降三高的虫草甾醇复合物的制作方法

本发明属于医药领域，具体涉及一种降三高的虫草甾醇复合物。

背景技术：

近年来，随着人们生活水平的不断提高，糖尿病、冠心病等疾病发病率日益增加。中草药作用稳定，副作用少，研究具有降糖降脂作用的中草药，能为临床上治疗糖尿病，高脂血症提供更多的方法。

虫草中所含有的虫草多糖是虫草体内含量最丰富、最重要的生物活性物质之一，具有广泛药理作用。近年来资源日益衰竭，人们尝试培养虫草菌丝体、子实体作天然虫草的替代，已经获得不同程度的认可。国家一类新药虫草菌粉，系采用从天然虫草中分离出虫草菌种，人工培养液体发酵和固体培养制成。

蛹虫草为子囊菌门，肉座目，虫草菌科、虫草属的模式种，又名北冬虫夏草、北虫草等。蛹虫草目前已实现人工栽培。虫草素、虫草酸和虫草多糖复合物是冬虫夏草菌特有的物质，是冬虫夏草特殊功效的主要指标。而恰恰是这些指标，在人工环境优裕条件下生长的北冬虫夏草含量可以比天然条件下生长得更高。人工培养的北冬虫夏草的蛋白质、氨基酸、维生素等含量均达到或超过天然冬虫夏草的水平。虽然人工培养的北冬虫夏草中的个别营养成分略低于天然冬虫夏草水平，但这些营养成分是可以通过研究加以提高的。

随着虫草传统功效不断地发掘，特别是虫草成份对应的药理研究和临床疗效果都得到了消费者的肯定，以虫草为原料的药品和保食品、保健品逐步开发并进入市场。根据国家食品药品监督管理局数据查询的结果，国产虫草保健食品大部分是原草或培育虫草直接销售，或是进行打粉、压片等粗加工销售，以单纯虫草制成的保健食品供应有两项弊端。

一是考虑到虫草价格昂贵，单品达到同样效果日服用剂量较大，产品价格较高，而令普通消费者难以承受；

二是没有基于中医基础理论，通过中药君、臣配伍发挥其最大效果，而使保健效能更为突出。

目前市场上多以简单的虫草鲜草、干草原材料进行销售，虫草深加工产品种类比较单一且数量少，虫草成份市场大部分走向高端医药产品为主，严重制约了虫草组合的附加价值和经济效益。且现有虫草饮品配方生产工艺不够合理，使得活性成分被破坏，营养物质损失过多，营养不均衡、保健作用不明显；另外在产品生产过程中添加过多辅料，如蔗糖、防腐剂、人工色素等，有损消费者身体健康，无法满足消费者滋补养生的需求。

技术实现要素：

本发明针对上述问题，提出了一种虫草多糖复合物，植物甾醇及多种其他物质如昆布粉，山楂果粉，马齿苋份等的配伍，以解决了现有技术虫草产品的缺陷，达到以虫草多糖复合物为君份主导、植物甾醇为臣份铺助、配以昆布粉、山楂果粉、马齿苋粉、葛根粉、黄精提取物、枸杞、酸枣仁、青钱柳、槐花组合而成，协同增效，降血压，降血脂和降血糖，特别是降血脂和降血糖的目的。

本发明采取的技术方案如下：

本发明提供一种降三高的虫草甾醇复合物，包括以下重量比的成分：

虫草多糖复合物25-35％、植物甾醇15-25％，昆布粉10-14％、山楂果粉3-5％、马齿苋粉4-6％、葛根粉5-7％、黄精提取物5-8％、枸杞4-6％、酸枣仁4-6％、青钱柳3-5％、槐花3-5％，余量为医用或食品保健用辅料。

所述虫草多糖复合物包括虫草多糖和虫草基础成分，其中所述虫草基础成分选自下列之一：

虫草粉或虫草发酵菌丝体的提取物或浓缩物；

其中虫草为虫草属真菌寄生并能产生子实体的菌物结合体，包括冬虫夏草，蛹虫草及虫草属的其他种。

进一步，所述虫草为蛹虫草。

进一步，所述虫草多糖利用蛹虫草提取的多糖或者液体发酵培养蛹虫草菌丝体，然后从发酵液中提取虫草多糖进行纯化。

进一步，所述虫草多糖复合物中虫草多糖的质量分数为20％-35％。

进一步，所述降三高的虫草甾醇片由以下重量比的成分组成：虫草多糖复合物30％、植物甾醇20％，昆布粉12％、山楂果粉4％、马齿苋粉5％、葛根粉6％、黄精提取物5％、枸杞5％、酸枣仁5％、青钱柳4％、槐花4％。

进一步，所述虫草多糖复合物中虫草多糖的质量分数为30％。

进一步，所述虫草基础成分为蛹虫草发酵菌丝体的浓缩物,浓缩倍数为10-20倍。

进一步，所述虫草甾醇复合物制成片剂。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：

本发明在虫草有效成分基础配方中加上高含量多糖的复合配方的重复价值是对人体的疾病预防、治疗、延年益寿更精准、更高效、更合理和均衡。在实践中纯粹的多糖高含量也远未达到上述预期目标，而发明人经过多年研究和实践发现，达到最高阀值的虫草基础有效成份(或者浓缩基础有效成份)配上高含量多糖时对人类疾病的预防、治疗、延年益寿达到最佳效果。而且虫草多糖复合物可以增强人体对其他物质的吸收效果，从而提升其他成分的功效。而且虫草多糖复合物可以增强人体对其他物质的吸收效果，从而提升其他成分的功效。

本发明通过虫草多糖复合物的特殊性，实现植物甾醇、昆布粉、山楂果粉、马齿苋粉、葛根粉、黄精、枸杞、酸枣仁、青钱柳、槐花功效的进一步增强；并通过中药的君臣配伍原理，合理配置本发明配方的组分和比例，以达到降三高的作用，在实践中一般血脂最难降低，但是本发明降血脂、血糖效果均上佳。而且本发明采用药食同源的原料，采用安全级别最高，即可以不限制用量的食品类原料进行合理配伍，兼具功效和安全性，无副作用，且无剂量限值。

附图说明

图1为给药第7天小鼠的血糖水平柱形图；

图2为给药第14天小鼠的血糖水平柱形图；

图3为给药14天小鼠口服葡萄糖的耐量(ogtt)曲线下面积柱形图。

具体实施方式：

下面结合具体实施例，对本发明做详细描述。

实施例1

虫草多糖复合物制备：

取虫草菌丝体，液态发酵法进行培养，培养5天后，提取培养物中的虫草多糖，提取方法采用现有技术即可，得到虫草粗多糖。然后对虫草粗多糖进行提纯，获得纯度大于90％的虫草多糖。

另取虫草菌丝体培养物进行浓缩，浓缩10倍后得到虫草培养液浓缩物，按重量百分数，30％的虫草多糖，70％的虫草培养液浓缩物配置虫草多糖复合物。

实施例2

黄精提取物的制备工艺：黄精→前处理→提取→浓缩→加醇静置冷却→过滤，浓缩→二次醇沉→浓缩→喷雾干燥→包装灭菌→成品

具体步骤

1、前处理：将黄精挑拣，切碎投至提取罐中浸泡3h。

2、提取：加入3倍量纯水，第一次回流提取3h，从溶媒沸腾计时，控制温度100℃，保温到时。压出药液，第二次再加入3倍量纯水回流提取2h。第三次再加入2倍量纯水回流提取1h。

3、浓缩：将提取的药液抽入浓缩罐中进行减压浓缩，温度控制在70℃以下，真空度控制在0.06mpa以上，将浸膏压入储液罐冷却。

4、醇沉、静置：注入3倍量的95％酒精的搅拌静置2h。

5、过滤：将静置后的上清醇液分离，过滤掉醇液得稀浸膏，浓缩。

6、二次醇沉：将稠膏用3倍量的80％酒精溶解，倾去上清液。

7、浓缩：将过滤后的药液进行浓缩，浓成稠膏。

8、喷雾干燥：将稠膏进行喷雾，水分＜20％。

实施例3

山楂果粉

1、选取优质山楂果：清洁、无污染、无腐烂、无霉变、无虫蛀的山楂果；

2、清洗干净，除去泥沙，风干水份；

3、按山楂比水重量为1:20的比例，加水升温至100～105℃沸水，持续30min；

4、抽提、过滤，得到山楂原浆；

5、烘干、过筛、灭菌。

实施例4

昆布粉的工艺流程：挑选原料-清洗-除盐-除腥味-干燥-粉碎-过筛-杀菌-封装；

1、挑选原料：挑选海带目，绳藻科，海带科，翅藻科和巨藻科，呈褐色或棕褐色，表面光滑藻体；

2、清洗除盐-清水漂洗泥沙，洗净后用有效氯浓度为2毫升/立方米的洁净水浸泡2-3小时，去除盐分，使藻体软化；

3、脱腥沥干。将软化藻体浸入20％柠檬酸溶液5-10小时，除去腥

味，然后用清水漂洗2-3次，除残留酸液，再将其沥干。

4、干燥：将沥干的海带置于烘干机内约6小时。分三段式工艺，第一段：55-60度/1小时；第二段60-65度/2小时；第三段：65度3小时；保持空气流速，及时排出湿蒸气。

5、粉碎过筛：采用粉碎机粉碎后，直接80目过筛；

6、杀菌，将昆布粉成品铺薄层，在无菌室进行杀菌处理；

实施例5

马齿苋粉

1、采新采收的马齿苋清水浸泡20分钟，再用净水冲洗3次以上，将泥灰及杂物清理干静；

2、使用鼓风干燥箱将其烘干；

3、按料比为1：4的比例把马齿苋与95％玉米酒精混合与胶桶中浸泡24小时以上。然后用200目的纱布过滤，取虑液。

4、在46℃，压力为-0.08mpa中把虑液浓缩到原料液的5％。按浓缩液的1％的比例添加蒸馏水，静置12个小时，让叶绿素析出，再用200的纱布过滤，最后用滤纸过滤，取虑液。

5、树脂的预处理

首先用去离子水充分洗涤，洗至洗水清亮为止，然后用4％hcl及4％naoh交替处理2—3次，每次酸碱用量大约为树脂体积的2倍，动态顺流通过，换酸换碱之间大量水洗酸、碱处理使其型变，最后用95％乙醇再浸泡1—2次。

6、预处理完的树脂用去离子泡12个小时，再用冲洗至无异味，最后用蒸馏水冲洗三遍，待用。

7、装柱，把树脂柱垂直固定好，往柱体底部塞一团脱脂棉，然后往柱体灌柱体积50％的1，3-丁二醇，再把树脂灌进柱体，树脂的高度约为柱体的3分之2。

8、装完柱后，往顶部塞也塞上一团脱脂棉。(注：装柱前后必须保持柱体内的水要一直浸没过树脂)

9、脱色

第一次脱色把虑液引流入柱体中，流速要慢，以免冲击到了棉球下的树脂。然后按每分钟2ml的流速过滤脱色。前期过滤脱色的液体(约为柱体虑液的3分之1)要另存。在过滤过程中，必须保持柱内虑液一直浸没过树脂。当过滤到虑液快没过顶部棉团时，把前期的虑液倒会柱体再次过滤，到虑液液面快没过棉团时结束第一次过滤脱色。得到淡黄色的马齿苋提取液。

第二次脱色用新的树脂柱，流速调为1ml每分钟，按第一次过滤脱色的方法操作。得到透明的马齿苋液体。

10、树脂再生使用失效的树脂先用4％hcl浸2—3小时，体积为树脂量的2倍，水洗至中性，然后用4％naoh浸2—3小时，水洗至中性，如吸附色素较多，树脂颜色较深可用95％乙醇浸3—4小时，水洗至水液透明。

11、成品灭菌把提取液1，3-丁二醇、酒精按1：4：1的比例混合，然后用旋转蒸发仪在45℃、-0.09mpa的环境下蒸发浓缩。最后可得成品。

实施例6

酸枣仁

(1)在通风无尘室温下筛选优质酸枣仁；

(2)清洗去除杂质，风干去除水份；

(3)粉碎装入萃取器，将萃取介质二氧化碳经计量后，从萃取器底部进入萃取器控制超临界温度为40-55℃，压力为20-38mpa，二氧化碳流量为1200-2000l/小时，萃取时间3-12小时；

(4)从萃取器顶部流出的含有酸枣仁油的超临界二氧化碳气体进入减压分离器中，酸枣仁油从减压分离器的底部放出，二氧化碳气体从分离器顶部流出经冷却后循环使用；

(5)萃取器中萃取酸枣仁油后的粉状物为脱脂酸枣仁粉。

实施例7

枸杞

选料、理料，选择新鲜卫生、粒形饱满、成熟度好的枸杞子与新鲜度好、符合食品卫生要求的枸杞叶为原料，去除腐烂、生霉果、虫蚀果、病变果、褐(黄)变及杂物。

洗料，用用质量分数为0.5％～1.0％的盐水浸泡20min～30min(分钟)后，用清水冲洗干净，烘干。

粉碎，用振动磨(带水冷装置)粉碎至120目(粒径约为60μm)，使细胞破壁，粉碎温度小于50℃。

脱气、在90kpa下脱气，粉料温度控制在30℃以下。

瞬间灭菌，用高温瞬时杀菌机灭菌，温度为98℃、时间为15s，用板式热交换器将粉料冷却至30℃。

实施例8

葛根粉

葛根原料挑选→清洗→去皮→切片→护色→漂洗→蒸煮→清洗→干燥→粉碎→过筛→葛根粉。

(1)原料选择：选择无损坏的新鲜葛根，用自来水清洗，除去表面附着的尘土杂物等。

(2)切片：将去皮后的葛根用蔬菜切片机切成一定规格的片状，切片的目的在于缩短干燥的时间，切片厚度、长、宽均为1cm。切片过程要尽量在短时间内完成，以控制切片过程中的酶促褐变的发生。

(3)护色：葛根清洗去皮后用0.35％柠檬酸和0.30％焦亚硫酸钠混合液护色1h，

(4)蒸煮：护色抑制非酶褐变，但葛根中存在氧化酶引起褐变依然存在，故需加热灭酶，工艺条件蒸煮一段时间，蒸煮后葛根易保持色泽、全粉易于冲泡。蒸煮16min。

(5)干燥：用烘干设备干燥，以保证产品的卫生。干燥时间可根据葛根片大小确定，要求最终水分在6％以下。置于60℃鼓风恒温干燥箱内烘干。

(6)粉碎、包装：将干燥后的葛根片，用中药粉碎机粉碎，使葛根粉的细度在80目左右。

实施例9

槐花

1、夏季花开放或花蕾形成时采收，除去杂质及梗，筛去灰屑。

2、置炒制容器内，用文火加热干燥，炒至深黄色“槐米”。

3、粉碎80目过筛。

实施例10：样品1的制备

称取实施例1-9中各原料(未提及原料选用普通市场购买即可)，按以下质量分数配置降三高的虫草甾醇片：

虫草多糖复合物25％、植物甾醇15％，昆布粉12％、山楂果粉5％、马齿苋粉6％、葛根粉7％、黄精提取物8％、枸杞6％、酸枣仁6％、青钱柳5％、槐花3％，麦芽糊精2％，压片得到降三高的虫草甾醇片。

实施例11：样品2的制备

降三高的虫草甾醇片

取蛹虫草菌丝体，液态发酵法进行培养，培养8天后，提取培养物中的虫草多糖，提取方法采用现有技术即可。本实施例选择用水提法提取，得到虫草粗多糖。然后对虫草粗多糖进行提纯，获得纯度大于95％的虫草多糖。

另取蛹虫草菌丝体培养物进行浓缩，浓缩10倍后得到虫草培养液浓缩物，按重量百分数，35％的虫草多糖，65％的虫草培养液浓缩物配置虫草多糖复合物。

按以下质量分数配置降三高的虫草甾醇片：

虫草多糖复合物35％、植物甾醇23％，昆布粉10％、山楂果粉3％、马齿苋粉4％、葛根粉5％、黄精提取物6％、枸杞4％、酸枣仁4％、青钱柳3％、槐花3％，压片得到降三高的虫草甾醇片。

实施例12：样品3的制备

降三高的虫草甾醇片

取蛹虫草菌丝体，液态发酵法进行培养，培养10天后，提取培养物中的虫草多糖，提取方法采用现有技术即可。本实施例选择用水提法提取，得到虫草粗多糖。然后对虫草粗多糖进行提纯，获得纯度大于90％的虫草多糖复。

另取蛹虫草菌丝体培养物进行浓缩，浓缩10倍后得到虫草培养液浓缩物，按重量百分数，30％的虫草多糖，70％的虫草培养液浓缩物配置虫草多糖复合物。

按以下质量分数配置降三高的虫草甾醇片：

虫草多糖复合物30％、植物甾醇20％，昆布粉12％、山楂果粉4％、马齿苋粉5％、葛根粉6％、黄精提取物5％、枸杞5％、酸枣仁5％、青钱柳4％、槐花4％。配制后压片制成片剂。

实施例13：对照样品1的制备

降三高的虫草甾醇片

取蛹虫草菌丝体，液态发酵法进行培养，培养10天后，提取培养物中的虫草多糖，提取方法采用现有技术即可。本实施例选择用水提法提取，得到虫草粗多糖。然后对虫草粗多糖进行提纯，获得纯度大于90％的虫草多糖复。

另取蛹虫草菌丝体培养物进行浓缩，浓缩10倍后得到虫草培养液浓缩物，按重量百分数，30％的虫草多糖，70％的虫草培养液浓缩物配置虫草多糖复合物。

按以下质量分数配置降三高的虫草甾醇片：

虫草多糖复合物40％、植物甾醇15％，昆布粉10％、山楂果粉4％、马齿苋粉5％、葛根粉5％、黄精提取物5％、枸杞4％、酸枣仁4％、青钱柳4％、槐花4％。配制后压片制成片剂。

实施例14：对照样品2的制备

降三高的虫草甾醇片

取蛹虫草菌丝体，液态发酵法进行培养，培养10天后，提取培养物中的虫草多糖，提取方法采用现有技术即可。本实施例选择用水提法提取，得到虫草粗多糖。然后对虫草粗多糖进行提纯，获得纯度大于90％的虫草多糖复。

另取蛹虫草菌丝体培养物进行浓缩，浓缩10倍后得到虫草培养液浓缩物，按重量百分数，30％的虫草多糖，70％的虫草培养液浓缩物配置虫草多糖复合物。

按以下质量分数配置降三高的虫草甾醇片：

虫草多糖复合物30％、植物甾醇29％，昆布粉10％、山楂果粉3％、马齿苋粉4％、葛根粉5％、黄精提取物5％、枸杞4％、酸枣仁4％、青钱柳3％、槐花3％。配制后压片制成片剂。

实施例15：虫草甾醇对糖尿病小鼠降糖降脂作用研究

(1)糖尿病小鼠造模

取昆明种小鼠，雄性，体重20-23g，小鼠禁食不禁水12小时，预实验后以链脲佐菌素150mg·kg^-1对小鼠进行腹腔注射(stz溶于0.1mol·l^-1、ph值4.5的柠檬酸/柠檬酸钠缓冲液中，现用现配，冰浴保存)。正常对照组小鼠腹腔注射等量的上述缓冲溶液。72h后(小鼠采血前不禁水、禁食12h)眼球后静脉丛采血50μl，用离心机3000r·min-1离心5min，分离血清，用葡萄糖试剂盒测定小鼠空腹血糖(fbg)，凡fbg≥11.0mmol·l^-1视为糖尿病动物模型。将成模的小鼠随机分为二甲双胍组(阳性对照组)、模型对照组及虫草甾醇对照组(样品组)，二甲双胍对照组(阳性对照)，虫草多糖复合物组(对照样品3)，其是由30％的虫草多糖，70％的虫草培养液浓缩物配置而成，虫草粗多糖纯度大于95％，每组4只，另取4只正常小鼠。小鼠每日适当喂食1次，自由饮水。

(2)试验方案

成模后第2天开始灌胃给药，每天正常小鼠对照组(正常对照组)给予0.9％氯化钠溶液10ml/kg，模型对照组给予0.9％氯化钠溶液10ml/kg，二甲双胍组(阳性对照)给予二甲双胍250mg/kg，虫草甾醇组及虫草多糖复合物组(对照样品3)给予100mg/kg，每天空腹给药1次，连续灌胃14天，分别给药第7,14天取血测血糖，取血前禁食12小时，眼球后静脉丛采血，用葡萄糖试剂盒测定血糖值。小鼠用药第14天，禁食12小时，各组灌胃葡萄糖2.5g/kg，分别测定0，0.5，1，2各小时小鼠的血糖，比较口服葡萄糖的耐量(ogtt)变化情况，并计算耐量的血糖浓度-时间曲线下面积(auc)，数据处理采用graphpadprism5软件。

(3)试验结果

试验结果表明(图1，图2)给药前，模型对照组小鼠血糖与正常对照组相比差异具有统计学意义(*p＜0.05，**p＜0.01)，给药后，样品1-3与模型对照组相比，血糖明显降低，说明样品1-3具有显著的降血糖效果。而对照样品1-3降糖效果不明显。

试验结果表明(图3)各组小鼠在灌葡萄糖溶液后0.5小时，血糖迅速升高，正常对照组小鼠血糖与模型对照组和样品组小鼠相比差异有统计学意义(*p＜0.05，**p＜0.01)。正常对照组小鼠2小时基本能回复到灌葡萄糖前血糖水平，虫草甾醇复合物各组小鼠血糖在2小时的血糖水平基本与均正常对照组相当，说明虫草甾醇复合物各组(样品1-3)对糖尿病小鼠耐受能力有增强作用，能够较快抑制小鼠餐后血糖升高，从而改善糖尿病小鼠高血糖状态。而对照样品1-3抵抗血糖升高作用不明显。

(4)各给药组对糖尿病小鼠空腹血脂的影响

与正常对照组比较，模型对照组tg、tc、ldl-c明显升高，hdl-c明显降低；与模型对照组相比，样品组(虫草甾醇复合物)tg、tc、ldl-c均有一定降低，二甲双胍组和样品组相比差异具有统计学意义(*p＜0.05，**p＜0.01)，对照样品组tg、tc、ldl-c降低不明显。结果见表1。

表1各组小鼠空腹血脂比较(mmol/l)

通过实验结果可知，本发明的虫草甾醇复合物在降糖降脂领域具有潜在的药用价值。

本发明关于虫草甾醇片的制备方法，不构成对该保健食品的限定，也可采用本领域公知的其它方法来制备，还可以采用常规方法制备成任何常规内服制剂，例如可以将这些原料水煎，纯化、浓缩水煎液得干膏，经粉碎制成颗粒剂服用；可以将这些原料水煎，然后浓缩水煎液按汤剂服用；也可以制成早餐热饮；还可以探索其它合适的剂型。

以上所述仅为本发明的优选实施例，并非因此即限制本发明的专利保护范围，凡是运用本发明说明书及附图内容所作的等效结构变换，直接或间接运用在其他相关的技术领域，均同理包括在本发明的保护范围内。