一种葡萄糖调节蛋白75在制备抗热应激损伤药物中的应用的制作方法

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种葡萄糖调节蛋白75在制备抗热应激损伤药物中的应用。

背景技术

近年来，随着地球生态环境的不断恶化，全球变暖已成为难以逆转的气候趋势。极端高热气候不仅在热带和亚热带地区持续加剧，而且在许多温热带地区频发。我国广东地区、东南沿海及南海诸岛等属热带地区，长夏暖冬，夏季炎热多湿。尤其是南海诸岛，四周环海，处于典型的热带海洋气候，空气中的相对湿度高达100％，而且常年气温30℃以上多达8个月。因此，我国户外作业人员的身心健康面临着严重的热应激威胁。随着我国基础建设和重工业的飞速发展，在钢铁工业、铁路建设、浇铸车间等行业从事高温作业的人群也大幅增加；随着藏南与南海领土争端不断加剧，我军指战员在严酷亚热带、热带季风气候进行大规模户外军事作业的频率也不断增多；2012年5月，随着我国首个自主研发的深水钻井平台在南海方向开钻，大规模的南海方向资源开发也已经逐渐拉开序幕，这意味着大量的工人不得不在热带海域进行户外作业。基于上述分析，我国从事高温环境作业的人员数量急剧增加，越来越多的人员不得不面对热应激的威胁。而与此不相称的是，我国在热环境医学领域的研究近年来却呈现逐渐下降的趋势；近几年国家资助的高温环境和热应激方面的科研项目多集中在畜牧业和养殖业等农业领域，而对高温作业环境下的生理病理反应机制的基础研究却非常少，大量的高温环境作业人员将缺乏有效的健康维护和作业能力维持措施，这将严重削弱我国南疆领土(海)的防卫力度，减缓温热带地区的基础建设进程、妨碍我国工业化进程的步伐、影响南海资源开发的进度。对于高温环境中的作业人员而言，体温调节贯穿着整个热应激的全过程(包括代偿期和失代偿期)，而心血管系统在体温调节中扮演了重要的角色，高温所致心血管系统的损伤也是高温中暑致死的关键。因此，探索高温环境条件下心血管系统细胞的保护手段，对于高热环境中作业和生活人群具有重要意义。

目前，预防热应激心肌损伤的主要手段是合理补充电解质和水分，防止心律失常发生。补充电解质和水分只能起到防护心率失常的作用，而对渐进性的热应激心肌细胞损伤和凋亡的防护作用则十分有限。对于热应激心肌损伤的治疗目前主要以临床心脏内科的抗心肌缺血或者抗心肌梗死的药物为主，也有一些基于中医理论的对症治疗中药制剂。这些药物和中药制剂由于是非特异性对症治疗药物，导致它们以缓解症状为主，不能从根本上有效阻断热应激心肌细胞损伤的细胞内信号通路，治疗效果十分有限；与此同时，不可避免的会引起一系列的毒副作用。同时也未见防治热应激致血管细胞损伤的药物和防护措施的相关报道。总而言之，到目前为止，国内外尚缺乏针对热应激所致心血管系统细胞损伤的特异性防护药物。

葡萄糖调节蛋白75(grp75)广泛存在于从原核到真核生物的多种细胞中，在进化上具有高度的保守性，但是与其同家族的其它蛋白质在一级结构上的差别却很大，大概只有50％左右的同源性。对于grp75在对热应激心肌细胞的调控作用及机制尚未见研究报道，也未见通过grp75调控热应激机体心血管系统细胞和功能的相关报道。

技术实现要素：

本发明的目的是克服现有技术的不足，提供一种葡萄糖调节蛋白75在制备抗热应激损伤药物中的应用。

本发明的技术方案概述如下：

一种葡萄糖调节蛋白75在制备抗热应激损伤药物中的应用，所述葡萄糖调节蛋白75的氨基酸序列用序列表中seqidno.1所示。

实验证明，一种葡萄糖调节蛋白75能明显抑制热应激所致的心肌细胞和血管内皮细胞的凋亡。

附图说明

图1为一种葡萄糖调节蛋白75对心肌细胞凋亡率的影响(*与对照组相比较p<0.05)。

图2为一种葡萄糖调节蛋白75对血管内皮细胞凋亡率的影响(*与对照组相比较p<0.05)。

具体实施方式

下面通过具体实施例对本发明做进一步说明。

seqidno.1所示的一种葡萄糖调节蛋白75由生物合成公司合成。

细胞培养液1号配方：89％mem(gibco，cat#41500034)，10％胎牛血清(gibco，cat#16000-044)，1％青霉素/链霉素溶液(gibco，cat#15140-122)。

细胞培养液2号配方：89％dmem(gibco，cat#8117167)，10％胎牛血清(gibco，cat#16000-044)，1％青霉素/链霉素溶液(gibco，cat#15140-122)。

实验例1

1)出生1-3天的wistar乳鼠麻醉后，立即取出心脏，采用胰酶(sigma)消化法获得原代心肌细胞。

2)将体外常规培养的心肌细胞分为两组：对照组、grp75干预组。

3)将所述的一种葡萄糖调节蛋白75以0.5mg/ml的浓度加入grp75干预组细胞的培养液(细胞培养液1号配方)中。

4)将上述细胞置于41℃的培养箱中12小时。

5)显微镜下观察细胞，并收集细胞，检测检测细胞细胞凋亡率。

6)结果显示，所述grp75可使41℃热应激条件下的心肌细胞凋亡率显著降低(图1)。表明所述grp75对热应激心肌细胞具有保护作用。

实验例2

1)将体重为180克-200克的wistar大鼠麻醉后，立即取出腹主动脉，采用铁壁法获得原代血管内皮细胞。

2)将体外常规培养的血管内皮细胞分为两组：对照组、grp75干预组。

3)将所述的一种葡萄糖调节蛋白75以0.5mg/ml的浓度加入grp75干预组内皮细胞的培养液(细胞培养液2号配方)中。

4)将上述细胞置于41℃的培养箱中12小时。

5)显微镜下观察细胞，并收集细胞，检测检测细胞细胞凋亡率。

6)结果显示，所述grp75可使41℃热应激条件下的血管内皮细胞凋亡率显著降低(图2)。表明所述grp75对热应激血管内皮细胞具有保护作用。

序列表

<110>军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所

<120>一种葡萄糖调节蛋白75在制备抗热应激损伤药物中的应用

<160>1

<170>siposequencelisting1.0

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