本发明涉及一种中药材有效成分的用途，具体地说涉及白及苷在制备止血药物方面的应用。
背景技术：
出血是诸多内、外科疾病的重要临床症状，且多为危、急、重症。出血常伴有疼痛及炎症反应，过多时会导致休克，甚至危及生命。因此，止血是处理临床出血性重症的必要步骤和重要手段。止血是一个复杂的生理过程，主要受血液凝固、血小板聚集和血管收缩等重要因素影响。当血管损伤发生出血，组织自身的凝血机制充分表现出来，凝血酶原激活物活性增强，形成增多，继而凝血酶原转变为凝血酶，凝血酶再催化纤维蛋白原转变为纤维蛋白，同时也使机体产生对抗纤维蛋白溶解过程的因素。
凡是能够促使出血停止的药物均称为止血药，止血药主要是通过增强体内凝血因素或抑制凝因素，促使凝血，从而达到止血的目的。临床上使用的天然止血药物主要通过缩短凝血时间、促进局部血管收缩、增强毛细血管抵抗力并降低通透性、抑制纤溶过程、增加血小板数目、缩短凝血酶生成时间、增强血小板第三因子活性等作用达到止血的功效。目前，常用的多数止血药物面临着成分复杂、止血时间长、止血效果不明显、易引发过度凝血等其它生理效应、生物安全性差等诸多缺陷，不能完全满足临床需要。因此，开发成分单一、使用安全、效果突出、具有极高的临床应用价值和巨大的市场需求的止血药物，成为当前药物开发的当务之急。
技术实现要素：
鉴于现有技术所存在的问题，本发明提供白及苷在制备止血药物方面的应用，即在制药中的新应用。
所述止血药物包含有其他药物赋形剂或载体。
所述止血药物的药物剂型包括注射剂、口服液、散剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、滴丸剂、缓释剂和外用贴剂。
所述片剂制备方法：取白及苷粉碎过筛，加入淀粉、麦芽糖等药用辅料后采用湿法制粒，干燥整粒后加入滑石粉等润滑剂，按常规方法压片，即得止血片。
给药方式为口服给药、注射给药或外用。
白及苷在制备外科手术中止血药物中的应用。
与现有技术相比，本发明的有益效果是：本发明的白及苷是从具有多年临床应用历史、安全有效的白及药材中分离得到一种单体化合物(militarine)，系纯天然成分，经药效验证其具有明显止血效果，且正常情况下不会产生凝血作用，不会造成人体过敏等不良反应，安全、低毒，可工业化生产，具有良好的应用前景和较高的临床应用价值。
附图说明
图1为白及苷对家兔体外凝血时间的影响(means±s,n＝10)，与空白组相比，*p<0.05,**p<0.01。
图2为白及苷对出血模型小鼠毛细管凝血时间(ct)、断尾出血时间(bt)的影响(means±s,n＝10)，与空白组相比，#p<0.05,##p<0.01；与肝素钠组相比，*p<0.05,**p<0.01；
图3为白及苷对正常小鼠毛细管凝血时间(ct)、断尾出血时间(bt)的影响(means±s,n＝10)，与空白组相比，#p<0.05,##p<0.01；与肝素钠组相比，*p<0.05,**p<0.01。
具体实施方式
为了使本领域的技术人员更好的理解本发明的技术方案，下面结合具体实施方式对本发明所述技术方案进行清楚、完整地描述。基于本发明中的实施例，本领域技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
本实施例中所采用的白及苷是从植物白及中提取或者通过合成获得，其分子式为c34h46o17，化学名为双[4-(β-d-吡喃葡萄糖氧)苄基]-2-异丁基苹果酸酯。其化学结构为：
在出血状态下，白及苷具有显著的止血作用，在使用剂量为云南白药的十分之一时就能取得与其止血效果相当的止血药效；最重要的是，在正常状态下，白及苷并不表现出止血作用，而是具有一定的活血作用，这对避免可能不恰当使用止血药物具有重要意义；白及苷为天然活性物质，不会造成人体过敏等不良反应，安全无毒，可工业化生产，具有很好的应用前景。
止血药物包含治疗和/或预防有效量的白及苷以及任选的药学可接受的赋形剂。上述药学可接受的赋形剂可以是药物制剂领域中任何常规的赋形剂，包括药学领域常规的稀释剂、填充剂、粘合剂、湿润剂、崩解剂、吸收促进剂、表面活性剂、吸附载体和润滑剂、载体等，必要时，还可以在药物组合物中加入香味剂、防腐剂和甜味剂等。用于特定给药方式或疾病类型的、制备方法合理可行的特定赋形剂也包含在此范围内。
止血药物可以制成注射剂、口服液、散剂、颗粒剂、胶囊剂、片剂、滴丸剂、缓释剂和各种外用贴剂等多种形式。上述各种剂型的药物均可以按照药学领域的常规方法制备。
给药方式为口服给药、注射给药或外用。
利用白及苷制备的止血药物中片剂和注射剂中的冻干粉针的配方和制备方法具体如下：
实施例1白及苷止血药物的药物剂型中片剂的配方和制备方法
白及苷止血药物中，所述片剂由以下原料制成：白及苷10g、淀粉20g、麦芽糖20g、滑石粉适量、10％淀粉糊适量、注射用水适量，共制成100片。
所述片剂制备方法：取白及苷粉碎过筛，加入淀粉、麦芽糖等药用辅料后采用湿法制粒，干燥整粒后加入滑石粉等润滑剂，按常规方法压片，即得本发明止血片。
上述制备方法具体为取白及苷、淀粉、麦芽糖分别过100目筛，将三者均匀混合后采用湿法制粒，加入适量10％淀粉浆制软材，过16目筛制粒，将湿颗粒在40～60℃干燥2h后，16目筛网整粒，按重量加入2～4％滑石粉作为润滑剂，按常规方法压片，即得。
实施例2白及苷止血药物的药物剂型中冻干粉针注射剂的配方和制备方法
白及苷止血药物中，冻干粉针注射剂由以下原料制成：白及苷100g、甘露醇50g、注射用水1000ml。
所述冻干粉针注射剂制备方法：将上述的甘露醇溶解于注射用水中，置于恒温水浴磁力搅拌器中搅拌，搅拌温度为40～50℃，至全部溶解得到甘露醇溶液。将甘露醇溶液降温至20℃再加入白及苷，保持20℃温度继续搅拌至全部溶解，用适量注射用水定容，调节溶液的ph值至7.0左右。上述溶液分别通过0.45μm和0.22μm滤膜循环过滤，时间30min。取样检验，确定装量并灌入经清洗和消毒的西林瓶中，半压塞后放入真空冷冻干燥机。开启机器，保持真空度在10pa以下，冷肼温度低于-40℃，维持12h后出箱轧盖，既得。
为说明本发明白及苷在制备止血药物方面的应用取得良好的效果，下面结合具体实验对本发明所取得的效果做进一步说明。
实施例3白及苷对家兔凝血时间的影响
(1)实验目的：采用家兔体外凝血实验，测定凝血时间，来判断白及苷止血的效果。
(2)实验对象：家兔
(3)动物分组及给药：取云南白药10mg，白及苷1mg，加两滴dmso溶解，置于1mlepp管中，加pbs(ph＝7.4)溶液至1ml，空白组为pbs(ph＝7.4)。各组取0.2ml溶液置于直径1.5cm，长10cm的玻璃管中，置37℃水浴箱中水浴2min。于家兔右颈总动脉抽取10ml动脉血，分别加入2ml兔血在上述试管中，混合均匀后水浴，每隔10s倾斜玻璃管，至血液凝结不流动，记录凝血时间，每组测量6个样本。
(4)实验结果：根据图1结果可知，与空白组比较，云南白药组与白及苷组均快速形成血凝块。云南白药组与白及苷组凝血时间与空白组相比，差异有统计学意义(p<0.05)，均表现为止血作用。证明白及苷在1/10云南白药剂量下，与云南白药的止血活性相当，具有较为理想的开发潜力。
实施例4白及苷对出血模型小鼠毛细管凝血时间(ct)、断尾出血时间(bt)的影响
(1)实验目的：考察不同浓度白及苷对全身肝素化出血模型小鼠毛细管凝血时间(ct)、断尾出血时间(bt)的影响。
(2)实验对象：全身肝素化出血模型小鼠
(3)动物分组及给药：取km小鼠60只(♀♂各半)，随机分为6组，每组10只。分为空白对照组、肝素化模型组、硫酸鱼精蛋白组(1.6g·kg-1)、白及苷高(80mg·kg-1)、中(40mg·kg-1)、低(20mg·kg-1)剂量组。各组小鼠每天尾静脉注射相应药物1次，空白组给予生理盐水10ml·kg-1，连续5天。第5天，灌胃给药60min后，除空白组外其余各组均尾静脉注射肝素钠，3.2u/只，15min后用手术刀于距小鼠尾尖0.5cm处割断，待血液自行溢出时开始计时，每隔30s用滤纸吸附血滴一次，直至血液自然停止(滤纸吸时无血迹)。以人工形成创面到出血停止所经时间作为小鼠出血时间(bt)。同样分组及给药的小鼠，15min后用内径1mm，长10cm的毛细玻璃管从小鼠内眼球后静脉丛取血，待血液充满玻璃管时开始计时，接着每隔30s折断两端毛细玻璃管(约0.5cm)，并缓慢向左右拉开，观察折断处有无血凝丝出现，从血液充满玻璃管开始至出现血凝丝所经历的时间作为小鼠凝血时间(ct)。
(4)实验结果：肝素钠是一种比较重要的抗凝血药，全身肝素化小鼠是实验中较为常用的一种出血模型。小鼠断尾出血时间(bt)和毛细管凝血时间(ct)实验是一种比较经典的用于止血、促凝血中药的活性筛选方法，可综合反映参与止血过程的各种因素如血管、血小板、凝血系统等的功能。实验结果如图2所示，采用统计学软件spss17.0处理，所有数据经one-wayanova统计分析结果表明：在20、40和80mg/kg三个剂量下，白及苷均能显著缩短全身肝素化小鼠的bt和ct值(p<0.01或0.01)(三个剂量对肝素钠所延长的bt的缩短率分别为39％、47％和57％；对肝素钠所延长的ct的缩短率分别为23％、81％和100％)。实验结果说明白及苷给药组均表现出不同程度缩短肝素化小鼠出血时间和凝血时间的作用，其中以高剂量给药组的止血作用最为显著，对病理性出血小鼠具有明显的促凝作用。此外，实验表明，白及苷在160mg/kg以内对全身肝素化小鼠无不良反应，说明白及苷毒性小，安全浓度较高，具有很好的安全性。
实施例5白及苷对正常小鼠凝血毛细管凝血时间(ct)、断尾出血时间(bt)的影响
(1)实验目的：通过考察白及苷对正常小鼠毛细管凝血时间(ct)、断尾出血时间(bt)的影响，评价白及苷对正常小鼠凝血功能的影响。
(2)实验对象：正常小鼠
(3)动物分组及给药：取km小鼠60只(♀♂各半)，随机分为6组，每组10只。分为空白对照组、止血阳性药酚磺乙胺组(40mg·kg-1)、活血阳性药阿司匹林组(40mg·kg-1)、白及苷高(80mg·kg-1)、中(40mg·kg-1)、低(20mg·kg-1)剂量组。各组小鼠每天尾静脉注射相应药物1次，空白组给予生理盐水10ml·kg-1，连续5天。第5天，注射给药60min后用手术刀于距小鼠尾尖0.5cm处割断，待血液自行溢出时开始计时，每隔30s用滤纸吸附血滴一次，直至血液自然停止(滤纸吸时无血迹)。以人工形成创面到出血停止所经时间作为小鼠出血时间(bt)。分组及给药方法同上。于第5天灌胃给药60min后，用内径1mm，长10cm的毛细玻璃管从小鼠内眼球后静脉丛取血，待血液充满玻璃管时开始计时，接着每隔30s折断两端毛细玻璃管(约0.5cm)，并缓慢向左右拉开，观察折断处有无血凝丝出现，从血液充满玻璃管开始至出现血凝丝所经历的时间作为小鼠凝血时间(ct)。
(4)实验结果：由图3可知，与空白组相比，小鼠尾静脉注射白及苷单体后可剂量依赖性增加小鼠的出血时间(bt)和凝血时间(ct)(p<0.5或p<0.01)，在20、40和80mg/kg剂量下bt延长率分别21％、56％和77％，ct延长率分别为9％、21％和26％，表明白及苷对正常小鼠具有明显的抗凝作用。
综合上述实验结论，证实了白及苷对体外出血和肝素造成的小鼠体内出血模型均具有明显的止血作用，同时，白及苷对正常小鼠有抗凝血作用，在止血过程中不会产生过度促凝作用。
仅为本发明的较佳实施例而已，并不用以限制本发明，凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围内。