本发明涉及一种用于预防、改善或治疗骨疾病的含有潘多汀(panduratin)衍生物或提琴形凹唇姜萃取物的组合物。
背景技术：
为了得到正常的骨功能，需要有通过破骨细胞(osteoclast)的骨吸收(bone resorption)和成骨细胞(osteoblast)的骨形成(bone formation)的动态平衡的骨重建(bone remodeling)过程。然而，破骨细胞的过度活性以及成骨细胞的活性降低会导致重建过程中的失衡，从而导致诸如骨质疏松(osteoprosis)之类的骨质流失疾病(骨骼疾病)。
骨质疏松是骨骼相关的疾病中最常见的骨质流失疾病，例如多发性骨髓瘤和骨关节炎，且通常以骨折的增加和骨强度的降低为特征(Nat.Rev.Endocrinol.8：212-227,2011；J.Dent.Res.91：736-744,2012)。
在口腔中，牙槽骨的破骨细胞中的活性快速增加会导致骨吸收，从而导致牙周组织中牙槽骨的流失，并导致伴有牙齿脱落的牙槽骨流失疾病(J.Immunol.Res.2015:1-10,2015)。为了克服这种不平衡，通常使用抑制破骨细胞过度活性、促进成骨细胞的活性或抑制破骨细胞的活性以及促进破骨细胞的活性的方法(Nat.Rev.Rheumatol.7:631-638,2011)。
破骨细胞形成于造血干细胞中，且分化的破骨细胞分解矿化骨，因此破骨细胞在身体骨骼的生长及动态平衡的维持方面具有重要作用。破骨细胞的分化受受体所调节，所述受体例如作为肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)配体的核因子k-B配体的受体激活剂(receptor activator of nuclear factor kappa-B ligand,RANKL)，核因子k-B的受体激活剂(receptor activator of nuclear factor kappa-B,RANK)及骨保护素(osteoprotegerin,OPG)。RANKL是由例如成骨细胞或人牙龈成纤维细胞(human gingival fibroblast)等细胞分泌的，并附着于破骨细胞或破骨细胞前体细胞(osteoclast precursor cell)中表达的RANK上。这样的附着信号增加了活化T细胞细胞质1的核因子(nuclear factor of activated T-cells,cytoplasmic 1,NFATc1)的活性，所述细胞质1(NFATc1)是一种主要的转录因子，因此促进了诸如抗酒石酸盐酸性磷酸酶(tartrate-resistant acid phosphatase,TRAP)的酶和降钙素受体(calcitonin receptor)的合成，所述降钙素受体是破骨细胞分化的特异性生物标志物，在骨降解和吸收中起到重要作用。作为诱饵(decoy)受体的OPG附着于RANKL上以阻止RANKL直接附着到RANK。因此，RANKL和OPG的相对浓度在维持骨骼稳态方面起到重要作用(J.Immunol.Res.2015:1-10,2015)。
迄今为止开发的有代表性的骨质疏松症药物主要是双磷酸盐(bisphosphonates)制剂，其通过削弱破骨细胞的功能来抑制骨质流失。然而，这些化学合成的产品具有引起诸如肠胃失调、肾毒性、肌肉骨骼疼痛和下颌坏死等副作用。因此，基于具有副作用少、安全性高的天然材料的骨质疏松或牙槽骨质流失的预防和治疗是非常重要的研究主题(Datamonitor Research Reports,2007；Korean J.Fam.Pract.3:16-24,2013)。
提琴形凹唇姜(Boesenbergia pandurata，与Boesenbergia rotunda同名)是一种叫做手指根(fingerroot)的姜科植物(zingiberaceae family)，且其根茎(rhizome)广泛用于治疗感冒、肠炎、皮肤病及尿道痛。提琴形凹唇姜含有乔松素查耳酮(pinocembrin chalcone)、小豆蔻明(cardamonin)、乔松素(pinocembrin)、环松素(pinostrobin)、4-羟基潘多汀A(4-hydroxypaduratin A)、及潘多汀A(panduratin A)，据报道这些成分具有抗癌效果(Trakoontivakorn,G.,et.al.J.Arig.Food chem.,49,3046-3050,2001)，并且据报道基于黄酮的二氢查耳酮(dihydrochalcone)组合物具有杀虫效果(Phytochemistry,34,415-419,1993)。
然而，在本发明之前，还没有详细报道潘多汀萃取物或提琴形凹唇姜萃取物在包括骨质疏松或牙槽骨质流失的骨质流失疾病中的预防、改善或治疗效果。
技术实现要素：
本发明的一个方面在于提供一种含有潘多汀衍生物和/或提琴形凹唇姜萃取物的组合物，作为一种天然物质，其可以被安全地使用，同时通过抑制破骨细胞的分化在骨重建的过程中具有恢复和改善骨形成和骨吸收平衡的效果。
根据本发明的一个方面，提供了一种含有作为活性成分的提琴形凹唇姜(Boesenbergia pandurata)萃取物或其馏分的组合物。
具体地，本发明提供一种用于预防或治疗骨质流失疾病的药物组合物，所述组合物含有作为活性成分的提琴形凹琴姜(Boesenbergia pandurata)萃取物或其馏分。
进一步地，本发明提供一种用于预防或改善骨质流失的准药品组合物，所述组合物含有作为活性成分的提琴形凹琴姜(Boesenbergia pandurata)萃取物或其馏分。
进一步地，本发明提供一种用于预防或改善骨质流失的准药品，所述准药品含有作为活性成分的提琴形凹琴姜(Boesenbergia pandurata)萃取物或其馏分。
进一步地，本发明提供一种用于预防或改善骨质流失的食品组合物，所述组合物含有作为活性成分的提琴形凹琴姜(Boesenbergia pandurata)萃取物或其馏分。
根据本发明的另一个方面，提供一种含有作为活性成分的潘多汀衍生物或其盐的组合物。
具体地，本发明提供一种用于预防或治疗骨质流失疾病的药物组合物，所述组合物含有作为活性成分的潘多汀衍生物或其盐。
进一步地，本发明提供一种用于预防或改善骨质流失的准药品组合物，所述组合物含有作为活性成分的潘多汀衍生物或其盐。
进一步地，本发明提供一种用于预防或改善骨质流失的准药品，所述准药品含有作为活性成分的潘多汀衍生物或其盐。
进一步地，本发明提供一种用于预防或改善骨质流失的食品组合物，所述组合物含有作为活性成分的潘多汀衍生物或其盐。
本发明的所述潘多汀衍生物或提琴形凹唇姜作为一种天然物质可以安全地使用而没有副作用，同时通过抑制破骨细胞的分化具有治疗、预防或改善骨质流失疾病的效果，因此可以有效地用于药品、准药品、食品等制备中。
附图说明
图1示出了通过提琴形凹唇姜萃取物(BPE)的处理在RANKL诱导的RAW264.7细胞中测量NFATc1、TRAP和组织蛋白酶K(cathepsin K)的mRNA表达的结果。
图2示出了通过潘多汀A(PAN)的处理在RANKL诱导的RAW264.7细胞中测量NFATc1、TRAP和组织蛋白酶K的mRNA表达的结果。
图3示出了通过提琴形凹唇姜萃取物(BPE)的处理在RANKL诱导的RAW264.7细胞中测量NFATc1、TRAP和组织蛋白酶K的蛋白质表达的结果。
图4示出了通过潘多汀A(PAN)的处理在RANKL诱导的RAW264.7细胞中测量NFATc1、TRAP和组织蛋白酶K的蛋白质表达的结果。
图5示出了关于提琴形凹唇姜萃取物(BPE)对在RANKL诱导的RAW264.7细胞中的TRAP活性的影响的测量图。
图6示出了关于潘多汀A(PAN)对在RANKL诱导的RAW264.7细胞中的TRAP活性的影响的测量图。
图7示出了通过显微镜的分析，提琴形凹唇姜萃取物(BPE)对在RANKL诱导的RAW264.7细胞中的破骨细胞分化的效果。
图8示出了通过显微镜分析，潘多汀A(PAN)对在RANKL诱导的RAW264.7细胞中的破骨细胞分化的效果。
具体实施方式
本发明人探索并研究了几种天然材料，其在骨重建过程中通过抑制破骨细胞分化具有恢复和保持骨形成和骨吸收的平衡的效果的同时还可被安全应用，结果本发明人证实潘多汀衍生物和/或提琴形凹唇姜(Boesenbergia pandurata)萃取物或其馏分具有预防、改善或治疗骨质流失疾病的效果，因此完成了本发明。
以下将对本发明进行详细描述。
本发明涉及一种组合物，所述组合物用于预防、治疗或改善骨质流失疾病，所述组合物含有作为活性成分的提琴形凹唇姜(Boesenbergia pandurata)萃取物或其馏。
进一步地，本发明涉及一种组合物，其用于预防、治疗或改善骨质流失疾病，所述组合物含有作为活性成分的潘多汀衍生物或其盐。
所述术语“提琴形凹唇姜(Boesenbergia pandurata，与Boesenbergia rotunda同名)”也称为手指根(fingerroot)，并且指的是自然生长在南亚的姜科植物(zingiberaceae family)。提琴形凹唇姜的根茎部被广泛用于治疗感冒、肠炎、皮肤病等。
在制备本发明的萃取物中，手指根的所有部位均可以使用，尽管提琴形凹唇姜的萃取物的部位未被限制，但是优选使用提琴形凹唇姜的根茎部。植物的形式对于萃取物的制备来说是不受限制的，并且所述植物指的是包括所有已经过诸如干燥和粉碎等处理步骤的植物。
在本发明的一个实施例中，提琴形凹唇姜萃取物的破骨细胞的抑制作用已被确认，因此，证实了使用萃取物可以通过抑制骨质的流失和形成的重建过程中的过度流失来治疗或改善骨质流失疾病从而平衡骨质流失和形成。
本发明的提琴形凹唇姜萃取物可以优选地包含潘多汀(panduratin)衍生物。在本发明的一个实施例中，从提琴形凹唇姜萃取物中分离并识别一种潘多汀衍生物，且经实验证实该萃取物及从其分离出的潘多汀组合物具有抑制破骨细胞分化的作用。
所述“潘多汀(panduratin)”为一种从称为手指根(Boesenbergia rotunda)的植物的根部萃取的成分，并已知具有AMPK活性作用。
潘多汀衍生物包括潘多汀A(panduratin A)、4-羟基潘多汀A(4-hydroxypaduratin A)及iso潘多汀A(isopanduratin A)。潘多汀A为(2，6-f二羟基-4-甲氧基苯基)[3-甲基-2-(3-甲基丁-2-烯基)-5-苯基环己-3-烯基]甲酮，分子式为C26H30O4，并且优选地为具有下列化学式1结构的化合物。此外，4-羟基潘多汀A(4-hydroxypaduratin A)为(2，4，6-二羟基苯[3-甲基-2-(3-甲基丁-2-烯基)-6-苯基环己-3-烯基]甲酮，分子式为C25H28O4，并且优选地为具有下列化学式2结构的化合物。此外，iso潘多汀A(isopanduratin A)为(2-甲氧基-4，6-二羟基苯基)-[3-甲基-2-(3-甲基丁-2-烯基)-6-苯基环己-3-烯基]甲酮，分子式为C26H30O4，并且优选地为具有下列化学式3结构的化合物。
[化学式1]
[化学式2]
[化学式3]
组合物可包含一种潘多汀衍生物的盐。所述盐可以是药学上可接受的盐。
在本发明的一个实施例中，从圆形凹唇姜萃取物中分离并识别一种活性成分，其结果是，该活性成分被证实是潘多汀A，并且证实了潘多汀A具有抑制破骨细胞分化的作用。因此，可以看出本发明的潘多汀衍生物可以从提琴形凹唇姜(Boesenbergia pandurata)中萃取。
如本文所使用的，术语“萃取物”指的是一种通过将预先确定的物质溶解在溶剂中以分离并识别其活性成分或特征成分而得到的物质。具体地，该术语包括通过将萃取溶剂加入植物而萃取得到的萃取物和通过将分馏溶剂加入由萃取溶剂萃取得到的萃取物中分馏得到的馏分。因此，本发明的提琴形凹唇姜(Boesenbergia pandurata)萃取物包括所有通过向提琴形凹唇姜添加溶剂而得到的萃取物和通过向该得到的萃取物再一次添加分馏溶剂而分馏得到的馏分。
具体地，所述萃取物可以是采用提琴形凹唇姜的根茎部的乙醇萃取物、热水萃取物、己烷萃取物、乙酸乙酯萃取物或超高压萃取物。
萃取溶剂可以选自水、有机溶剂、亚临界水和超临界流体中的至少一种。所述有机溶剂可以是极性溶剂、非极性溶剂、极性和非极性混合溶剂或水。具体地，所述溶剂可以是选自C1-C6醇(alcohol)、丙酮(acetone)、醚(ether)、苯(benzene)、氯仿(chloroform)、乙酸乙酯(ethyl acetate)、二氯甲烷(methylene chloride)、己烷(hexane)、环己烷(cyclohexane)、石油醚(petroleum ether)和水中任何一种溶剂。
在本发明的一个实施例中，通过向提琴形凹唇姜添加乙醇制备了一种萃取物，并且所述提琴形凹唇姜的乙醇萃取物被证实具有抑制破骨细胞活性的作用。因此，优选地，乙醇可以用作萃取溶剂。
植物萃取物可以通过传统的制备植物萃取物的方法来制备。更具体地，可以这样实施方法，向植物添加去除杂质的萃取溶剂并进行萃取工艺。所述萃取工艺可以是冷萃取、温萃取、加压萃取或超声粉碎萃取。例如，萃取物可以通过适于食品加工的纯净水、乙醇、亚临界水或超临界二氧化碳萃取和纯化干燥的植物体，或通过在超高压100Mpa或更高压的条件下采用超高压萃取装置萃取和纯化提琴形凹唇姜，或通过对直接压缩植物体得到的油进行分离和纯化而得到。
分馏溶剂可以是水、丁醇、乙酸乙酯、氯仿、己烷或其混合物。馏分可以是一种通过前述萃取方法制备的萃取物，具体地，馏分为通过对粗萃取物进行进一步的分馏过程而得到的馏分。所述分馏溶剂可以是选自乙酸乙酯、乙醚、氯仿、苯、己烷、二氯甲烷及其混合溶剂的一种溶剂。具体地，分馏过程可以通过依次向粗萃取物添加混合溶剂，后依次得到分层的馏分来进行。
在本发明的一个实施例中，萃取物可以是通过己烷-氯仿-乙酸乙酯的第一馏分，通过将混合有己烷、氯仿及乙酸乙酯的溶剂添加至提琴形凹唇姜的乙醇萃取物中进行分馏而得到。此外，萃取物可以是通过己烷-乙酸乙酯-甲醇的第二馏分，通过将己烷、乙酸乙酯及甲醇作为进一步的溶剂再一次对第一馏分进行分馏而得到。所述己烷、氯仿及乙酸乙酯的混合溶剂可以通过将己烷、氯仿及乙酸乙酯以(1-5)：1：(0.1-0.5)的量比进行混合而得到的混合溶剂，也可以通过将己烷、乙酸乙酯及甲醇以(15-20)：(0.5-4)：1的量比进行混合而得到。本发明的馏分包含大量潘多汀成分，因此具有预防、治疗或改善骨质流失疾病的卓越效果。
在萃取或分馏之后，可以浓缩萃取物或馏分或从中除去溶剂，进行真空过滤或进一步进行浓缩和/或冷冻干燥。得到的萃取物可以存储于冰柜(deep freezer)中备用。
分馏法采用诸如溶剂分馏法、硅胶色谱(silica gel chromatography)、制备型HPLC等方法来进行，从而制备具有浓缩活性物质的特定馏分。
如本文中所使用的，术语“骨质流失”指的是由破骨细胞和成骨细胞的失衡引起的一种骨质流失症状，术语“骨质流失疾病”指的是包括与该症状相关的所有疾病。因此术语“骨质流失疾病”包含了所有由低骨密度或不平滑的骨生成引起的疾病，其中低骨密度是由破骨细胞活性过多引起骨质流失导致的，而不平滑的骨生成是由成骨细胞活性降低导致的。该疾病的具体示例包括骨质疏松、佩吉特氏病(Paget’s disease)、牙槽骨流失、骨软病、骨营养障碍。
骨质疏松(osteoprosis)指的是由于骨量减少及其质量改变引起的骨强度减弱的疾病，因此很容易发生骨折。可以通过减弱破骨细胞的功能或激活成骨细胞来减缓、改善或治疗这些症状或预防相关疾病。
佩吉特氏病(Paget’s disease)指的一种骨质疾病，其骨重建(bone remodeling)过度进行从而侵入大范围的骨骼系统，可以通过抑制骨吸收和/或骨形成来减缓、改善或治疗这些症状或预防相关疾病。
牙槽骨流失指的是包括牙周组织中的牙槽骨流失的所有症状。所述佩吉特氏病可以由牙周炎或牙龈炎引起，但不限于此。
骨软病(Osteomalacia)指的是由于新形成的骨基质的异常钙化而导致骨密度降低的疾病，其也被称为佝偻病(rickets)。抑制破骨细胞活性可以延缓骨软化或预防由骨软病引起的骨折。
骨营养障碍(osteodystrophy)是由营养失衡引起的骨生长抑制，并可能伴随骨质疏松症。骨营养障碍也称为骨形成障碍或骨关节发育畸形。骨营养障碍包括肾性骨营养障碍、肥大性骨营养不良(Hypertrophic Osteodystrophy)和胎儿型软骨营养障碍(chondrodystrophia foetalis,fetal chonchodystrophy)。
在本发明的一个实施例中，实验证实了用潘多汀或本发明的萃取物处理破骨细胞抑制了破骨细胞的活性。因此，本发明的组合物通过抑制破骨细胞的活性来抑制和延缓引起骨质流失的过度的骨吸收，可以有效预防、治疗或改善骨质流失疾病。
如本文所使用的术语“预防”或“防止”指的是所有抑制或延缓疾病或症状的发生的行为。
在本发明中，该术语指的是通过抑制破骨细胞的活性延缓骨质流失疾病的发生周期或抑制疾病的发生。
如本文所使用的术语“改善”指的是所有有利地改变疾病或疾病症状的行为。在本发明中，该术语指的是骨质疏松症状或诸如牙槽骨质流失等症状通过抑制破骨细胞活性的改善。
如本文所使用的术语“治疗”指的是所有延缓、停止或逆转疾病或症状的进程的行为。在本发明中，该术语指的是通过抑制破骨细胞活性来停止、减轻、改善、除去或逆转骨质流失或牙槽骨质流失。
在本发明的一个实施例中，已被证实用提琴形凹唇姜(Boesenbergia pandurata)或潘多汀的处理可以抑制引起骨质疏松的破骨细胞分化。
因此，在这方面，本发明的组合物可以是用于预防或治疗骨质流失疾病的药物组合物。
除了上述有效成分之外，本发明的组合物还可以包括至少一种用于预防或治疗骨质流失疾病的具有相同或相似功能的活性成分。例如组合物还可以包括一种已知的用于骨质疏松的治疗剂，一种已知的用于牙槽骨疾病等的治疗剂，上述这两种治疗剂在预防或治疗骨质流失疾病方面有效。当本发明的组合物包含一种额外的成分时，可以是具有进一步加强预防或治疗骨质流失疾病的效果的成分。额外成分的添加可能需要考虑复合物的使用是否稳定、配置的难易及活性成分是否稳定。基于总组合物的重量，所述额外的成分可以以0.0001wt％至10wt％的含量包含在内。例如，所述额外的成分可以是以含有0.0001wt％(含)至1wt％(含)、0.0001wt％(含)至0.1wt％(含)、0.0001wt％(含)至0.001wt％(含)、0.001wt％(含)至10wt％(含)、0.001wt％(含)至1wt％(含)、0.001wt％(含)至0.1wt％(含)、0.01wt％(含)至10wt％(含)及0.01wt％(含)至1wt％(含)的含量被包含在组合物中。上述含量范围可以根据诸如安全性及本发明的提琴形凹唇姜萃取物或潘多汀化合物的配制的容易性等条件进行调整。
本发明的药品组合物还可以是潘多汀的药学上可接受的盐。如本文所使用的术语“药学上可接受的”指的是在生理上可接受的并且在施用于人体时通常不会引起过敏反应或其相似反应。所述盐优选地为通过药学上可接受的游离酸形成的一种酸加成盐。
药学上可接受的盐可以是使用有机酸或无机酸形成的一种酸加成盐。有机酸的示例包括甲酸、乙酸、丙酸、乳酸、丁酸、异丁酸、三氟乙酸、苹果酸、马来酸、丙二酸、富马酸、琥珀酸、琥珀酸单酰胺、谷氨酸、酒石酸、草酸、柠檬酸、乙醇酸、葡糖醛酸、抗坏血酸、苯甲酸、邻苯二甲酸、水杨酸、邻氨基苯甲酸、二氯乙酸、氨氧基乙酸、苯磺酸、对甲苯磺酸或甲磺酸。无机酸的示例包括盐酸、溴酸、硫酸、磷酸、硝酸、碳酸、或硼酸。所述酸加成盐可以优选为氯酸盐或乙酸盐的形式，更优选为氯酸盐的形式。
上述酸加成盐可以通过普通的盐制备的方法来制备，包括a)直接混合潘多汀和一种酸；b)将其中的一种溶解在一种溶剂或水溶剂中，然后混合；或c)将潘多汀加入溶剂或水溶剂中的酸中，然后混合。
另外，如上所述，可接受的盐的其他示例包括GABA盐、加巴喷丁盐、普瑞巴林盐、尼古丁盐、己二酸盐、半-丙二酸盐、半胱氨酸盐、乙酰半胱氨酸盐、甲硫氨酸盐、精氨酸盐、赖氨酸盐、鸟氨酸盐或天冬氨酸盐。
此外，本发明的药品组合物还可以包含药学上可接受的盐。
药学上可接受的载体的示例可以包括用于口服给药的载体或用于肠胃外给药的载体。用于口服给药的载体可以包括乳糖、淀粉、纤维素衍生物、硬脂酸镁、硬脂酸等。用于肠胃外给药的载体包括水、适当的油、盐溶液、葡萄糖水溶液、乙二醇等。此外，所述载体还可以包括稳定剂和防腐剂。所述稳定剂的合适的示例包括诸如亚硫酸氢钠、亚硫酸钠或抗环血酸等抗氧化剂。所述防腐剂的合适的示例包括苯扎氯铵、对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯和氯丁醇。其他药学上可接受的载体可参考以下文献(Remington's Pharmaceutical Sciences,19th ed.,Mack Publishing Company,Easton,PA,1995)。
本发明的组合物可以通过任何方法施用于包括人类的哺乳动物上。本发明的药品组合物可以是口服或肠胃外给药，并且肠胃外给药的实例可以是但不限于静脉内、肌肉内、动脉内、髓内、硬膜内、心脏内、经皮、皮下、腹膜内、鼻内、肠、外用、舌下、直肠给药。
本发明的药品组合物可以根据如上所述的给药途径，配制成口服或肠胃外给药的制剂。根据本发明的组合物可以通过使用至少一种缓冲液(例如，盐溶液或PBS)、碳水化合物(例如，葡萄糖、甘露糖、蔗糖或葡聚糖)、抗氧化剂、抑菌剂、螯合剂(例如，EDTA或谷胱甘肽)、填充剂、增量剂、粘合剂、辅助剂(例如，氢氧化铝)、悬浮剂、增稠剂、润湿剂、崩解剂、表面活性剂、稀释剂或赋形剂来配制。
一种用于口服给药的固体制剂包括片剂、丸剂、粉末、颗粒、液体、凝胶、糖浆、浆液、悬浮液或胶囊，并且这种固体制剂可以通过混合le、片剂等来制备。这些固体制剂可以通过将至少一种赋形剂与本发明的药品组合物进行混合来制备，所述赋形剂如淀粉(包括玉米淀粉、小麦淀粉、大米淀粉及马铃薯淀粉)、碳酸钙(Calcium carbonate)、蔗糖(Sucrose)、乳糖(Lactose)、葡萄糖、山梨糖醇、甘露醇、木糖醇、赤藓糖醇麦芽糖醇、纤维素、甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、羟丙基甲基纤维素或明胶。例如，可以通过将活性成分与固体赋形剂混合，粉碎混合物，向其添加合适的辅助剂，然后将混合物加工成颗粒混合物来获得片剂或糖衣片剂。
除了简单的赋形剂之外，还可以使用如硬脂酸镁和滑石粉等润滑剂。用于口服给药的液体制剂与悬浮剂、内用液体、乳液、糖浆等相对应，且除了作为简单稀释剂的水或液体石蜡之外还可以包括几种诸如润湿剂、甜味剂、香料和防腐剂等的赋形剂。
在一些示例中，可以加入交联的聚乙烯吡咯烷酮、琼脂、海藻酸或海藻酸钠作为崩解剂，且还可以加入抗凝剂、润滑剂、润湿剂、调味剂、乳化剂和防腐剂。
至于肠胃外给药，本发明的药品组合物可以通过本领域已知的方法配制成注射剂型，经皮给药剂和鼻内吸入剂以及合适的肠胃外载体。注射剂需要进行充分的灭菌、并且需要保护其免受诸如细菌和真菌等微生物的污染。用于注射剂的合适的载体的示例可以包括但不限于水、乙醇、多元醇(例如甘油、丙二醇、液体聚乙二醇等)、其混合物和/或包括植物油的溶剂或分散剂。更优选地，Hanks液、林格氏液、磷酸盐缓冲盐水(phosphate buffered saline,PBS)或含有注射用三乙醇胺的无菌水、或等渗溶液(例如10％乙醇、40％丙二醇或5％葡萄糖)可用作合适的载体。为了保护注射剂免受微生物污染，注射剂可以进一步含有各种抗细菌和抗真菌剂，例如对羟基苯甲酸酯、氯丁醇、苯酚、山梨酸和硫汞撒。在大多数情况下，注射剂可以进一步含有诸如糖或氯化钠的等渗剂。
经皮给药制剂的形式包括软膏、乳膏、洗剂、凝胶、外用溶液、膏药、涂敷药和气雾剂。所述“经皮给药”指的是将药品组合物外用施用于皮肤上以通过皮肤传递有效量的活性成分。
在吸入剂的情况下，根据本发明使用的化合物可以使用合适的推进剂例如二氯氟甲烷、三氯氟甲烷、二氯四氟乙烷、二氧化碳或其他合适的气体，以气雾喷雾剂的形式从加压包装或喷雾器方便地传递。在加压的气雾剂的情况下，给药单位可以通过提供阀门来确定，所述阀门递送测量的量。例如，可以将明胶胶囊和用于吸入器或吹入器中的药筒配制成含有化合物及含有诸如乳糖或淀粉等的合适粉末材料的粉末混合物。这些制剂描述于文献中，该文献在药品化学中是一种通常已知的处方集(Remington's Pharmaceutical Science,15th Edition,1975.Mack Publishing Company,Easton,Pennsylvania 18042,Chapter 87:Blaug,Seymour)。
当本发明的药品组合物包含有效量的潘多汀或提琴形凹唇姜萃取物或其馏分时，可以优选地提供预防、改善或治疗骨质流失疾病的效果。如本文所使用的术语“有效量”指的是一种显示出比消极控制更多响应的量，并且优选地是一种足以预防、改善或治疗骨质流失疾病的量。本发明的药品组合物可以包含0.01-99.99％的潘多汀或提琴形凹唇姜萃取物和剩余的药学上可接受的载体。本发明的药品组合物中含有的潘多汀或提琴形凹唇姜萃取物或其部分的有效量可以根据生产的组合物的形式而改变。
本发明的药品组合物的总有效量可以以单剂量(single dose)给药于患者，或者以多剂量(multiple dose)给药，所述多剂量通过分次治疗方案(fractionated treatment protocol)用于一段较长期间内。本发明的药品组合物，活性成分的含量可以取决于疾病的严重性而变化。例如，本发明的药品组合物可以被施用一次或被分成多剂量，以使潘多汀或提琴形凹唇姜萃取物优选地以0.001-100mg的量来被施用，且更优选地一日按每1kg体重施加0.01-10mg的量。然而，对于潘多汀或提琴形凹唇姜萃取物的剂量，其有效剂量是根据患者的各种因素来确定的，如给药途径、治疗次数、患者年龄、体重、健康状况及性别、疾病的严重性、食物及排泄率，因此鉴于这一事实，本领域的技术人员可以根据预防、治疗或改善骨质流失的特定用途来确定潘多汀或提琴形凹唇姜萃取物的合适的有效量。根据本发明的药品组合物，只要组合物示出本发明的效果，不受限于特定的剂型、给药途径及其给药方法。
本发明的用于预防或治疗骨质流失疾病的药品组合物可以单独使用或与采用手术、放射疗法、激素疗法、化学疗法或生物反应控制剂的其他方法组合使用。
本发明的用于预防或治疗骨质流失疾病的药品组合物可以以外用制剂的剂型的形式来提供，所述制剂包括作为活性成分的潘多汀或提琴形凹唇姜萃取物。在该方面，本发明的组合物可以是用于预防或改善骨质流失的准药品组合物及含有相同组合物的准药品。
外用制剂可以直接用于皮肤或进入口腔。当本发明的用于预防或治疗骨质流失的药品组合物用作外用制剂时，还可以包括辅助剂，所述辅助剂普遍用于皮肤病学领域，例如脂肪物质、有机溶剂、增溶剂、浓缩剂、胶凝剂、软化剂、抗氧化剂、悬浮剂、稳定剂、成型剂(forming agent)、芳香剂、表面活性剂、水、离子或非离子乳化剂、填充剂、多价螯合剂、螯合剂、防腐剂、维生素、阻滞剂、润湿剂、精油、染料、色素、亲水或亲脂性活性剂、脂质囊泡或任何其他用于常规外用的皮肤制剂的任何成分。此外，上述成分可以以通常用于美容的量导入。
当本发明的制剂用作外用制剂时，可以以液体制剂、软膏、贴剂、凝胶、乳霜或气雾剂的剂型的形式提供，但不限于此。根据本发明的一个实施例，本发明的准药品可以包括牙膏、漱口剂的口腔护理产品和小鼠喷雾剂、软膏、面膜、泥敷剂、贴剂和经皮吸收剂。
在本发明的一个实施例中，用潘多汀或提琴形凹唇姜萃取物来处理抑制了破骨细胞的分化，因此当活性成分用于口腔护理产品时，口腔护理产品会显示出预防或改善由过度骨吸收引起的牙槽骨疾病的效果。因此，所述准药品组合物可以是用于预防或改善骨质流失的口腔护理组合物。
当本发明的组合物用作准药品组合物时，可以根据常规的方法通过添加潘多汀或提琴形凹唇姜萃取物如其所是或与其他准药品成分一起来适当地使用。所述混合的活性成分的量可以根据使用目的(预防、保健或治疗)适当地确定。
上述药品组合物和下述食品组合物的含量可适用于本发明的准药品组合物和准药品。
在另一个方面，本发明的组合物可以是用于预防或改善骨质流失的食品组合物。
所述食品组合物可以是保健功能的食品组合物。
在本发明的一个实施例中，已被证实，用潘多汀或提琴形凹唇姜萃取物来治疗可以抑制破骨细胞的分化和活性，从而可以直接预防或延缓骨质流失。所述骨质流失是由引起骨质流失的疾病引起的，优选地是由破骨细胞的过度活性导致的骨质流失疾病引起的。
本发明的食品组合物包括所有食品类型，所述食品类型包括功能性食品(functional food)、营养补充剂(nutritional supplement)、保健食品(health food)、食品添加剂(food additives)、及动物饲料、及由人体或包括牲畜的动物摄取的食品组合物。
上述食品组合物的类型可以根据本领域已知的常规方法制备成各种形式。所述食品组合物通过向一般食品添加潘多汀或提琴形凹唇姜萃取物来制备，所述一般食品包括但不限于饮料(包括酒精饮料)、水果及其加工食品(例如水果罐头、瓶装食品、果酱、带皮果酱等)、鱼类、肉类及其加工产品(例如火腿、香肠、咸牛肉等)、面包、面条(例如乌冬面、荞麦面、拉面、意大利面、通心粉等)、果汁、各种饮料、饼干、糖浆、乳制品(例如黄油、奶酷等)、食用植物油、人造黄油、植物蛋白、蒸煮食品、冷冻食品和各种调味料(例如大豆酱、酱油、调味汁等)。
可替代地，营养补充剂可以通过向包括但不限于胶囊、片剂、药丸等添加潘多汀或提琴形凹唇姜萃取物来制备。
至于保健功能性食品，可以通过例如液化、造粒、包封及粉化来获得潘多汀或提琴形凹唇姜萃取物，从而使潘多汀或提琴形凹唇姜萃取物本身可以通过但不限于茶、果汁及饮料的形式被饮用(作为保健饮料)。此外，所述潘多汀或提琴形凹唇姜萃取物可以通过粉末或浓缩液的形式来制备以用作食品添加剂。此外，所述潘多汀或提琴形凹唇姜萃取物可以通过与已知具有预防或改善骨质流失效果的活性成分相混合来制备成组合物的形式。
当本发明的食品组合物被用作保健饮品组合物时，所述相应的保健饮料可以含有作为添加剂成分的如在普通饮料中的一些调味剂或天然碳水化合物等。所述的碳水化合物可以是：单糖，如葡萄糖和果糖；双糖，如麦牙糖和蔗糖；多糖，如糊精和环糊精；糖醇，如木糖醇，山梨糖醇和赤藓醇。所述甜味剂可以包括：天然甜味剂，如祝马丁和甜叶菊萃取物；及合成甜味剂，如糖精和阿斯巴甜。天然碳水化合物的比例通常为每100mL的本发明组合物中含约0.01-0.04g，优选地为约0.02-0.03g。
潘多汀或提琴形凹唇姜萃取物可以作为用于预防或改善骨质流失的有效成分包含于食品组合物中，并且其量为足以获得预防或改善骨质流失疾病的效果并且没有特别限制的量。然而，萃取物含量优选为所有组合物总重量的0.01-100wt％。所述本发明的食品组合物可以通过将潘多汀或提琴形凹唇姜萃取物与另一种已知的具有预防或改善骨质流失的活性成分相混合而制备。
进一步地，本发明的保健食品可以包括各种营养素、维生素、电解质、调味剂、着色剂、果胶酸及其盐、海藻酸及其盐、有机酸、保护胶体增稠剂、pH调节剂、碳化物安定剂、稳定剂、防腐剂、甘油、醇类或碳酸化剂。此外，本发明的保健食品可以含有用于制造天然果汁、果汁饮料和蔬菜饮料的果肉。这些成分可以单独使用或混合使用。这种添加剂的比例并不是很重要，但是在相对于本发明的组合物100重量份中，其通常选择在0.01-0.1重量份的范围内。
下列将参考实施例对本发明进行详细描述。本发明可以进行各种修改并且可以具有多种形式，因此，应该理解的是，下面描述的特定实施例和说明仅用于说明目的，并且本发明并不限于特定实施例。应当理解的是，本发明的范围旨在包括在本发明的技术思想和技术范围内的所有修改例、等同例或替代物。
实施例1：提琴形凹唇姜萃取物的制备
将干燥的提琴形凹唇姜在混合器中压碎后，将压碎的100g提琴形凹唇姜样本放入500mL的乙醇中，在50℃下搅拌30分钟来萃取。将萃取的样本用瓦特曼(Whatman)No.2过滤纸过滤两次，将过滤得到的萃取物放入真空旋转蒸发器中浓缩以去除溶剂成分，然后通过冷冻干燥去除水分，从而得到一种提琴形凹唇姜萃取物。
实施例2：分离和确定潘多汀A结构
实施例2-1：分离潘多汀A
将实施例1中得到的浓缩的提琴形凹唇姜萃取物与乙酸乙酯相混合以提取乙酸乙酯可溶性成分，然后减压除去乙酸乙酯以仅浓缩乙酸乙酯可溶性成分。然后，将浓缩的成分装入填充有6×15cm硅胶的圆柱中，后使用含有己烷、氯仿和乙酸乙酯的溶剂进行分馏，其中己烷、氯仿和乙酸乙酯以15：5：1.5(v/v/v)的比例相互混合。所述浓缩的成分根据分馏的顺序共分成六个馏分，将各个馏分进行浓缩和干燥。在六个馏分中，用18：2：1(v/v/v)比例相混合的含有己烷、乙酸乙酯和甲醇的展开溶剂对No.3馏分(馏分3)进行薄层色谱(TLC,silica gel 60F254,Merck)，从而根据分馏的顺序共得到三个馏分，后将所述馏分进行浓缩和干燥。在该三个馏分中，对馏分No.2(馏分3-2)进行循环高效液相色谱(recycling HPLC，column：W252，20mmID×500mm L)以根据分馏的顺序共得到两个馏分，后将每个馏分进行浓缩和干燥。最终，对两个馏分中的No.2的馏分(馏分3-2-2)进行浓缩和干燥，从而分离出单一的纯活性物质。
实施例2-2：确定潘多汀A结构
为了确定从实施例2-1中分离得到的单一的纯活性物质的结构，分别在500MHz和125MHz(溶剂：CDCl3)的条件下测量单一活性物质的1H-NMR谱和13C-NMR谱。为了根据得到的13C-NMR谱和1H-NMR谱的结果测量1H-1H相关性和1H-13C相关性，对活性物质的1H-1H COSY谱和1H-1H COSY谱进行测量，然后使用来自碳共振的波长识别每个碳的信号。
此外，为了得到分离的单一物质的质谱，测量EI/MS。在EI/MS中，观察到[M+H+]为m/z407，因此该化合物为具有分子重量406并且分子式为C26H30O4。
对照以前的研究报告(Phytochemistry,26:1542-1543,1987)分析1H-NMR，13C-NMR，1H-1H COSY，1H-13C HSQC和EI/MS得到的结果。其结果是，证实从实施例2-1分离出来的单一物质是(2，6-二羟基-4-甲氧基苯基)[3-甲基-2-(3-甲基丁-2-烯基)-5苯基环己-3-烯基]甲酮，该甲酮为由下列公式1表示的潘多汀A化合物。所述公式1为：
[化学式1]
实验例1：对提琴形凹唇姜萃取物和潘多汀A的抑制破骨细胞分化的效果的确认
实验例1-1：通过RT-PCR确认提琴形凹唇姜萃取物和潘多汀A的抑制破骨细胞分化的效果
利用杜尔贝科改良的伊格培养基(DMEM(Dubecco’s Modified Eagle’s Medium),Hyclone,Logan,UT,USA))，其中含有10％胎牛血清，将RAW264.7破骨细胞前体细胞(American Type Culture Collection(ATCC),Manassas,VA,USA)以8×104个细胞/孔(cells/well)接种在6孔微量滴定板(6-well microtiter plate)中。在24个小时之后，分别用25ng/ml的RANKL(Peprotech Inc.,Rocky Hill,NJ,USA)和在实施例2中得到的提琴形凹唇姜萃取物(1μg/ml和10μg/ml)或潘多汀A(0.1μm和1μm)处理含有10％胎牛血清的α-改良的伊格培养基(α-MEM(α-modified Eagles’Medium),Gibco,Grand Island,NY,USA))，后诱导分化4天。培养基两天换一次。
为了检测破骨细胞分化中表达的主要转录因子：激活的T细胞的核因子的细胞质1(nuclear factor of activated T-cells,cytoplasmic 1,NFATc1)、TRAP酶和组织蛋白酶K(cathepsin K)的mRNA表达水平，进行了RT-PCR。通过Trizol试剂(Takara，Tokyo,Japan)从分化的细胞中获得总RNA，为合成cDNA，对RNA进行逆转录，后利用下列引物进行RT-PCR。结果如图1或图2所示。
β-肌动蛋白：
正向引物：5'-CAGCTCAGTAACAGTCCGCC-3'
反向引物：5'-TCACTATTGGCAACGAGCGG-3'
NFATc1：
正向引物：5'-CCTGGAGATCCCGTTGCTTC-3'
反向引物：5'-TCCCGGTCAGTCTTTGCTTC-3'
TRAP：
正向引物：5'-AAATCACTCTTTAAGACCAG-3'
反向引物：5'-TTATTGAATAGCAGTGACAG-3'
组织蛋白酶K：
正向引物：5'-ATCTCTCTGTACCCTCTGCA-3'
反向引物：5'-CCTCTCTTGGTGTCCATACA-3'
如图1或图2所示，可以确认NFATc1、TRAP及组织蛋白酶K的mRNA表达水平通过提琴形凹唇姜萃取物和潘多汀A处理在破骨细胞分化中减少了。尤其可以确认的是TRAP和组织蛋白酶K的mRNA的表达水平几乎未在提琴形凹唇姜萃取物(10μg/ml)处理组或潘多汀A(1μM)处理组中显示。这些结果指示本发明的提琴形凹唇姜萃取物和潘多汀A具有抑制破骨细胞的骨吸收的显著效果。
实验例1-2：通过蛋白质印迹(Western blot)确认提琴形凹唇姜萃取物和潘多汀A的抑制破骨细胞分化的效果
利用含有10％胎牛血清的杜尔贝科改良的伊格培养基(Hyclon)，将RAW264.7破骨细胞前体细胞(ATCC)以1×105个细胞/孔(cells/well)接种在6孔微量滴定板中。在24个小时之后，分别用25ng/ml的RANKL(Peprotech)和在实施例2中得到的提琴形凹唇姜萃取物(1μg/ml和10μg/ml)或潘多汀A(0.1μm和1μm)处理含有10％胎牛血清的α-MEM(Gibco)，后培养4天。为了检测NFATc1和TRAP酶，组织蛋白酶K(破骨细胞分化中表达的主要转录因子)的蛋白质表达水平，进行了蛋白质印迹(western blot)。
具体地，用含有蛋白酶抑制剂混合物(proteinase inhibitor cocktail)的NP40缓冲液(ELPIS-Biotech,Daejeon,Korea)裂解细胞。将缓冲液中裂解的细胞转移到1.5ml试管(tube)中，在13000rpm下离心10分钟，由此得到仅有的上清液。利用Bradford法(Bradford,Bio-Rad Laboratories Inc.,Hercules,CA,USA)量化该上清液。将定量的蛋白质煮沸5分钟，然后使用10％SDS-PAGE通过电泳进行分离，再将分离的蛋白质转移到硝化纤维素膜上。用2.5％牛血清蛋白(BSA)以1：1000的比例稀释抗NFATc1、TRAP和组织蛋白酶K的一抗，后在室温下与转移到硝化纤维素膜上的蛋白质一起培育20小时。在与一抗培育后，用Tris缓冲盐水吐温20(TBST)将硝化纤维素膜反复洗涤3次，时间长达10分钟。洗涤后，用2.5％的BSA以1:5000的比例将识别一抗的二抗进行稀释，后在室温下与硝化纤维素膜一起培育2小时，之后用TBST反复洗涤3次，每次洗涤10分钟。用ECL蛋白质印迹检测试剂(western blotting detection reagents(Amersham,Tokyo,Japan))获得蛋白质条带(Protein band)，后用G；BOX EF成像系统(Syngene,Cambridge,UK)使获得的蛋白质条带(Protein band)可视化。得到的结果如图3所示。
如图3或图4所示的，可以确认NFATc1、TRAP和组织蛋白酶K的蛋白质表达水平在通过提琴形凹唇姜萃取物或潘多汀A处理分化的破骨细胞中减少。具体地，NFATc1和组织蛋白酶K的蛋白质表达几乎未在提琴形凹唇姜萃取物(10μg/ml)处理组或潘多汀A(1μM)处理组中显示。这些结果指出本发明的提琴形凹唇姜萃取物或潘多汀A具有抑制破骨细胞的骨吸收的显著效果。
实验例1-3：确认提琴形凹唇姜萃取物和潘多汀A的抑制TRAP酶活性的效果
使用如实验例1的相同方法，将RAW264.7破骨细胞前体细胞附着于6孔微量滴定板中，后分别用25ng/ml的RANKL(Peprotech)和在实施例2中得到的提琴形凹唇姜萃取物(1μg/ml和10μg/ml)或潘多汀A(0.1μm和1μm)处理含有10％胎牛血清的α-MEM(Gibco)，然后诱导分化四天。培养基两天换一次。之后，完全去除上清液，用0.1％的Triton X-100(Oriental chemical industries,Seoul,Korea)裂解细胞。将裂解于缓冲液中的细胞转移至1.5ml试管中，使其在13000rpm下离心15分钟，从而得到仅有的上清液。根据制造商的说明书利用白细胞酸性磷酸试剂盒(leukocyte acid phosphatase kit)(Sigma-Aldrich,St.Louis,MO,USA)对所述含有TRAP的上清液进行分析。结果如图5或6所示。
如图5或6所示，可以确认TRAP酶活性在通过提琴形凹唇姜萃取物或潘多汀A(##p<0.01,**p<0.01)处理分化的破骨细胞中显著减小。尤其可以确认的是，TRRAP酶活性在提琴形凹唇姜(10μg/ml)处理组或潘多汀A(1μM)处理组中降低。这些结果指出本发明的提琴形凹唇姜萃取物或潘多汀A具有抑制破骨细胞的骨吸收的显著效果。
实验例1-4：通过TRAP染色确认提琴形凹唇姜萃取物和潘多汀A的抑制破骨细胞分化的效果
使用如实验例1的相同方法，将RAW264.7破骨细胞前体细胞附着于6孔微量滴定板中，后分别用25ng/ml的RANKL(Peprotech)和在实施例2中得到的提琴形凹唇姜萃取物(1μg/ml和10μg/ml)或潘多汀A(0.1μm和1μm)处理含有10％胎牛血清的α-MEM(Gibco)，然后使其诱导分化4天。培养基两天换一次。在4天之后，完全去除上清液，用2％的甲醛(Junsei chemical,Tokyo,Japan)固定细胞。之后，根据制造商的说明书利用白细胞酸性磷酸试剂盒(leukocyte acid phosphatase kit,Sigma-Aldrich)对TRAP进行染色，并通过显微镜分析提琴形凹唇姜萃取物或潘多汀A的抑制破骨细胞分化的效果。结果如图7或图8所示。
如图7或8所示，可以确认通过提琴形凹唇姜萃取物或潘多汀A的处理抑制了破骨细胞的分化。尤其可以确认的是，与提琴形凹唇姜萃取物(10μg/ml)处理组或潘多汀A(1μM)处理组中的对照组(control)相比，分化被抑制到几乎相似的水平。这些结果指出本发明的提琴形凹唇姜萃取物或潘多汀A具有抑制破骨细胞的骨吸收的显著效果。
下面将对含有根据本发明实施例1和2中的提琴形凹唇姜萃取物和/或潘多汀A作为活性成分的药品和食品的制备例进行描述，但本发明并不旨在限制于这些制备例而是出于说明的目的。在通过常规方法生产制备例1和2中的药品和食品组合物的同时，根据组成成分和其组成比例使用具有预防、改善或治疗骨质疏松症或牙槽骨质流失效果的提琴形凹唇姜萃取物和/或潘多汀A。
制备例1：药品
制备例1-1：粉末制剂
通过常规的粉末制备方法，通过将实施例1和2中50mg的提琴形凹唇姜萃取物或潘多汀A与2g结晶纤维素相混合，后将该混合物装入密封包装中来生产粉末制剂。
制备例1-2：片剂
通过常规的片剂制备方法，通过将实施例1和2中50mg的提琴形凹唇姜萃取物或潘多汀A与400mg结晶纤维素和5mg硬脂酸镁相混合，后将该制锭该混合物来生产片剂。
制备例1-3：胶囊制剂
通过常规的胶囊制剂生产方法，通过将实施例1和2中30mg的提琴形凹唇姜萃取物或潘多汀A与100mg乳清蛋白和400mg的结晶纤维素和6mg的硬脂酸镁相混合，后该混合物装入明胶胶囊中来生产片剂。
制备例1-4：注射剂
通过下列步骤来生产注射剂：将活性成分溶解在注射用蒸馏水中；将pH调节至约7.5；将实施例2中的100mg的潘多汀A，注射用蒸馏水和pH调节剂相混合；将混合物装入2ml容量的安瓿中；然后对安瓿进行消毒。
制备例2：食品
制备例2-1：保健食品的制备
将实施例1和2中1000mg的提琴形凹唇姜或潘多汀A，70ug的维生素A醋酸酯，1.0mg的维生素E，0.13mg的维生素B1，0.15mg的维生素B2，0.5mg的维生素B6，0.2ug的维生素B12，10mg的维生素C，10ug的生物素，1.7mg的烟酰胺，50ug的叶酸，0.5mg的泛酸钙，1.75mg的硫酸亚铁，0.82mg的氧化锌，25.3mg的碳酸镁，15mg的磷酸二氢钾，55mg的磷酸氢钙，90mg的柠檬酸钾，100mg的碳酸钙和24.8mg的氯化镁相混合来生产保健食品。
混合比例可以任意改变。将上述成分混合后，根据常规保健食品生产方法使其成粒状，且该产品可以用于根据常规方法制备保健食品组合物中。
制备例2-2：保健饮料的制备
通过将纯净水添加至实施例1和2中1000mg的提琴形凹唇姜萃取物或潘多汀A，1000mg的柠檬酸，100g的低聚糖，2g的李子浓缩液，1g的牛磺酸中以生产总容量为900ml的保健饮料。将上述成分混合后，在85℃下加热并搅拌约1小时，然后在2L容器中过滤并摄取得到的溶液，然后密封消毒，并根据常规保健饮料生产方法冷藏来生产保健饮料，且该产品可以用于保健饮料组合物的制备中。
制备例2-3：口香糖
根据常规方法通过将20wt％的胶基，76.9wt％的糖，1wt％的调味剂，2wt％的水和实施例1和2中0.1wt％的提琴形凹唇姜萃取物或潘多汀A进行混合来生产口香糖。
制备例2-4：糖果
根据常规方法通过将60wt％的糖，39.8wt％的糖浆，1wt％的调味剂和实施例1和2中的0.1wt％的提琴形凹唇姜萃取物或潘多汀A进行混合来生产糖果。
制备例2-5：饼干
根据常规方法通过将25.59wt％的一级低筋面粉，22.22wt％的一级中筋面粉，4.8wt％的精制糖，0.73wt％的食盐，0.78wt％的葡萄糖，11.78wt％的棕榈起酥油，1.54wt％的铵，0.17wt％的碳酸氢钠，0.16wt％的亚硫酸氢钠，1.45wt％的米粉，0.0001wt％的维生素B，0.04wt％的牛奶调味料，20.6998wt％的水，1.16wt％的干奶粉，0.29wt％的代乳品，0.03wt％的磷酸钙，0.29wt％的盐沫，7.27wt％的喷雾干燥奶粉和实施例1和2中的提琴形凹唇姜或潘多汀A进行混合生产饼干。
制备例3：准药品和其他
使用在实施例中制备的提琴形凹唇姜或潘多汀A来生产下列准药品。
制备例3-1：牙膏
如下列表1所示来生产含有实施例中制备的提琴形凹唇姜或潘多汀衍生物的牙膏。
[表1]
制备例3-2：漱口液
如下列表2所示来生产含有实施例中制备的提琴形凹唇姜或潘多汀衍生物的漱口液。
[表2]
制备例3-3：口腔喷雾
如下列表3所示来生产含有实施例中制备的提琴形凹唇姜或潘多汀衍生物的口腔喷雾。
[表3]
制备例3-4：食用薄膜
如下列表4所示来生产含有实施例中制备的提琴形凹唇姜或潘多汀衍生物的食用薄膜。
[表4]