豆芋叶多糖的减肥用途的制作方法

文档序号:15584836发布日期:2018-10-02 18:15阅读:218来源:国知局

本发明涉及医药领域,具体涉及一种豆芋叶多糖的减肥用途。



背景技术:

豆芋(apiosamericanamedikus)原产于北美洲东部的加拿大至美国佛罗里达州的南部地区,属多年生豆科植物(蝶形花科亚科)。其可食用部分为地下块茎,且其蛋白质含量高于其他植物块茎,是一种既营养又有经济价值的作物,因而常被印第安人作为主食。豆芋自2009年国内引种成功,并被逐渐在富阳、金华、龙游、温州等地推广种植。研究表明豆芋不同部位(花、藤、叶、块茎)均含有丰富的游离氨基酸、可溶性蛋白、多糖、皂苷、黄酮、异黄酮、维生素c、维生素e和矿物质等成分。其中,豆芋叶的维生素e含量最高,同时还含有较高含量多糖、总皂苷和异黄酮,具有极大的开发潜力。

随着现代社会经济的高速发展,人民的生活水平显著提高,肥胖成为全球普遍流行的健康问题。据世界卫生组织在2011年3月报道表明,2008年全球有超过15亿成年人处于超重水平,其中至少5亿是肥胖。预计到2030年,美国42%的人口将存在肥胖问题。将超出美国现在人口3000万。与此相关的医疗成本增加将达近5500亿美元。而在国内据2010年发表的研究报告称,中国目前肥胖人口达3.25亿人,增幅超过美国、英国和澳大利亚。7岁以下儿童中有近五分之一超重,7%是肥胖儿童,比例远超欧洲国家。这个数字在未来20年还可能增加一倍。脂质代谢紊乱的常见并发症有脂肪肝、高血压、糖尿病、冠心病、脑卒中等。由此可见,脂质代谢紊乱已成为全球普遍的健康问题,预防和治疗脂质代谢紊乱已经成为21世纪的重要健康问题,如何预防与治疗脂质代谢紊乱及其相关并发症的发生已引起全世界学者的关注。因此,目前很多营养与保健食品的研究人员都非常关注有关肥胖和慢性疾病发生及预防的研究与话题,但对于豆芋叶多糖的减肥活性鲜有报道。



技术实现要素:

本发明目的在于提供一种豆芋叶多糖的减肥用途,为医学、食品科学等领域开发天然减肥产品提供新资源。

为解决上述技术问题,本发明提供一种豆芋叶多糖的减肥用途:

用于制备减肥食品或药物;

作为本发明豆芋叶多糖的减肥用途的改进:

所述减肥食品或药物为降低高脂饮食导致肥胖的体重的食品或药物。

作为本发明豆芋叶多糖的减肥用途的进一步改进:

所述减肥食品或药物为降低脂肪组织重量的食品或药物。

作为本发明豆芋叶多糖的减肥用途的进一步改进:

所述减肥食品或药物为降低血清中甘油三酯(tg)和总胆固醇(tc)含量的食品或药物。

作为本发明豆芋叶多糖的减肥用途的进一步改进:

所述减肥食品或药物为降低肝脏中甘油三酯(tg)和总胆固醇(tc)含量的食品或药物。

作为本发明豆芋叶多糖的减肥用途的进一步改进:

所述减肥食品或药物为降低血清中谷丙转氨酶(alt)和谷草转氨酶(ast)含量的食品或药物。

作为本发明豆芋叶多糖的减肥用途的进一步改进:

所述减肥食品或药物为调节肝脏中谷丙转氨酶(alt)和谷草转氨酶(ast)含量的食品或药物。

作为本发明豆芋叶多糖的减肥用途的进一步改进:

所述豆芋叶多糖的制备方法包括以下步骤:

①、豆芋叶多糖粗品的制备:

1.1、按照1g:8~12ml(较佳为1g:10ml)的料液比将豆芋叶和蒸馏水混合后先进行提取(提取的同时也实现了灭酶),然后打浆,再离心(4000r/min离心30min),取上清液抽滤并收集滤液;

1.2、将离心所得的滤渣代替豆芋叶按步骤1.1重复提取两次,合并三次滤液,旋蒸浓缩(至原体积1/4~1/6)得到浓缩液;

1.3、将步骤1.2所得浓缩液于搅拌条件下加入乙醇(纯乙醇)至乙醇最终浓度为85±5%,4±1℃下静置24±2h后收集沉淀,得豆芋叶粗多糖;

②、豆芋叶粗多糖的纯化,依次进行以下步骤:

a、活性炭脱色:

将豆芋叶粗多糖用蒸馏水溶解(蒸馏水的用量只需能保证豆芋叶粗多糖溶解即可),得豆芋叶粗多糖溶液,在豆芋叶粗多糖溶液中加入活性炭搅拌后过滤;

注:上述在豆芋叶粗多糖溶液中加入活性炭搅拌后过滤具体步骤为:豆芋叶粗多糖溶液中加入活性炭于80±10℃水浴锅中搅拌45±5min后过滤;豆芋叶粗多糖与活性炭的质量比为10~20:1;以所得的滤液替代上述豆芋叶粗多糖溶液重复上述加入活性炭及搅拌后过滤的脱色过程,直至最终所得的滤液呈无色,得脱色后多糖粗品溶液;

b、sevage法脱蛋白:

在脱色后多糖粗品溶液中加入sevage试剂,于磁力搅拌器中1000±100转/min转速搅拌30±5min,然后离心,除去位于下层的水层和位于上层的溶剂层之间的变性蛋白;所述sevage试剂由正丁醇:氯仿=1:4~6的体积比混合而得;

以所得的除去变性蛋白后的所得物替代上述脱色后多糖粗品溶液重复上述加入sevage试剂、磁力搅拌、离心,除去变性蛋白的脱蛋白过程5~8次,得除去蛋白质的多糖溶液;

将除去蛋白质的多糖溶液旋蒸浓缩直至为原体积的8~12%,将浓缩液于-70~-90℃预冻5~7h,然后用真空冷冻干燥机干燥成粉末状,得到豆芋叶多糖。

本发明公开了一种豆芋叶多糖的制备方法及其减肥用途,为医学、食品科学等领域开发天然减肥产品提供新资源。本发明中的豆芋叶多糖经高脂饮食诱导肥胖小鼠实验评价证明,可以显著降低肥胖小鼠体重,降低血清及肝脏中甘油三酯和总胆固醇含量,作用效果全面且显著。因此,本发明的豆芋叶多糖应用于制备减肥食品或药品,以治疗和预防肥胖及其相关慢性疾病发生。本发明的豆芋叶多糖的用法为口服,用量每次约150~250mg,每日三次。

本发明同现有技术相比,具有以下优点:

1.本发明首次发现豆芋叶多糖能缓解高脂饮食诱导肥胖小鼠体重的增加,降低肥胖小鼠血清和肝脏中甘油三酯和总胆固醇含量,表现出显著的减肥降脂效果,具有良好的开发前景。

2.本发明为豆芋叶多糖提供了新的医疗用途,拓展了一个新的应用领域。

附图说明

图1为本发明中不同浓度豆芋叶多糖对小鼠体重的影响。

图2为本发明中不同浓度豆芋叶多糖对小鼠肝脏中谷丙转氨酶(alt)含量的影响。

图3为本发明中不同浓度豆芋叶多糖对小鼠肝脏中谷草转氨酶(ast)含量的影响。

图4为本发明中不同浓度豆芋叶多糖对小鼠肝脏中甘油三酯(tg)含量的影响。

图5为本发明中不同浓度豆芋叶多糖对小鼠肝脏中总胆固醇(tc)含量的影响。

注:本发明图1~图5,表1~表2中:

lfd代表低脂对照组(饲喂含10%脂肪的低脂饲料);

hfd代表高脂对照组(饲喂含45%脂肪的高脂饲料);

hfd+l代表低剂量组(饲喂含45%脂肪的高脂饲料+灌胃200mg/(kg·d)豆芋叶多糖);

hfd+h代表高剂量组(饲喂含45%脂肪的高脂饲料+灌胃400mg/(kg·d)豆芋叶多糖)。

具体实施方式

下面结合具体实施例对本发明进行进一步描述,但本发明的保护范围并不仅限于此:

实施例1、豆芋叶多糖的减肥用途,如图1-图5所示,豆芋叶多糖具有显著的减肥降脂效果。豆芋叶多糖具体制备步骤如下:

(1)、豆芋叶多糖粗品的制备:

(1.1)、按照1g:10ml的料液比,称取豆芋叶100g加入1000ml蒸馏水,80℃水浴4h进行提取(提取的同时也实现了灭酶),然后打浆,再离心(4000r/min离心30min),将离心所得的上清液抽滤并收集滤液;

(1.2)、将步骤(1.1)离心所得的滤渣代替步骤(1.1)中豆芋叶,重复提取2次,合并三次滤液旋转蒸发浓缩直至为原体积的1/5,得浓缩液。

(1.3)、将步骤(1.2)所得浓缩液于搅拌条件下加入乙醇(纯乙醇)至乙醇最终浓度为85%,4℃下静置24h后收集沉淀,得豆芋叶粗多糖;

(2)、豆芋叶多糖粗品的的纯化,依次进行以下步骤:

a、活性炭脱色:

将豆芋叶粗多糖置于烧杯中用蒸馏水溶解(蒸馏水的用量只需能保证豆芋叶粗多糖溶解即可),得豆芋叶粗多糖溶液,在豆芋叶粗多糖溶液中加入活性炭于80±10℃水浴锅中搅拌45min后过滤;豆芋叶粗多糖与活性炭的质量比为15:1;

以所得的滤液替代上述豆芋叶粗多糖溶液重复上述加入活性炭及搅拌后过滤的脱色过程3次,此时最终所得的滤液呈无色,得脱色后多糖粗品溶液;

b、sevage法脱蛋白:

按照4:1的体积比,在400ml脱色后多糖粗品溶液中加入100mlsevage试剂,于磁力搅拌器中1000转/min转速搅拌30min,然后离心,通过分液漏斗除去位于下层的水层和位于上层的溶剂层之间的变性蛋白;所述sevage试剂由正丁醇:氯仿=1:5的体积比混合而得;

以所得的除去变性蛋白后的所得物替代上述脱色后多糖粗品溶液重复上述加入sevage试剂、剧烈振荡、离心,除去变性蛋白的脱蛋白过程5次,得除去蛋白质的多糖溶液;

将除去蛋白质的多糖溶液旋蒸浓缩得到浓缩液(约为原体积的10%),将浓缩液在-80℃预冻6h,然后用真空冷冻干燥机48h(真空冷冻干燥机设定的工艺参数为-40℃,1.2pa)将其干燥成粉末状(含水率≤0.1%),得到豆芋叶多糖。

用上述方法制备获得的豆芋叶多糖进行干预由高脂饮食诱导的c57bl/6肥胖小鼠,观察其体重变化并检测血清和肝脏中甘油三脂和胆固醇含量变化,具体步骤为:

1、实验动物分组与处理;

50只雄性c57bl/6小鼠放入动物房内喂养,饲养环境为12h光暗交替,温度为23±3℃,相对湿度为50%。适应性喂养1周后,将小鼠随机分为5组,每组10只。

组别设计分别为:低脂对照组(lfd),饲喂含10%脂肪的低脂饲料;高脂对照组(hfd),饲喂含45%脂肪的高脂饲料;低剂量豆芋叶多糖组(hfd+l),饲喂含45%脂肪的高脂饲料并灌胃200mg/(kg·d)豆芋叶多糖;高剂量豆芋叶多糖组hfd+h),饲喂含45%脂肪的高脂饲料并灌胃400mg/(kg·d)豆芋叶多糖。实验期间小鼠自由进食和饮水,实验持续12周。

2、记录豆芋叶多糖对肥胖小鼠体重的影响:

实验期间每周记录体重和摄食量。根据图1可以发现,豆芋叶多糖干预12周后,同高脂对照组相比,低剂量组和高剂量组均能缓解高脂饮食诱导的c57bl/6小鼠体重增加。

实施例2、豆芋叶多糖对肥胖小鼠脂肪、肝脏等脏器指数的影响;

将实施例1中灌胃12周后的小鼠禁食24h,称量体重,眼眶取血后将小鼠颈椎脱臼处死,取肾周及附睾周围脂肪,快速摘取心、肝、脾、肾、棕色脂肪等组织并记录重量,具体数据如表1所示。

表1豆芋叶多糖干预对小鼠脏器指数的影响

根据表1可知,豆芋叶多糖干预能够缓解高脂饮食诱导的肥胖小鼠肝脏指数下降,同时不同剂量豆芋叶多糖干预均可以显著降低肥胖小鼠体内睾周脂肪和肾周脂肪指数,高剂量豆芋叶多糖干预可显著提高肥胖小鼠脾脏指数,同高脂对照组相比豆芋叶多糖干预对肝脏、棕色脂肪、心脏、肾脏、胰腺指数均无显著影响。以上结果表明豆芋叶多糖能够显著改善高脂饮食诱导肥胖小鼠体内脂肪指数和脾脏指数的变化。

实施例3、豆芋叶多糖对肥胖小鼠血清甘油三酯、总胆固醇、谷丙转氨酶和谷草转氨酶含量的影响;

将实施例1中灌胃12周后的小鼠禁食24h,眼眶取血后将小鼠颈椎脱臼处死,血液样品1500转离心15min,取血清保存并采用东芝全自动生化分析仪对血清中甘油三酯和总胆固醇含量进行测定,具体数据如表2所示。

表2豆芋叶多糖干预对小鼠血清指标的影响

根据表2可知,高剂量的豆芋叶多糖干预能够降低高脂饮食诱导的肥胖小鼠血清中总胆固醇含量,同时低剂量组均可以显著降低肥胖小鼠血清中甘油三酯、总胆固醇的含量。高低两个剂量组均可以显著降低肥胖小鼠血清中谷丙转氨酶和谷草转氨酶的含量。以上结果表明豆芋叶多糖能够改善高脂饮食诱导肥胖小鼠血清中甘油三酯、总胆固醇、谷丙转氨酶和谷草转氨酶含量的变化。

实施例4、豆芋叶多糖对肥胖小鼠肝脏谷丙转氨酶和谷草转氨酶含量的影响;

将实施例1中灌胃12周后的小鼠禁食24h,称量体重,眼眶取血后将小鼠颈椎脱臼处死,取小鼠肝脏按照谷丙转氨酶含量测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)和谷草转氨酶含量测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)说明书进行测定。

根据图2和图3可知,同低脂对照组相比高脂组小鼠肝脏中谷丙转氨酶和谷草转氨酶的含量显著增加,而高剂量的豆芋叶多糖干预后均能显著改善由高脂饮食造成的肝脏中转氨酶含量的增加,以上结果表明豆芋叶多糖具有显著的护肝功效。

实施例5、豆芋叶多糖对肥胖小鼠肝脏甘油三酯和总胆固醇含量的影响;

将实施例1中灌胃12周后的小鼠禁食24h,称量体重,眼眶取血后将小鼠颈椎脱臼处死,取小鼠肝脏按照甘油三脂含量测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)和总胆固醇含量测定试剂盒(南京建成生物工程研究所)说明书进行测定。

根据图4和图5可知,同低脂对照组相比高脂组小鼠肝脏中甘油三酯和总胆固醇含量均显著增加,而不同剂量的豆芋叶多糖干预后均能显著改善由高脂饮食造成的肝脏中总胆固醇的增加,高剂量的豆芋叶多糖干预后能够显著降低肝脏中甘油三酯的积累。以上结果表明豆芋叶多糖能够有效的缓解肝脏中甘油三酯和总胆固醇的积累。

综上本发明提出一种豆芋叶多糖的减肥用途,为医学、食品科学等领域开发天然减肥产品提供新资源。同时涉及豆芋叶多糖在制备减肥产品中的应用。以上列举的仅为本发明的实施的若干实例。显然,本发明不限于以上实施例,还可以有许多变形。本领域的普通技术人员能从本发明公开的内容直接导出或联想到的所有变形,均应认为是本发明的保护范围。

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