本发明涉及化学药物制剂技术领域，具体涉及一种注射用左卡尼汀组合物的制备方法及其脂质体注射剂。
背景技术：
左卡尼汀是哺乳动物能量代谢中需要的体内天然物质，其主要功能是促进脂类代谢。在缺氧、缺血时，脂酰-coa堆积，线粒体内的长链脂酰卡尼汀也堆积，游离卡尼汀因大量消耗而减低。缺血缺氧导致atp水平下降，细胞膜和亚细胞膜通透性升高，堆积的脂酰-coa可致膜结构改变，膜相崩解而导致细胞死亡。另外，缺氧时以糖无氧酵解为主，脂肪酸等堆积导致酸中毒，离子紊乱，细胞自溶死亡。足够量的游离卡尼汀可使堆积的脂酰-coa进入线粒体内，减少其对腺嘌呤核苷酸转位酶的抑制，使氧化磷酸化得以顺利进行。左卡尼汀是肌肉细胞尤其是心肌细胞的主要能量来源，脑、肾等许多组织器官亦主要靠脂肪酸氧化供能。左卡尼汀还能增加nadh细胞色素c还原酶、细胞色素氧化酶的活性、加速atp的产生，参与某些药物的解毒作用。对于各种组织缺血缺氧，左卡尼汀通过增加能量产生而提高组织器官的功能，临床上注射用左卡尼汀主要采用冻干粉的形式进行保存，然而，注射用左卡尼汀冻干粉在制备过程中，存在一系列问题，导致成品的也存在各种不足：
1、传统的制备工艺是制得半成品溶液后再以盐酸调节酸碱度，容易导致溶液体系酸碱度不均匀，从而影响到药效。
2、传统制备工艺中所制得的左卡尼汀在临床使用中容易变色，使消费者对产品产生信任危机。
3、传统制备工艺的冻干环节温度设定过于粗糙，没有考虑到产品自身物理性质，导致产品出现骨架及冻干微结构塌陷，影响生产效率及复溶性能。
综上，现有的左卡尼汀制备工艺亟待改善。
技术实现要素：
为解决现有技术存在的不足，本发明提供了一种注射用左卡尼汀组合物的制备方法，包括如下步骤：
步骤s1：利用体积比介于10：1-12：1的磷酸二氢钠和氢氧化钠溶液，配制酸碱缓冲液，其中，该酸碱缓冲液的摩尔浓度介于0.010-0.012mol/l；
步骤s2：将果糖二磷酸钠及左卡尼汀注射液加入酸碱缓冲液中，其中，果糖二磷酸钠与左卡尼汀的质量比介于0.8：1-1.1：1，左卡尼汀的质量浓度介于18-22g/l；
步骤s3：加入质量浓度为0.1g/l的针用活性炭搅匀，搅拌吸附30分钟；
步骤s4：超声过滤活性炭；
步骤s5：真空冷冻干燥，得到左卡尼汀组合物成品。
其中，所述步骤s2中，在将左卡尼汀及果糖二磷酸钠溶液混合时，控制混合液的体系温度介于55-65摄氏度之间。
其中，所述步骤s2还包括：在将左卡尼汀及果糖二磷酸钠混合液搅拌均匀后，监测溶液酸碱度，并通过乳酸将溶液的酸碱度调整在5.9-6.2之间。
其中，所述步骤s5中，真空冷冻干燥的工艺流程包括：
步骤s51：取少量待真空冷冻干燥的半成品，通过监测冻干曲线，确定共晶点；并且，通过监测晶体析出时的温度，确定共熔点；
步骤s52：将半成品放入冻干机内，迅速降温至低于共晶点25度后，预冻2小时；
步骤s53：利用压缩机对冻干机的后箱冷阱制冷，使后箱冷阱温度低于-70摄氏度；
步骤s54：抽真空，将真空度抽至10pa以下；
步骤s55：迅速将导热油温度升至50摄氏度，开始高速升温升华干燥；
步骤s56：当制品温度达到（共熔点-15摄氏度）时，迅速将导热油温度降至20摄氏度，并保持该温度匀速升温升华干燥；
步骤s57：当制品温度达到10摄氏度时，再将导热油温度升至50摄氏度，在此温度下干燥5小时。
其中，所述步骤s3中，所使用的活性炭的制备方法包括：
步骤s31：将聚乙二醇、线性酚醛树脂与有机醇溶液混合处理10小时；
步骤s32：将活性炭原料与酸液混合后，搅拌均匀，超声处理1-3小时，得到酸化物料；
步骤s33：将步骤s32得到的酸化物料置于步骤s31得到的混合液中，搅拌均匀，烘箱中缓慢升温至80摄氏度后，处理24小时；
步骤s34：将烘箱处理完毕后的物料在80摄氏度的真空环境下放置半小时，得复料；
步骤s35：将复料转移至100摄氏度的环境中，之后，于4小时内升温至800摄氏度，再自然降至室温，得到活性炭。
其中，所述步骤s32中，所使用的活性炭原料包括以质量百分比计的如下组成成份：不粘煤70-90份、焦油10-22份、负离子粉20-25份、沥青2-3份、蒙脱石4-12份、氯化镁3-5份、面粉胶水5-9份、海泡石4-6份、氧化镁0.5份、植物提取物6-8份及稳定剂2-6份。
其中，稳定剂选自钙锌复合稳定剂。
本发明另外提供了一种左卡尼汀脂质体注射剂，包括以质量百分比计的如下组成成份：左卡尼汀组合物1份、大豆卵磷脂20份、胆固醇0.5-3份、抗氧剂0.01-1份，其中，左卡尼汀组合物由上述任一项制备方法制备而得。
其中，所述抗氧剂包括以质量百分比计的如下组成成份：l-精氨酸60份、维生素e2-3份、维生素c40-50份、柠檬酸锌10-20份。
本发明提供的注射用左卡尼汀组合物的制备方法及其脂质体注射剂，成品微结构稳定、复溶性好、安全性佳、药性优于现有药品。
具体实施方式
为了对本发明的技术方案及有益效果有更进一步的了解，下面详细说明本发明的技术方案及其产生的有益效果。
本发明的目的在于，针对现有的制备工艺存在的种种不足，从酸碱缓冲体系、冻干工艺、活性炭的选取、冻干支撑剂的选取等多个环节对制备工艺进行精化，使最终制得的左卡尼汀物理性能稳定、外观均匀、产品复溶性好、脱炭方便。
一、酸碱度的调节
由于现有的制备工艺中，是通过将左卡尼汀与冻干支撑剂在溶液中混匀后，再调节混合液体系的酸碱度，这种做法存在诸多缺陷：1、由于采用在溶液体系中滴加盐酸，容易导致溶液体系中酸碱度分布不均匀的情况，从而导致产品品质低下；2、左卡尼汀与冻干支撑剂混合后，溶液呈胶体状态，不好搅拌，酸碱度调节控制过程消耗人力成本和时间成本；3、酸碱调节过程溶液的酸碱度变化剧烈，半成品在此环境中容易降解。
本发明解决此问题的方法在于：提前配制好缓冲液，然后在缓冲液中溶解左卡尼汀与冻干支撑剂，发明人经过大量的对比实验验证：浓度介于0.010-0.012mol/l之间的磷酸二氢钠与氢氧化钠的混合液，对左卡尼汀及其相关冻干支撑剂的酸碱度缓冲效果最好，溶解了左卡尼汀及其相关冻干支撑剂的混合液的酸碱度基本上能够保持在制备所需要的5.9-6.2之间，即使有微小偏差，也可以在溶液溶解均匀后，加入乳酸调节即可。
本发明通过先制备缓冲液，再将主药溶解于缓冲液中的技术方案，保证了在整个药液的制备过程中，半成品药液处于较稳定的酸碱环境中，避免了主药被酸破坏降解，也避免了左旋成品向右旋成品的转化，能有效保持左卡尼汀的药性，同时大大提高产品的安全性。
二、冻干支撑剂的选择
现有的工艺中，多选择甘露醇作为冻干支撑剂，然而，在使用甘露醇做为冻干支撑剂时，所制备的成品在临床使用中容易变色，发明人意外发现，在临床中，若将左卡尼汀与果糖二磷酸钠注射液配合使用，则能够杜绝此现象，因此，发明人尝试以果糖二磷酸钠代替甘露醇，并完整地完成了之后的活性炭吸附工艺及冻干工艺，事实证明：果糖二磷酸钠的加入并不会对后期的活性炭吸附工艺及冻干工艺产生任何影响。
并且，通过调整注射用左卡尼汀组合物中左卡尼汀和果糖二磷酸钠的重量比例，可以有效减少注射用左卡尼汀组合物随板层温度升高逐渐加剧的骨架及冻干微结构塌陷，当左卡尼汀和果糖二磷酸钠的重量比例介于0.8：1-1.1：1时，既可以避免左卡尼汀配制药液固含量太高，阻碍水汽通道的形成和制品中水汽的升华，又可以最大限度的提高注射用左卡尼汀组合物骨架及冻干微结构塌陷的下限温度，在此基础上，若减少果糖二磷酸钠的用量，则注射用左卡尼汀组合物骨架及冻干微结构塌陷的下限温度过低，若增加果糖二磷酸钠的用量，则配制药液固含量过高，阻碍水汽通道的形成和制品中水汽的升华，冻干时间显著延长。
三、吸附抽滤工艺的优化
发明人通过研究实验发现，左卡尼汀配制药液近似胶体溶液，这种溶液在通过各种过滤器具的微小孔道时阻力较大，因此在制备注射用左卡尼汀组合物的过程中，左卡尼汀配制药液脱碳和过滤十分困难，特别是整体配制药液过多或活性炭加入量较大的时候，往往会大幅度延长生产周期。
本发明通过提高配制药液的温度并改善活性炭的选择来消除配制药液近似胶体溶液所带来的种种弊端。
1、药液温度选择
大量的试验表明，适当提高配制药液的温度，可以有效消除药液中近似胶体的结构，排除其过滤困难的弊端，将药液加热至55-65摄氏度并保温半小时，将钛棒过滤器及0.22um的微孔过滤器串联，脱炭同时进行无菌过滤，通过考察过滤器各段压力下降情况及使用前后气泡点试验，表明易过滤性能大幅度提高，即便是大幅度提高生产批量和活性炭的加入量，也没有出现现有工艺过滤困难的现象。
2、活性炭的选择
活性炭的吸附及后期的抽滤是制备左卡尼汀中的必备工艺，活性炭常用于吸附溶液中原辅料带来的杂质和热源，提高药品质量，但用量过大，一方面吸附主药，使药物含量降低，另一方面，影响产品质量。因此，在实际操作过程中，除了控制活性炭的量之外，还需要选择高质量的活性炭，本发明中，发明人选择自己制备专用于左卡尼汀制备工艺的活性炭，其制备工艺包括：
步骤1：将聚乙二醇、线性酚醛树脂与有机醇溶液混合处理10小时，线性酚醛树脂的引入，可以增加活性炭的活化性能，提高其比表面积比。
步骤2：将活性炭原料与酸液混合后，搅拌均匀，超声处理1-3小时，得到酸化物料；所使用的活性炭原料包括以质量百分比计的如下组成成份：不粘煤70-90份、焦油10-22份、负离子粉20-25份、沥青2-3份、蒙脱石4-12份、氯化镁3-5份、面粉胶水5-9份、海泡石4-6份、氧化镁0.5份、植物提取物6-8份及稳定剂2-6份；稳定剂选自钙锌复合稳定剂。
步骤3：将步骤s32得到的酸化物料置于步骤s31得到的混合液中，搅拌均匀，烘箱中缓慢升温至80摄氏度后，处理24小时。
步骤4：将烘箱处理完毕后的物料在80摄氏度的真空环境下放置半小时，得复料。
步骤5：将复料转移至100摄氏度的环境中，之后，于4小时内升温至800摄氏度，再自然降至室温，得到活性炭。通过后两步的真空高温处理，使得活性炭的耐磨强度得到固定，在吸附左卡尼汀半成品溶液的时候，不容易引入杂质。
四、真空冻干工艺的优化
真空冷冻干燥工艺直接影响到最终成品的外观及稳定性，而现有的真空冷冻干燥工艺，工艺参数过于粗糙，没有考虑到实际药液在前期操作过程中的物理性质，本发明引入了独有的个性定制真空冷冻干燥工艺的概念，在真空冷冻干燥之前需要对处方配制的溶液进行共晶点、共熔点确定，以便制定冻干曲线。共晶点是指物料中的水分全部冻结的温度。要保证药物完全冻结，预冻温度一般要比共晶点低20-25摄氏度。预冻温度过低，会增加能耗和生产成本，预冻温度过高，则不能保证药物中的水分完全冻结，水分将不能完全以冰的形式升华，残留水分导致药物在干燥过程中发生块状物收缩变形、甚至融化。另外，未冻结的水分中所含溶质，在干燥过程中可能随内部水分向块状物表面迁移，出现冻干块状物表面硬化现象。物料共熔点是指完全冻结的物料，当温度升值某一值时，物料内部的冰晶开始熔化时的温度。升华时加热温度不能快速高于共熔点，没除尽的水分会在物料内部产生气泡或充气膨胀，影响冻干制品的外观性状。
由于左卡尼汀配制药液固含量较高，很难形成完整的水汽通道，不利于制品中水汽的升华，因此冷冻干燥的周期也较长，同时该产品随着板层温度的升高，按现有技术进行冻干时必然出现骨架及冻干微结构塌陷，就这些缺陷而言，冷冻干燥周期较长的缺陷不仅仅在于限制了注射用左卡尼汀组合物生产效率的提高，最严重的是冻干时出现的骨架及冻干微结构塌陷会直接影响到最终产品的质量，这是因为，骨架及冻干微结构塌陷影响到了注射用左卡尼汀组合物复溶性能，导致产品使用时存在不溶性微粒且澄清度变差，甚至不符合药典规定，造成整批药品的报废，即便是出厂时复溶性能较好的注射用左卡尼汀组合物，由于骨架及冻干微结构的存在，在放置过程中微结构塌陷继续延伸，导致整个冻干孔隙结构进一步破坏，使得复溶性能逐渐变差。
本发明中，首先将分装好的左卡尼汀药液置冻干机内，迅速降低制品温度至低于共晶点25度后，继续冷冻2小时使左卡尼汀药液完全冻结，这一预冻过程可以保证获得相对易于升华的结晶状态，除了使左卡尼汀完全冻结外，也可以使得最终升温升华前制品的温度尽可能的低，为后续超越常规技术的迅速极大幅度升温创造更大的制品温度安全上升空间。
其次，在后箱制冷阶段，确保将前箱真空抽至10pa以下，为后续超越常规技术的迅速极大幅度升温做好真空度准备。
接下来，在高速干燥阶段，一次性的在极短时间内迅速将导热油温度升至50摄氏度，对于注射用左卡尼汀组合物这一类固含量高且伴有骨架及冻干微结构塌陷的产品，这在现有技术中是不可想象的。然而，由于做好了上述制品温度安全上升空间、冷量储备及真空度等方面的准备，这一高速升温升华干燥过程可以得以顺利安全实施，其直接的制剂效果就是，大量供热使得制品中水分在极短时间里被大量的升华掉，其间制品温度也会迅速上升，但由于时间短、初始制品温度低，尚未达到骨架及冻干微结构塌陷的温度，因此可以保有极佳的冻干骨架及微结构。
最后，考虑到共熔点的存在，需要对高速干燥过程进行控制，本发明中，当监测制品温度达到（共熔点-15摄氏度）时，迅速将导热油温度降至20摄氏度，进入匀速干燥阶段，并保持该温度匀速升温升华干燥，当制品温度达到10摄氏度时，再将导热油温度升至50摄氏度，在此温度下干燥5小时，得到最终的成品。
本发明另外提供了一种左卡尼汀脂质体注射剂，包括以质量百分比计的如下组成成份：左卡尼汀1份、大豆卵磷脂20份、胆固醇0.5-3份、抗氧剂0.01-1份，其中，左卡尼汀在制备过程中，参考上文所述的工艺优化参数进行；所述抗氧剂包括以质量百分比计的如下组成成份：l-精氨酸60份、维生素e2-3份、维生素c40-50份、柠檬酸锌10-20份。通过将抗氧化剂对心血管及免疫力的改善，与左卡尼汀对能量代谢的改善整合，更进一步提高了左卡尼汀在治疗缺血性心律失常、稳定性心绞痛、急性心肌梗死、心力衰竭等上的效果。
下以具体的实施例与现有实施例的对比进一步论证本发明的有益效果：
实施例1：
步骤s1：利用体积比介于10：1的磷酸二氢钠和氢氧化钠溶液，配制酸碱缓冲液，其中，该酸碱缓冲液的摩尔浓度为0.010mol/l；
步骤s2：将果糖二磷酸钠及左卡尼汀注射液加入酸碱缓冲液中，其中，果糖二磷酸钠与左卡尼汀的质量比为1.0：1，左卡尼汀的质量浓度为18/l，控制混合液的体系温度介于55-65摄氏度之间，酸碱度介于5.9-6.2之间；
步骤s3：加入质量浓度为0.1g/l的针用活性炭搅匀，搅拌吸附30分钟；
步骤s4：超声过滤活性炭；
步骤s5：取少量待真空冷冻干燥的半成品，通过监测冻干曲线，确定共晶点；并且，通过监测晶体析出时的温度，确定共熔点；
步骤s6：将半成品放入冻干机内，迅速降温至低于共晶点25度后，预冻2小时；
步骤s7：利用压缩机对冻干机的后箱冷阱制冷，使后箱冷阱温度低于-70摄氏度；
步骤s8：抽真空，将真空度抽至10pa以下；
步骤s9：迅速将导热油温度升至50摄氏度，开始高速升温升华干燥；
步骤s10：当制品温度达到（共熔点-15摄氏度）时，迅速将导热油温度降至20摄氏度，并保持该温度匀速升温升华干燥；
步骤s11：当制品温度达到10摄氏度时，再将导热油温度升至50摄氏度，在此温度下干燥5小时。
实施例2：同于实施例1，区别仅在于酸碱缓冲液的摩尔浓度为0.012mol/l。
实施例3：同于实施例1，区别仅在于果糖二磷酸钠与左卡尼汀的质量比为0.9：1。
实施例4：同于实施例1，区别仅在于左卡尼汀的质量浓度为20g/l。
实施例5：同于实施例1，区别仅在于左卡尼汀的质量浓度为22g/l。
比较例：
步骤s1：按照重量比1：0.75-1：1.25称取甘露醇与左卡尼汀，搅拌使之完全溶解，混合均匀后，用0.1mol/l的盐酸调节酸碱度至5.7-6.3，左卡尼汀的质量浓度介于18-22g/l；
步骤s2：加入质量浓度为0.1g/l普通的针用活性炭搅匀，搅拌吸附30分钟；
步骤s3：超声过滤活性炭；
步骤s4：分装后将分装好的左卡尼汀药液置于冻干机内，进入真空冷冻干燥阶段：
步骤s41：预冻，温度为-45摄氏度，预冻2小时；
步骤s42：升华，在温度-45摄氏度至-15摄氏度之间升华15小时，然后在温度-15摄氏度至0度下升温11小时；
步骤s43：干燥，40摄氏度下保持2小时，得到成品。
将本发明制备的左卡尼汀成品与比较例所制备的对比：本发明得到左卡尼汀，块状物疏松、颗粒饱满，成品可迅速溶解，且在放置数天后成品溶液仍呈澄清状；而比较例得到的左卡尼汀，块状物皱缩、塌陷成品溶解缓慢，且在放置数天后溶液出现明显的发黄迹象；由此可知，本发明提供的制备工艺，可有效提高成品的质量。
本发明的有益效果如下：
1、通过缓冲液的引入提供了稳定的酸碱环境，可有效避免主药的酸解，提高药性和成品安全性。
2、通过果糖二磷酸钠的选择，保证了成品的稳定性。
3、通过专用活性炭的制备及选择，优化了吸附工艺，减少了成品中的杂质。
4、通过冻干工艺的优化，改善了成品微结构，提高了其复溶性。
虽然本发明已利用上述较佳实施例进行说明，然其并非用以限定本发明的保护范围，任何本领域技术人员在不脱离本发明的精神和范围之内，相对上述实施例进行各种变动与修改仍属本发明所保护的范围，因此本发明的保护范围以权利要求书所界定的为准。