本发明属于药物领域，具体涉及一种治疗未分化甲状腺癌的药物组合物及其制备方法和用途。
背景技术：
甲状腺癌(thyroidcarcinoma)为常见的甲状腺恶性肿瘤，约占全身恶性肿瘤的1％，包括乳头状癌、滤泡状癌、未分化癌和髓样癌四种类型，其中未分化甲状腺癌为甲状腺癌中恶性程度最高的一种，未分化型甲状腺癌的具体病因目前仍不明确，可能与高碘饮食、缺碘、辐射、遗传因素等相关，其发病率约占甲状腺癌发病率的10％，具有患者年龄高、发病迅速、转移迅速、治疗困难、预后差、存活率低等特点，其1年生存率仅为约20％，5年生存率约为5％，平均生存时间为3-10个月。未分化甲状腺癌引起死亡的主要原因是局部肿瘤进展导致的呼吸梗阻，以及肿瘤转移引起的并发症。
目前西医针对未分化甲状腺癌的治疗以外科手术治疗为主，辅以放射治疗和内分泌治疗。但手术治疗、内分泌治疗、放射治疗都会使患者气血受损，正气损伤，而未分化甲状腺癌又具有患者年龄高、发病迅速、转移迅速等特点，确诊时往往已经出现了局部浸润和全身的转移，未分化甲状腺癌患者年龄高、身体条件差，一般难以承受手术所带来的创伤及术后并发症，即使进行外科手术，由于局部浸润和全身转移情况的存在，也往往难以全面清癌症细胞，且有可能会导致癌症细胞的加速转移，用以辅助手术治疗的放射治疗、内分泌治疗也会降低患者抵抗力，进一步的对患者身体造成较大的伤害。因此，对于未分化甲状腺癌的西医治疗效果非常不理想，直接导致了目前未分化甲状腺癌患者的生存期非常短，往往在确诊后12个月内就会死亡。
甲状腺疾病对应于中医上的“瘿病”，中医对瘿病的最早的记录可以追溯到战国时代。在病因认识上，《吕氏春秋尽数篇》载“轻水者，多秃与癭人”，《诸病源候论癭候》引《养生方》“诸山水黑土中，出泉流者，不可久居，常食令人作瘿病，动气增患”，《杂病源流犀烛》载“然西北方依山居涧之民，食溪谷之水，受冷毒之气，其间妇女，往往生节如瘿”，认识到甲状腺疾病与水土因素有关，在用药方面，《肘后备急方》首次提出使用海藻、昆布治疗瘿病；《千金翼方》、《外台秘要》等记载昆布、羊靥、鹿靥等药物治疗瘿病；《本草纲目》记载了黄药子治疗瘿病。历代先后提出用于瘿病的方剂包括海藻玉壶汤、活血消瘿汤、十全流气汤、消瘰丸等，这些方剂大多都使用了含碘中药，如昆布、海藻等。
对于未分化甲状腺癌，也有医者使用含碘类中药进行治疗，但现代病理学研究发现高碘摄入为未分化甲状腺癌的发病因素之一，因此，使用含碘中药治疗未分化甲状腺癌属于中医治疗未分化甲状腺癌的误区之一。中医治疗未分化甲状腺癌的另一误区是使用活血化瘀、软坚散结类药物，由于未分化甲状腺癌本身已经具有转移迅速等特点，针对该病使用活血化瘀、软坚散结类药物将会进一步加剧未分化甲状腺癌的转移，会进一步加剧病情的恶化，增大后续治疗的难度，缩短患者的生存期。
本申请发明人在充分研究未分化甲状腺癌的病因的基础上，提出了以舒肝解郁、扶本助阳为主，以补益气血、滋阴清热为辅的未分化甲状腺癌的治疗方法，取得了良好的治疗效果。
技术实现要素：
本发明的目的是一种治疗未分化甲状腺癌的药物组合物及其制备方法和用途。
一方面，本发明提供一种用于治疗未分化甲状腺癌的药物组合物，由柴胡、香附、生地黄、浙贝母、淫羊藿、姜黄、黄精、委陵菜、白花蛇舌草、王不留行、厚朴、党参和甘草制成。
优选的，所述药物组合物由以下重量配比的柴胡8-10、香附8-10、生地黄3-6、浙贝母3-6、淫羊藿5-9、姜黄3-6、黄精5-9、委陵菜3-6、白花蛇舌草3-6、王不留行3-6、厚朴3-6、党参3-6和甘草2-4制成。
更优选的，所述药物组合物由以下重量配比的柴胡9、香附9、生地黄5、浙贝母5、淫羊藿8、姜黄5、黄精8、委陵菜5、白花蛇舌草5、王不留行5、厚朴5、党参5和甘草3制成。
本发明药物组合物为口服药物组合物，优选的，所述口服药物组合物选自汤剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、散剂。
本发明的再一个目的是提供一种用于治疗未分化甲状腺癌的药物组合物的制备方法，包括以下步骤：
1)备料：按照配方称取各原料药；
(2)粉碎：将配方量的柴胡、香附、生地黄、浙贝母、淫羊藿、姜黄、黄精、委陵菜、白花蛇舌草、王不留行、厚朴、党参和甘草粉碎过10-30目筛，混合均匀后备用；
(3)提取：取步骤(2)所得混合粉料，加入2-4倍量的70-90％乙醇溶液，提取2-4次，每次0.5-1.5小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩，优选的浓缩至25℃时相对密度为1.15～1.25的浸膏；
以及任选的：
(4)制剂：在步骤(3)所得浸膏中添加药学上可接受的辅料后制备成相应剂型，即得。
优选的，所述步骤(2)中粉碎过20目筛；步骤(3)中混合粉料加入3倍量75％的乙醇，提取3次，每次提取1小时。
优选的，所述剂型为汤剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂或散剂。
优选的，所述药学上接受的辅料选自：稀释剂、粘合剂、崩解剂、润滑剂或助流剂、矫味剂、包衣剂、明胶胶囊壳等。
所述稀释剂选自淀粉、糊精、微晶纤维素等；所述粘合剂选自：淀粉浆、羟丙基甲基纤维素、羧甲基纤维素钠、聚维酮等；所述崩解剂选自羧甲基淀粉钠、交联聚维酮、交联羧甲基纤维素钠等；所述润滑剂或助流剂选自：硬脂酸镁、滑石粉、微粉硅胶等；所述矫味剂选自：阿斯巴甜、甜菊苷、甘草甜素、糖精钠。
本发明的再一个目的是提供柴胡、香附、生地黄、浙贝母、淫羊藿、姜黄、黄精、委陵菜、白花蛇舌草、王不留行、厚朴、党参和甘草制备治疗未分化甲状腺癌的药物组合物的用途。
优选的，所述药物组合物由以下重量配比的柴胡8-10、香附8-10、生地黄3-6、浙贝母3-6、淫羊藿5-9、姜黄3-6、黄精5-9、委陵菜3-6、白花蛇舌草3-6、王不留行3-6、厚朴3-6、党参3-6和甘草2-4制成。
更优选的，所述药物组合物由以下重量配比的柴胡9、香附9、生地黄5、浙贝母5、淫羊藿8、姜黄5、黄精8、委陵菜5、白花蛇舌草5、王不留行5、厚朴5、党参5和甘草3制成。
所述药物组合物为口服药物组合物，优选的，所述口服药物组合物选自汤剂、片剂、胶囊剂、颗粒剂、丸剂、散剂。
本发明药物组合物中：
柴胡，为伞形科植物柴胡或狭叶柴胡的干燥根，味苦、性微寒，归肝、胆经。有和解表里，疏肝升阳之功效。常用于感冒发热、寒热往来、疟疾、肝郁气滞、胸肋胀痛、脱肛、子宫脱垂、月经不调等症的治疗。
香附，为莎草科植物莎草的干燥根茎，味辛、微苦、微甘，性平，归肝、脾、三焦经。具有疏肝解郁，理气宽中，调经止痛的功效。常用于用于肝郁气滞，胸胁胀痛，疝气疼痛，乳房胀痛，脾胃气滞，脘腹痞闷，胀满疼痛，月经不调，经闭痛经等症的治疗。
生地黄，为玄参科植物地黄的块根，味甘苦，性凉。归心、肝、脾、肺经，有滋阴清热，凉血补血的功效。常用于治阴虚发热，消渴，吐血，衄血，血崩，月经不调，胎动不安，阴伤便秘等症的治疗。
浙贝母，百合科植物浙贝母的干燥鳞茎。味苦，性寒，归肺、心经。具有清热化痰止咳，解毒散结消痈的功效。用于风热咳嗽，痰火咳嗽，肺痈，乳痈，瘰疬，疮毒。
淫羊藿，为小檗科植物淫羊、箭叶淫羊藿、柔毛淫羊藿、或朝鲜淫羊藿的干燥叶，味辛、甘，性温，归肝、肾经。具有补肾壮阳,祛风除湿等功效。常用于用于肾虚阳痿、腰膝无力,风寒湿痹,筋骨酸痛等症的治疗。
姜黄，为姜科植物姜黄的干燥根茎。味辛、苦，性温，归脾、肝经。具有破血行气，痛经止痛的功效，常用于胸胁刺痛，胸痹心痛，痛经经闭，症瘕，风湿肩臂疼痛，跌扑肿痛等症的治疗。
黄精，为百合科植物滇黄精、黄精或多花黄精的干根茎。味甘，性平。归脾、肺、肾经。具有补气养阴，健脾，润肺，益肾等功效。常用于脾胃气虚，体倦乏力，胃阴不足，口干食少，肺虚燥咳，劳嗽咳血，精血不足，腰膝酸软，须发早白，内热消渴等症的治疗。
委陵菜，为蔷薇科植物委陵菜的干燥全草，味苦，性寒，归肝、大肠经。具有清热解毒，凉血止痢等功效，常用于赤痢腹痛，久痢不止，痔疮出血，痈肿疮毒等症的治疗。
白花蛇舌草，为茜草科耳草属植物白花蛇舌草的全草。味微苦，性寒，归胃、大肠、小肠经。具有清热解毒，利湿通淋等功效，常用于肺热喘咳，咽喉肿痛，肠痈，疖肿疮疡，毒蛇咬伤，热淋涩痛，水肿，痢疾，肠炎，湿热黄疸，癌肿等症的治疗。
王不留行，为石竹科植物麦蓝菜的干燥成熟种子。味苦，性平。归肝、胃经。常用于用于经闭，痛经，乳汁不下，乳痈肿痛，淋证涩痛等症的治疗。
厚朴，为木兰科植物厚朴或凹叶厚朴的干燥树皮、根皮及枝皮。味苦、辛，性温，归脾、胃、肺、大肠经。具有燥湿消痰，下气除满等功效，常用于湿滞伤中，脘痞吐泻，食积气滞，腹胀便秘，痰饮喘咳等症的治疗。
党参，为桔梗科植物党参、素花党参、或川党参等的干燥根。味甘，性平，归脾、肺经。具有补中益气、止渴、健脾益肺，养血生津等功效。常用于脾肺气虚，食少倦怠，咳嗽虚喘，气血不足，面色萎黄，心悸气短，津伤口渴，内热消渴等症的治疗。
甘草，为豆科植物甘草、胀果甘草或光果甘草的干燥根和根茎。味甘，性平，归心、肺、脾、胃经。具有补脾益气，清热解毒，祛痰止咳，缓急止痛，调和诸药等功效，常用于脾胃虚弱，倦怠乏力，心悸气短，咳嗽痰多，脘腹、四肢挛急疼痛，痈肿疮毒等症的治疗，以及用于缓解药物毒性、烈性。
本发明有益效果
本发明发明人在充分研究的基础上，有效规避了现有中医治疗未分化甲状腺癌的误区，并提出了以舒肝解郁、扶本助阳为主，以补益气血、滋阴清热为辅的未分化甲状腺癌的治疗方法，可有效抑制癌细胞的增殖、迁移，增强患者自身抵抗力，从而延缓未分化甲状腺癌的病情发展，延长患者的生存时间，取得了良好的未分化甲状腺癌的治疗效果。
本发明药物组合物配伍合理，各药味之间协同发挥抗未分化甲状腺癌的作用，筛选过程中的实验研究显示如果去除药物组合物中的白花蛇舌草、王不留行，剩余药物组合物抗未分化甲状腺癌作用显著降低，而白花蛇舌草与王不留行组合抗未分化甲状腺癌的效果也不理想。
本发明药物组合物安全、无副作用，制备方法简单，适合工业化生产，可广泛用于未分化甲状腺癌及其他类型甲状腺癌的预防和治疗。
具体实施方式
在下文中更详细地描述了本发明以有助于对本发明的理解。
实施例1:一种治疗未分化甲状腺癌的汤剂
柴胡9g、香附9g、生地黄5g、浙贝母5g、淫羊藿8g、姜黄5g、黄精8g、委陵菜5g、白花蛇舌草5g、王不留行5g、厚朴5g、党参5g和甘草3g，按照以下方法制备：
(1)备料：按照配方称取各原料药；
(2)粉碎：将配方量的柴胡、香附、生地黄、浙贝母、淫羊藿、姜黄、黄精、委陵菜、白花蛇舌草、王不留行、厚朴、党参和甘草粉碎过20目筛，混合均匀后备用；
(3)提取：取步骤(2)所得混合粉料，加入3倍量的75％乙醇溶液，提取3次，每次1小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至1g生药/ml，即得本发明治疗未分化甲状腺癌的汤剂。
实施例2:一种治疗未分化甲状腺癌的片剂
柴胡90g、香附90g、生地黄50g、浙贝母50g、淫羊藿80g、姜黄50g、黄精80g、委陵菜50g、白花蛇舌草50g、王不留行50g、厚朴50g、党参50g和甘草30g，按照以下方法制备：
(1)备料：按照配方称取各原料药；
(2)粉碎：将配方量的柴胡、香附、生地黄、浙贝母、淫羊藿、姜黄、黄精、委陵菜、白花蛇舌草、王不留行、厚朴、党参和甘草粉碎过20目筛，混合均匀后备用；
(3)提取：取步骤(2)所得混合粉料，加入3倍量的75％乙醇溶液，提取3次，每次1小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至25℃时相对密度为1.15～1.25的浸膏；
(4)制剂：在步骤(3)所得浸膏中添加药学上可接受的辅料后压片，即得本发明治疗未分化甲状腺癌的片剂。
实施例3：一种治疗未分化甲状腺癌的颗粒剂
柴胡80g、香附80g、生地黄30g、浙贝母30g、淫羊藿50g、姜黄30g、黄精50g、委陵菜30g、白花蛇舌草30g、王不留行30g、厚朴30g、党参30g和甘草20g，按照以下方法制备：
(1)备料：按照配方称取各原料药；
(2)粉碎：将配方量的柴胡、香附、生地黄、浙贝母、淫羊藿、姜黄、黄精、委陵菜、白花蛇舌草、王不留行、厚朴、党参和甘草粉碎过20目筛，混合均匀后备用；
(3)提取：取步骤(2)所得混合粉料，加入3倍量的75％乙醇溶液，提取3次，每次1小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至25℃时相对密度为1.15～1.25的浸膏；
(4)制剂：在步骤(3)所得浸膏中添加药学上可接受的辅料后制粒，即得本发明治疗未分化甲状腺癌的颗粒剂。
实施例4：一种治疗未分化甲状腺癌的胶囊剂
柴胡100g、香附100g、生地黄60g、浙贝母60g、淫羊藿90g、姜黄60g、黄精90g、委陵菜60g、白花蛇舌草60g、王不留行60g、厚朴60g、党参60g和甘草40g，按照以下方法制备：
(1)备料：按照配方称取各原料药；
(2)粉碎：将配方量的柴胡、香附、生地黄、浙贝母、淫羊藿、姜黄、黄精、委陵菜、白花蛇舌草、王不留行、厚朴、党参和甘草粉碎过20目筛，混合均匀后备用；
(3)提取：取步骤(2)所得混合粉料，加入3倍量的75％乙醇溶液，提取3次，每次1小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至25℃时相对密度为1.15～1.25的浸膏；
(4)制剂：在步骤(3)所得浸膏中添加药学上可接受的辅料制粒后填充于明胶胶囊壳，即得本发明治疗未分化甲状腺癌的胶囊剂。
对比例1：柴胡9g、香附9g、生地黄5g、浙贝母5g、淫羊藿8g、姜黄5g、黄精8g、委陵菜5g、厚朴5g、党参5g和甘草3g，按照以下方法制备：
(1)备料：按照配方称取各原料药；
(2)粉碎：将配方量的柴胡、香附、生地黄、浙贝母、淫羊藿、姜黄、黄精、委陵菜、厚朴、党参和甘草粉碎过20目筛，混合均匀后备用；
(3)提取：取步骤(2)所得混合粉料，加入3倍量的75％乙醇溶液，提取3次，每次1小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至25℃时相对密度为1.15～1.25的浸膏。
对比例2：白花蛇舌草10g、王不留行10g，按照以下方法制备：
(1)备料：按照配方称取各原料药；
(2)粉碎：将配方量的白花蛇舌草、王不留行粉碎过20目筛，混合均匀后备用；
(3)提取：取步骤(2)所得混合粉料，加入3倍量的75％乙醇溶液，提取3次，每次1小时，合并提取液，回收乙醇，浓缩至25℃时相对密度为1.15～1.25的浸膏。
效果例1：本发明药物组合物抗未分化甲状腺癌细胞增殖的效果
1.1实验药物
本发明实施例2步骤(3)所得浸膏使用无菌pbs稀释至5g生药/ml；
对比例1-2所得浸膏均使用无菌pbs稀释至5g生药/ml。
1.2实验实验方法
取对数生长期的人未分化甲状腺癌细胞(ash-3)，使用含10％胎牛血清的1640培养基稀释至5×104/ml，接种于96孔培养板中，每孔200μl，于37℃、5％co2的无菌培养箱中培养24h，弃去上清，重新加入含10％胎牛血清的1640培养基，每孔200μl。
将稀释至5g生药/ml的本发明实施例2步骤(3)所得浸膏及对比例1-2浸膏给药至96孔板中，每孔50μl，每种药物平行三孔。继续培养24小时后，每孔加入5mg/ml的mtt20μl，继续培养4小时后，弃去上清，每孔加入100μldmso，震动溶解10分钟后，施用酶标仪测定570nm处的吸光度值，计算细胞增殖抑制率，具体结果见表1，其中：
细胞增殖抑制率(％)＝(对照组吸光度值-实验组吸光度值)/对照组吸光度值×100％。
1.3实验结果
表1本发明药物组合物对人未分化甲状腺癌细胞增殖的影响
表1实验结果显示了去除白花蛇舌草和王不留行后所得对比例1浸膏虽然显示了一定的人未分化甲状腺癌细胞的增殖抑制效果，但抑制效果非常微弱，白花蛇舌草和王不留行提取物的对比例2浸膏对人未分化甲状腺癌细胞的增殖抑制效果相对于对比例1稍强，但明显弱于本发明实施例2步骤(3)所得浸膏对人未分化甲状腺癌细胞的增殖抑制效果。该实验结果显示了本发明药物组合物中各药味之间存在配伍增效的效果。
效果例2：本发明药物抗未分化甲状腺癌细胞迁移的效果
2.1实验药物
本发明实施例2步骤(3)所得浸膏使用无菌pbs稀释至5g生药/ml；
对比例1-2所得浸膏均使用无菌pbs稀释至5g生药/ml。
2.2实验实验方法
取对数生长期的人未分化甲状腺癌细胞(ash-3)，使用含10％胎牛血清的1640培养基稀释至5×105/ml，接种于6孔培养板中，每孔1.5ml，于37℃、5％co2的无菌培养箱中培养至细胞完全铺满，使用200μltip头沿每孔直径位置一次性划出一无细胞的划痕，使用无菌pbs清洗6孔板每孔后弃去上清，重新加入含10％胎牛血清的1640培养基1.5ml/孔，并同时添加试验药物，每孔400μl，继续培养，并记录划痕两边细胞完全融合所需时间，具体结果见表2。
2.3实验结果
表2本发明药物组合物对人未分化甲状腺癌细胞迁移的影响
表2实验结果显示，空白组与对比例1组人未分化甲状腺癌细胞的划痕融合所需时间最短，表明该两组细胞呈现了高迁移活性，对比例2组细胞融合所需时间稍长于空白组与对比例1组，而本发明实施例2组细胞划痕融合所需时间最长，为空白组的3.5倍，其中虽然存在本发明药物组合物对人未分化甲状腺癌细胞增殖抑制的影响，但也显示了本发明药物组合物对于人未分化甲状腺癌细胞迁移的高抑制活性。
效果例3：本发明药物组合物对未分化甲状腺癌荷瘤裸鼠的影响
3.1实验药物
本发明实施例2步骤(3)所得浸膏使用无菌pbs稀释至5g生药/ml；
对比例1-2所得浸膏均使用无菌pbs稀释至5g生药/ml。
3.2实验动物及实验方法
6周龄裸鼠30只，适应性饲养2d后，于右前肢腋下接种人未分化甲状腺癌细胞(ash-3)，其中细胞密度6×105/ml，接种量均为0.2ml。接种后继续饲养2周，选择接种成功的裸鼠20只，随机分为四组，具体为模型组、本发明实施例2组、对比例1-2组，每组5只，每只裸鼠每天灌胃给药一次，灌胃量均为0.4ml，连续灌胃21天，末次灌胃后2h，裸鼠颈椎脱臼处死，剥离肿瘤后称重，计算抑瘤率，具体实验结果见表3，其中：
抑瘤率(％)＝(模型组瘤重-实验组瘤重)/模型组瘤重×100％。
1.3实验结果
应用统计软件spss的多因素方差分析模块进行数据分析，p<0.05表示差异有统计学意义。
表3本发明药物组合物对人未分化甲状腺癌细胞荷瘤裸鼠的影响
与模型组比较：**p<0.01。
表3实验结果显示了本发明药物组合物在体内也具有显著的抑制人未分化甲状腺癌的效果，其抑瘤率超过了70％，而不含白花蛇舌草和王不留行的对比例1组的瘤重还重于模型组，显示了对比例1组药物组合物的浸膏在体内未显示出抑瘤活性，而对比例2组的白花蛇舌草和王不留行浸膏虽然显示了一定的抑瘤效果，但抑瘤率明显低于本发明实施例2组。
以上描述了本发明优选实施方式，然其并非用以限定本发明。本领域技术人员对在此公开的实施方案可进行并不偏离本发明范畴和精神的改进和变化。