本发明属于医药领域，具体涉及淫羊藿苷在制备降低地贫pesaro危险分级的药物中的应用。
背景技术：
地中海贫血(简称地贫，thalassemia)，亦称为海洋性贫血或库勒氏贫血，是世界上最常见的遗传性血液病之一。其分子基础为珠蛋白基因缺陷导致珠蛋白链合成障碍，使形成血红蛋白四聚体的α-链/非α-链比例失衡，进而引起红细胞破坏而溶血。常规采用红细胞输注及去铁治疗。对于重型β地贫患者，骨髓移植被认为是目前唯一可以治愈的方法，而预处理是骨髓移植的重要环节之一。大多数移植中心采用以白消安/环磷酰胺为基础的移植预处理方案。
预处理方案中所用白消安和环磷酰胺的剂量若过大，会引起不良反应，导致病人死亡；剂量若不足，则引起移植排斥或复发。预处理方案中所用白消安和环磷酰胺的剂量通常与地贫患者的危险分级相关。意大利的pesaro通过对地贫骨髓移植预处理方案完全相同的年龄小于17岁的161例地贫骨髓移植治疗效果进行多元回归分析，发现：肝肿大超过2cm、肝脏纤维化和不正规使用去铁胺为三个危险因素，显著地降低了移植后的生存率。正规使用去铁胺被定义为开始输血后18个月内使用和皮下注射8-10小时、每周至少5次。这样，pesaro将地贫患者分成3个危险等级：i级，3个危险因素均没有；ii级，有1-2个危险因素；iii级，3个危险因素均有。
为了研究地贫危险级别与预处理用药剂量之间的内在关系，发明人利用腹腔注射铁剂建立了地贫pesaro危险分级所对应的铁过载小鼠模型(见专利20151009468.0)：给实验小鼠腹腔注射含铁制剂，剂量为每kg体重的小鼠1g铁，每周给铁1次，所述的铁包括fe2+和fe3+；小鼠注射1周后可建立地贫pesaro危险分级所对应的i级铁过载小鼠模型；小鼠注射2-4周可建立地贫pesaro危险分级所对应的ii级铁过载小鼠模型；小鼠注射5-8周可建立地贫pesaro危险分级所对应的iii级铁过载小鼠模型。
地贫pesaro危险分级的肝肿大、肝纤维化和不正规使用去铁胺的三个危险因素，主要是由于地贫患者反复输血导致的体内铁过载引起的。因此，缓解地贫骨髓移植患者的铁过载程度，减少肝肿大、肝纤维化、不正规使用去铁胺的危险因素个数，就可降低其pesaro危险分级的级别，有助于提高地贫骨髓移植的成功率。
淫羊霍苷(icraiin,ica)是从小檗科植物淫羊藿(epimediumbrevicornummaxim.)、箭叶淫羊藿(epimediumsagittatummaxim.)、柔毛淫羊藿(epimediumpubescensmaxim.)或朝鲜淫羊藿(epimediumkoreanumnakai)的干燥叶中提取的化合物。本品呈淡黄色针状结晶粉末，分子式为c33h40o15，分子量为676.65。研究表明淫羊霍苷有促进成骨细胞的分化及矿化功能，对骨质疏松症具有一定的预防作用；一定浓度的淫羊藿苷可增加肿瘤病人淋巴因子激活的杀伤细胞以及自然杀伤细胞的活性；此外还有保护血管内皮细胞、抗炎抗肿瘤作用、性激素样的作用、抗衰老功效、预防脑损伤和治疗哮喘的效果等。目前尚未有文献报道淫羊藿苷具有改善铁过载病症的作用。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供淫羊藿苷在制备降低地贫pesaro危险分级的药物中的应用。
本发明的目的通过下述技术方案实现：
淫羊藿苷在制备降低地贫pesaro危险分级的药物中的应用。
在给予铁剂建立地贫pesaro危险分级所对应的铁过载小鼠模型的同时，给予淫羊藿苷进行治疗。淫羊藿苷可以缓解小鼠的铁过载程度，减少地贫pesaro危险分级中的危险因素(肝肿大、肝纤维化、不正规使用去铁胺)的个数，降低地贫pesaro危险分级的级别。
所述的淫羊藿苷包括纯品淫羊藿苷，以及含有淫羊藿苷的提取物和以淫羊藿苷为活性成分的组合物。
所述药物的剂型，本领域技术人员可以根据实际的需要选择，包括但不限于片剂、胶囊、丸剂、散剂、注射液。
淫羊藿苷改善铁过载的作用，可用于制备治疗地贫、遗传性血色素沉着症、铁过载引起的酒精性肝炎等铁过载病的药物，亦可用于制备治疗高铁诱发的肿瘤、肝肿大、肝纤维化等病症的药物。
本发明相对于现有技术具有如下的优点及效果：
1、淫羊藿苷的毒性甚微，安全治疗窗宽，使用安全。
2、淫羊藿苷的给药途径广泛，可以采用不同的制剂满足不同的需要。
3、淫羊藿苷来源于淫羊藿药材，药材供给充足，提取分离方法成熟，易于产业化推广应用。
具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细的描述，但本发明的实施方式不限于此。
实施例1
淫羊藿苷在降低地贫pesaro危险分级中的应用
取健康c57bl/6小鼠，雄性，8周龄，体重20-23克。设空白对照组、铁过载模型组(给铁2周组)、淫羊藿苷治疗组(治疗2周组)，每组8只小鼠。于23±2℃、相对湿度55±5％环境下饲养，设定光照/黑暗为12h/12h昼夜循环。每日给予常规饲料，自由进食、进水，1周换2-3次垫料。
铁过载模型组和淫羊藿苷治疗组，腹腔注射右旋糖酐铁(fe含量100mg/ml)，1g铁元素/kg体重，1次/周，共2周。淫羊藿苷治疗组在给药右旋糖酐铁的前2天和后2天，各腹腔注射50mg/kg淫羊藿苷1次。空白对照组给与相应的药物溶剂。给药结束后1周，处死小鼠，检测相关指标。
电感耦合等离子体质谱仪可以准确快速地测出血清中的铁含量。采用该法对铁过载模型小鼠血清中的铁含量进行检测，表1结果显示，给右旋糖酐铁2周后小鼠的血清铁是空白组血清铁的2.51倍。临床上患者的血清铁是正常人的10-15倍则会出现中毒表现，属于不正规使用去铁胺，故此时“不正规使用去铁胺”的危险因素不存在。给铁的同时，采用淫羊藿苷腹腔注射治疗：50mg/kg，2次/周，小鼠的血清铁是空白组血清铁的1.39倍，“不正规使用去铁胺”的危险因素依旧不存在。
利用肝脏指数(肝脏重量与体重的比值)以及肝脏重量增加比率[(每组小鼠肝脏指数-对照组肝脏指数)/对照组肝脏指数*100]对小鼠的肝脏肿大程度进行定量分析。表2结果显示，给右旋糖酐铁2周后小鼠肝脏重量增加比率为57.80％。根据临床经验：人肝肿大2cm，一般对应总体积(重量)增加50％。可判断此时小鼠已达到pesaro危险分级中所对应的肝肿大标准。给铁的同时采用淫羊藿苷腹腔注射治疗：50mg/kg，2次/周，肝脏重量增加比率下降为31.45％，地贫pesaro危险分级中所对应的肝肿大现象消失。
masson三色染色是根据组织的渗透性能不同，选择分子大小不同的两到三种阴离子染料进行染色，将不同组织区别开来。可将肝脏纤维组织染成亮蓝色从而判断肝纤维化程度。表3结果显示，给右旋糖酐铁2周后小鼠的肝组织未出现纤维化，给铁的同时采用淫羊藿苷腹腔注射治疗：50mg/kg，2次/周，地贫pesaro危险因素的肝纤维化依然不存在。
可见，给右旋糖酐铁2周后的小鼠只有肝肿大1个危险因素，属于地贫pesaro危险分级的ii级危险模型；给铁的同时采用淫羊藿苷腹腔注射治疗：50mg/kg，2次/周，血清铁含量降低，肝肿大消失，降为地贫pesaro危险分级的i级危险模型。
实施例2
淫羊藿苷在降低地贫pesaro危险分级中的应用
取健康c57bl/6小鼠，雄性，8周龄，体重20-23克。设空白对照组、铁过载模型组(给铁4周组)、淫羊藿苷治疗组(治疗4周组)，每组8只小鼠。于23±2℃、相对湿度55±5％环境下饲养，设定光照/黑暗为12h/12h昼夜循环。每日给予常规饲料，自由进食、进水，1周换2-3次垫料。铁过载模型组和淫羊藿苷治疗组，腹腔注射右旋糖酐铁(fe含量100mg/ml)，1g铁元素/kg体重，1次/周，共4周。淫羊藿苷治疗组在给药右旋糖酐铁的期间，每天小鼠灌胃200mg/kg淫羊藿苷1次。空白对照组给与相应的药物溶剂。给药结束后1周，处死小鼠，检测相关指标。
从表1可见，给右旋糖酐铁4周后小鼠的血清铁是空白组血清铁的26.27倍。临床上患者的血清铁是正常人的10-15倍则会出现中毒表现，属于不正规使用去铁胺，故此时“不正规使用去铁胺”的危险因素存在。给铁的同时，采用淫羊藿苷灌胃治疗：200mg/kg，7次/周，小鼠的血清铁是空白组血清铁的9.81倍，故治疗后“不正规使用去铁胺”的危险因素不存在了。
表2结果显示，给右旋糖酐铁4周后小鼠肝脏重量增加比率为80.38％，可判断此时小鼠达到地贫pesaro危险分级中所对应的肝肿大标准。给铁的同时，采用淫羊藿苷灌胃治疗：200mg/kg，7次/周，肝脏重量增加比率下降为36.83％，地贫pesaro危险分级中所对应的肝肿大现象消失。
表3结果显示，给右旋糖酐铁4周后小鼠的肝组织未出现纤维化，给铁的同时，采用淫羊藿苷灌胃治疗：200mg/kg，7次/周，地贫pesaro危险因素的肝纤维化依然没有出现。
可见，给右旋糖酐铁4周后的小鼠有不正规使用去铁铵、肝肿大2个危险因素，属于地贫pesaro危险分级的ii级危险模型；给铁的同时，采用淫羊藿苷灌胃治疗：200mg/kg，7次/周，不正规使用去铁铵消失，肝肿大消失，降为地贫pesaro危险分级的i级危险模型。
实施例3
淫羊藿苷在降低地贫pesaro危险分级中的应用
取健康c57bl/6小鼠，雄性，8周龄，体重20-23克。设空白对照组、铁过载模型组(给铁6周组)、淫羊藿苷治疗组(治疗6周组)，每组8只小鼠。于23±2℃、相对湿度55±5％环境下饲养，设定光照/黑暗为12h/12h昼夜循环。每日给予常规饲料，自由进食、进水，1周换2-3次垫料。铁过载模型组和淫羊藿苷治疗组，腹腔注射右旋糖酐铁(fe含量100mg/ml)，1g铁元素/kg体重，1次/周，共6周。淫羊藿苷治疗组在给药右旋糖酐铁的期间，小鼠腹腔注射100mg/kg淫羊藿苷，5次/周。空白对照组给与相应的药物溶剂。给药结束后1周，处死小鼠，检测相关指标。
从表1可见，给右旋糖酐铁6周后小鼠的血清铁是空白组血清铁的57.37倍。临床上患者的血清铁是正常人的10-15倍则会出现中毒表现，属于不正规使用去铁胺，故此时“不正规使用去铁胺”的危险因素存在。给铁的同时，采用淫羊藿苷腹腔注射治疗，100mg/kg，5次/周，小鼠的血清铁是空白组血清铁的24.72倍，“不正规使用去铁胺”的危险因素仍存在。
表2结果显示，给右旋糖酐铁6周后小鼠肝脏重量增加比率为105.91％。可判断此时小鼠达到地贫pesaro危险分级中所对应的肝肿大标准。给铁的同时，采用淫羊藿苷腹腔注射治疗，100mg/kg，5次/周，肝脏重量增加比率下降为50.54％，但地贫pesaro危险分级中所对应的肝肿大现象依然存在。
表3结果显示，给右旋糖酐铁6周后小鼠的肝组织出现纤维化，给铁的同时采用淫羊藿苷腹腔注射治疗，100mg/kg，5次/周，地贫pesaro危险因素的肝纤维化消失。
可见，给右旋糖酐铁6周后的小鼠有不正规使用去铁铵、肝肿大、肝纤维化3个危险因素，属于地贫pesaro危险分级的iii级危险模型；给铁的同时，采用淫羊藿苷腹腔注射治疗，100mg/kg，5次/周，肝纤维化消失，降为地贫pesaro危险分级的ii级危险模型。
表1.淫羊藿苷对地贫pesaro危险分级铁过载小鼠模型的血清铁改善
与对照组比较，**p<0.01；与相应给铁组比较，△△p<0.01.
表2.淫羊藿苷对地贫pesaro危险分级铁过载小鼠模型的肝肿大治疗作用
与对照组比较，**p<0.01；与相应给铁组比较，△p<0.05,△△p<0.01.
表3.淫羊藿苷对地贫pesaro危险分级铁过载小鼠模型的肝纤维化的治疗
上述实施例为本发明较佳的实施方式，但本发明的实施方式并不受上述实施例的限制，其他的任何未背离本发明的精神实质与原理下所作的改变、修饰、替代、组合、简化，均应为等效的置换方式，都包含在本发明的保护范围之内。