本发明提供了用于治疗与糖尿病足综合征相关的细菌感染或与外周局部缺血相关的足部的其他细菌感染的手段和方法。
背景技术
糖尿病足综合征是一种常与溃疡和细菌感染有关的病理。这种细菌感染在下文中被确定为糖尿病足感染。糖尿病足感染的治疗经常受到局部缺血的阻碍，而局部缺血通常与糖尿病足综合征有关。因此，抗生素的全身性给药将能够仅在感染部位实现抗生素药物的低血浆水平。如果感染是由耐药菌如耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌(mrsa)引起的，这个问题则尤为严重。
病况因糖尿病患者经常患有外周神经病变这一事实而进一步恶化。这些患者可能患有糖尿病足感染症，但痛感很小或没有痛感。这种感染可能一直未被患者发现，也可能被患者置之不理。因此，通常从溃疡性软组织开始的感染可以扩散到底部骨组织。可能发展成骨髓炎，其特别难用抗生素疗法治疗。
由于上述困难，糖尿病足感染是导致下肢截肢的最常见原因。截肢通常伴随发病率和死亡率的风险增大。
因此，迫切需要改进糖尿病足感染的治疗，尤其是在mrsa感染的情况和/或患者遭受严重程度局部缺血的情况和/或骨组织受影响的情况下。
因此，本发明的目的是提供能够改进糖尿病足感染的治疗的化合物，尤其是在mrsa感染的情况和/或患者遭受严重程度局部缺血的情况和/或骨组织受影响的情况下。
本发明的另一个目的是提供用于治疗糖尿病足感染、尤其是糖尿病足骨髓炎的化合物，该化合物能够在感染部位增加抗生素药物的局部浓度。
本发明的另一个目的是提供用于治疗糖尿病足骨髓炎的化合物，该化合物显示出改善的骨穿透性。
本发明的另一个目的是提供用于治疗糖尿病足感染的方法，尤其是在mrsa感染的情况和/或患者遭受严重程度局部缺血的情况和/或骨组织受影响的情况下。
本发明的另一个目的是提供治疗糖尿病足感染、尤其是糖尿病足骨髓炎的方法，该方法能够增大感染部位的抗生素药物的局部浓度。
本发明的另一个目的是提供治疗糖尿病足骨髓炎的方法，该方法依赖于使用表现出改进的骨穿透性的化合物。
本发明的另一个目的是提供治疗与外周局部缺血相关的足部其他细菌感染的方法。
本发明的另一个目的是提供适合于以上方法的药物组合物。
技术实现要素：
本发明提供了用于治疗糖尿病足感染和与外周局部缺血相关的足部其他细菌感染的药物以及治疗这些感染的方法。特别是，本发明提供了如以下编号的实施方式中所指定的此种药物。
1.一种应用于治疗与糖尿病足相关的细菌感染或与外周局部缺血相关的足部其他细菌感染的方法中的化合物，其中，所述化合物是{6-[(1e)-3-{甲基[(3-甲基-1-苯并呋喃-2-基)甲基]氨基}-3-氧代丙-1-烯-1-基]-2-氧代-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2h)-基}甲基磷酸二氢酯，或其药学上可接受的盐或代谢物，或代谢物的药学上可接受的盐。
2.如实施方式1所述应用的化合物，其中，所述细菌感染由葡萄球菌种导致，所述葡萄球菌种包括但不限于金黄色葡萄球菌。
3.如实施方式1或2所述应用的化合物，其中，所述细菌感染由耐甲氧西林的金黄色葡萄球菌导致。
4.如实施方式1、2或3所述应用的化合物，其中，所述细菌感染是软组织和/或骨组织的感染。
5.如实施方式1、2、3或4所述应用的化合物，其中，所述细菌感染是骨髓炎。
6.如实施方式1、2、3、4或5所述应用的化合物，其中，所述化合物是{6-[(1e)-3-{甲基[(3-甲基-1-苯并呋喃-2-基)甲基]氨基}-3-氧代丙-1-烯-1-基]-2-氧代-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2h)-基}甲基磷酸二氢酯的二(乙醇铵)盐。
7.如实施方式1、2、3、4、5或6所述应用的化合物，其中，所述化合物以5mg/天至600mg/天、优选40mg/天至720mg/天、更优选80mg/天至480mg/天、最优选16mg/天至480mg/天的剂量施用。
8.如实施方式7所述应用的化合物，其中，所述化合物每日静脉施用两次，每次施用的剂量为40mg至160mg。
9.如实施方式7所述应用的化合物，其中，所述化合物每日口服施用两次，每次施用的剂量为40mg至240mg。
10.如实施方式7所述应用的化合物，其中，所述化合物每日静脉施用三次，每次施用的剂量为40mg至240mg。
11.如实施方式7所述应用的化合物，其中，所述化合物每日口服施用三次，每次施用的剂量为40mg至240mg。
12.如实施方式1、2、3、4、5、6、7、8、9、10或11所述应用的化合物，其中，所述方法包括用于在施用所述化合物之前、同时和/或之后除去受感染和/或坏死组织的外科手术。
13.如实施方式1、2、3、4、5、6、7、8、9、10、11或12所述应用的化合物，其中，所述方法包括施用一种或多种其他抗生素剂或抗菌剂的给药。
14.一种应用于治疗与糖尿病足相关的细菌感染或与外周局部缺血相关的足部其他细菌感染的方法中的药物组合物，其中，所述组合物包含在以上实施方式1或6中所规定的化合物，并且其中，所述方法如实施方式1～5和7～13中的一项或多项所述。
具体实施方式
定义
治疗有效剂量在本发明的上下文中用来表征一定量的药物，其能够完全或部分根除引起糖尿病足感染或与外周局部缺血相关的足部其他细菌感染的致病菌。例如，在本发明的上下文中，致病菌含量的任何统计学显著减少都表明了治疗效果。
药学上可接受的在本发明的上下文中用来指代在合理的医学判断范围内，适合与人类和动物的组织接触使用而没有过度的毒性、刺激性、过敏反应和/或其他问题或并发症且与合理的益处/风险比相称的那些化合物、材料、组合物和/或剂型。
药学上可接受的盐在本发明的上下文中用来表征药物的任何形式的离子种类(酸加成盐、碱加成盐、两性离子盐/内盐等)，其是以上所定义的药学上可接受的。
糖尿病患者在本发明的上下文中用来表征如美国糖尿病协会于diabetescare2004,27,s5-s10中发表的“糖尿病的诊断和分类”中描述的患有糖尿病的患者。
糖尿病足或糖尿病足综合征在本发明的上下文中用来表征如世界卫生组织定义为“与神经病变和不同程度的局部缺血和感染有关的足部(脚踝远侧并包括脚踝)溃疡的病况”(引自jeffcoatew.j.,macfarlaner.m.,fletchere.m.“糖尿病足病变的描述与分类(thedescriptionandclassificationofdiabeticfootlesions)”，diabeticmedicine,1993；10(7):676-679)。
糖尿病足感染在本文中用来表征与糖尿病足综合征相关的细菌感染。
糖尿病足骨髓炎在本文中用来表征与糖尿病足综合征相关的骨骼细菌感染(骨髓炎)。
局部缺血描述于r.l.hardman等发表于semininteruntradiol2014；31:378-388中的“外周动脉疾病分类系统概述(overviewofclassificationsystemsinperipheralarterydisease)”中了。因此，术语“严重程度局部缺血”可理解为如r.l.hardman等发表于semininteruntradiol2014；31:378-388中的所述文章“外周动脉疾病分类系统概述”中的表6所定义的1级、2级或3级缺血。外周局部缺血和/或外周血管疾病表征了由于外周动脉管腔狭窄或阻塞而导致肢体血液分布不足的病况。受影响的肢体(此处：足部)因此显示局部缺血，并且优选是如上文所定义的严重程度局部缺血。
化合物a表征化合物{6-[(1e)-3-{甲基[(3-甲基-1-苯并呋喃-2-基)甲基]氨基}-3-氧代丙-1-烯-1-基]-2-氧代-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2h)-基}甲基磷酸二氢酯。该化合物的其他名称是((e)-6-[(n-甲基-((3-甲基苯并呋喃-2-基)甲基)氨基)-3-氧代丙-1-烯-1-基)-2-氧代-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2h)-基]甲基磷酸酯和n-甲基-n-[(3-甲基-2-苯并呋喃基)甲基]-3-[5,6,7,8-四氢-7-氧代-8-[(膦酰基氧基)甲基]-1,8-二氮杂萘-3-基]-(2e)-2-丙烯酰胺。其casrn为1518800-35-5。其是前药。其活性代谢物被确定为化合物b，(e)-n-甲基-n-((3-甲基苯并呋喃-2-基)甲基)-3-(7-氧代-5,6,7,8-四氢-1,8-二氮杂萘-3-基)丙烯酰胺。其casrn为620175-39-5。
本文中提供的定义和其他信息用于解释权利要求。如有任何剩余的含糊不清之处，应辅助地且以与本发明相符的程度使用wo2013/190384a中所包含的定义和信息。作为信息的补充来源，可以使用化学、制药和医学词典，尤其是
发明概况
化合物a已知是能够有效治疗细菌感染、尤其是由金黄色葡萄球菌导致的那些感染的药物化合物。然而，基于现有信息，预期化合物a不能有效治疗糖尿病足感染，尤其是糖尿病足骨髓炎。
本发明基于以下惊人的发现，即化合物b不仅显示出抗菌治疗效果，而且还发挥血管舒张性能。特别是，在临床前模型中，化合物b能有效地抑制pde3酶，并发挥与西洛他唑相同程度的舒张性能，西洛他唑是一种用于缓解患有外周血管疾病的个体的间歇性跛行症状的药物。由于环核苷酸磷酸二酯酶(pde)是通过控制第二信使camp和cgmp的降解速率来调节camp和cgmp的细胞水平的酶，因此pde3的抑制与血管舒张性能之间有密切的交互关系。pde3a和pde3b是pde3的亚家族基因，pde3属于11个相关基因家族。这种酶的抑制可以防止camp的分解，从而增加camp的细胞内浓度。camp的细胞内浓度起到重要的第二信使作用，例如心肌收缩和血管平滑肌收缩(benderat,beavoja:cyclicnucleotidephosphodiesterases:molecularregulationtoclinicaluse.pharmacol.rev.(2006)58(3):488-520)。这些性能能够改善糖尿病足患者和患有外周局部缺血的其他患者的受影响组织的血液灌注。化合物b的此种第二治疗作用提供了对于糖尿病足部感染的有效抗生素治疗的关键，因为其改善血液灌注，从而增加感染部位的局部药物浓度。本发明的发明人还发现，与万古霉素相比，化合物b在兔模型中表现出惊人的良好的骨穿透性。据发现，骨穿透性在受感染的骨骼中特别高。因此，化合物b在治疗与糖尿病足相关的骨髓炎时特别有效。基于这些惊人的发现，完成了本发明。
也就是，本发明提供了用于治疗与糖尿病足相关的细菌感染或与外周局部缺血相关的足部其他细菌感染的化合物和药物组合物，其中，所述化合物如本文所指定。本发明还提供了用于治疗与糖尿病足相关的细菌感染或与外周局部缺血相关的足部其他细菌感染的方法，所述方法包括对需要的患者施用治疗有效量的本文所述的化合物或本文所述的药物组合物。
药物
wo2013/190384a中描述了化合物a及其合成。化合物a的酸形式的结构如下所示：
化合物a用作化合物b的前药，化合物b是wo03/088897a的实施例99中描述的化合物。化合物b的结构如下所示：
化合物b是参与细菌脂肪酸合成的细菌靶标fabl的抑制剂。化合物b更难配制成具有令人满意的溶解度、稳定性和生物利用度的可接受的肠胃外制剂。因此，目前正在开发一种以前药化合物a为基础的抗菌药物，该药物得益于口服和肠胃外双制剂。
本发明依赖于化合物a及其药学上可接受的盐的使用。然而，在本发明的上下文中，也可以使用活性代谢物化合物b及其药学上可接受的盐，只要能够提供适宜的施用药物的手段即可。在该范围内，除非上下文另有规定，本文中对化合物a的提及也应理解为还包括活性代谢物化合物b。
化合物a也可以以其药学上可接受的盐的形式使用。wo2013/190384a的权利要求1和6～17中公开了优选的药学上可接受的盐。特别令人感兴趣的是二(乙醇铵)盐。不过，也可以使用其他药学上可接受的盐。这些其他药学上可接受的盐例如公开在s.m.berge、l.m.bighley和d.c.monkhouse，“pharmaceuticalsalts”，j.pharm.sci.66(1),1-19(1977)；p.h.stahl和c.g.wermuth编，handbookofpharmaceuticalsalts:properties,selectionanduse,weinheim/zürich，wiley-vch,2008和a.k.bansal等，pharmaceuticaltechnology,3(32),2008中。
还可以组合使用化合物a与一种或多种其他药物，尤其是抗生素药物。合适的辅助药(co-drug)列举在wo2013/190384a的[00131]至[00140]段和权利要求32至34中。具体的辅助药(包括wo2013/190384a中提到的那些)列举如下。
可能的辅助药包括如下所述的其他fabl抑制剂、其他抗生素剂或抗菌剂。
可用作辅助药的抗生素剂的非限制性实例包括头孢菌素类、喹诺酮类和氟喹诺酮类、青霉素类、青霉素类和β-内酰胺酶抑制剂、碳青霉烯类、单环内酰胺类、大环内酯类和林可胺类、糖肽类、脂肽类、脂糖肽类、利福霉素、噁唑啉酮类、四环素类、氨基糖苷类、链阳霉素类和磺胺类等。各家族包括许多成员。
头孢菌素类可按世代进一步分类。按世代分类的头孢菌素类的合适的非限制性实例包括下列。头孢菌素类(第一世代化合物)的实例包括头孢羟氨苄、头孢唑啉、头孢氨苄、头孢噻吩、头孢匹啉和头孢拉啶。第二世代化合物包括头孢克洛、头孢孟多、头孢尼西、头孢替坦、头孢西丁、头孢罗奇、头孢美唑、头孢呋辛、头孢呋肟酯和氯碳头孢。第三世代包括头孢地尼、头孢布坦、头孢托仑、头孢他美、头孢泊肟、头孢罗齐、头孢呋辛(酯)、头孢呋辛(钠)、头孢哌酮、头孢克肟、头孢噻肟、头孢泊肟酯、头孢他啶、头孢唑肟、头孢卡品、头孢达肟、头孢甲肟、头孢匹胺和头孢三嗪。第四世代化合物包括头孢吡。第五世代化合物包括头孢洛林、头孢洛扎和头孢吡普。
合适的喹诺酮类和氟喹诺酮类的非限制性实例包括西诺沙星、环丙沙星、依诺沙星、加替沙星、格列帕沙星、左氧氟沙星、洛美沙星、贝西沙星、非那沙星、莫西沙星、萘啶酮酸、诺氟沙星、氧氟沙星、斯帕氟沙星、特洛瓦沙星、噁喹酸、格美沙星、培氟沙星和纳莫诺沙星和新生霉素。
合适的青霉素类的非限制性实例包括阿莫西林、氨苄西林、巴坎西林、卡茚西林、美洛西林、哌拉西林和替卡西林。
合适的青霉素类和β-内酰胺酶抑制剂的非限制性实例包括阿莫西林-克拉维酸、氨苄西林-舒巴坦、苄青霉素、氯唑西林双氯唑西林、甲氧西林、苯唑西林、青霉素g(苄星、钾、普鲁卡因)、青霉素v、哌拉西林+他唑巴坦、替卡西林+克拉维酸和萘夫西林。
合适的碳青霉烯类的非限制性实例包括多利培南、厄他培南、亚胺培南-西司他丁和美罗培南。合适的单环内酰胺类的非限制性实例包括氨曲南。合适的大环内酯类和林可胺类的非限制性实例包括阿奇霉素、克拉霉素、克林霉素、地红霉素、红霉素、林可霉素、氟红霉素、交沙霉素、米德卡霉素、美地霉素、竹桃霉素、罗他霉素、罗红霉素、螺旋霉素、泰乐菌素、酮内酯、吡利霉素和醋竹桃霉素。合适的糖肽类的非限制性实例包括替考拉宁、达巴万星、雷莫拉宁、万古霉素、奥利万星和特拉万星。合适的利福平类的非限制性实例包括利福布丁、利福平和利福喷丁。合适的噁唑啉酮类的非限制性实例包括利奈唑胺、伊皮唑胺、泼斯唑利(posizolid)、雷氏唑利(radelozid)、兰贝唑利(ranbezolid)、苏特唑利(sutezolid)、泰地唑利(tedizolid)。合适的四环素类的非限制性实例包括地美环素、多西环素、美他环素、米诺环素、土霉素、四环素、氯莫环素、赖甲环素、甲氯环素、青哌环素、罗利环素、替加环素和氯四环素。
合适的氨基糖苷类的非限制性实例包括阿米卡星、阿巴卡星(arbakacin)、庆大霉素、卡那霉素、西索米星、阿贝卡星、新霉素、萘替米星、链霉素、妥布霉素、卡那霉素b、核糖霉素、大观霉素、潮霉素b、双氢链霉素、威大霉素、阿司米星和巴龙霉素。合适的链阳霉素类的非限制性实例包括喹奴普丁+达福普汀、原始霉素和维吉尼亚霉素。
合适的磺胺类的非限制性实例包括磺胺米隆、磺胺嘧啶银、磺胺醋酰、磺胺嘧啶、磺胺甲噁唑、柳氮磺吡啶、磺胺异噁唑、甲氧苄氨嘧啶-磺胺甲噁唑、磺胺甲二唑、磺胺二甲基异嘧啶、磺胺甲二唑、磺胺二甲嘧啶、磺胺吡啶、磺胺二甲异噁唑、磺胺、磺胺噻唑、磺胺硫脲、磺胺二甲噁唑、磺胺间二甲氧嘧啶、磺胺多辛、磺胺林、磺胺托嘧啶、磺胺甲氧二嗪、磺胺甲氧吡哒嗪、磺胺培林、磺胺甲基嘧啶、磺胺苯吡唑、磺胺哒唑啉。
合适的其他抗生素剂的非限制性实例包括：枯草杆菌肽、氯霉素、叠氮氯霉素、甲砜氯霉素、氟甲磺氯霉素、瑞他莫林、泰妙灵、伐奈莫林、梭链孢酸、粘菌素甲磺酸(colistimethate)、磷霉素、异烟肼、乌洛托品、甲硝唑、磺甲硝咪唑、奥硝唑、莫匹罗星、呋喃妥英、呋喃西林、硝呋妥因醇、新生霉素、多黏菌素b、大观霉素、托普霉素、替加环素、甲氧苄氨嘧啶、溴莫普林、四氧普林、黏菌素、多黏菌素b、达托霉素、短杆菌肽、异烟肼、泰斯巴汀、环丝氨酸、卷曲霉素、吡嗪酰胺、对氨基水杨酸和红霉素丁二酸乙酯+磺胺异噁唑。
如果决定使用药物组合，则随后关于施用形式、剂量等的说明需要根据辅助药的特征适当地加以调整。以上提及的一种或多种辅助药可以在施用化合物a或其药学上可接受的盐或其代谢物(例如化合物b)或代谢物的药学上可接受的盐之前、同时和/或之后施用。
药物制剂、施用和剂量
化合物a可以如wo2013/190384a的[00141]至[00164]段中所述配制并施用。优选的制剂是适合静脉施用的制剂和适合口服施用的制剂。特别合适的是以下类型的制剂：用于口服施用的片剂、胶囊、液体溶液和悬浮液。对于肠胃外施用，可使用标准赋形剂制备注射用无菌溶液和悬浮液。wo2013/190384a中所述的那些中受关注的具体制剂类型如下所述。
本发明的药物组合物可根据其预定用途以本领域公知的各种手段施用。例如，如果本发明的组合物将通过口服施用，则将其配制为片剂、胶囊、颗粒、粉末或糖浆。作为选择，本文公开的制剂可作为注射液(静脉注射、肌肉注射或皮下注射)或滴注制剂进行肠胃外施用。
这些制剂可通过常规手段制备，如果需要，组合物可与诸如赋形剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂、矫味剂、增溶剂、悬浮助剂、乳化剂或涂布剂等任何常规添加剂混合。所公开的赋形剂可用于多于一种功能。例如，填料或粘合剂也可以是崩解剂、助流剂、抗粘剂、润滑剂、甜味剂等。
在本发明的制剂中，润湿剂、乳化剂和润滑剂(如十二烷基硫酸钠和硬脂酸镁)以及着色剂、脱模剂、涂布剂、甜味剂、调味和香味剂、防腐剂和抗氧化剂都可存在于配制剂中。
受试的组合物可能适合口服施用、鼻腔施用(例如，通过使用干粉制剂或雾化制剂吸入)、局部施用(包括口腔和舌下)、经肺施用(包括气溶胶施用)、气溶胶和/或肠胃外施用(例如通过注射，例如，静脉注射或皮下注射)。制剂可以方便地以单位剂型呈现，并且可以通过药剂学领域中已知的任何方法制备。可与载体材料结合产生单一剂量的组合物的量根据所治疗的对象和特定的施用方式而不同。
制备这些制剂的方法包括使本发明的组合物与载体以及可选的一种或多种配合剂结合在一起的步骤。通常，制剂通过使药剂与液体载体和/或细碎的固体载体均匀而紧密的结合、然后在必要时对产品进行成型而制备。
适合口服施用的制剂可以是胶囊、扁囊剂、丸剂、片剂、锭剂(使用调味剂，通常是蔗糖和阿拉伯胶或黄芪胶)、粉末、颗粒，或水性液体或非水液体中的溶液或悬浮液，或水包油或油包水液体乳剂、或作为酏剂或糖浆、或作为软锭剂(使用惰性碱，如明胶和甘油，或蔗糖和阿拉伯胶)的形式，每种形式均包含预定量的受试组合物作为其活性组分。本发明的组合物也可以作为大丸剂、药糖剂或糊剂施用。
在口服施用的固体剂型(胶囊、片剂、丸剂、糖衣丸、粉末、颗粒等)中，将受试组合物与一种或多种药学上可接受的载体混合，所述载体例如柠檬酸钠或磷酸二钙，和/或下列物质中的任一种：(1)填料或增量剂，如淀粉、葡萄糖、乳糖、蔗糖、葡萄糖、甘露醇、和/或硅酸；(2)粘合剂，例如，纤维素(如微晶纤维素、甲基纤维素、羟丙基甲基纤维素(hpmc)和羧甲基纤维素)、海藻酸盐、明胶、聚乙烯吡咯烷酮、蔗糖和阿拉伯胶；(3)保湿剂，如甘油；(4)崩解剂，如琼脂-琼脂、碳酸钙、马铃薯或木薯淀粉、海藻酸、某些硅酸盐和碳酸钠；(5)溶解延迟剂，如石蜡；(6)吸收促进剂，如季铵化合物；(7)润湿剂，例如十六烷醇和单硬脂酸甘油酯；(8)吸附剂，如高岭土和膨润土；(9)润滑剂，如滑石、硬脂酸钙、硬脂酸镁、固体聚乙二醇、十二烷基硫酸钠及其混合物；和(10)着色剂。在胶囊、片剂和丸剂的情况中，组合物也可以包含缓冲剂。类似类型的固体组合物也可以作为填料用在软填充和硬填充明胶胶囊中，这种胶囊采用乳糖或牛奶糖以及高分子量的聚乙二醇等作为赋形剂。所公开的赋形剂可用于多于一种功能。例如，填料或粘合剂也可以是崩解剂、助流剂、抗粘剂、润滑剂、甜味剂等。
制剂和组合物可包含所公开的化合物的微粉化晶体。微粉化可以仅对化合物的晶体进行，也可以对晶体与部分或全部药用赋形剂或载体的混合物进行。所公开的化合物的微粉化晶体的平均粒径可以为例如约5至约200微米，或约10至约110微米。
片剂可以可选地与一种或多种助剂成分一同通过压缩或模制制得。压缩的片剂可使用粘合剂(如明胶、微晶纤维素或羟丙基甲基纤维素)、润滑剂、惰性稀释剂、防腐剂、崩解剂(例如，淀粉乙醇酸钠或交联的羧甲基纤维素钠)、表面活性剂或分散剂制备。模制的片剂可通过在合适的机器中模制由惰性液体稀释剂润湿的受试组合物的混合物来制备。片剂以及其他的固体剂型(例如糖衣丸、胶囊、丸剂和颗粒)可选地可以涂印(scored)或制备有包衣或外壳，例如制药领域中公知的肠溶包衣和其他包衣。
将认识到，本发明的组合物可以包括冻干的或冷冻干燥的本文中公开的化合物。例如，本文中公开的是所公开的化合物的晶体和/或非晶态粉末形式的组合物。
口服施用的液体剂型包括药学上可接受的乳液、微乳液、溶液、悬浮液、糖浆和酏剂。除了受试组合物之外，液体剂型还可包含本领域中常用的惰性稀释剂(例如，水或其他溶剂)、增溶剂和乳化剂，如乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁二醇、油(特别是棉籽油、花生油、玉米油、胚芽油、橄榄油、蓖麻油和芝麻油)、甘油、四氢呋喃醇、聚乙二醇和山梨聚糖的脂肪酸酯、环糊精及其混合物。
除了受试组合物之外，悬浮液还可包含悬浮剂，例如，乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨醇和山梨聚糖酯、微晶纤维素、氢氧化铝、膨润土、琼脂-琼脂和黄芪胶及其混合物。
经皮施用的受试组合物的剂型包括粉末、喷雾剂、软膏、糊剂、乳膏、洗剂、凝胶、溶液和贴剂。活性组分可在无菌条件下与药学上可接受的载体以及可能需要的任何防腐剂、缓冲液或推进剂混合。
除了受试组合物之外，软膏、糊料、乳膏和凝胶还可以含有赋形剂，如动物和植物脂肪、油脂、蜡、石蜡、淀粉、黄芪胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、硅酸、滑石和氧化锌或其混合物。
除了受试组合物之外，粉末和喷雾剂还可包含赋形剂，例如，乳糖、滑石、硅酸、氢氧化铝、硅酸钙和聚酰胺粉，或这些物质的混合物。喷雾剂可额外包含常用的推进剂，如氯氟烃和挥发性未取代的碳氢化合物，如丁烷和丙烷。
作为另选，本发明的组合物和化合物可通过气溶胶施用。这是通过制备含有该化合物的湿气溶胶、脂质体制剂或固体颗粒来实现的。可以使用非水性(例如，氟碳化合物促进剂)悬浮液。可以使用声波雾化器，因为它们将使药剂受到剪切的程度降到最低，而剪切可能会导致受试组合物中所含化合物的降解。
通常，湿气溶胶是通过将受试组合物的水溶液或悬浮物与传统的药学上可接受的载体和稳定剂一起配制而制成的。载体和稳定剂根据特定的受试组合物的要求而不同，不过通常包含非离子表面活性剂(吐温类、普郎尼克类或聚乙二醇)、无害蛋白如血清白蛋白、山梨聚糖酯、油酸、卵磷脂、氨基酸如甘氨酸、缓冲剂、盐、糖或糖醇。气溶胶一般由等渗溶液制备。
应当指出，作为实例给出的赋形剂可能具有多于一种功能。例如，填料或粘合剂也可以是崩解剂、助流剂、抗粘剂、润滑剂、甜味剂等。
本发明的适合于肠胃外施用的药物组合物包含受试组合物与一种或多种药学上可接受的无菌等渗水溶液或非水溶液、分散液、悬浮液或乳液、或无菌粉末(可在使用前重构成无菌的可注射溶液或分散液)的组合，其可含有抗氧化剂、缓冲液、抑菌剂、溶质(使制剂与预期接受者的血液等渗)或悬浮剂或增稠剂。例如，本文提供的是包含所公开的化合物且还可包含例如葡萄糖(例如，在水中约1重量％至约10重量％的葡萄糖，或约5重量％的葡萄糖(d5w))的水性组合物。
可用在本发明的药物组合物中的合适的水性和非水性载体的实例包括水、乙醇、多元醇(如甘油、丙二醇、聚乙二醇等)及其适当的混合物、植物油(如橄榄油)，和可注射的有机酯(如油酸乙酯)和环糊精。例如，通过使用如卵磷脂等包衣材料，通过在分散液的情况下保持所需的颗粒尺寸，以及通过使用表面活性剂可以保持适当的流动性。
应认识到，设想的制剂(如口服制剂(如丸剂或片剂))可配制为控释制剂，例如即刻释放的制剂、延迟释放的制剂或其组合。
在某些实施方式中，受试化合物可以配制为片剂、丸剂、胶囊或其他合适的可食用制剂(以下统称为“片剂”)。在某些实施方式中，治疗剂量可以提供为10片以下的片剂。在另一个实例中，治疗剂量提供为50片、40片、30片、20片、15片、10片、5片或3片片剂。
在某些实施方式中，将所公开的化合物配制为片剂、胶囊或水性溶液或悬浮液用于口服施用。在片剂形式的另一个实施方式中，将片剂配制为使抗菌剂(或多种抗菌剂)在施用后一起摄入(例如，随时间推移)时所得的量将提供至少为中位有效剂量(ed50)的剂量，例如，至少50％的个体表现出抑制细菌细胞生长或保护(例如，统计上显著减少感染)的数量效应的剂量。在另一个实施方式中，将片剂配制为施用后提供的抗菌剂(或多种抗菌剂)的总量为患者(人类或非人类哺乳动物)提供至少ed50的剂量。在其他的实施方式中，在24小时的时间内提供的抗菌剂(多种抗菌剂)的量将提供下述的给药方案，该方案平均提供的一种或多种抗菌剂的平均血浆浓度为至少ed50浓度(例如，抑制细菌细胞生长的最大效果的50％的浓度)。在其他的实施方式中，可提供小于100倍、10倍或5倍的ed50。在其他的实施方式中，单剂量提供了约0.25mg至1250mg的一种或多种化合物。
同样，本文中公开的化合物可配制为用于肠胃外给药，例如，用于皮下注射、肌肉注射或静脉注射，例如，抗菌剂可以提供在无菌溶液或悬浮液(以下统称为“可注射溶液”)中。在一些实施方式中，可注射溶液可被配制为使例如在大剂量注射中提供的抗菌剂(或多种抗菌剂)的量或静脉注射的剂量将提供至少中位有效剂量、或小于ed50的100倍、或小于ed50的10或5倍的剂量。可注射溶液可被配制为使(施用时)提供的抗菌剂(或多种抗菌剂)的总量将为患者提供ed50剂量，或小于ed50的100倍、或小于ed50的10或5倍。在其他的实施方式中，施用后在24小时的时间内注射至少两次所提供的抗菌剂(或多种抗菌剂)的量提供下述的给药方案，该方案平均提供的一种或多种抗菌剂的平均血浆浓度为至少ed50浓度、或小于ed50的100倍、或小于ed50的10或5倍。在其他的实施方式中，单剂量注射提供约0.25mg至1250mg，或约0.25mg至约2500mg的抗菌剂。
化合物a的剂量不受特别限制，可由治疗医师根据患者的病况适当选择。化合物a可以以5mg/天至720mg/天、优选40mg/天至600mg/天、更优选80mg/天至480mg/天、最优选16mg/天至480mg/天的剂量施用。进一步，优选的剂量对于静脉注射为80mg/天至480mg/天或80mg/天至320mg/天，更优选160mg/天至320mg/天或100mg/天至300mg/天，最优选约200mg/天至240mg/天，对于口服施用为80mg/天至720mg/天或80mg/天至480mg/天，更优选240mg/天至480mg/天或100mg/天至450mg/天，最优选约280mg/天至320mg/天。这些剂量可通过连续输注施用，每日一次，或多次计量，如每日两次、每日三次、每日四次等。这意味着优选给药方案对于静脉注射为40mgbid(每日两次)至160mgbid或tid(每日三次)，对于口服给药为40mgbid至240mgbid或tid。在另一个实施方式中，剂量可以以更长的时间间隔施用，例如每隔一天或每周一次。可能的时间间隔包括，尤其是2天、3天、4天、5天、6天、7天、10天和14天。这种较长的时间间隔例如可能适用于纳米悬浮剂的iv施用。本文中提供的剂量说明是指化合物a的游离酸形式。如果使用化合物b或化合物a或化合物b的盐形式，剂量必须通过将上述剂量指标乘以所选化合物的分子量与化合物a的分子量的比值来调整。
化合物a的施用时间不受具体限制。在许多情况中，有利的是化合物a在2周至16周或2周至13周、更优选4周至14周或4周至10周、最优选6周至12周的时间内连续施用。
因此，本发明尤其涉及一种治疗有需求的患者的与糖尿病足相关的细菌感染或与外周局部缺血相关的足部其他细菌感染的方法，其中所述方法包括对所述患者施用治疗有效量(例如，如本节前文中所规定的量)的{6-[(1e)-3-{甲基[(3-甲基-1-苯并呋喃-2-基)甲基]氨基}-3-氧代丙-1-烯-1-基]-2-氧代-3,4-二氢-1,8-二氮杂萘-1(2h)-基}甲基磷酸二氢酯，或其药学上可接受的盐或代谢物，或代谢物的药学上可接受的盐。所述方法还包括在施用所述化合物之前、同时和/或之后除去受感染和/或坏死组织的外科手术。
患者
待治疗的患者是患有足部感染的伴有外周局部缺血的患者，尤其是患有糖尿病足感染或与外周局部缺血相关的足部其他细菌感染的人类糖尿病患者，特别是伴有或不伴有糖尿病足骨髓炎的患有糖尿病足感染的患者。感染可能是由单一菌株的致病菌引起的，但也可能是由多种这类细菌菌株引起的。特别是，本发明属于治疗患有由一种或多种下列细菌引起的足部感染(例如糖尿病足感染)的患者的手段和方法：
葡萄球菌种
耐抗生素的葡萄球菌种，所述抗生素通常用于治疗由革兰氏阳性菌导致的感染，包括但不限于β-内酰胺类，如青霉素(如苯唑西林、氨苄西林)和头孢菌素(如头孢唑林、头孢他林(ceftarolin))、万古霉素、利奈唑胺、克林霉素、利福平、达托霉素、氟喹诺酮类如左氧氟沙星和环丙沙星、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、磷霉素、夫西地酸、替加环素和四环素如多西环素
金黄色葡萄球菌
社区获得性金黄色葡萄球菌
医院获得性金黄色葡萄球菌
甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌
耐甲氧西林金黄色葡萄球菌
耐抗生素的金黄色葡萄球菌菌株，所述抗生素用于治疗由革兰氏阳性菌导致的感染，包括但不限于β-内酰胺类，如青霉素(如苯唑西林、氨苄西林)和头孢菌素(如头孢唑啉、头孢他林)、万古霉素、利奈唑胺、克林霉素、利福平、达托霉素、氟喹诺酮类如左氧氟沙星和环丙沙星、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、磷霉素、夫西地酸、替加环素和四环素如多西环素
耐多种药的金黄色葡萄球菌株
凝固酶阴性葡萄球菌
耐抗生素的凝固酶阴性葡萄球菌株，所述抗生素用于治疗由革兰氏阳性菌导致的感染，包括但不限于β-内酰胺类，如青霉素(如苯唑西林、氨苄西林)和头孢菌素(如头孢唑啉、头孢他林)、万古霉素、利奈唑胺、克林霉素、利福平、达托霉素、氟喹诺酮类如左氧氟沙星和环丙沙星、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、磷霉素、夫西地酸、替加环素和四环素如多西环素
表皮葡萄球菌
耐甲氧西林表皮葡萄球菌
甲氧西林敏感表皮葡萄球菌
耐抗生素的表皮葡萄球菌菌株，所述抗生素用于治疗由革兰氏阳性菌导致的感染，包括但不限于β-内酰胺类，如青霉素(如苯唑西林、氨苄西林)和头孢菌素(如头孢唑啉、头孢他林)、万古霉素、利奈唑胺、克林霉素、利福平、达托霉素、氟喹诺酮类如左氧氟沙星和环丙沙星、甲氧苄啶/磺胺甲噁唑、磷霉素、夫西地酸、替加环素和四环素如多西环素
耐多种药的表皮葡萄球菌
溶血性葡萄球菌
路邓葡萄球菌
模仿葡萄球菌
人葡萄球菌
本发明的化合物和药物组合物特别适合于治疗患有足骨髓炎(例如糖尿病足骨髓炎)的患者，该疾病与足部组织如糖尿病足组织的严重程度局部缺血相关。本发明的化合物的舒张性能对这类患者尤其有益。在这方面，术语“严重程度局部缺血”是指受感染的骨组织的血液灌注程度为同一患者未受影响的身体部位(如患者的手)的软组织和/或骨组织中血液灌注程度的50％以下，优选为30％以下。作为另选，“严重程度局部缺血”也可以理解为r.l.hardman等发表于semininteruntradiol2014,31:378-388的“外周动脉疾病分类系统概述(overviewofclassificationsystemsinperipheralarterydisease)”中的表6所定义的1级、2级或3级局部缺血。
在一个实施方式中，治疗施用给既无打算生育孩子也未处在孕育孩子的过程中的患者。
优选的实施方式
本发明的优选实施方式使用化合物a或其药学上可接受的盐来治疗糖尿病足骨髓炎。该优选的实施方式的特别优选的方面是使用化合物a的二(乙醇铵)盐。该优选实施方式的另一特别优选的方面是治疗由金黄色葡萄球菌感染引起的糖尿病足骨髓炎。该优选实施方式的另一特别优选的方面是治疗与严重程度局部缺血相关的糖尿病足骨髓炎。另一特别优选的实施方式是通过静脉施用以40mgbid至160mgbid或tid的剂量范围施用化合物a，或通过口服施用以40mgbid至240mgbid或tid的剂量范围施用化合物a。甚至更优选的实施方式的特征在于同时实现两个以上的这些特别优选的方面。
实施例
实施例1：pde3抑制试验
导言：环核苷酸磷酸二酯酶(pde)是通过控制第二信使camp和cgmp的降解速率来调节camp和cgmp细胞水平的酶。pde3a和pde3b是pde3家族的成员。pde3的抑制可防止camp断裂，从而增加其细胞内浓度。camp的细胞内浓度起到重要的第二信使作用，例如调节心肌收缩和血管平滑肌收缩(1.benderat,beavoja:cyclicnucleotidephosphodiesterases:molecularregulationtoclinicaluse.pharmacol.rev.(2006)58(3):488-520)。
材料/方法：在酶磷酸二酯酶试验中使用caliper迁移率测定法(2.carda1,caldwellc,minh等:high-throughputbiochemicalkinaseselectivityassays:paneldevelopmentandscreeningapplications,jbiomolscreen.(2009)；14(1):31-42)测定了化合物b对人pde3a和pde3b的抑制活性，并与西洛他唑(pde3抑制剂)进行比较。该方法基于荧光标记底物ifl-camp的产物的电荷变化和电泳分离。在384孔板中以26μl的体积进行试验。ifl-camp底物在反应缓冲液(100mmhepes(ph7.5)、5mmmgcl2和0.002％brij35)中，在活性酶(pde3a和pde3b)和不同浓度的测试化合物的存在下进行芯片外温育。温育期后，测定反应产物和剩余底物。使用ez读取器ii进行检测。使用变斜率拟合以prism软件(graphpad,sandiego,ca,usa)，从各个体的浓度-响应曲线确定诱发50％响应的化合物的浓度(ic50)。
结果：pde3抑制剂西洛他唑抑制了两种异构体的酶活性，对pde3a的抑制作用略强于pde3b，其各自绝对ic50值为0.416μm和0.912μm。化合物b也能够抑制pde3a和pde3b的酶活性，其各自绝对ic50值分别为0.6μm和0.703μm。
结论：化合物b对pde3a和pde3b的抑制活性与西洛他唑(缓解患有外周血管疾病的个体的间歇性跛行症状的药物)相当。
实施例2：家兔隐静脉模型的体外血管舒张测试
材料/方法：使用离体家兔隐静脉组织评估化合物b的血管舒张作用。击打头部杀死家兔，然后进行颈椎脱位和放血。仔细切除一段隐静脉。清除静脉所有的脂肪和结缔组织，并切成2.5mm长的环。将环水平安装在20ml的器官浴槽中，浴槽中装满保持在37.7±0.5℃的克莱布斯溶液，并充入95％的o2和5％的co2的混合气体。克莱布斯溶液的组成如下(mm)：nacl:118.0/kcl:5.0/cacl2:2.6/mgso4(7h2o):1.2/nahco3:24.9/kh2po4:1.2/葡萄糖:10.0。ph为7.40±0.05。在最佳静息张力为1g时，使这些环平衡60分钟。使用等距力传感器测量收缩张力，并使用专用软件(iox版本1.554,emkatechnologies，法国巴黎)对信号进行分析。使用对80mmkcl的三次挑战验证组织活力。在kcl的三次挑战后，达到最大收缩。基于以1μm去甲肾上腺素预收缩的环中的1μm乙酰胆碱所产生的舒张作用，验证内皮的完整性。所有实验均在带内皮的动脉环上进行。该方法评价了试验物在预收缩试样中的作用。试样用激动剂(1μm的去甲肾上腺素)预收缩，直到达到稳定的强直性收缩为止。六种累积浓度的试验物或比较物随后加入浴槽中，记录舒张情况，绘制浓度-响应曲线。三种试样接触0.1％的dmso连续六个时期以与化合物b和西洛他唑比较。对四种试样(由四种动物获取)进行了试验物和比较物的研究。三种试样用于dmso治疗组的研究。将对试验物的舒张响应表达为由激动剂诱导的预收缩的抑制百分比。使用线性回归由各个体的浓度-响应曲线确定诱导50％最大响应(ec50)的激动剂的浓度。对于各个环，将激动剂效力(pd2)计算为-log(ec50)。
结果：
-对静脉试样的活力和内皮完整性进行验证(kcl诱导的收缩：dmso治疗组、化合物b治疗组和西洛他唑治疗组的平均±sd分别为3.90±0.05、4.29±0.2和4.32±0.29g，乙酰胆碱诱导的舒张：dmso治疗组、化合物b治疗组和西洛他唑治疗组的平均±sd分别为-93±3、-62±11和-82±6％)。
-在以1μm去甲肾上腺素预收缩的家兔隐静脉环中，dmso(0.1％，连续6个周期)使试样随时间逐渐舒张(最大舒张率为-29±11％)。
-与载体对照组(dmso)相比，在0.03至1μm的范围内，化合物b对以1μm去甲肾上腺素预收缩的隐静脉环无舒张作用。相反，在3和10μm时，化合物b以浓度依赖方式使1μm去甲肾上腺素预收缩的试样舒张(10μm时-69±9％相对于dmso治疗组中的-29±11％，pd2值＝5.85±0.10)。
-与载体对照组(dmso)相比，在0.001至1μm的范围内，西洛他唑对以1μm去甲肾上腺素预收缩的隐静脉环无舒张作用。相反，在10和100μm时，西洛他唑以浓度依赖方式使1μm去甲肾上腺素预收缩的试样舒张(100μm时-70±7％相对于dmso治疗组中的29±11％，pd2值＝6.08±0.14)。
结论：3和10μm的化合物b对1μm的去甲肾上腺素预收缩的隐静脉环发挥了血管舒张性能。作为比较，西洛他唑在10和100μm时对预收缩的隐静脉环表现出血管舒张性能。
实施例3：大鼠模型中金黄色葡萄球菌诱导的急性骨髓炎的体内治疗
材料/方法：使用clsi指南通过肉汤微量稀释对由骨感染分离出的20株mrsa菌株进行最低抑菌浓度(mic)测定。在第一天，通过用panton-valentine杀白细胞素(pvi)-阳性mrsa菌株的7log10集落形成单元(cfu)对胫骨髓腔的接种来诱导实验性骨髓炎。将大鼠随机分配至以下治疗组：化合物a100mg/kg口服(po)每日两次(bid)，万古霉素100mg/kg腹腔注射(ip)每日一次(od)，磷霉素75mg/kg腹腔注射qd，载体口服bid，为期3周，从感染后第8天开始(n＝6/组)。对照组动物在治疗前第8天和在第28天治疗期结束时对骨匀浆中的cfu计数。收集感染的和未感染的骨样品和血浆样品，用lc-ms/ms对化合物b进行定量。
结果：发现化合物b对全部20株mrsa骨分离物表现出极强的活性，其中包括5个菌株耐克林霉素，2个菌株呈pvi阳性，其mic范围非常紧凑，为0.004至0.015μg/ml。在具有实验性骨髓炎的大鼠中，发现骨的定量培养物在治疗前的第8天在所有对照动物中(中值：5.8log10cfu/g骨)和在第28天在全部载体治疗的动物中(5.6log10cfu/g骨)对于mrsa为阳性。发现万古霉素组0/6大鼠中骨培养物呈阴性，化合物a或磷霉素组的2/6(33％)大鼠中骨培养物呈阴性。与载体对照组相比，在第8天化合物a和磷霉素治疗在细菌负荷方面引发了平均2.8(p<0.005)和3.3(p<0.003)log10cfu/g骨的减少(曼-怀二氏检验)。用万古霉素治疗的大鼠在细菌负荷方面没有统计学上明显的减少。治疗3周后，未观察到对化合物a的耐性增大。化合物b的骨:血浆的比率在0.06至0.27的范围内，受感染的胫骨和未受感染的胫骨之间没有差异。
结论：综上，实验性骨髓炎功效和药物骨穿透性试验的结果表明，化合物a在治疗葡萄球菌性骨髓炎方面具有治疗潜力。
实施例4：家兔模型(1)中金黄色葡萄球菌诱导的急性骨髓炎的体内治疗
材料/方法：使用clsi指南通过肉汤微量稀释进行mic测定。骨环钻术后用108cfu的mrsa临床菌株接种家兔的膝盖诱导骨髓炎(om)。接种后第3天，进行外科清创术以模拟临床操作。取出股骨红骨髓(bm)和骨骺海绵状骨的样品，进行细菌计数。
接种后第3天开始治疗并以选定的剂量持续4天，该选定的剂量近似于人体的等效治疗性接触：化合物a12.5mg/kgbid静脉注射(iv)(4h灌注)，近似人体剂量160mg静脉注射bid，或320mg/天或其载体bid静脉注射，或万古霉素100mg/kg，每日一次持续静脉输注至血清稳态浓度为mic的20倍(近似于人体剂量30mg/kg，每日一次)。接种后的第7天，确定bm样品和骨样品中的细菌计数。通过比较抗菌治疗之前(感染后第3天)和治疗之后(感染后第7天)的细菌计数来评估治疗效果。收集受感染的和未受感染的bm、骨和血浆样品，通过lc-ms/ms对化合物b进行定量。
结果：mrsa分离物的mic对于化合物b是0.004μg/ml，对于万古霉素是1μg/ml。体内结果如表1中所示。化合物a在bm和骨中有明显的抗葡萄球菌活性。万古霉素和载体之间未观察到细菌计数的明显差异。治疗4天后，未观察到对化合物b的耐性增大。如表2中所示，化合物b具有较高的骨穿透性，受感染组织中的骨和骨髓与血浆的比率高于未受感染组织。平均±sd比值在受感染的骨和骨髓中分别为2.1±1.35和1.8±3.6。
表1.治疗4天后骨髓和骨组织细菌计数的平均变化
*相对于载体和万古霉素的p<0.001(方差分析(anova)，随后进行snk检验)。
表2.药物骨和骨髓与血浆的比率(n＝10)
结论：综上所述，实验性om的疗效和药物骨穿透结果表明，化合物a在治疗葡萄球菌性om方面具有治疗潜力。
实施例5：家兔模型(2)中金黄色葡萄球菌诱导的急性骨髓炎的体内治疗
材料/方法：使用clsi指南通过肉汤微量稀释进行mic测定。骨环钻术后用108cfu/ml的mrsa临床菌株接种家兔的膝盖诱导om。接种后第3天，进行外科清创术以模拟临床操作。取出股骨红骨髓(bm)和骨骺海绵状骨的样品，确定相当于感染后第3天的细菌计数。感染后第3天开始治疗并以选定的剂量水平持续施用4天化合物a，化合物a的剂量水平为12.5、6.25、1.6、0.4或0.1mg/kgbid静脉注射(4h灌注)，或其载体bid静脉注射。接种后的第7天，确定bm样品和骨样品中的细菌计数。通过比较抗菌治疗之前(感染后第3天)和治疗之后(感染后第7天)的细菌计数来评估治疗效果。
结果：mrsa分离物的mic对于化合物b是0.004μg/ml。体内结果如表3中所示。化合物a在12.5mg/kg时显示出细菌滴度在bm和骨中显著降低。较低剂量的化合物a(6.25、1.6、0.4和0.1mg/kg静脉注射bid)的评估显示呈剂量-效应关系，bm和骨中细菌计数显著减少至0.4mg/kg剂量。治疗4天后，未观察到对化合物b的耐性增大。
表3.治疗4天后骨髓和骨组织细菌计数的平均变化
ap<0.01，bp<0.05载体组(anova，随后进行snk检验)。
dp<0.001，相对于化合物a12.5mg/kg静脉注射bid(anova，随后进行snk检验)。
结论：综上所述，实验性骨髓炎的疗效表明化合物a在治疗葡萄球菌性om方面具有治疗潜力。
实施例6.化合物a的可能制剂
(a)注射用制剂，40mg单位剂量组合物
该产物用5毫升5％的注射用葡萄糖重构，然后将所需量的小瓶稀释成250或500ml的5％葡萄糖(或0.9％生理盐水)输液袋。
口服制剂：
化合物a40mg胶囊
a重量指的是全部化合物，即活性药物部分和反离子。
实施例7.化合物b的可能制剂
口服制剂
化合物b片剂