骤四：将步骤三中分得的渣，加20倍纯水，加热至100℃，回收提取2h，分离得玛卡水提液和渣；将渣再加20倍纯水100℃回流重复1次，分离得玛卡水提液和渣；将玛卡水提液合并，旋转蒸发浓缩得浓缩液；将浓缩液冷冻干燥或加3倍95％乙醇沉淀，分取沉淀，干燥，得玛卡多糖6.7g，提取率8.4％；
步骤五，将步骤四中的分离的渣加8倍纯水，加热至80℃，调ph9.5，搅拌提取60min；将料液降温至47℃±1℃，调ph8.3±0.1，加复合蛋白酶0.35g，搅拌4h，升温至75℃15min灭酶；进行渣液分离，得清液、渣弃；在清液中加0.2％糖炭60℃搅拌精制45min，过滤脱炭，得精制液；精制液经旋转蒸发得浓缩液；将浓缩液干燥(可冷冻干燥、喷雾干燥)得玛卡蛋白肽13.07g，得率为16.3％。
以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点。本行业的技术人员应该了解，本发明不受上述实施例的限制，上述实施例和说明书中描述的只是说明本发明的原理，在不脱离本发明精神和范围的前提下，本发明还会有各种变化和改进，这些变化和改进都落入要求保护的本发明范围内。本发明要求保护范围由所附的权利要求书及其等效物界定。