本发明属于中草药技术，特别是涉及一种石斛复方制剂及其制备方法与应用。
背景技术：
目前有大量研究报道微量元素对于增强人体免疫力以及延缓衰老、抗氧化具有重要作用，对各个中药中微量元素的测定以及溶出率研究也越来越受到重视；对于抗氧化方面，众所周知络氨酸抑制作用才是最关键的，但是目前市面上主要采用单一中药进行提取利用，就其中的分离成分，并没有达到预期的效果。本发明从抗氧化和提高免疫力角度出发，复配出一种全新复方，并就其制备方法进行了优化。技术实现要素：发明目的：针对现有抗氧化和增强免疫力复方单一的问题，本申请提供了一种石斛复方制剂及其制备方法与应用。技术方案：本申请所述的石斛复方制剂，包括以下重量份数的各个组分：石斛30-50份、黄芪10-30份、土茯苓30-50份、西洋参5-20份、甘草5-10份、藏红花5-15份、金银花5-15份、白藜芦醇2-30份。优选的，所述复方制剂包括以下重量份数的各个组分：石斛45-50份、黄芪10-15份、土茯苓30-40份、西洋参5-10份、甘草5-10份、藏红花5-10份、金银花5-10份、白藜芦醇5-15份。最优选的，所述复方制剂包括以下重量份数的各个组分：石斛48份、黄芪12份、土茯苓35份、西洋参8份、甘草8份、藏红花6份、金银花6份、白藜芦醇8份。上述复方可以加工制成颗粒剂、片剂、口服液、糖浆剂或胶囊等。上述制剂的制备方法，包括以下步骤：(1)称取配方量的石斛和黄芪，粉碎过筛备用；(2)称取配方量的土茯苓、西洋参、甘草、藏红花和金银花，与步骤(1)所得石斛和黄芪粉末混合，加水浸泡后，煎煮2-4次，混合所得水煎液，过滤收集滤液，冷冻干燥即可；(3)称取配方量的白藜芦醇，与步骤(2)冷冻干燥所得粉末，按照常规制剂工艺加入适宜辅料，加工制成相应剂型。步骤(1)中，粉碎后过15-40目筛。步骤(2)中，加入8-12倍量的水浸泡5-24h。上述制备方法中没有详细叙述的内容均为常规技术手段。本申请所采用的中药均为常见常用易得中药：石斛：味甘，性微寒；归胃、肾经；益胃生津，滋阴清热。用于热病津伤，口干烦渴，胃阴不足，食少干呕，病后虚热不退，阴虚火旺，骨蒸劳热，目暗不明，筋骨痿软。《本草通玄》：“石斛，甘可悦脾，咸能益肾，故多功于水土二脏。但气性宽缓，无捷奏之功，古人以此代茶，甚清膈上。”黄芪：性温，味甘。补气固表，托毒排脓，利尿，生肌。用于气虚乏力、久泻脱肛、自汗、水肿、子官脱垂、慢性肾炎蛋白尿、糖尿病、疮口久不愈合。含有黄酮类成分毛蕊异黄酮(calycosin)、3-羟基-9，10-二甲氧基紫檀烷，还含黄芪皂甙ⅰ、ⅴ、iii(astragalosideⅰ、ⅴ、iii)。土茯苓：甘、淡，平；归肝、胃经。功效：解毒，除湿，通利关节。主治梅毒及汞中毒所致的肢体拘挛，筋骨疼痛；湿热淋浊，带下，痈肿，瘰疬，疥癣。《本草纲目》：“健脾胃，强筋骨，去风湿，利关节，止泄泻。治拘挛骨痛；恶疮痈肿。解汞粉、银朱毒。”西洋参：甘微苦，凉。益肺阴，清虚火，生津止渴。治肺虚久嗽，失血，咽干口渴，虚热烦倦。《医学衷中参西录》：能补助气分，并能补益血分。中阳衰微，胃有寒湿者忌服。①《本草从新》：脏寒者服之，即作腹痛，郁火服之，火不透发，反生寒热。②《纲目拾遗》：忌铁器及火炒。根茎含人参皂甙ro、rb1、rb2、rc、rd、re、rg1以及假人参皂甙f1(pseudoginsenosidef11)，尚含精氨酸、天冬氨酸等18种氨基酸；又含挥发油、树脂等。甘草：气微，味甜而特殊。功能主治清热解毒、祛痰止咳、脘腹等。藏红花：甘，平；入心、肝经。功能主治为：活血化瘀，散郁开结。治忧思郁结，胸膈痞闷，吐血，伤寒发狂，惊怖恍惚，妇女经闭，产后瘀血腹痛，跌扑肿痛。①《饮膳正要》：主心忧郁积，气闷不散，久食令人心喜。②《品汇精要》：主散郁调血，宽胸膈，开胃进饮食，久服滋下元，悦颜色，及治伤寒发狂。③《纲目》：活血，又治惊悸。金银花：性甘、寒；归肺、胃经。清热解毒，消炎退肿。主治外感风热或温病发热，中暑，热毒血痢，痈肿疔疮，喉痹，多种感染性疾病。白藜芦醇，又名芪三酚、3,4',5-三羟基芪、(e)-5-2-(4-羟苯基)-乙烯基-1,3-苯二酚，化学式(分子式)：c14h12o3，是一种白色粉末，是一种具有重要生理活性多酚类物质，是多种植物体中主要功效成分，可以广泛用于食品、保健品、医药等领域。上述复方制剂用于制备抗氧化和增强免疫力药物中的应用也在本发明的保护范围内。有益效果：从中药配伍来说，本申请选用的中药均为常见常用中药，成本低效果好；从现代医药有效成分方面来说，本申请的制备方法结合各个组分的有效成分，采取最适宜的制备方法，力争保留其更利用本配方功效的成分；将石斛和黄芪进行粉碎处理，在与其他药材一并煎煮，提高石斛和黄芪中有效成分的溶出率；；本申请通过各个成分之间的协同作用，达到了增效作用，具有明显的抗氧化作用。具体实施方式下面结合具体实施例对本申请作出详细说明。实施例1组合物处方：石斛48份、黄芪12份、土茯苓35份、西洋参8份、甘草8份、藏红花6份、金银花6份、白藜芦醇8份。制备方法：(1)称取配方量的石斛和黄芪，粉碎过18目筛备用；(2)称取配方量的土茯苓、西洋参、甘草、藏红花和金银花，与步骤(1)所得石斛和黄芪粉末混合，加入10倍量的水浸泡10h，煎煮3次，混合所得水煎液，过滤收集滤液，冷冻干燥即可；(3)称取配方量的白藜芦醇，与步骤(2)冷冻干燥所得粉末，按照常规制剂工艺加入适宜辅料，加工制成相应剂型。实施例2组合物处方：石斛45份、黄芪10份、土茯苓30份、西洋参5份、甘草5份、藏红花5份、金银花5份、白藜芦醇5份。制备方法：(1)称取配方量的石斛和黄芪，粉碎过15目筛备用；(2)称取配方量的土茯苓、西洋参、甘草、藏红花和金银花，与步骤(1)所得石斛和黄芪粉末混合，加入8倍量的水浸泡8h，煎煮2次，混合所得水煎液，过滤收集滤液，冷冻干燥即可；(3)称取配方量的白藜芦醇，与步骤(2)冷冻干燥所得粉末，按照常规制剂工艺加入适宜辅料，加工制成相应剂型。实施例3组合物处方：石斛50份、黄芪15份、土茯苓40份、西洋参10份、甘草10份、藏红花10份、金银花10份、白藜芦醇25份。制备方法：(1)称取配方量的石斛和黄芪，粉碎过40目筛备用；(2)称取配方量的土茯苓、西洋参、甘草、藏红花和金银花，与步骤(1)所得石斛和黄芪粉末混合，加入12倍量的水浸泡24h，煎煮4次，混合所得水煎液，过滤收集滤液，冷冻干燥即可；(3)称取配方量的白藜芦醇，与步骤(2)冷冻干燥所得粉末，按照常规制剂工艺加入适宜辅料，加工制成相应剂型。对比例1称取与实施例1同样重量的土茯苓，加入其10倍量的水浸泡10h，煎煮3次，混合所得水煎液，过滤收集滤液，冷冻干燥即可。对比例2称取与实施例1同样重量的土茯苓、西洋参、甘草、藏红花和金银花，加入其10倍量的水浸泡10h，煎煮3次，混合所得水煎液，过滤收集滤液，冷冻干燥即可。对比例3称取与实施例1同样重量的西洋参、甘草、藏红花和金银花，加入其10倍量的水浸泡10h，煎煮3次，混合所得水煎液，过滤收集滤液，冷冻干燥即可。对比例4称取与实施例1同样重量的白藜芦醇。对比例5对比例1和对比例4所得混合。对比例6称取与实施例1同样重量的石斛和黄芪，粉碎过18目筛，加入其10倍量的水浸泡10h，煎煮3次，混合所得水煎液，过滤收集滤液，冷冻干燥即可。对比例7对比例1和对比例6所得混合。实施例1制备所得产品中微量元素含量测定。(1)铜、锌、铁、锰、铬元素含量测定：标准样品：配制的各元素储备液均为高纯氧化物或高纯金属，所用水为2次去离子水。微量元素测定仪器与工作条件：仪器名称：2cpq-100(日本岛津)。工作条件：入射功率1.5kw，反射功率<5w，载气流量1.05l/min，冷却气流量10.5l/min，等离子气流量1.5l/min。测定波长：zn2025.48a，fe2599.40a，cu2347.54a，mn2576.10a，cr2677.16a。分析步骤：取步骤(3)所得粉末混合物，称取2.0g于石英烧杯中，低温碳化，冷却，移入马弗炉中，从低温升至500℃灰化至白，取出冷却至室温，加5ml1:1hcl溶解残渣，移入50ml容量瓶中，定容分析液，上述分析液与工作曲线按以上工作条件同时上机测定。(2)硒元素含量测定方法：分析方法：取步骤(3)所得粉末混合均匀，然后取样采用jascofp-550型荧光分光光度计，按毛发、粮食、土壤中微量硒的荧光光度法测定。(3)测量结果如下：本申请复方制剂对络氨酸酶抑制活性的测定。试验材料和仪器：1/15mol.l-1的磷酸盐缓冲液。络氨酸酶：(sigma公司)25000单位/mg，准确称取络氨酸酶0.0035g用上述磷酸盐缓冲液定容至ml容量瓶配制成200u/ml的溶液。dopa：北京舒博伟公司，准确称取30mg用上述磷酸盐缓冲液定容至100ml容量瓶配成0.03％的溶液。tu-1800紫外分光光度仪：北京普析通用有限公司。样品溶液的制备：分别称取实施例1以及对比例1-7制备所得粉末2g，用1/15mol.l-1的磷酸盐缓冲液分别配制成1mg/ml、0.5mg/ml、0.2mg/ml浓度的溶液待用。分析测定方法：用吸管按下表所示体积，准确吸取abcd四组反应液，每组平行3组试管，并且acd三组25℃温育5min立即转移比色皿中于475nm处测吸光值。以下列公式计算络氨酸酶的抑制百分率：络氨酸酶的抑制百分率(％)＝[(a-b)-(c-d)]/(a-b)*100％反应液的组成试验结果实施例1以及对比例1-7制备所得提取物粉末对络氨酸酶活力的浓度效应试验结果见下表。1mg/ml0.5mg/ml0.2mg/ml实施例115.5126.3575对比例14.6915.2625.36对比例25.0215.6525.25对比例31.205.365.98对比例40.650.360.08对比例54.8715.5226.31对比例62.452.564.25对比例76.3519.5832.66当前第1页12