用于减少身体脂肪沉积的技术及组合物制剂与应用的制作方法

本发明涉及化妆品技术领域，具体地说，是一种用于减少身体脂肪沉积的技术及组合物制剂与应用。

背景技术：

减脂一直是广大女性追求的目标，肥胖不仅仅是健康的危险因素之一，同时也影响外表的美观，尤其是面部的脂肪沉积。目前市面上用于脂肪消融的针剂，由于是侵入式具有一定的副作用和感染机会。而对于外用涂抹具有一定的减脂效果的化合物，往往出现维持时间短，易于反弹等缺点。因此添加多种化合物改进组合物的作用效力，起到协同效应，延长减脂效果，是非常有价值的。

中国专利文献cn104906028(申请号201510381658.6)公开了一种具有改善皮肤问题的发酵组合物及其应用，及以该发酵物组合物为主体的化妆品及其应用，其原料中含有cfte(中草药含有多酚的水果、茶叶、食用菌)培养基，和ets(食用菌、茶叶、大豆)发酵物种子液。

中国专利文献cn105434209(申请号201510298514.4)公开了一种美容祛皱纹收紧塑型的组合物及其制备方法，所述组合物由绿茶提取物，莲叶提取物，朝鲜当归提取物，金缕梅提取液，马齿苋提取液，酵母提取物，射干提取物，牡丹花根提取物，月见草籽油，七叶树皂甙，积雪草总苷，水解蚕丝蛋白，弹力蛋白，大豆水解蛋白，胶原蛋白，阿尔法-硫辛酸，辅酶q10，小球藻，聚谷氨酸，纳托胶，神经酰胺3，霍霍巴酯，角鲨烷，透明质酸，氢化聚葵烯，左旋乳酸钠，维生素c乙基醚，1.3丁二醇，水等原料制成。能够营养皮肤、促进脸部血液循环，防止皮肤水分散失，长期使用能够产生消除皱纹，消褪黑色素的效果。

目前本发明涉及的一种用于减少身体脂肪沉积的技术及组合物制剂与应用未见文献报道。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种用于减少身体脂肪沉积的技术及组合物制剂与应用。

本发明的第一方面，提供一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸1-200份、脂代谢相关酶2-100份，三羧酸循环相关酶1-200份。

优选的，所述的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸1-30份、脂代谢相关酶2-20份、三羧酸循环相关酶1-30份。

优选的，所述的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸15-20份、脂代谢相关酶10-15份、三羧酸循环相关酶20-25份。

优选的，所述的脂代谢相关酶选自：甘油激酶、甘油-3-磷酸脱氢酶、脂肪酸α-羟化酶、肝脂酶、脂酰辅酶a合酶、脂酰辅酶a脱氢酶、烯酰辅酶a水合酶、肉碱-脂酰转移酶i、激素敏感脂酶、羟甲基戊二酸单酰基辅酶a、硫解酶中的一种或两种以上。

优选的，所述的三羧酸循环相关酶选自柠檬酸合酶、乌头酸酶、异柠檬酸脱氢酶、琥珀酰辅酶a合成酶、琥珀酸脱氢酶、延胡索酸酶、苹果酸脱氢酶、谷胱甘肽还原酶中的一种或两种以上。

优选的，所述的组合物，还包括柠檬酸2-10份。柠檬酸属于果酸的一种，主要作用是加快角质更新，常用于乳液、乳霜、洗发精、美白用品、抗老化用品、青春痘用品等。角质的更新有助于皮肤的中黑色素的剥落，毛孔的收细，黑头的溶解等。进一步优选的，柠檬酸5-6份。

优选的，所述的组合物，还包括阿魏酸2-10份。阿魏酸能清除自由基，促进清除自由基的酶的产生，增加谷胱甘肽转硫酶和醌还原酶的活性，并抑制酪氨酸酶活性，来调节人体生理机能。同时在人体中可起到健美和保护皮肤的作用。进一步优选的，阿魏酸5-8份。

优选的，所述的组合物，还包括茶多酚2-10份。茶多酚(teapolyphenols)是茶叶中多酚类物质的总称，包括黄烷醇类、花色苷类、黄酮类、黄酮醇类和酚酸类等。茶多酚有清除自由基的作用，可抑制皮肤线粒体中脂氧合酶和脂质过氧化作用，从而具有抗衰老效应。进一步优选的，茶多酚5-6份。

优选的，所述的组合物，还包括琥珀酸2-10份。琥珀酸医药工业中可用于生产磺胺药、维生素a、维生素b等抗痉挛剂、松痰剂、利尿剂和止血药物。还可用作润滑剂和表面活性剂的原料。进一步优选的，琥珀酸5-6份。

优选的，所述的组合物，还包括延胡索酸2-10份。延胡索酸酶(反丁烯二酸酶)fumarase正式名称为延胡索酸水化酶(fumaratehydra－tase)，是催化延胡索酸+h2o→l-苹果酸可逆进行相互转变反应的酶。进一步优选的，延胡索酸酶6-8份。

优选的，所述的组合物，还包括维生素e2-10份。维生素e具有延缓衰老，减少皱纹的产生，减少细胞耗氧量，抗氧化保护机体细胞免受自由基的毒害，改善脂质代谢的作用。进一步优选的，维生素e5-8份。

优选的，所述的组合物，还包括清蛋白2-10份。可选择人血白蛋白、卵白蛋白、血清白蛋白、牛血清白蛋白、犬白蛋白等。清蛋白能维持血浆胶体渗透压的恒定；能够促进难溶性的小分子有机物和无机离子可逆地结合形成易溶性的复合物，成为这些物质在血液循环中的运输形式；具有黏性、胶质性，能够起到解毒的作用。清蛋白是蛋白和化合物运输的载体,可以促进脂肪降解产物的运输,促进脂肪降解产物到达目标组织进行降解,进一步优选的，血清白蛋白8-10份。

优选的，所述的组合物，还包括磷脂酰胆碱2-10份。磷脂酰胆碱(1,2-diacyl-sn-glycero-3-phosphocholine)是一种两性分子，由亲水的头部和疏水的尾部组成。亦称卵磷脂。磷脂是细胞膜和各种细胞器(线粒体、内质网、细胞核、高尔基器、叶绿体等)膜的重要组分，几乎细胞所含有的全部磷脂都集中在生物膜中。生物膜的许多特性，如作为膜内外物质的通透性屏障，膜内外物质的交换，信息传递，神经脉冲的传导等都与磷脂和其它膜脂有关。进一步优选的，磷脂酰胆碱8-10份。

优选的，所述的组合物，还包括亚油酸2-10份。亚油酸是不饱和脂肪酸的一种，具有降低血脂、软化血管、降低血压、促进微循环的作用。进一步优选的，亚油酸5-6份。

优选的，所述的组合物，还包括辅酶a2-10份。辅酶a(coa、coash或hscoa)，主要参与脂肪酸以及丙酮酸的代谢。进一步优选的，辅酶a3-5份。

优选的，所述的组合物，还包括camp2-10份。环磷酸腺苷(camp)是细胞内参与调节物质代谢和生物学功能的重要物质，是生命信息传递的“第二信使”，对脂肪代谢也起着重要的作用。进一步优选的，camp2-5份。

本发明的第二方面，提供一种以如上任一所述的组合物作为活性成分的身体导入制剂。

所述的化组合物作为唯一活性成分占制剂质量百分比0.01-99.9％，优选为0.1-10％。

优选的，所述的腹部导入制剂为搽剂、涂剂、涂抹剂、凝胶剂、冻干注射剂等。

优选的，所述的腹部导入制剂中溶剂可采用生理盐水、去离子水或调配液，调配液配方为：水、甘露糖醇、1,2-己二醇、透明质酸。

本发明的第三方面，提供一种如上任一项所述的组合物在制备减少身体脂肪沉积的化妆品中的应用。

本发明优点在于：

1、本发明的用于减少身体脂肪沉积的化妆品组合物具有很好的减脂效果。

2、本发明的化妆品组合物无需侵入式注射，反弹小，维持时间长的优点。

附图说明

图1是肥胖小鼠使用本发明组合物、国外同类产品溶脂针后的体重变化比较；将nod肥胖小鼠24只饲养增重45g后，随机分3组，给药施药：1、法国进口溶脂针组(剂量0.1ml/次)，品牌cellulyse，规格10ml/支。2、瑞士进口溶脂针品牌swisshehl组(剂量0.1ml/次)，规格10ml/支，3、实施例1组合物组(剂量0.1mg/次)，每支10ml/支。第一次注射后，间隔24h连续注射第二次，间隔48小时后注射第三次，一周内完成三次注射。每天观察并记录体重变化，取每组小鼠体重平均值作图(p<0.05)。

图2是体外实验检测本发明组合物对脂肪细胞内脂肪的溶脂活性；

实验分组：组1.rpmi1640组；组2.国外同类产品组(法国进口溶脂针(剂量0.1ml/次)，品牌cellulyse，规格10ml/支，溶媒为生理盐水)；组3.国外同类产品组(瑞士进口溶脂针(剂量0.1ml/次)，品牌swisshehl组，规格10ml/支，溶媒为生理盐水)；组4.溶媒组(溶媒为生理盐水)；组5.实施例1组合物组。

将人原代脂肪细胞按约8500/孔的密度铺板，待12小时后贴壁牢固后，按以上分5组进行加样，每组3个复孔，培养48小时后，对细胞进行油红o染色，观察细胞形态变化，用异丙醇处理染色后的细胞，在490nm波长下测定吸光度(a)值，将组1的(a)值作为对照组，计算脂肪细胞内相对脂肪含量。

图3是本发明组合物对正常细胞毒性评价结果。

人原代皮肤上皮细胞铺板与96孔板，每孔8000个细胞，培养贴壁12小时后，分别是对照组和加入实施例1化妆品组合物(1)浓度梯度为2、4、10、40mg/ml，同时加入等体积rmpi1640培养液作为空白对照组，培养48小时后，使用cck8试剂盒，测量细胞增殖和生长活性，将空白对照组设为1，实施例1设为组1，计算存活率。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明提供的具体实施方式作详细说明。实施例中所用的产品均为市售原料。

实施例1

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸1份、甘油激酶2份、柠檬酸合酶1份。

实施例2

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸5份、甘油-3-磷酸脱氢酶4份、乌头酸酶5份。

实施例3

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸10份、脂肪酸α-羟化酶6份、异柠檬酸脱氢酶10份。

实施例4

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸15份、肝脂酶8份、琥珀酰辅酶a合成酶15份。

实施例5

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸20份、脂酰辅酶a合酶10份、琥珀酸脱氢酶20份。

实施例6

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸25份、脂酰辅酶a脱氢酶12份、延胡索酸酶25份。

实施例7

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸30份、烯酰辅酶a水合酶15份、柠檬酸合酶30份。

实施例8

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸4份、肉碱-脂酰转移酶i16份、苹果酸脱氢酶3份。

实施例9

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸6份、激素敏感脂酶18份、谷胱甘肽还原酶6份。

实施例10

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸12份、羟甲基戊二酸单酰基辅酶a20份、柠檬酸合酶8份。

实施例11

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸16份、硫解酶10份、乌头酸酶12份。

实施例12

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸18份、肝脂酶14份、异柠檬酸脱氢酶18份、柠檬酸10份。

实施例13

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸1份、肝脂酶2份、柠檬酸合酶1份、阿魏酸2份。

实施例14

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸5份、甘油激酶4份、乌头酸酶5份、茶多酚2份。

实施例15

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸10份、甘油-3-磷酸脱氢酶6份、异柠檬酸脱氢酶10份、琥珀酸2份。

实施例16

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸15份、脂肪酸α-羟化酶8份、琥珀酰辅酶a合成酶15份、延胡索酸10份。

实施例17

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸20份、脂酰辅酶a合酶10份、琥珀酸脱氢酶20份、维生素e10份。

实施例18

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸25份、脂酰辅酶a脱氢酶12份、延胡索酸酶25份、清蛋白8份。

实施例19

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸30份、烯酰辅酶a水合酶15份、柠檬酸合酶30份、磷脂酰胆碱2份。

实施例20

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸4份、肉碱-脂酰转移酶i16份、苹果酸脱氢酶3份、亚油酸2份。

实施例21

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸6份、激素敏感脂酶18份、谷胱甘肽还原酶6份、辅酶a2份。

实施例22

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸12份、羟甲基戊二酸单酰基辅酶a20份、柠檬酸合酶8份、camp2份。

实施例23

一种用于减少身体脂肪沉积的组合物，包括以下重量份的组份：去氧胆酸200份、羟甲基戊二酸单酰基辅酶a100份、柠檬酸合酶200份。

实施例24：本发明的组合物对小鼠体重变化的影响试验

实验方法

1.1动物

nod肥胖小鼠24只(南京模式动物中心)，雌性，体重35-40g。

1.2动物实验分组

待小鼠体重增加至45g，随机分3组，给药施药：

组1、法国进口溶脂针组(剂量0.1ml/次)，品牌cellulyse，规格10ml/支。

组2、瑞士进口溶脂针品牌swisshehl组(剂量0.1ml/次)，规格10ml/支。

组3、实施例1组合物组(剂量0.1mg/次)，每支10ml/支。均采用皮下脂肪层注射，第一次注射后，间隔24h连续注射第二次，间隔48小时后注射第三次，一周内完成三次注射。每天观察并记录体重变化，取每组小鼠体重平均值作图(p<0.05)。

1.3观测指标：称重，观测体重变化

结果如图1所示，肥胖小鼠用此化妆品后，与溶脂针组1比较，实施例1组合物组体重显著降低，且下降幅度更快(p<0.05)。即便与溶脂针组2相比较，体重下降幅度和反弹强度有显著差异(p<0.05)，表明实施例1组合物能取得非常明显减脂的作用。

实施例25：本发明的化妆品组合物的溶脂活性

实验方法

1.1细胞

人原代脂肪细胞

1.2细胞实验分组

组1.rpmi1640组

组2.国外同类产品组(法国进口溶脂针(剂量0.1ml/次)，品牌cellulyse，规格10ml/支，溶媒为生理盐水)

组3.国外同类产品组(瑞士进口溶脂针(剂量0.1ml/次)，品牌swisshehl组，规格10ml/支，溶媒为生理盐水)

组4.溶媒组(溶媒为生理盐水)

组5.实施例1组合物组

将人原代脂肪细胞按约8500/孔的密度铺板，待12小时后贴壁牢固后，按以上分5组进行加样，每组3个复孔，培养48小时后，对细胞进行油红o染色，观察细胞形态变化，用异丙醇处理染色后的细胞，在490nm波长下测定吸光度(a)值，将组1的(a)值作为对照组，计算脂肪细胞内相对脂肪含量。

1.3体外实验检测实施例1组合物对脂肪细胞内脂肪的溶脂效果。

结果如图2所示，实施例1组合物组作用人原代脂肪细胞48h后，与溶脂针(法国进口溶脂针(剂量0.1ml/次)，品牌cellulyse，规格10ml/支)比较，脂肪细胞明显减小，脂肪含量显著降低，且下降幅度更快(p<0.05)。即便与溶脂针组(瑞士进口溶脂针(剂量0.1ml/次)，品牌swisshehl组，规格10ml/支)比，脂肪细胞内脂肪的下降幅度有显著差异(p<0.05)，表明实施例1组合物组在体外对脂肪细胞具有非常明显的溶脂效果。

实施例26：本发明的化妆品组合物对正常细胞的毒性试验

实验方法

1.1细胞

人原代皮肤上皮细胞

1.2实施例1组合物对正常细胞毒性评价

我们将实施例1组合物加入体外培养的原代皮肤上皮细胞，培养48小时后，用cck8方法检测细胞的活力，组1为培养基rpmi1640对照组；组2为实施例1复合物组。

结果如图3所示，实施例1组合物组的细胞存活率与对照组相比，对细胞未见有明显毒性(p＞0.05)；说明本发明的化妆品组合物的组分是安全有效的。

实施例27：本发明的化妆品组合物用于身体脂肪降解的临床试验

随机选取50名中青年女性受试者，试验时，首先测量受试者体重、大腿围和上臂围，作为体验前数据，然后将本品涂抹在受试者大腿处和上臂处，然后按摩或借助超声导入设备，每次需时50-80min，每个3天一次，3次为一个疗程，一个疗程做完之后，测量受试者体重、大腿围和上臂围，后期为期1年的随访过程中，分别在体验后第1、3、6、和12个月测量受试者体重、大腿围和上臂围，将50名受试者的相关数据在相对应阶段得到的数据进行汇总求平均值，结果如下表1-3。

由表1-3数据可以看出，本发明的化妆品组合物具有显著的减少身体脂肪沉积的效果。

表1受试者体重、上臂围、大腿围实验结果

表225名女性受试者体重和腰围实验结果(女性腰围正常为65cm)

表325名男性受试者体重和腰围实验结果

以上已对本发明创造的较佳实施例进行了具体说明，但本发明创造并不限于所述实施例，熟悉本领域的技术人员在不违背本发明创造精神的前提下还可做出种种的等同的变型或替换，这些等同的变型或替换均包含在本申请权利要求所限定的范围内。