一种获取完整羊脑的开颅方法与流程

本发明涉及生物科学技术领域，具体是涉及一种获取完整羊脑的开颅方法。

背景技术：

羊是非常重要的家养动物，是我们肉、毛、奶等物质资源的主要来源之一。羊的生长和发育与激素密切相关，然而大部分激素都来自于脑内，如生长激素。在科学研究过程中，为了探究脑内激素的生成和代谢，需要获得脑内完整的组织。如繁殖与下丘脑分泌的促性腺激素释放激素密切相关，为了研究下丘脑调控促性腺激素释放激素分泌机制，我们必须获取完整的下丘脑组织。脑内还有一些特殊的样品如垂体、松果体也需要在获得完整羊脑的前提下才能获得。所以如何巧妙的开颅，获取完整组织对科学研究具有非常大的价值。另一方面，在制作脑内标本过程中，也常常需要完整的组织，标本可作为商品具有经济价值，所以获取完整羊脑开颅的方法也具有一定的经济价值。

目前对于人开颅进行手术的方法技术很多，但是羊和人的结构完全不一样，而羊乃至很多动物都没有系统的方法用于开颅，所以我们研制的开颅方法具有创新性和先进性。

技术实现要素：

本发明解决的技术问题是，针对现有技术的不足，提供一种获取完整羊脑的开颅方法。

本发明的技术方案如下：

一种获取完整羊脑的开颅方法，包括以下步骤：

S1：屠宰山羊后，于1-60min内取下完整的羊头，并与0.01-12h内进行开颅操作；

S2：使用手术刀切割皮肤划线：在羊头颅顶的羊角前2cm处(眼睛后上方)切割一条横向线，该位置下面为大脑前沿；纵向沿颅顶中线向后(往脖子方向)切割一条纵向线；左右耳下方处各一条线，分别为左线和右线，所述左线和右线在颈骨之上斜向上经过耳下方和横向线相交；

S3：使用手术刀和剪刀分别沿横向线、纵向线、左线和右线各切除1cm宽皮肤，沿着左线和右线切割耳下方时，需要将一些肉切除；

S4：固定羊头，可将羊头放于凳子上，使用手工钢锯对准各条线进行切割，切割深度为1±0.02cm，优选1cm，在锯颅顶时特别要注意，不能切割过深；

S5：将凿子插入颅顶横向切割缝隙，通过杠杆原理，将颅盖骨打开，或握住羊角往两边用力，掰开羊头；

S6：完整暴露羊脑后，将羊脑微微提起，使用手术刀，从前往后逐步切割，获取完整羊脑；

S7：将羊脑反过来，可以清晰的看到“花生瓣”状的下丘脑，将下丘脑用小剪刀小心剪下；

S8：将羊头正面放，使用手术刀沿大脑中线向下切割，打开大脑，在大脑和小脑连接位置可以看到一个圆圆的小球，该样品为松果体；

S9:使用手术刀切割垂体窝软骨，尽力往两边切割，最后用剪刀取出完整的垂体，取出的垂体还带着软骨和膜，将膜和软骨小心去除，获得完整脑垂体；

S10：完成采样，获取了完整的脑部组织，包括大脑、小脑、下丘脑、松果体、脑垂体。

进一步地，在上述方案中，屠宰山羊后，于1-20min内取下完整的羊头。

进一步地，在上述方案中，取下完整的羊头后，在0.01-1h内进行开颅操作。

进一步地，在上述方案中，将取下的大脑、小脑、下丘脑、松果体、脑垂体用DEPC处理水洗涤后，用装有RNA保存液的EP管盛装保存。

作为另一种选择，将取下的大脑、小脑、下丘脑、松果体、脑垂体用下述配方的溶液密封浸泡保存：盐酸胍22.15％、焦磷酸铁18.2％、富马酸亚铁2.88％、二硫苏糖醇0.328％、盐酸赖氨酸0.012％、N-酰基衍生物0.65％、冷冻保护剂2～5％、水加至100％，所述冷冻保护剂为二甲基亚砜，保存温度设置在-40～-60℃。

本发明的有益效果是：本发明的发明人通过对山羊头部结构的细致观察和解剖，确定羊头的骨骼结构、羊脑所处的位置、羊头各骨骼连接点，制定了一套获取羊完整脑组织的开颅方法，该方法具有一定的系统性，操作简单，保证脑组织不被破坏，从而获得脑内完整的组织，包括大脑、小脑、下丘脑、垂体、松果体，不仅有助于科学研究，而且在制作脑内标本方面具有一定的经济价值。

附图说明

图1是本发明的切割划线示意图；

图2是本发明沿各线切割皮肤示意图；

其中，1-横向线、2-纵向线、3-左线、4-右线。

具体实施方式

下面结合具体实施方式来对本方面进行更进一步详细的说明：

实施例1：

一种获取完整羊脑的开颅方法，包括以下步骤：

S1：屠宰山羊后，于1min内取下完整的羊头，并与0.01h内进行开颅操作；

S2：使用手术刀切割皮肤划线：在羊头颅顶的羊角前2cm处(眼睛后上方)切割一条横向线1，该位置下面为大脑前沿；纵向沿颅顶中线向后(往脖子方向)切割一条纵向线2；左右耳下方处各一条线，分别为左线3和右线4，所述左线3和右线4在颈骨之上斜向上经过耳下方和横向线1相交；

S3：使用手术刀和剪刀分别沿横向线1、纵向线2、左线3和右线4各切除1cm宽皮肤，沿着左线3和右线4切割耳下方时，需要将一些肉切除；

S4：固定羊头，可将羊头放于凳子上，使用手工钢锯对准各条线进行切割，切割深度为0.98cm，在锯颅顶时特别要注意，不能切割过深；

S5：将凿子插入颅顶横向切割缝隙，通过杠杆原理，将颅盖骨打开，或握住羊角往两边用力，掰开羊头；

S6：完整暴露羊脑后，将羊脑微微提起，使用手术刀，从前往后逐步切割，获取完整羊脑；

S7：将羊脑反过来，可以清晰的看到“花生瓣”状的下丘脑，将下丘脑用小剪刀小心剪下；

S8：将羊头正面放，使用手术刀沿大脑中线向下切割，打开大脑，在大脑和小脑连接位置可以看到一个圆圆的小球，该样品为松果体；

S9:使用手术刀切割垂体窝软骨，尽力往两边切割，最后用剪刀取出完整的垂体，取出的垂体还带着软骨和膜，将膜和软骨小心去除，获得完整脑垂体；

S10：完成采样，获取了完整的脑部组织，包括大脑、小脑、下丘脑、松果体、脑垂体。

S11：将取下的大脑、小脑、下丘脑、松果体、脑垂体用DEPC处理水洗涤后，用装有RNA保存液的EP管盛装保存。

实施例2：

一种获取完整羊脑的开颅方法，包括以下步骤：

S1：屠宰山羊后，于20min内取下完整的羊头，并与1h内进行开颅操作；

S2：使用手术刀切割皮肤划线：在羊头颅顶的羊角前2cm处(眼睛后上方)切割一条横向线1，该位置下面为大脑前沿；纵向沿颅顶中线向后(往脖子方向)切割一条纵向线2；左右耳下方处各一条线，分别为左线3和右线4，所述左线3和右线4在颈骨之上斜向上经过耳下方和横向线1相交；

S3：使用手术刀和剪刀分别沿横向线1、纵向线2、左线3和右线4各切除1cm宽皮肤，沿着左线3和右线4切割耳下方时，需要将一些肉切除；

S4：固定羊头，可将羊头放于凳子上，使用手工钢锯对准各条线进行切割，切割深度为1cm，在锯颅顶时特别要注意，不能切割过深；

S5：将凿子插入颅顶横向切割缝隙，通过杠杆原理，将颅盖骨打开，或握住羊角往两边用力，掰开羊头；

S6：完整暴露羊脑后，将羊脑微微提起，使用手术刀，从前往后逐步切割，获取完整羊脑；

S7：将羊脑反过来，可以清晰的看到“花生瓣”状的下丘脑，将下丘脑用小剪刀小心剪下；

S8：将羊头正面放，使用手术刀沿大脑中线向下切割，打开大脑，在大脑和小脑连接位置可以看到一个圆圆的小球，该样品为松果体；

S9:使用手术刀切割垂体窝软骨，尽力往两边切割，最后用剪刀取出完整的垂体，取出的垂体还带着软骨和膜，将膜和软骨小心去除，获得完整脑垂体；

S10：完成采样，获取了完整的脑部组织，包括大脑、小脑、下丘脑、松果体、脑垂体。

S11：将取下的大脑、小脑、下丘脑、松果体、脑垂体用下述配方的溶液密封浸泡保存：盐酸胍22.15％、焦磷酸铁18.2％、富马酸亚铁2.88％、二硫苏糖醇0.328％、盐酸赖氨酸0.012％、N-酰基衍生物0.65％、二甲基亚砜3％、水加至100％，保存温度设置在-60℃。

实施例3：

一种获取完整羊脑的开颅方法，包括以下步骤：

S1：屠宰山羊后，于60min内取下完整的羊头，并与12h内进行开颅操作；

S2：使用手术刀切割皮肤划线：在羊头颅顶的羊角前2cm处(眼睛后上方)切割一条横向线1，该位置下面为大脑前沿；纵向沿颅顶中线向后(往脖子方向)切割一条纵向线2；左右耳下方处各一条线，分别为左线3和右线4，所述左线3和右线4在颈骨之上斜向上经过耳下方和横向线1相交；

S3：使用手术刀和剪刀分别沿横向线1、纵向线2、左线3和右线4各切除1cm宽皮肤，沿着左线3和右线4切割耳下方时，需要将一些肉切除；

S4：固定羊头，可将羊头放于凳子上，使用手工钢锯对准各条线进行切割，切割深度为1.02cm，在锯颅顶时特别要注意，不能切割过深；

S5：将凿子插入颅顶横向切割缝隙，通过杠杆原理，将颅盖骨打开，或握住羊角往两边用力，掰开羊头；

S6：完整暴露羊脑后，将羊脑微微提起，使用手术刀，从前往后逐步切割，获取完整羊脑；

S7：将羊脑反过来，可以清晰的看到“花生瓣”状的下丘脑，将下丘脑用小剪刀小心剪下；

S8：将羊头正面放，使用手术刀沿大脑中线向下切割，打开大脑，在大脑和小脑连接位置可以看到一个圆圆的小球，该样品为松果体；

S9:使用手术刀切割垂体窝软骨，尽力往两边切割，最后用剪刀取出完整的垂体，取出的垂体还带着软骨和膜，将膜和软骨小心去除，获得完整脑垂体；

S10：完成采样，获取了完整的脑部组织，包括大脑、小脑、下丘脑、松果体、脑垂体。

S11：将取下的大脑、小脑、下丘脑、松果体、脑垂体用下述配方的溶液密封浸泡保存：盐酸胍22.15％、焦磷酸铁18.2％、富马酸亚铁2.88％、二硫苏糖醇0.328％、盐酸赖氨酸0.012％、N-酰基衍生物0.65％、二甲基亚砜5％、水加至100％，保存温度设置在-40℃。

在上述说明中，使用较佳的实施方式说明了本发明，但本发明并不限定于上述实施方式，当然能够在不脱离本发明的主旨的范围内进行各种改变。