抗衰老组合物的制作方法

本发明涉及一种抗衰老组合物，更详细地，涉及一种以促进胶原蛋白的生物合成的化合物作为有效成分的用于减少皮肤皱纹和增强皮肤弹性的抗衰老组合物。
背景技术：
：皮肤是一种负责保护人体免受外部环境影响并防止内部水分和有用成分向外流出的屏障功能、体温调节或排泄等各种生理功能的重要的器官。通常，由于皮肤有很多机会与各种外部刺激接触，因此与其他器官相比，皮肤容易出现皱纹。其中，面部皮肤直接暴露于阳光、干燥环境、污染物等，因此，皱纹等衰老现象比未暴露于外部的皮肤更早出现。由皮肤组织衰老引起的最典型的变化是皮肤基质(matrix)的变化，其中真皮层中的人皮肤成纤维细胞(humanskinfibroblast)衰老，降低了生产纤维和基质的能力，并且基质的量整体减少，使皮肤的厚度变薄，皮肤弹性降低，从而形成皱纹。即，随着衰老的进行，皮肤的弹性降低、血液循环障碍、皮肤屏障的减弱等变得更加严重。最近，在韩国国内推出功能性化妆品后，新材料的开发变得更加重要，功能性新材料的开发得到了积极的推进，但是，能够实现实际商业化的用于减少皮肤皱纹和皮肤弹性的抗衰老用功能性原料并不多。用于减少皮肤皱纹的研究方向大致可分为以下几个方面：去除促进皮肤衰老的如紫外线、活性氧和干燥皮肤等环境因素来延缓皮肤衰老本身；基于对皮肤皱纹产生机制的研究结果来准备如抑制弹性蛋白酶、促进胶原蛋白的生物合成及抑制分解、促进透明质酸的合成等预防措施；直接注射胶原蛋白或透明质酸以缓和生成的皮肤皱纹或者补充减少的皮肤基质成分或细胞以改善产生的皮肤皱纹等。目前，用于减少皮肤皱纹和增强皮肤弹性的最具代表性的抗衰老用功能性原料有类视黄醇(retinoids)、维生素c等。在类视黄醇中，视黄酸(retinoicacid)用作强效抗衰老用治疗剂，但是对皮肤具有强烈刺激性，因此限制性地用作治疗剂，并且刺激性比较小的视黄醇、视黄醇棕榈酸酯等广泛用作化妆品材料。然而，视黄醇和视黄醇棕榈酸酯被光照射时，因光而变性，对皮肤引起刺激的光毒性和其稳定性成为问题，虽然维生素c也是广泛使用的减少皱纹的治疗剂，但具有诱发强酸性导致的皮肤刺激、物质本身的稳定性低的缺点。因此，迫切需要开发一种与现有抗衰老组合物相比对生物体安全且高效的新型抗衰老用化妆品组合物。技术实现要素：发明要解决的课题本发明的目的是提供一种用于减少皮肤皱纹和增强皮肤弹性的抗衰老组合物。本发明的另一目的是提供一种将所述抗衰老组合物涂布于皮肤来促进皮肤的胶原蛋白的生物合成，从而对减少皮肤皱纹和增强皮肤弹性有用的方法。用于解决课题的手段本发明提供一种抗衰老组合物，其中，包含由下述化学式1表示的化合物作为有效成分，[化学式1][在化学式1中，r1各自独立地为氢、直链(c1-c30)烷基、直链(c2-c30)链烯基、直链(c2-c30)炔基、直链(c1-c30)烷氧基或直链羟基(c1-c30)烷基；r2是或者取代或未取代的氨基酸基团，上述r11是羟基(c1-c30)烷基。]根据本发明的一个实施方案的抗衰老组合物提供上述化合物的新用途，其用于通过促进胶原蛋白生物合成来减少皮肤皱纹和增强皮肤弹性。本发明提供一种体外胶原蛋白合成促进剂，其包含由所述化学式1表示的化合物作为有效成分。此时，所述胶原蛋白合成促进剂可以指用于促进胶原蛋白合成的组合物。并且，本发明提供一种将包含由所述化学式1表示的化合物作为有效成分的抗衰老组合物涂布于皮肤而减少皮肤皱纹和增强皮肤弹性的方法。发明效果根据本发明的抗衰老组合物的稳定性优异，对人体无害，而且通过促进胶原蛋白生物合成，从而减少皮肤皱纹和增强皮肤弹性的效果优异。附图说明图1示出了实施例1中的抗衰老组合物的处理后的1型胶原蛋白的数值。图2示出了实施例2中的抗衰老组合物的处理后的表皮和真皮层的胶原蛋白纤维。具体实施方式以下，将详述根据本发明的抗衰老组合物，然而，除非另外定义，否则本文使用的技术术语和科学术语具有本发明所属领域的技术人员通常理解的含义，并且在下述说明中将省略对于有可能不必要地混淆本发明的主旨的公知功能和构成的说明。本发明中使用的术语“抗衰老”可以是将皮肤保护和改善皮肤状况、皮肤美白、预防或改善皮肤衰老和皱纹、毛孔收缩和缩小、皮肤保护、改善皮肤屏障功能、减轻对皮肤的刺激、皮肤细胞增殖和再生能力、抗氧化能力、提高胶原蛋白合成能力等全部包含的概念，特别是指具有提高胶原蛋白合成能力。本发明中使用的术语“涂布”是指通过任意的适当方法使根据本发明的组合物与个体的皮肤接触，从而旨在由此使相应组合物吸收到皮肤中。本发明中使用的术语“预防”是指通过涂布本发明的组合物来抑制或延迟皱纹发生的所有行为，并且本发明中使用的术语“改善”是指通过涂布本发明的组合物而皱纹状态有所好转或向有利的方向改变、或使皮肤弹性比以前更高、或延迟由于衰老导致的皮肤弹性丧失的速率等所有行为。本发明中使用的术语“皱纹”是指由皮肤衰老产生的细纹，可以由基因导致的原因、皮肤真皮中存在的胶原蛋白和弹性蛋白的减少、外部环境等诱发。另外，术语“弹性”是指由存在于皮肤真皮层的弹性蛋白(elastin)组成的弹性纤维显示出来的弹性，并且该弹性纤维如橡胶那样具有非常低的弹性系数，因此仅以很小的力也容易变形，当该力被除去时，它很容易恢复原形。此时，所述弹性纤维具有在称为弹性蛋白的无定形基质中嵌入有微原纤维(microfibrils)的形态，弹性蛋白是由来自赖氨酸的称为锁链素(desmosine)和异锁链素(isodesmosine)的仅在弹性纤维中发现的非常独特的氨基酸组成的蛋白质。这些锁链素和异锁链素等在长肽链中形成交联(cross-links)，这种结构使弹性蛋白具有如橡胶那样的性质。本申请人对显示出对抗衰老的强烈效果并具有优异的制剂稳定性的新的原料进行了深入研究，其结果得出具有抗炎效果的由下述化学式1表示的化合物具有减少皮肤皱纹和增强皮肤弹性的效果，从而提供包含由下述化学式1表示的化合物作为有效成分的抗衰老组合物，从而完成了本发明。化学式1[在化学式1中，r1各自独立地为氢、直链(c1-c30)烷基、直链(c2-c30)链烯基、直链(c2-c30)炔基、直链(c1-c30)烷氧基或直链羟基(c1-c30)烷基；r2是或者取代或未取代的氨基酸基团，其中r11是羟基(c1-c30)烷基。]本发明中记载的“烷基”、“烷氧基”和此外包含“烷基”部分的取代基均包括直链形态。此外，根据本发明的烷基、烷氧基和羟烷基优选具有直链形态且具有1至7个碳原子、或者在上述碳原子数的基础上具有直链形态，但是具有8至30个碳原子也是本发明的一个实施方案。本发明中记载的“链烯基”是具有至少一个双键的直链形态的烃，例如可举出乙烯基、丙-1-烯-1-基、丙-1-烯-2-基、丙-2-烯-1-基、丙-2-烯-2-基、丁-1-烯-1-基，丁-1-烯-2-基，2-甲基-丙-1-烯-1-基，丁-2-烯-1-基，丁-2-烯-2-基，丁-1,3-二烯-1-基，丁-1,3-二烯-2-基等，但不限于此。本发明中记载的“炔基”是具有至少一个三键的直链形态的烃，例如可举出乙炔基、丙-1-炔-1-基、丙-2-炔-1-基、丁-1-炔-1-基、丁-1-炔-3-基、丁-3-炔-1-基等，但不限于此。在根据本发明的一个实施方案的抗衰老组合物中，从上述化合物的溶解度和与溶剂的相容性优异，并且不仅对生物体安全，而且还促进皮肤的成纤维细胞的1型(type-1)和3型(type-3)的胶原蛋白生物合成，从而提高皮肤弹性，皮肤皱纹改善效果优异的方面，所述化合物的r1优选为直链形态的(c1-c20)烷基、(c1-c20)烷氧基或羟基(c1-c20)烷基。从根据本发明的一个实施方案的所述化合物是非常稳定的物质，剂型开发容易，并且没有皮肤屏障功能异常、表皮过度增殖等皮肤副作用，特别是1型(type-1)胶原蛋白的生物合成能力优异的方面，更优选地，化合物的r1可以是直链形态的(c1-c5)烷基，r2可以选自以下结构，但不限于此。[在上述结构中，r21和r22各自独立地为氢或(c1-c7)烷基。]在根据本发明的一个实施方案的抗衰老组合物中，优选地，所述化合物的r21和r22各自独立地选自甲基、乙基和丙基，但不限于此。此外，作为将本发明的组合物添加到人源成纤维细胞的培养液中并测量两种类型的生物合成胶原蛋白的量的结果，本申请人证明了由所述化学式1表示的化合物和包含该化合物作为有效成分的抗衰老组合物在促进胶原蛋白，特别是1型(type-1)和3型(type-3)胶原蛋白的生物合成方面具有优异的效果，从而确定了由所述化学式1表示的化合物和包含该化合物作为有效成分的抗衰老组合物对增强皮肤弹性和皮肤皱纹改善效果有用的事实。此外，确认了在不诱导细胞增殖的浓度范围内不显示毒性，从而明确了该化合物和组合物非常安全。即，根据本发明的一个实施方案的抗衰老组合物作为皮肤外用剂，促进胶原蛋白的生物合成，从而显示出对抗衰老有用的效果，而且不会引起以往用于抗衰老的类视黄醇等所具有的皮肤屏障功能异常、表皮过度增殖等皮肤副作用，并且非常稳定，从而易于开发制剂，因此，该组合物有望安全有效地应用于化妆品组合物、药物组成物等。根据本发明的一个实施方案的化妆品组合物、药物组合物等抗衰老组合物中的作为有效成分的上述化合物的含量没有特别限定，优选相对于组合物的总重量包含0.001至50重量％为佳，更优选包含0.01至30.0重量％为佳，但不限于此。以下，将具体说明根据本发明的一个实施方案的抗衰老化妆品组合物。为了增强抗衰老，根据本发明的化妆品组合物在包含上述化合物的基础上，作为本领域公知的用于减少皱纹的成分，当然可以进一步包含选自视黄酸、tgf、来自动物胎盘的蛋白质、桦木酸和小球藻提取物中的一种以上的皱纹改善成分。这时，相对于化妆品组合物的总重量，可以包含0.000001重量％至10重量％的另外的用于减少皱纹的成分，并且上述重量％可以根据诸如胶原蛋白合成促进活性、皮肤安全性、与由化学式1表示的化合物制成剂型时的容易性等因素进行调节。此外，根据本发明的一个实施方案的化妆品组合物可包含选自水性添加剂和油性添加剂中的一种以上添加剂，其中，所述水性添加剂选自纯净水、稳定剂、乳化剂、增稠剂、保湿剂、液晶膜增强剂、ph调节剂、抗菌剂、水溶性高分子、被膜剂、金属离子螯合剂、氨基酸、有机胺、高分子乳液、ph控制剂、皮肤营养素、抗氧化剂、抗氧化助剂、防腐剂、香料等中的一种以上，所述油性添加剂选自脂肪油、蜡、烃油、高级脂肪酸油、高级醇、合成酯油、硅油等中的一种以上。这里，水性添加剂只要是通常在本领域中使用的原料就不受限制，并且其具体实例可以是选自甘油、二丙二醇、丁二醇、戊二醇、甲基丙二醇、山梨糖醇、双甘油、赤藓糖醇、季戊四醇、聚丁二醇-10、聚甘油-3、聚甘油-4、聚甘油-6、聚甘油-10、聚甘油-20、聚甘油-40、山梨醇聚醚-5、山梨醇聚醚-6、山梨醇聚醚-20、山梨醇聚醚-30、山梨醇聚醚-40、肌醇、麦芽糖醇、麦芽糖、甘露聚糖、甘露糖醇、甘露糖、乳糖醇、乳糖、二羟丙基pg-葡萄糖苷、二硫辛烷二醇、果糖、葡糖胺、甲基葡糖胺、葡萄糖、1,2,6-己硫醇、甲基葡萄糖-10、甲基葡萄糖-20、臭氧化甘油、植烷三醇、硫代甘油、苏糖醇、三羟甲基丙烷、木糖醇、edta、瓜尔胶、木瓜籽、角叉菜胶、半乳聚糖、阿拉伯树胶、果胶、甘露聚糖、淀粉、黄原胶、凝胶多糖、甲基纤维素、羟乙基纤维素、羧甲基纤维素、甲基羟丙基纤维素、硫酸软骨素、硫酸皮肤素、糖原、硫酸乙酰肝素、透明质酸、透明质酸钠、黄蓍胶、硫酸角质素、软骨素、硫酸粘蛋白、羟乙基瓜尔胶、羧甲基瓜尔胶、葡聚糖、硫酸角质素、刺槐豆胶、琥珀葡聚糖、卡龙酸、甲壳质、壳聚糖、羧甲基甲壳质、琼脂、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、羧乙烯基聚合物、聚丙烯酸钠、聚乙二醇、膨润土、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、苯氧乙醇、1,2-己二醇、乙基己基甘油等中的一种以上。此外，所述油性添加剂只要是本领域通常使用的原料就不受限制，可以是如下原料：橄榄油、山茶油、霍霍巴油、甘油三酯、甘油三辛酸酯和甘油三异棕榈酸酯等液体油脂；椰子油、氢化椰子油、棕榈油、氢化油和氢化蓖麻籽油等固体油脂；蜂蜡、小烛树蜡、巴西棕榈蜡、羊毛脂、霍霍巴蜡等。烃油可以是例如液体石蜡、角鲨烯、凡士林、微晶蜡等。高级脂肪酸可例示月桂酸、肉豆蔻酸、棕榈酸、硬脂酸和山嵛酸等蜡；鲸蜡醇、硬脂醇、山嵛醇、肉豆蔻醇、鲸蜡硬脂醇等。合成酯油可以选自肉豆蔻酸异丙酯、辛酸十六烷基酯、肉豆蔻酸辛基十二烷基酯、棕榈酸异丙酯、月桂酸己酯、肉豆蔻酸肉豆蔻酯、乳酸十六烷基酯、异硬脂酸异十六烷基酯、新戊二醇二癸酸酯、乙基己基甘油、十六烷基乙基己酸酯、棕榈酸乙基己酯和鲸蜡硬脂醇等高级醇；二甲基聚硅氧烷、甲基苯基聚硅氧烷和甲基氢化聚硅氧烷等链状硅油；十二甲基环六硅氧烷、八甲基环四硅氧烷、十甲基环五硅氧烷等环状硅油等，但不限于此。根据本发明的一个实施方案的化妆品组合物除了本发明中特别公开的制备方法之外当然还可以使用通常已知的制备方法以一般的乳液制剂和溶解制剂等的形态制备。此时，可以根据目的适当地选择上述化妆品组合物，并且作为其具体实例，可以将组合物配制成选自柔软化妆水、收敛化妆水、营养化妆水、眼霜、滋养霜、按摩霜、清洁霜、清洁泡沫、清洁水、粉末、精华、面膜等中的剂型，但不限于此。以下，将详细说明根据本发明的一个实施方案的抗衰老药物组合物。根据本发明所属领域的普通技术人员可容易地实施的方法，根据本发明的一个实施方案的抗衰老药物组合物可包含药剂学上可接受的载体。包含在所述抗衰老药物组合物中的药剂学上可接受的载体是制备制剂时通常使用的载体，并且可以是乳糖、右旋糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯胶、磷酸钙、藻酸盐、明胶、硅酸钙、微晶纤维素、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素、水、糖浆、甲基纤维素、羟基苯甲酸甲酯、羟基苯甲酸丙酯、滑石、硬脂酸镁或矿物油，但不限于此。除上述成分外，本发明的抗衰老药物组合物还可包含润滑剂、润湿剂、甜味剂、调味剂、乳化剂、悬浮剂、或防腐剂等。当然，除了本发明特别公开的制备方法之外，可以使用通常已知的制备方法制备根据本发明的一个实施方案的药物组合物，并且可以根据目的将其配制成适当的形态。作为其具体实例，可列出诸如乳液、软膏、凝胶、乳膏、贴剂和喷雾剂的形态，但不限于此。作为本发明的一个实施方案，提供胶原蛋白合成促进剂，其包含由上述化学式1表示的化合物作为有效成分。此外，作为本发明的一个实施方案，提供了通过将包含由化学式1表示的化合物作为有效成分的抗衰老组合物涂布于皮肤来减少皮肤皱纹和增强皮肤弹性的方法。以下，将提供优选的实施例以帮助理解本发明。然而，下述实施例仅是为了更容易理解本发明而提供的，并且下述实施例仅是说明性的，而不以任何方式限制本发明的范围。实施例1将n-(2-羟乙基)辛酰胺加入到人成纤维细胞的培养液(dmem培养液，10％胎牛血清，1％抗生素)中，以证实在细胞水平上促进1型胶原蛋白合成的作用。合成的胶原蛋白的测定是使用picpeia试剂盒(原胶原蛋白i型c肽酶免疫测定试剂盒)而进行定量。使用人成纤维细胞培养液将人源成纤维细胞(humanfibroblast)以2×105个细胞/孔等分到6个孔中。确认细胞粘附后，将作为有效成分的n-(2-羟乙基)辛酰胺(抗衰老组合物)溶解于培养液，在各孔中以20μm的浓度各处理2ml。在37℃、5％co2条件的培养箱中培养24小时后，在细胞提取液中测定与皱纹形成因子有关的1型胶原蛋白。此时，上述抗衰老组合物的浓度在处理人源成纤维细胞时是无毒并且不会诱导细胞增殖的范围的浓度。其结果如表1和图1所示。实施例2通过紫外线照射进行了光衰老的皮肤的情况下，表皮-真皮结合部位的胶原纤维网络受损。因此，胶原纤维的量和形态用作皮肤光衰老的指标。涂布n-(2-羟乙基)辛酰胺后，将接受紫外线照射的无毛小鼠的皮肤组织用马松三色法(masson'strichrome)染色，用光学显微镜(ix71，olympus，jpn)观察，然后用数码相机(dp71，olympus，jpn)进行拍摄。购买人造皮肤(来自mattek，ashland，usa的epidermfttm)后，在专用培养基(eft-400)中稳定18小时。在人造皮肤的表面上，涂布浓度为0.1％的100μl的n-(2-羟乙基)辛酰胺(抗衰老组合物)作为有效成分。24小时后，将人造皮肤组织用10％甲醛固定，并用石蜡包埋，用马松三色法(masson'strichrome：m&t)染色切成5μm的组织，从而观察胶原纤维(collagenfibers)的染色程度。其结果如图2所示。比较例1除了不使用有效成分(阴性对照组)之外，以与实施例1中相同的方式确认促进1型胶原蛋白合成的效果。另外，相对于阴性对照组的1型胶原蛋白合成能力计算为比率，并且由增加率表示。其结果如表1和图1所示。表1实施例1比较例11型胶原蛋白浓度(20um)0.0150.002增加率(％)750-根据所述表1中所示的结果，可知根据本发明的抗衰老组合物相对于比较例1(阴性对照组，未处理组)，在促进1型胶原蛋白合成的效果上具有显著的增加率(与比较例相比为750％水平)。另外，如图2所示，当用根据本发明的抗衰老组合物进行处理时(实施例2)，在表皮下的真皮层中观察到用苯胺蓝强烈染色的胶原纤维。然而，在比较例1中，在表皮下的真皮层中观察到用苯胺蓝弱染色的胶原纤维。这样的结果证明，根据本发明的抗衰老组合物对光衰老有效。因此，根据本发明的抗衰老组合物不仅促进胶原纤维的合成，而且有效地抑制表皮-真皮结合部位的胶原纤维网络的损伤，从而在预防皮肤衰老和减少皮肤皱纹方面优异，因此，期待在各种剂型中的应用。如上所述，对本发明的特定部分进行了详细的说明，并且显而易见的是，这种特定技术仅是本领域技术人员的实施例，而不是限制本发明的范围。因此，本发明的实质范围将由所附权利要求及其等同物限定。当前第1页12