本发明涉及中药制剂技术领域，尤其涉及一种用于防治骨质增生、风湿性骨关节炎和筋骨疼痛的制剂及其制备方法。
背景技术：
威灵仙，是毛茛科，铁线莲属多年生木质藤本。在临床上，它用于治疗痛风顽痹、肢体麻木、筋脉拘挛、减弱风湿痹痛、舒筋活血、消肿止痛等功效，其在临床上被广泛应用于治疗风湿痛、摔伤、骨质增生和风湿性关节炎等疾病。
威灵仙的化学成分包括挥发性成分和非挥发性成分。有学者采用水蒸气蒸馏法提取威灵仙中挥发性成分并利用gc-ms技术进行了分析鉴定，发现其化学成分主要为脂肪酸类、酯类、萜类及原白头翁素等其他化合物。
但目前威灵仙均以复方制剂的形式应用于治疗相关骨病，例如中国专利cn1879846公开了一种治疗风湿、骨质增生和骨质疏松的中药制剂，主要由金毛狗脊、乌梢蛇、葛根、淫羊藿、木瓜、土牛膝、土党参、姜黄、威灵仙、补骨脂、淀粉、羧甲淀粉钠和滑石粉组成，该中药制剂所含中药种类繁多，含有名贵药材，其价格令消费者望而却步；中国专利cn105362540a提供一种治疗骨质增生的中药组合，其由鹿衔草、威灵仙、生南星、生甘草、秦艽、冰片、白醋混合制备而成，该中药组合减少了中药配伍的种类，有效降低了成本，但该中药组合中威灵仙还是需与其他药物组分进行相互配合和协同作用。
目前均未出现单独采用威灵仙来治疗骨质增生、风湿性骨关节炎和筋骨疼痛的报道。
技术实现要素：
本发明的目的在于克服现有技术中的缺陷，旨在保护单独采用威灵仙挥发油制剂用于防治骨质增生、风湿性骨关节炎和筋骨疼痛。
申请人目前已广泛推广的威灵仙注射剂在临床上用于治疗骨质增生、风湿性骨关节炎和筋骨疼痛等疾病已有二十多年应用的历史，威灵仙注射液是通过蒸馏提取的芳香水剂，其发挥药效作用的主要成分是挥发性成分，该注射液能祛风除湿、通络止痛。临床使用情况表明，该注射液疗效确切，未发现明显的副作用，。但该制剂的制备步骤还需进一步优化以调整有效挥发成分的含量，并且为了满足广大患者的需求，对制剂的种类需进行多样化制备。
为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：
本发明提供一种用于防治骨质增生、风湿性骨关节炎和筋骨疼痛的制剂，其包括威灵仙挥发油类成分。
优选地，所述威灵仙挥发油类成分包括水蒸气蒸馏法制备得到的芳香水剂和挥发油、溶剂提取法制备得到的威灵仙挥发油中的至少一种
优选地，所述制剂的形式包括注射剂、涂膜剂、透皮贴剂和膏剂，其中膏剂优选软膏和巴布膏。
本发明还提供一种上述用于防治骨质增生、风湿性骨关节炎和筋骨疼痛的制剂的制备方法，其包括如下步骤：
步骤1)威灵仙挥发油类成分的提取；
步骤2)威灵仙挥发油制剂的制备。
为了进一步优化上述技术方案，本发明所采取的技术措施还包括：
优选地，在步骤1)中，在威灵仙挥发油类成分的提取之后，还包括威灵仙挥发油类成分的精制。
优选地，步骤1)中威灵仙挥发油类成分的提取包括蒸馏法和溶剂提取法。
优选地，所述威灵仙挥发油类成分的精制包括重蒸馏、萃取、冷冻和色谱分离。
优选地，威灵仙挥发油类成分的提取和精制的操作过程如下：取一定质量的威灵仙药材，加入5-15倍药材质量的蒸馏水，40-80摄氏度温浸3-24小时，然后蒸馏3-6小时，收集2倍药材质量的蒸馏液；蒸馏液重蒸馏2-4小时，得到1倍药材质量重蒸馏液。
优选地，威灵仙挥发油类成分的提取和精制的操作过程如下：取一定质量的威灵仙药材，加入5-10倍药材质量的蒸馏水，40-80摄氏度温浸3-12小时，然后蒸馏3-8小时，收集上层的挥发油类成分，该挥发油类成分进行冷冻或者色谱分离精制。优选地，威灵仙挥发油类成分的提取和精制的操作过程如下：
将一定质量的威灵仙药材，加适量蒸馏水和羊毛脂，热水浴温浸10～14小时，然后取适量的羊毛脂液体蒸馏4～6小时，收集挥发油与羊毛脂的混合液，该混合液采用液-液萃取技术分离威灵仙挥发油。
也可采用本领域其他常规的挥发油类成分的提取和精制步骤。
优选地，所述步骤1)中采用的威灵仙药材是毛茛科铁线莲属植物威灵仙(clematischinensisosbeck)、棉团铁线莲(c.hexapetala)、东北铁线莲(c.manshurica)的干燥根及根茎，其被粉碎成粉末状或切成片状。
优选地，威灵仙挥发油制剂的制备方法包括：威灵仙注射液、威灵仙巴布膏、威灵仙软膏、威灵仙透皮贴剂、威灵仙挥发油等制剂的制备方法。
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
本发明对威灵仙挥发油类成分的提取和精制步骤进行优化，有效调整提取液中的有效挥发成分的含量，使得该制剂尤其适用于防治骨质增生、风湿性骨关节炎和筋骨疼痛，并实现了制剂种类的多样化，患者可选择涂膜剂、透皮贴剂、软膏和巴布膏来替代注射液，这减少了患者往返医院的次数，满足了广大患者的需求。
具体实施方式
下面结合实施例，对本发明的具体实施方式作进一步描述。以下实施例仅用于更加清楚地说明本发明的技术方案，而不能以此来限制本发明的保护范围。
下述实施例中所制备的用于防治骨质增生、风湿性骨关节炎和筋骨疼痛的制剂均包括威灵仙挥发油类成分，其采用的原料均为毛茛科铁线莲属植物威灵仙(clematischinensisosbeck)、棉团铁线莲(c.hexapetala)、东北铁线莲(c.manshurica)的干燥根及根茎，其被粉碎成粉末状或切成片状，其中粉末状的粒度为5-10mm，切片状的长度、宽度和厚度均不大于50mm，采用上述尺寸更利于挥发性成分的提取。
实施例1
此实施例为威灵仙注射液的制备，其步骤如下：
威灵仙1.0千克，加入5倍量蒸馏水于50摄氏度温浸12小时，然后100摄氏度蒸馏4小时，收集蒸馏液2000毫升；蒸馏液在100摄氏度再蒸馏2小时，收集蒸馏液约900毫升；加入聚山梨酯80共计5毫升，加热溶解震摇滤过，调节ph至6.0，以重蒸馏水至1000毫升，滤过，灌封，蒸汽灭菌即得威灵仙注射液。威灵仙注射液鉴别方法是取重蒸馏后蒸馏液1毫升，加蒸馏水稀释至50毫升，摇匀，紫外可见分光光度法检测255±3nm波长处有最大吸收。威灵仙注射液每支2毫升，肌内注射，一次2-4毫升，一日1-2次。
实施例2
此实施例为威灵仙注射液的制备，其步骤如下：
威灵仙1.0千克，加入10倍量蒸馏水于60摄氏度温浸6小时，然后100摄氏度蒸馏8小时，收集蒸馏液4000毫升；蒸馏液在100摄氏度重蒸馏3小时，收集蒸馏液约900毫升；加入聚山梨酯80共计5毫升，加热溶解震摇滤过，调节ph至6.0，以重蒸馏水至1000毫升，滤过，灌封，蒸汽灭菌即得威灵仙注射液。威灵仙注射液鉴别方法是取重蒸馏后蒸馏液1毫升，加蒸馏水稀释至50毫升，摇匀，紫外可见分光光度法检测255±3nm波长处有最大吸收。威灵仙注射液每支2毫升，肌内注射，一次2-4毫升，一日1-2次。
实施例3
此实施例为威灵仙注射液的制备，其步骤如下：
威灵仙1.0千克，加入10倍量蒸馏水于40摄氏度温浸24小时，然后100摄氏度蒸馏4小时，收集蒸馏液2000毫升；蒸馏液在100摄氏度重蒸馏2小时，收集蒸馏液约900毫升；加入聚山梨酯80共计5毫升，加热溶解震摇滤过，调节ph至6.0，以重蒸馏水至1000毫升，滤过，灌封，蒸汽灭菌即得威灵仙注射液。威灵仙注射液鉴别方法是取重蒸馏后蒸馏液1毫升，加蒸馏水稀释至50毫升，摇匀，紫外可见分光光度法检测255±3nm波长处有最大吸收。威灵仙注射液每支2毫升，肌内注射，一次2-4毫升，一日1-2次。
实施例4
此实施例为威灵仙注射液的制备，其步骤如下：
威灵仙1.0千克，加入15倍量蒸馏水于80摄氏度温浸6小时，然后100摄氏度蒸馏5小时，收集蒸馏液2500毫升；蒸馏液在100摄氏度重蒸馏2小时，收集蒸馏液约900毫升；加入聚山梨酯80共计5毫升，加热溶解震摇滤过，调节ph至6.0，以重蒸馏水至1000毫升，滤过，灌封，蒸汽灭菌即得威灵仙注射液。威灵仙注射液鉴别方法是取重蒸馏后蒸馏液1毫升，加蒸馏水稀释至50毫升，摇匀，紫外可见分光光度法检测255±3nm波长处有最大吸收。威灵仙注射液每支2毫升，肌内注射，一次2-4毫升，一日1-2次。
实施例5
此实施例为威灵仙巴布膏的制备，其步骤如下：
威灵仙药材10.0千克，加入6倍量蒸馏水于50摄氏度温浸12小时，然后蒸馏4小时，油水分离(馏分可适当降温以加快油水分离)，取挥发油，经过零下20摄氏度冷冻精制，得到100毫升威灵仙挥发油。威灵仙挥发油100克，加明胶、甘油等制成的基质，研成细腻糊状，制成涂料，均匀涂布于无纺布，切段，盖衬，切成小块，即得威灵仙巴布膏。
实施例6
此实施例为威灵仙巴布膏的制备，其步骤如下：
威灵仙药材10.0千克，加入10倍量蒸馏水于60摄氏度温浸12小时，然后蒸馏5小时，油水分离(馏分可适当降温以加快油水分离)，取挥发油，经过零下20摄氏度冷冻精制，得到100毫升威灵仙挥发油。取1份聚乙烯醇适量用水溶胀后，90摄氏度水浴加热溶解，滤过，放冷；另取4份明胶适量加入上述聚乙烯醇溶液，充分溶胀，60摄氏度水浴加热溶解，加入5份甘油拌匀，最后加入聚丙烯酸钠7份，拌匀，最后缓慢加入威灵仙挥发油，研匀，均匀涂布于无纺布，加盖聚乙烯膜，自然放置，切块，即得威灵仙巴布膏。
实施例7
此实施例为威灵仙软膏的制备，其步骤如下：
威灵仙药材10.0千克，加入6倍量蒸馏水于50摄氏度温浸12小时，然后蒸馏4小时，油水分离(馏分可适当降温以加快油水分离)，取挥发油，经过零下20摄氏度冷冻精制，得到100毫升威灵仙挥发油。威灵仙挥发油100克，加入液体石蜡10毫升，研成细腻糊状；另取羊毛脂20克和凡士林适量共置水浴加热融化，待温度降至50摄氏度时，等量递加分次加入以上混合物，边加边研合，研制冷凝，即得威灵仙软膏。
实施例8
此实施例为威灵仙软膏的制备，其步骤如下：
威灵仙药材10.0千克，加入10倍量蒸馏水于60摄氏度温浸12小时，然后蒸馏5小时，油水分离(馏分可适当降温以加快油水分离)，取挥发油，经过零下20摄氏度冷冻精制，得到100毫升威灵仙挥发油。取3:2比例的聚乙二醇4000和聚乙二醇400，置容器中水浴加热融化，搅拌均匀，待冷至将凝时加入威灵仙挥发油100克，边加边研合，研制冷凝，即得威灵仙软膏。
实施例9
此实施例为威灵仙透皮贴剂的制备，其步骤如下：
威灵仙药材10.0千克，加入10倍量蒸馏水于60摄氏度温浸12小时，然后蒸馏5小时，油水分离(馏分可适当降温以加快油水分离)，取挥发油，经过零下20摄氏度冷冻精制，得到100毫升威灵仙挥发油；加入适量丙酮、dmso、月桂氮酮，并加入聚乙烯醇缩甲乙醛，边加边搅拌，至全部溶解，研成细腻糊状，制成涂料，均匀涂布于无纺布，切段，盖衬，切成小块，即得威灵仙透皮贴剂。
实施例10
此实施例为威灵仙挥发油的制备，其步骤如下：
威灵仙药材10.0千克，粉碎后置于提取装置中，加水60l，将羊毛脂置热水浴中加热温浸12小时，待融化后将羊毛脂液体30ml加入挥发油油水分离器中，用水蒸气蒸馏法提取挥发油5小时，收集并得到挥发油与羊毛脂的混合液。采用液-液萃取技术分离威灵仙挥发油。得到的挥发油与羊毛脂的混合液中加入无水乙醇100ml，摇动均匀，经每分钟3000转离心分离，对油层加水两次，每次60ml，摇动均匀，再次经每分钟3000转离心分离5分钟，将分出的水层弃去，得到威灵仙挥发油100ml。
实施例11
此实施例为本发明制备的制剂对镇痛效果的影响。
本实施例采用健康小鼠作为研究对象，每只小鼠用电动宠物脱毛器将小鼠腹部的毛脱净。随机分为六组，即威灵仙挥发油低高剂量、中高剂量和高剂量组(含威灵仙挥发油分别为16、24、32mg/cm2)、阳性对照组扶他林乳剂(0.3mg/cm2)、空白基质组(给予等量基质/cm2)和空白对照组。每组10只，每组动物每日分两次涂药，涂药面积为1cm2/只早晚各一次，中间间隔10小时，连续给药七天。末次给药半小时后腹腔注射0.6％醋酸(现配现用，0.2ml/次/只)使小鼠腹膜致炎，计数30min内扭体次数，并计算抑制率(％)。高剂量组、中剂量组和低剂量组威灵仙挥发油软膏及阳性对照药扶他林能显著减少醋酸腹腔注射所致小鼠扭体次数，高剂量组、中剂量组和低剂量组威灵仙挥发油软膏的抑制率分别为68.4％、56.6％和42.8％。中剂量组威灵仙挥发油软膏镇痛效果与阳性对照药的镇痛效果相当。
以上对本发明的具体实施例进行了详细描述，但其只作为范例，本发明并不限制于以上描述的具体实施例。对于本领域技术人员而言，任何对本发明进行的等同修改和替代也都在本发明的范畴之中。因此，在不脱离本发明的精神和范围下所作的均等变换和修改，都应涵盖在本发明的范围内。