本发明涉及中药制剂领域，具体涉及一种治疗狼疮性肾炎的中药组合物及其制备方法。
背景技术：
狼疮性肾炎是指系统性红斑狼疮(sle)合并双肾不同病理类型的免疫性损害，同时伴有明显肾脏损害临床表现的一种疾病。其发病与免疫复合物形成、免疫细胞和细胞因子等免疫异常有关。除sle全身表现外，临床主要表现为血尿、蛋白尿、肾功能不全等。它是一种多因素包括遗传、性激素、环境、感染、药物、免疫反应等参与的特异性自身免疫病。上述多种因素相互作用，引起机体免疫系统紊乱，其中最重要的特征是产生抗核抗体等多种自身抗体，后者与抗原形成免疫复合物，并伴有免疫细胞、细胞因子等免疫异常，这是sle多组织、器官损伤的共同机制。
狼疮性肾炎的发病机制可能与以下因素有关：①循环免疫复合物在肾脏沉积；②原位免疫复合物形成；③局部补体激活；④自身抗体的直接作用；⑤t细胞介导的免疫反应等。狼疮性肾炎的全身表现为间断发热，颧部红斑(蝶形红斑)，盘状红斑，光过敏，口腔溃疡，关节炎，浆膜炎，神经系统异常(抽搐或精神病)。肾脏表现为单纯性血尿或蛋白尿，血尿、蛋白尿伴水肿、腰酸或高血压，即肾炎样表现；大量蛋白尿、低蛋白血症、水肿，即肾病综合征样表现；血尿、蛋白尿伴肾功能急剧减退，呈急进性肾炎表现；肾间质病变；慢性肾功能衰竭。
狼疮性肾炎目前仍是一种原因未明性疾病，治疗的主要目的在于控制ln的活动，保护肾脏功能，延缓肾组织纤维化的进程。对于靶器官功能正常或稳定的轻型sle及狼疮性肾炎患者，酌情用非甾体类抗炎药或抗疟药，可短期使用中、小剂量糖皮质激素(如强的松20～40mg/d)，必要时加用免疫抑制剂。对于重要靶器官出现明显损伤的重型sle及狼疮性肾炎患者，肾小球肾炎持续不缓解、急进性肾小球肾炎、肾病综合征患者，应给予标准激素治疗(泼尼松1g/kg/d)以及免疫抑制剂治疗，对于急性危及生命的重型狼疮患者应给予激素冲击治疗(甲泼尼龙0.5～1.0g/d)。当上述方法效果欠佳或病情较重时，可考虑血浆置换疗法。伴有急性严重肾功能不全、严重高血容量、心力衰竭时应紧急透析，使其渡过危险期。因此，总体而言目前临床上尚缺乏疗效可靠的治疗药物。
技术实现要素：
为解决上述问题，本发明提供了一种治疗狼疮性肾炎的中药组合物及其制备方法，所得的组合物对治疗狼疮性肾炎疗效显著，具有补养肝肾、清热解毒、祛风通络、化瘀散结、健脾安神、活血化瘀等功效。
为实现上述目的，本发明采取的技术方案为：
一种治疗狼疮性肾炎的中药组合物，由以下重量份的原料制备而成：
土茯苓15-20份、淫羊藿12-15份、蜘蛛香12-15份、何首乌3-6份、覆盆子8-10份、黄芪15-20份、甘草6-9份、芡实4-8份、三七5-10份、奶蓟草10-12份、小茴香3-6份、田基黄10-12份、鱼腥草5-10份、蚤休1-3份、党参6-9份、白茅根4-10份、山栀茶5-10份、一点红3-6份、黑枸杞3-6份。
优选地，由以下重量份的原料制备而成：
土茯苓15份、淫羊藿12份、蜘蛛香12份、何首乌3份、覆盆子8份、黄芪15份、甘草6份、芡实4份、三七5份、奶蓟草10份、小茴香3份、田基黄10份、鱼腥草5份、蚤休1份、党参6份、白茅根4份、山栀茶5份、一点红3份、黑枸杞3份。
优选地，由以下重量份的原料制备而成：
土茯苓20份、淫羊藿15份、蜘蛛香15份、何首乌6份、覆盆子10份、黄芪20份、甘草9份、芡实8份、三七10份、奶蓟草12份、小茴香6份、田基黄12份、鱼腥草10份、蚤休3份、党参9份、白茅根10份、山栀茶10份、一点红6份、黑枸杞6份。
优选地，由以下重量份的原料制备而成：
土茯苓17.5份、淫羊藿13.5份、蜘蛛香13.5份、何首乌4.5份、覆盆子9份、黄芪17.5份、甘草7.5份、芡实6份、三七7.5份、奶蓟草11份、小茴香4.5份、田基黄11.5份、鱼腥草7.5份、蚤休2份、党参7.5份、白茅根7份、山栀茶7.5份、一点红4.5份、黑枸杞4.5份。
本发明还提供了上述一种治疗狼疮性肾炎的中药组合物的制备方法，包括如下步骤：
s1、按上述的配方称取各组分；
s2、将各组分洗净沥干后置于汽爆罐内，先通入氮气至汽爆罐内压力为0.7-1.7mpa，爆破处理10-25min；然后迅速通入蒸汽至汽爆罐内压力为2.7-3.7mpa，蒸汽爆破处理3-5min后，室温浓缩至相对密度1.10-1.20，得浓缩液；
s3、向按质量百分比为0.5-2％的比例向所得的浓缩液中加入中性蛋白酶，30-35℃下酶解0.5-1h，过滤，得酶解液；
s3、将所得的酶解液迅速冷冻后再自然解冻，使提取物中淀粉老化沉淀；收集上清液，剩余部分离心，收集离心液体并合并于上清液中；
s4、将上清液以3-7bv/h的流速通过大孔树脂柱，动态吸附饱和后，用表皮细胞生长因子以5-8bv/h的流速淋洗上述大孔树脂柱至流出液无色，再用体积分数为50％-70％的有机溶剂以8-12bv/h的流速进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，得浸膏；
s5、将浸膏用水溶解后以3-5bv/h的流速通过聚酰胺柱，动态吸附饱和后，用3-7bv表皮细胞生长因子以2-10bv/h的流速淋洗上述聚酰胺柱，再用体积分数为30％-50％的有机溶剂水溶液以5-10bv/h的流速进行洗脱，收集有洗脱液，喷雾干燥，即得组合物。
所述有机溶剂为天然来源的松节油衍生物，该松节油衍生物为蒎烯的异构、歧化产物。
本发明具有以下有益效果：
以补肾解毒为主、温阳化瘀为辅，从肝、脾、肾等多个方面对身体机能进行了综合的调理，从而可以显著的提高人体的免疫力，减少尿蛋白；所采用的主要药剂均为天然植物，对身体无害，长期使用不会存在副作用和依赖性；采用汽爆、酶解、大孔树脂吸附以及有机溶剂洗脱相结合的方式对药材进行加工，使得药材内的有效成分可以充分析出，从而在保证药剂疗效的前提下，进一步减少了药剂的副作用。
具体实施方式
为了使本发明的目的及优点更加清楚明白，以下结合实施例对本发明进行进一步详细说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。
实施例1
一种治疗狼疮性肾炎的中药组合物，由以下重量份的原料制备而成：
土茯苓15份、淫羊藿12份、蜘蛛香12份、何首乌3份、覆盆子8份、黄芪15份、甘草6份、芡实4份、三七5份、奶蓟草10份、小茴香3份、田基黄10份、鱼腥草5份、蚤休1份、党参6份、白茅根4份、山栀茶5份、一点红3份、黑枸杞3份。
实施例2
一种治疗狼疮性肾炎的中药组合物，由以下重量份的原料制备而成：
土茯苓20份、淫羊藿15份、蜘蛛香15份、何首乌6份、覆盆子10份、黄芪20份、甘草9份、芡实8份、三七10份、奶蓟草12份、小茴香6份、田基黄12份、鱼腥草10份、蚤休3份、党参9份、白茅根10份、山栀茶10份、一点红6份、黑枸杞6份。
实施例3
一种治疗狼疮性肾炎的中药组合物，由以下重量份的原料制备而成：
土茯苓17.5份、淫羊藿13.5份、蜘蛛香13.5份、何首乌4.5份、覆盆子9份、黄芪17.5份、甘草7.5份、芡实6份、三七7.5份、奶蓟草11份、小茴香4.5份、田基黄11.5份、鱼腥草7.5份、蚤休2份、党参7.5份、白茅根7份、山栀茶7.5份、一点红4.5份、黑枸杞4.5份。
本发明实施例还提供了一种治疗狼疮性肾炎的中药组合物的制备方法，包括如下步骤：
s1、按实施例1、实施例2和实施例3所述的配方称取各组分；
s2、将各组分洗净沥干后置于汽爆罐内，先通入氮气至汽爆罐内压力为0.7-1.7mpa，爆破处理10-25min；然后迅速通入蒸汽至汽爆罐内压力为2.7-3.7mpa，蒸汽爆破处理3-5min后，室温浓缩至相对密度1.10-1.20，得浓缩液；
s3、向按质量百分比为0.5-2％的比例向所得的浓缩液中加入中性蛋白酶，30-35℃下酶解0.5-1h，过滤，得酶解液；
s3、将所得的酶解液迅速冷冻后再自然解冻，使提取物中淀粉老化沉淀；收集上清液，剩余部分离心，收集离心液体并合并于上清液中；
s4、将上清液以3-7bv/h的流速通过大孔树脂柱，动态吸附饱和后，用表皮细胞生长因子以5-8bv/h的流速淋洗上述大孔树脂柱至流出液无色，再用体积分数为50％-70％的有机溶剂以8-12bv/h的流速进行洗脱，收集洗脱液，减压浓缩，得浸膏；
s5、将浸膏用水溶解后以3-5bv/h的流速通过聚酰胺柱，动态吸附饱和后，用3-7bv表皮细胞生长因子以2-10bv/h的流速淋洗上述聚酰胺柱，再用体积分数为30％-50％的有机溶剂水溶液以5-10bv/h的流速进行洗脱，收集有洗脱液，喷雾干燥，即得组合物；所述有机溶剂为天然来源的松节油衍生物，该松节油衍生物为蒎烯的异构、歧化产物。
实验例
实验动物及分组：
取8周龄系统性红斑狼疮(sle)mrl/ipr小鼠50只，雌性，适应性饲养一周后，按体重随机分为5组，每组10只。icr小鼠10只，雌性，作为正常对照组小鼠。
正常对照组：灌胃给予溶剂；
sle模型组：灌胃给予溶剂；
泼尼松组：灌胃给予5mg/kg；
中药组合物低剂量组：灌胃给予按本发明实施例3的配方制备的药物0.5g/kg；
中药组合物中剂量组：灌胃给予按本发明实施例3的配方制备的药物1g/kg；
中药组合物高剂量组：灌胃给予按本发明实施例3的配方制备的药物4g/kg。
所有试验组每天给药1次，连续给药3周，于给药结束时取血备用，摘取脾脏。
淋巴细胞亚群分析
脾细胞单细胞悬液的制备：把小鼠的脾脏放入盛有冷pbs液的培养皿中清洗，用玻璃匀浆器中加入3mlpbs研磨，再用200目不锈钢网过滤，把脾匀浆液离心以转速1500rpm/min离心7分钟，弃上清液，并加入红细胞裂解液2.5ml，混匀，静置2分钟后再加入pbs液2ml终止裂解反应，再以1500rpm/min离心7分钟，弃去上清液，用pbs洗三次后加入pbs，在荧光显微镜下计算细胞数。以上的操作均需在冰上。用以上脾细胞单细胞悬液，计细胞数后，把细胞浓度调整浓度5×106cells/ml。每一组取其中一只小鼠脾细胞样本做亚群分析，把已调整浓度的小鼠脾细胞样本加入流式细胞分析专用管，每只小鼠脾细胞样本制备两管，每管加入样本100μl。在含有样品专用管的第一管加5μlcd3(fitc)和3μlcd4(pe)，第二管加5μlcd3(fitc)和3μlcd8(pe)。室温闭光孵育20min，各管加入500μl鞘液，振荡混匀后上机分析。
尿微量白蛋白的测定
实验试剂：10％(v/v)的冰醋酸溶液(ph2.8)；0.303mol/l甘氨酸-冰醋酸缓冲液(ph3.0)：称取22.72g甘氨酸，用10％冰醋酸溶液稀释成1000ml，加nan3100mg，室温密封可稳定1年；溴酚蓝(1.924mmol/l)贮存液：精确称取257、36mgbpb，用无水乙醇溶至200ml，4℃冰箱可稳定1年；溴酚蓝(0.231mmol/l)显色剂：取60mlbpb贮存液，加入2.5mltritonx-100，用甘氨酸-冰醋酸缓冲液稀释至500ml，室温密封可保存1年。
标本的采集和检测：于第20天将小鼠分别放于代谢笼中饲养，收集隔夜12小时尿，准确记录尿量。叠氮钠处理后，离心(2000r/min)10min，量取储存的小鼠尿液2ml，各加显色剂1ml，混匀(防止产生气泡)，用紫外分光光度计于600nm下测定吸光度a。吸光度a反映尿微量白蛋白的含量大小，a值越小，尿微量白蛋白含量越低。
血清il-10、抗ds-dna抗体含量的测定
采用市售血清il-10、抗ds-dna抗体含量试剂盒按操作说明完成测定。
经检测，本发明的组合物能够纠正sle小鼠t细胞亚群的失衡状态。与正常对照组比较，sle模型小鼠的il-10和抗ds-dna抗体水平明显升高，与sle模型组相比，本发明能显著降低sle小鼠血清il-10和抗ds-dna抗体水平，其中中药组合物低、中剂量组效果尤为显著，优于阳性药，其中中药组合物中剂量组与正常对照组无显著性差异。这表明，本发明的药物对于sle小鼠治疗效果显著。
在t淋巴细胞亚群分析试验中，与sle模型组相比，本发明能使sle样小鼠下降的cd3+cd4+t细胞上升，使上升的cd3+cd8+t下降，纠正t细胞亚群的失衡状态；在血清il-10、抗ds-dna抗体含量测定试验中，与sle模型组相比，本发明能显著降低sle小鼠血清il-10和抗ds-dna抗体水平的升高，其中中药组合物中剂量组与正常对照组无显著性差异，说明本发明的药物对于sle小鼠治疗效果显著；在尿微量白蛋白的测定试验中，sle模型组白蛋白含量明显升高，反映sle小鼠肾脏有损伤，本发明能显著降低sle小鼠尿液中白蛋白的含量，中药组合物低、中剂量组效果尤为显著，优于阳性药，并且中药组合物低、中剂量组与正常对照组无显著性差异，表明本发明的药物对于sle小鼠肾脏损伤具有突出的治疗效果。
以上所述仅是本发明的优选实施方式，应当指出，对于本技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明原理的前提下，还可以作出若干改进和润饰，这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。