本发明属于阴道栓剂领域，涉及一种阴道膨胀栓及其制备方法，具体涉及一种咪喹莫特阴道膨胀栓及其制备方法。
背景技术：
尖锐湿疣是由人乳头瘤病毒(hpv)感染所致的以肛门生殖器部位增生性损害为主要表现的性传播疾病，严重危害女性健康。hpv有不同的亚型，最常引起尖锐湿疣的有hpv6、hpv11，在人体温暖潮湿的条件下容易生存繁殖，故生殖器及肛周是最易发生感染的部位。栓剂作为一种常用的剂型，与其他剂型比具有以下优点：1)能够避免口服药物的首过效应，2)栓剂塞入腔道后能够与腔道粘膜表面接触，在体温时很快软化、熔化或溶解，与腔道分泌液混合，有效增加接触面积，3)药物不受或少受胃肠道ph值或酶的破坏。
咪喹莫特是一种人工合成的非核苷异环咪唑喹啉胺类药物，属于小分子免疫调节剂，现有剂型局限于咪喹莫特乳膏，是美国食品药品监督管理局批准上市的第一个外用治疗生殖器尖锐湿疣的免疫调节剂，由于咪喹莫特具有免疫调节、抗肿瘤、抗血管和纤维增生等多种作用，近年来颇受关注。但单一的剂型局限性强，无法有效针对阴道给药，且过量使用会直接造成涂抹处红肿，糜烂和水泡等，因此限制其应用。
cn106177007a公开了一种用于治疗高危型hpv持续感染的宫颈疾病的中药栓剂及制备方法，该中药栓剂包括主剂和药学上可接受的制成栓剂的辅剂，主剂包括雄黄50-150份，黄连或盐酸小檗碱100-300份，白矾10-30份，冰片5-15份。该栓剂所含中药成分复杂，疗效不稳定，影响药效发挥。cn1555264a公开一种免疫应答调节剂化合物：咪唑喹啉胺、咪唑吡啶胺、6,7-稠合的环烷基咪唑吡啶胺、1,2-桥联的咪唑喹啉胺、噻唑并-和噁唑并-喹啉胺和吡啶胺、咪唑萘啶和四氢咪唑萘啶可用于治疗粘膜表面或下部的病症,方法是在粘膜表面施用治疗有效量的这些化合物。但组合物种包含多种咪唑喹啉类化合物，副作用较大，容易引起用药处不适等皮肤问题。
因此，提供一种安全稳定的治疗尖锐湿疣的栓剂具有重要意义和广阔的前景。
技术实现要素：
针对现有技术的不足及实际的需求，本发明提供一种咪喹莫特阴道膨胀栓及其制备方法。
为达此目的，本发明采用以下技术方案：
第一方面，本发明提供一种咪喹莫特阴道膨胀栓，所述膨胀栓包括咪喹莫特、透明质酸、基质和可膨胀的膨胀载体，所述膨胀栓各成分的重量份数为：
咪喹莫特属咪唑喹啉类化合物，是一个小分子免疫调节剂，能诱导体内细胞因子产生抗病毒活性，在体内外均能有效诱生α-干扰素(ifn-α)和α-肿瘤坏死因子(tnf-α)等多种细胞因子，启动人体内免疫系统抵抗外来病毒。
透明质酸作为细胞因子活性调节剂，具有特别的细胞因子的调控能力，对不同类型和菌株的疱疹病毒、hiv、巨细胞病毒有显著的高活性。组合使用咪喹莫特和透明质酸可以协同增效，促进二者功能发挥，同时透明质酸的加入可以减轻咪喹莫特可能产生的副作用，缓解腔道不适如红肿，瘙痒，灼痛等。
本发明发现，按所述重量份数并组合透明质酸制备而得的组合物可有效防止副作用产生，并且在所述组成和制备方法下制得的栓剂可安全用于阴道内给药，用于治疗阴道尖锐湿疣。
所述咪喹莫特为15-30份，例如可以是15份、16份、17份、18份、19份、20份、21份、22份、23份、24份、25份、26份、27份、28份、29份或30份。
所述透明质酸为10-26份，例如可以是10份、11份、12份、13份、14份、15份、16份、17份、18份、19份、20份、21份、22份、23份、24份、25份或26份。
所述基质为80-220份，例如可以是80份、82份、84份、85份、87份、89份、90份、94份、95份、98份、100份、105份、110份、115份、120份、125份、130份、135份、140份、145份、150份、155份、160份、165份、170份、175份、180份、185份、190份、195份、200份、205份、210份、205份、206份、208份或220份。
所述膨胀载体为50-300份，例如可以是50份、55份、60份、70份、80份、90份、100份、110份、120份、130份、140份、150份、155份、160份、165份、170份、180份、190份、200份、210份、220份、230份、240份、250份、260份、270份、280份、290份或300份。
优选地，所述膨胀栓还包括功能性低聚糖。
功能性低聚糖是由2-10个单糖通过糖苷键连接形成支链或支链的低度聚合糖，人体肠道内没有水解功能性低聚糖的酶系统，因此它们不能被消化吸收而直接进入大肠内优先为双歧杆菌利用，是双歧杆菌的增殖因子，通常作为食品行业的优选益生元，本发明发现，栓剂中添加功能性低聚糖可直接为阴道有益菌双歧杆菌供给营养，且不被有害菌利用，进而增加有益菌在阴道环境中的占比，调节阴道菌群环境，提高阴道免疫力以及自愈能力，辅助药效发挥。
优选地，所述功能性低聚糖占所述膨胀栓的重量份数为5-20份，例如可以是5份、6份、7份、8份、9份、10份、11份、12份、13份、14份、15份、16份、17份、18份、19份或20份，优选为10-15份。
优选地，所述功能性低聚糖包括水苏糖、棉籽糖、乳酮糖、低聚果糖、低聚木糖、低聚半乳糖、低聚异麦芽糖、低聚异麦芽酮糖、低聚龙胆糖、大豆低聚糖或低聚壳聚糖中的任意一种或至少两种的组合，所述组合例如可以是棉籽糖和低聚果糖的组合，低聚木糖和低聚半乳糖的组合，低聚异麦芽糖和低聚龙胆糖的组合，水苏糖、低聚异麦芽糖和大豆低聚糖的组合，低聚木糖、低聚半乳糖、低聚异麦芽糖和低聚异麦芽酮糖的组合，优选为低聚异麦芽糖和低聚龙胆糖的组合。
本发明发现，低聚异麦芽糖在阴道ph环境下稳定性最好，便于双歧杆菌摄取利用；低聚龙胆糖的吸湿性强，可以有效保持水分，防止栓剂干涩。
优选地，所述低聚异麦芽糖和低聚龙胆糖的重量比为(3-8):(1-5)，例如可以是3:1、4:3、3:5、5:3、6:5、7:4或8:3，优选为5:3。
本发明发现，低聚异麦芽糖和低聚龙胆糖在所述比例下进行组合可协同增效，双歧杆菌的增殖情况最佳，活性最好，阴道尖锐湿疣的治愈率最高。
优选地，所述基质包括合成脂肪酸酯、天然脂肪酸酯、类脂类基质、水溶性基质、氢化油或分馏油中的任意一种或至少两种的组合，所述组合例如可以是合成脂肪酸酯和水溶性基质的组合，天然脂肪酸酯和氢化油的组合，类脂类基质和分馏油的组合，合成脂肪酸酯、天然脂肪酸酯和水溶性基质的组合，或类脂类基质、水溶性基质和氢化油的组合，优选为合成脂肪酸酯、天然脂肪酸酯和水溶性基质的组合。
优选地，所述合成脂肪酸酯、天然脂肪酸酯和水溶性基质的重量比为(3-8):(1-5):(1-3)，例如可以是3:2:2、3:1:3、4:3:1、5:3:2、5:4:1、6:3:2、7:4:3或8:5:3，优选为5:3:2。
本发明发现，合成脂肪酸酯、天然脂肪酸酯和水溶性基质按照所述比例进行组合可提高栓剂使用过程中的舒适度，降低异物感，同时使药物分布更均匀，提高生物利用度。
优选地，所述合成脂肪酸酯为混合脂肪酸甘油酯、硬脂酸丙二醇酯、硬化油、半合成脂肪酸甘油酯、半合成椰油酯、witepsol、半合成棕榈油酯或半合成山苍子酯中的任意一种或至少两种的混合物，所述混合物例如可以是混合脂肪酸甘油酯和硬化油的混合物，硬脂酸丙二醇酯和半合成脂肪酸甘油酯的混合物，或半合成椰油酯、witepsol和半合成山苍子酯的混合物。
优选地，所述天然脂肪酸酯为乌桕脂、香果脂、茴香脂、柯克姆脂或可可豆脂中任意一种或至少两种的混合物，所述混合物例如可以是乌桕脂和柯克姆脂的混合物，香果脂和柯克姆脂的混合物，或香果脂、茴香脂和可可豆脂的混合物。
优选地，所述类脂类基质为羊毛脂和/或羊毛醇，优选为羊毛醇。
优选地，所述水溶性基质为聚乙二醇1450、聚乙二醇3350、聚乙二醇4000、聚乙二醇6000、甘油明胶、聚氧乙烯单硬脂酸酯或泊洛沙姆中的任意一种或至少两种的混合物，所述混合物例如可以是聚乙二醇1450和聚乙二醇3350的混合物，聚乙二醇4000和甘油明胶的混合物，聚乙二醇6000和泊洛沙姆的混合物，聚乙二醇6000、甘油明胶和聚氧乙烯单硬脂酸酯的混合物，聚乙二醇1450、聚乙二醇3350、聚乙二醇4000和泊洛沙姆的混合物，优选为聚乙二醇1450和聚乙二醇3350的混合物。
本发明发现，选择聚乙二醇1450和聚乙二醇3350组合作为基质时，可以良好的支撑栓剂外形，硬度适中，不妨碍药物组分的释放与药效发挥，提高栓剂使用舒适度。
优选地，所述聚乙二醇1450和聚乙二醇3350的重量比为(1-4):1，例如可以是1:1、2:1、3:1或4:1。
优选地，所述氢化油为氢化植物油、氢化花生油、氢化蓖麻油或氢化棉籽油中的任意一种或至少两种的混合物，所述混合物例如可以是氢化植物油和氢化蓖麻油的混合物，氢化花生油和氢化棉籽油的混合物，或氢化植物油、氢化花生油和氢化蓖麻油的混合物。
优选地，所述分馏油为分馏棕榈油和/或分馏椰子油。
优选地，所述基质还包括防腐剂、硬化剂或增稠剂中的任意一种或至少两种的组合，例如可以是防腐剂和硬化剂的组合，防腐剂和增稠剂的组合，硬化剂和增稠剂的组合，或防腐剂、硬化剂和增稠剂的组合。
本发明发现，基质中包括防腐剂、硬化剂和增稠剂，并且所述防腐剂、硬化剂和增稠剂按照所述重量份数进行组合可以稳定药剂成分不腐败，保持栓剂硬度适中，外形稳定不变形。
优选地，所述基质按重量份数包括5-10份的防腐剂、1-12份的硬化剂和15-30的增稠剂。
所述防腐剂按重量份数为5-10份，例如可以是5份、6份、7份、8份、9份或10份。
所述硬化剂按重量份数为1-12份，例如可以是1份、2份、3份、4份、5份、6份、7份、8份、9份、10份、11份或12份。
所述增稠剂按重量份数为15-30份，例如可以是15份、16份、17份、18份、19份、20份、21份、22份、23份、24份、25份、26份、27份、28份、29份或30份。
优选地，所述防腐剂包括山梨酸、肉桂酸或香兰酸酯中的任意一种或至少两种的组合，所述组合例如可以是山梨酸和肉桂酸的组合，山硫酸钠和香兰酸酯的组合，肉桂酸和香兰酸酯的组合，山梨酸、肉桂酸和香兰酸酯的组合，优选为山梨酸。
优选地，所述硬化剂包括白蜡、鲸蜡醇、硬脂酸或巴西棕榈蜡中的任意一种或至少两种的组合，所述组合例如可以是白蜡和鲸蜡醇的组合，硬脂酸和巴西棕榈蜡的组合，硬脂酸和巴西棕榈蜡的组合，白蜡、鲸蜡醇和硬脂酸的组合，优选为鲸蜡醇和硬脂酸的组合。
本发明发现，组合使用鲸蜡醇和硬脂酸可以稳定栓剂剂型，维持适宜硬度，鲸蜡醇和硬脂酸兼具稳定、增稠的作用，利于药效发挥与生物利用度的提高。
优选地，所述鲸蜡醇和硬脂酸的重量比为(2-5):(1-4)，例如可以是2:1、3:2、4:1、5:4、2:3或5:3。
优选地，所述增稠剂包括单硬脂酸甘油酯、海藻酸钠、红藻胶或硬脂酸铝中的任意一种或至少两种的混合物，所述混合物例如可以是单硬脂酸甘油酯和海藻酸钠的混合物，海藻酸钠和红藻胶的混合物，红藻胶和硬脂酸铝的混合物，单硬脂酸甘油酯、海藻酸钠和硬脂酸铝的混合物，优选为海藻酸钠和红藻胶的的混合物。
优选地，所述海藻酸钠和红藻胶的重量比为(1-3):1，例如可以是1:1、2:1或3:1。
优选地，所述膨胀载体包括棉条、无纺布或弹性纤维中的任意一种或至少两种的组合，所述组合例如可以是棉条和无纺布，或棉条和弹性纤维，优选为棉条。
第二方面，本发明提供了一种制备如第一方面所述咪喹莫特阴道膨胀栓的方法，包括如下步骤：
(1)含药基质的制备：
a)将基质中各组分按配方量置于水浴中混合，制得油相；
b)将含有咪喹莫特和透明质酸的混合液作为水相分散于步骤a)的油相中，获得预乳液；
c)将步骤(b)得到的预乳液进行快速膜乳化，得到含药基质；
(2)将含药基质倒入栓模中，插入膨胀载体，附着定型，制得栓剂。
优选地，所述步骤a)还包括如下步骤：将防腐剂、硬化剂和增稠剂与基质其他组分共同置于水浴中，混合；
优选地，步骤b)中的混合液还包括功能性低聚糖。
与现有技术相比，本发明具有如下有益效果：
(1)本发明组合使用咪喹莫特和透明质酸，协同增效，抗病毒效果显著，通过调节各个组分的配比，降低咪喹莫特的副作用并有效增加抗病毒活性，将咪喹莫特制备为栓剂，有效治疗阴道内尖锐湿疣；
(2)本发明组合使用功能性低聚糖，有效增殖阴道内有益菌群双歧杆菌，增强阴道自愈能力和免疫力，抑制致病菌的生长和繁殖；
(3)本发明所述基质的组合配方能有效促进药物发挥药效，在防腐剂、硬化剂和增稠剂的配合下能使阴道膨胀栓外形稳定，释放药物速度平缓，维持患处局部血药浓度平均，提高疗效降低副作用。
具体实施方式
为更进一步阐述本发明所采取的技术手段及其效果，以下通过具体实施方式来进一步说明本发明的技术方案，但本发明并非局限在实施例范围内。
实施例1
制备方法：
(1)含药基质的制备：
a)将基质中各组分按配方量置于水浴中混合，制得油相；
b)将含有咪喹莫特和透明质酸的混合液作为水相分散于步骤a)的油相中，获得预乳液；
c)将步骤(b)得到的预乳液进行快速膜乳化，得到含药基质；
(2)将含药基质倒入栓模中，插入膨胀载体，附着定型，制得栓剂。
实施例2
制备方法同实施例1。
实施例3
制备方法同实施例1。
实施例4
制备方法同实施例1。
实施例5
制备方法同实施例1。
实施例6
制备方法同实施例1。
实施例7
制备方法同实施例1。
实施例8
制备方法同实施例1。
实施例9
制备方法同实施例1。
实施例10
制备方法同实施例1。
实施例11
制备方法同实施例1。
实施例12
制备方法同实施例1。
实施例13
制备方法同实施例1。
实施例14
制备方法同实施例1。
实施例15
制备方法同实施例1。
实施例16
制备方法同实施例1。
实施例17
制备方法同实施例1。
实施例18
制备方法同实施例1。
实施例19
制备方法同实施例1。
实施例20
制备方法同实施例1。
实施例21
制备方法同实施例1。
实施例22
制备方法同实施例1。
实施例23
制备方法同实施例1。
实施例24
制备方法同实施例1。
实施例25
制备方法同实施例1。
实施例26
制备方法同实施例1。
实施例27
制备方法同实施例1。
实施例28
制备方法同实施例1。
实施例29
制备方法同实施例1。
实施例30
制备方法同实施例1。
实施例31
制备方法同实施例1。
对比例1
制备方法同实施例1。
对比例2
制备方法同实施例1。
对比例3
制备方法同实施例1。
对比例4
制备方法同实施例1。
对比例5
制备方法同实施例1。
对比例6
制备方法同实施例1。
临床试验
一、研究方法
研究方案参照中华人民共和国卫生部新药临床指导原则有关“妇产科生殖道炎症局部用药的临床验证”内容而制定。
1.试验病例：收治患者共93例，均经妇科检查确诊hpv6感染者29例，hpv11感染者32例，hpv16感染者17例，hpv18感染者15例，年龄均在18-49岁之间，排除妊娠和哺乳期患者；
2.诊断标准：
症状：阴道内瘙痒、灼痛，呈簇状增生的粉色或白色小乳头状疣；
实验室检查：用阴道或宫颈疣组织涂片，巴氏染色，可见空泡化细胞和角化不良细胞同时出现；在棘层上方及颗粒层出现空泡化细胞，是诊断hpv感染的重要证据；采用抗hpv蛋白的抗体检测病变组织中的hpv抗原；采用聚合酶链式反应做特异性分析，灵敏度高，方便迅速；
3.分组及给药：将93例尖锐湿疣患者分别给予实施例1-31和对比例1-6的阴道膨胀栓，给药均为每天一次，7天为一疗程；
4.观察项目
4.1治疗性观察
(1)症状；
(2)妇科检查：包括外阴、阴道、宫颈及阴道分泌物检查；
(3)实验室检查：对阴道分泌物检查，包括镜下、涂片，聚合酶链式反应检测；
4.2安全性观察
(1)一般体检项目；
(2)血、尿、便常规化验；
(3)心、肝、肾功能检查；
4.3不良反应观察
在用药期间出现的任何异常症状，体征，实验室检查，都应认真分析，仔细鉴别；
5.疗效评定标准：
痊愈：症状消失，妇科检查及实验室检查正常；
显效：症状明显减轻，妇科检查和实验室检查明显好转；
有效：症状有所减轻，妇科检查和实验室检查有所好转；
无效：治疗后较治疗前无变化；
6.治疗结果：患者均给药4个疗程后，治疗效果如表1所示。
表1
由表1可以看出，咪喹莫特阴道膨胀栓对多种hpv亚型感染导致的阴道尖锐湿疣都有较好疗效。比较实施例1与对比例1-6可知，咪喹莫特和透明质酸组合增效，在所述重量份数配比下效果最佳，有效防止咪喹莫特可能造成的副作用。比较实施例1与实施例6-13可以看出，功能性低聚糖对治疗效果的积极促进作用，按照所述重量份数和配比所得膨胀栓的疗效最佳，通过调节阴道菌群提高阴道免疫力与自愈能力，降低副作用的影响。比较实施例1与实施例14-25、实施例29-31可以看出，基质种类和组成比例对咪喹莫特阴道膨胀栓的治疗效果的影响，在所述基质种类和组成配比下，治疗尖锐湿疣效果最佳。比较实施例1与实施例26-28可以看出，防腐剂、硬化剂和增稠剂对栓剂药效发挥的积极作用，维持栓剂良好形态，使药物分部均匀提高生物利用度。
人群测试评价
取实施例和对比例的阴道膨胀栓进行使用感评价测试，选100名尖锐湿疣患者进行阶段性对比试验，周期为15天，前7天使用对比例阴道膨胀栓，停药一天后开始使用实施例阴道膨胀栓。分别从是产生副作用例如红肿、瘙痒等，以及使用过程舒适度方面进行评分，根据使用感受填写调查问卷，评分标准采用5分制，1分为效果最差，5分为效果最佳，调查结果见表2。
表2
由表2可以看出，咪喹莫特与透明质酸组合使用，配合功能性低聚糖可以有效降低咪喹莫特的副作用，减少红肿瘙痒等症状，且本发明所用基质种类和组合配比可以提高咪喹莫特阴道膨胀栓使用舒适度，减少患者排斥。比较实施例1与对比例1-6可知，咪喹莫特用量在本发明所述范围内可以安全用于阴道内给药，不产生副作用。比较实施例1与实施例6-31可以看出，基质种类和组合配比对咪喹莫特阴道膨胀栓安全性和使用舒适度的影响。
综上，本发明的咪喹莫特阴道膨胀栓，通过组合利用咪喹莫特和透明质酸以及功能性低聚糖，配合最佳的基质种类和配比，降低咪喹莫特自身的副作用，同时使各组分间协同作用，提高栓剂疗效与使用舒适度，能有效治疗阴道内尖锐湿疣。
申请人声明，本发明通过上述实施例来说明本发明的详细方法，但本发明并不局限于上述详细方法，即不意味着本发明必须依赖上述详细方法才能实施。所属技术领域的技术人员应该明了，对本发明的任何改进，对本发明产品各原料的等效替换及辅助成分的添加、具体方式的选择等，均落在本发明的保护范围和公开范围之内。