本发明涉及口服液
技术领域：
，更具体的是涉及一种改善脑神经组织的功能性口服液及其制备方法。
背景技术：
：大脑活动可分为记忆和思考想象，是大脑对经验过事物的识记、保持、再现或再认，它是进行思维、想象等高级心理活动的基础。由于生活压力，睡眠不良，脑细胞疲劳，大脑用度过大等因素导致的大脑思考力下降、记忆力衰退等是在当今社会人群中普遍存在的症状，稍严重会出现脑动脉硬化症、脑缺血性和出血性中风后遗症、短暂性脑缺血发作等脑循环障碍性疾病，更严重可能会出现大脑不听指挥、失语症、运用不能、记忆力差、认知功能障碍、眩晕和其它脑前庭问题及头痛等。神经节多糖和神经节苷脂是含唾液酸的糖神经鞘脂，存在于哺乳类动物脑细胞膜中，其在脑神经系统中含量非常丰富，是脑神经细胞膜及其重要的组成成分，在脑神经中发生、生长、分化过程中起必不可少的作用，对于损伤后的脑神经修复也非常重要，具有促进脑神经再生、促进脑神经轴突生长和突触形成、恢复脑神经支配功能；还具有改善脑神经传导、促进脑电波活动及其它脑神经电生理指标的恢复、保护脑细胞膜、促进脑细胞膜各种酶活性恢复等作用。神经节多糖和神经节苷脂是一种分子量小的糖脂类复合物质，能穿过血脑屏障进入大脑，直接作用于人脑细胞，镶嵌在受损的神经细胞膜上，稳定和改善神经细胞膜的物质交换功能，通过促进各种形态、生化、组化、神经生理及行为参数的改善，促使凋亡的神经细胞恢复活力，具有促进神经细胞及大脑组织的正常发育、修复损伤神经及大脑组织作用，是用于溶栓、抗凝或止血和新生儿缺氧缺血性脑病的有效物质，对改善记忆能力、修复脑损伤、老年痴呆及帕金森氏病有一定的改善作用。目前市场上治疗大脑损伤的药物都是针剂和片剂，这类药物对患者来说，操作不便，难度大且费用高，只有出现严重问题时才择次进行注射，老百姓无法接受经常性治疗和补充脑组织需求物质。由于神经节多糖和神经节苷脂是水溶性物质，极易溶解于水，直接口服吸收快，经过申请人大量实验研究，开发了一种方便口服的能补充大脑神经节多糖和神经节苷脂的口服溶液饮料，该口服液饮料能时刻补充大脑所需物质。技术实现要素：本发明的目的在于：为了解决目前市场上治疗大脑损伤的药物都是针剂和片剂，具有操作不便和费用高的缺点，老百姓难以经常性补充大脑所需的神经节多糖和神经节苷脂的问题，本发明提供一种方便服用的改善脑神经组织的功能性口服液，能时刻补充大脑所需的神经节多糖和神经节苷脂。本发明为了实现上述目的具体采用以下技术方案：一种改善脑神经组织的功能性口服液，由以下重量份数的原料组成，所述原料包括除人以外的哺乳动物大脑组织提取物1-3份、茶粉0.1-1.5份、水1000-1500份、调味剂0.4-2份。优选地，所述调味剂包括薄荷脑、乳化剂、香精、甜味剂和保护剂。上述一种改善脑神经组织的功能性口服液，由以下重量份数的原料组成，所述原料包括除人以外的哺乳动物大脑组织提取物1-3份、茶粉0.1-1.5份、水1000-1500份、薄荷脑0.005-0.3份、乳化剂0.1-0.3份、香精0.05-0.3份、甜味剂0.05-0.3份、保护剂0.2-0.6份，所述水为纯化水。优选地，所述除人以外的哺乳动物大脑组织提取物为猪、牛、羊或马的大脑组织提取物。优选地，所述茶粉为红茶粉、绿茶粉、草莓茶粉、茉莉花茶粉和菊花茶粉中的一种。优选地，所述乳化剂为吐温80。优选地，所述香精为草莓香精、苹果香精和柠檬酸中的一种。优选地，所述甜味剂为三氯蔗糖、蔗糖和糖精中的一种。优选地，所述保护剂为β-环糊精。优选地，所述除人以外的哺乳动物大脑组织提取物的制备包括以下步骤:1)称取冷冻的除人以外的哺乳动物大脑组织，解冻后除去杂质，再将大脑组织粉碎成脑浆；2)将脑浆装入超临界萃取装置进行萃取，得到萃取物；3)将萃取物加入提取设备，并加入乙醇，调节ph以有效去除游离脂类杂质，回流提取并过滤得到乙醇提取液和滤渣；4)将步骤3)中滤渣重复步骤3)；5)收集步骤3)和步骤4)中的乙醇提取液并回收乙醇，得到提取液；6)将提取液冷却后沉淀，过滤得到提取物，将提取物干燥粉碎即得到除人以外的哺乳动物大脑组织提取物。一种改善脑神经组织的功能性口服液的制备方法，包括以下步骤：1)制备纯化水：制备纯化水使其在25℃±1℃下的电导率小于5us/cm；2)制备茶汤：将茶粉溶解于纯化水中，并加热搅拌使其溶解制得茶汤；配制茶汤的温度为30-100℃，高温溶解能得到透明澄清茶汤，优选溶解温度为80℃以上。3)降温：称取纯化水加入步骤2)的茶汤中，降温至60℃以下，优选降温至30-40℃；4)溶解大脑组织提取物并定容：称取大脑组织提取物并溶解到步骤3)的茶汤中；再加纯化水定容；5)调味：向步骤4)的茶汤中加入调味剂搅拌使其溶解；6)精滤：将步骤5)的茶汤精滤除去杂质和不溶物；精滤可为膜过滤、过滤绵过滤，或者加入助滤剂如硅藻土等操作。7)灌装灭菌及冷却：将步骤6)的茶汤进行灌装，并将灌装好的茶汤进行灭菌、冷却至室温后包装即制得改善脑神经组织的功能性口服液。采用蒸汽高温灭菌操作可使本发明口服液长期放置而不变质。冷却可采用喷水冷却、直接放入水中冷却或者室温冷却等操作。本发明的有益效果如下：1.本发明制得的改善脑神经组织的功能性口服液服用方便、能时刻补充大脑所需的神经节多糖和神经节苷脂；外观、口感和气味基本符合大众的需求；稳定性好，放置24个月后仍为透明澄清液体，状态均匀、色泽均匀一致，无正常视力可见外来异物，且微生物含量检测达标，符合q/dry0002s-2018，口服液中神经节苷脂含量均未发生变化，表明本发明口服液质量稳定性好。2.服用本发明后，服用者的mmse和adl评分均较服用前有明显好转。3.本发明将超临界萃取和乙醇提取相结合，先通过超临界萃取得到萃取物(初提物)，再将萃取物(初提物)用乙醇进行回流提取得到含有神经节苷脂、神经节多糖和唾液酸的大脑组织提取物，其中，提取物的收率高达3.2-4.0‰，提取物中神经节苷脂的含量不小于92％。4.本发明脑神经组织的提取工艺简单，使用二氧化碳作为超临界流体，且仅使用乙醇作为提取溶剂，环保且安全无毒。具体实施方式为了本
技术领域：
的人员更好的理解本发明，下面结合以下实施例对本发明作进一步详细描述。以下对本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。本发明实施例1-实施例13中的猪脑组织提取物、茶粉、薄荷脑、吐温80、香精、甜味剂和保护剂β-环糊精均可在市场采购得到，且均为食品级。实施例1本实施例提供一种改善脑神经组织的功能性口服液，由以下重量份数的原料组成，所述原料包括猪脑组织提取物1份、绿茶粉0.5份、纯化水1000份、薄荷脑0.005份、吐温800.1份、草莓香精0.1份、三氯蔗糖0.05份、β-环糊精0.2份。实施例2本实施例提供一种改善脑神经组织的功能性口服液，由以下重量份数的原料组成，所述原料包括猪脑组织提取物1份、茉莉花茶粉0.5份、纯化水1000份、薄荷脑0.005份、吐温800.1份、苹果香精0.05份、三氯蔗糖0.05份、β-环糊精0.2份。实施例3本实施例提供一种改善脑神经组织的功能性口服液，由以下重量份数的原料组成，所述原料包括猪脑组织提取物1份、绿茶粉0.5份、纯化水1000份、薄荷脑0.005份、吐温800.1份、柠檬酸0.1份、三氯蔗糖0.05份、β-环糊精0.2份。实施例4本实施例提供一种改善脑神经组织的功能性口服液，由以下重量份数的原料组成，所述原料包括猪脑组织提取物1份、红茶粉1.3份、纯化水1000份、薄荷脑0.005份、吐温800.1份、草莓香精0.1份、三氯蔗糖0.05份、β-环糊精0.5份。实施例5本实施例提供一种改善脑神经组织的功能性口服液，由以下重量份数的原料组成，所述原料包括猪脑组织提取物1份、红茶粉1.3份、纯化水1000份、薄荷脑0.005份、吐温800.1份、苹果香精0.05份、三氯蔗糖0.05份、β-环糊精0.2份。实施例6本实施例提供一种改善脑神经组织的功能性口服液，由以下重量份数的原料组成，所述原料包括猪脑组织提取物1份、菊花茶粉1.3份、纯化水1000份、薄荷脑0.005份、吐温800.1份、柠檬酸0.1份、三氯蔗糖0.05份、β-环糊精0.4份。实施例7本实施例提供一种改善脑神经组织的功能性口服液，由以下重量份数的原料组成，所述原料包括猪脑组织提取物3份、草莓茶粉0.13份、纯化水1000份、薄荷脑0.3份、吐温800.3份、草莓香精0.28份、三氯蔗糖0.3份、β-环糊精0.3份。实施例8本实施例提供一种改善脑神经组织的功能性口服液，由以下重量份数的原料组成，所述原料包括猪脑组织提取物3份、草莓茶粉0.16份、纯化水1000份、薄荷脑0.13份、吐温800.14份、草莓香精0.3份、三氯蔗糖0.1份、β-环糊精0.6份。实施例9本实施例提供一种改善脑神经组织的功能性口服液，由以下重量份数的原料组成，所述原料包括猪脑组织提取物2份、草莓茶粉0.2份、纯化水1500份、薄荷脑0.3份、吐温800.3份、草莓香精0.3份、三氯蔗糖0.16份、β-环糊精0.3份。实施例10本实施例提供一种猪脑组织提取物的制备方法，包括以下步骤:1)称取1kg食用品级冷冻猪脑，解冻后除去杂质，再将猪脑置于粉碎机中打碎成脑浆；2)将脑浆装入超临界萃取装置进行超临界萃取，超临界流体为二氧化碳，萃取温度为35℃，萃取压力保持为28mpa，萃取2h，得到萃取物；3)将萃取物加入提取设备，向提取设备中加入萃取物体积7倍量、浓度为85％的乙醇，加氢氧化钠调节ph至9，在40℃下回流提取3小时，并在40℃下过滤得到乙醇提取液和滤渣；4)将步骤3)中滤渣重复步骤3)进行回流提取2次，即将步骤3)中滤渣投入提取设备，向提取设备滤渣量7倍、浓度为85％的乙醇，加氢氧化钠调节ph至9，在40℃下回流提取3小时，并在40℃下过滤得到二次乙醇提取液和二次滤渣；再将二次滤渣进行回流提取和过滤一次得到三次乙醇提取液和三次滤渣；5)收集并合并步骤3)中乙醇提取液和步骤4)中的二次乙醇提取液和三次乙醇提取液，回收乙醇，得到提取液；6)将步骤5)中提取液冷却后置于10℃下沉淀，过滤得到提取物，将提取物在真空度为-0.09mpa、40℃下干燥12小时，粉碎得到3.2g猪脑组织提取物，本实施例猪脑组织提取物的收率为3.2‰，所得猪脑组织提取物中含有神经节苷脂、神经节多糖和唾液酸。实施例11本实施例提供一种猪脑组织提取物的制备方法，包括以下步骤:1)称取1kg食用品级冷冻猪脑，解冻后除去杂质，再将猪脑置于粉碎机中打碎成脑浆；2)将脑浆装入超临界萃取装置进行超临界萃取，超临界流体为二氧化碳，萃取温度为45℃，萃取压力保持为20mpa，萃取1.5h，得到萃取物；3)将萃取物加入提取设备，向提取设备中加入萃取物体积4倍量、浓度为90％的乙醇，加氢氧化钠调节ph至10，在45℃下回流提取2.5小时，并在45℃下过滤得到乙醇提取液和滤渣；4)将步骤3)中滤渣重复步骤3)进行回流提取3次，即将步骤3)中滤渣投入提取设备，向提取设备滤渣量3倍、浓度为90％的乙醇，加氢氧化钠调节ph至10，在45℃下回流提取2.5小时，并在45℃下过滤得到二次乙醇提取液和二次滤渣；再将二次滤渣进行回流提取和过滤一次得到三次乙醇提取液和三次滤渣；再将三次滤渣进行回流提取和过滤一次得到四次乙醇提取液和四次滤渣；5)收集并合并步骤3)中乙醇提取液和步骤4)中的二次乙醇提取液、三次乙醇提取液和四次乙醇提取液，回收乙醇，得到提取液；6)将步骤5)中提取液冷却后置于0℃下沉淀，过滤得到提取物，将提取物在真空度为-0.09mpa、50℃下干燥11小时，粉碎得到3.6g猪脑组织提取物，本实施例猪脑组织提取物的收率为3.6‰，所得猪脑组织提取物含有神经节苷脂、神经节多糖和唾液酸。实施例12本实施例提供一种猪脑组织提取物的制备方法，包括以下步骤:1)称取1kg食用品级冷冻猪脑，解冻后除去杂质，再将猪脑置于粉碎机中打碎成脑浆；2)将脑浆装入超临界萃取装置进行超临界萃取，超临界流体为二氧化碳，萃取温度为50℃，萃取压力保持为15mpa，萃取3h，得到萃取物；3)将萃取物加入提取设备，向提取设备中加入萃取物体积6倍量、浓度为95％的乙醇，加氢氧化钠调节ph至10.5，在50℃下回流提取2小时，并在50℃下过滤得到乙醇提取液和滤渣；4)将步骤3)中滤渣重复步骤3)进行回流提取3次，即将步骤3)中滤渣投入提取设备，向提取设备滤渣量6倍、浓度为95％的乙醇，加氢氧化钠调节ph至10.5，在50℃下回流提取2小时，并在50℃下过滤得到二次乙醇提取液和二次滤渣；再将二次滤渣进行回流提取和过滤一次得到三次乙醇提取液和三次滤渣；再将三次滤渣进行回流提取和过滤一次得到四次乙醇提取液和四次滤渣；5)收集并合并步骤3)中乙醇提取液和步骤4)中的二次乙醇提取液、三次乙醇提取液和四次乙醇提取液，回收乙醇，得到提取液；6)将步骤5)中提取液冷却后置于-5℃下沉淀，过滤得到提取物，将提取物在真空度为-0.09mpa、50℃下干燥12小时，粉碎得到4.0g猪脑组织提取物，本实施例猪脑组织提取物的收率为4.0‰，所得猪脑组织提取物含有神经节苷脂、神经节多糖和唾液酸。依照四川鼎润元生物科技有限公司企业标准q/dry0002s-2018计算猪脑组织提取物中神经节苷脂的含量，测定方法依据高效液相色谱法，即使用高效液相色谱时，液体待检测物被注入色谱柱，通过压力在固定相中移动，由于被测物种不同物质与固定相的相互作用不同，不同的物质顺序离开色谱柱，通过检测器得到不同的峰信号，最后通过分析比对这些信号来判断待测物所含有的物质。使用的测试仪器有agilent液相色谱仪、色谱柱(lichrospher100nh2250×5.0mm5um)、超声波震荡器、分析天平，试剂为四氢呋喃(色谱纯)、乙腈(色谱纯)、磷酸(分析纯)、水(纯化水)。流动相：1％的磷酸：乙腈：四氢呋喃(v/v)＝300:600:100的比例配制，混匀，使用0.45um有机系膜抽滤一次，然后超声脱气30min，转入溶剂储液瓶密封，备用；临用前配制。波长：205nm，柱温：25℃，流速：1.0ml/min，进样量：20μl，运行时间：20min。测定步骤：分别精密吸取20μl注入液相色谱仪，记录色谱图：前5针对照溶液1的峰面积rsd≤2.0％，6针对照溶液1的峰面积rsd≤5.0％。进样序列如表1所示。表1进样序列表样品名称进样针数空白溶液1系统适用性溶液1对照品溶液15对照品溶液21供试品溶液13供试品溶液22对照品溶液11按外标法以峰面积计算：式中a样为样品主峰峰面积，a对为对照品主峰峰面积，m对为对照品取样量，单位mg，m样为样品取样量，单位mg，p对为对照品含量。采用上述方法分别测定本发明实施例10-实施例12所得的猪脑组织提取物中神经节苷脂的含量如表2所示。表2本发明实施例10-实施例12中神经节苷脂的含量表神经节苷脂含量/％实施例1092.3实施例1192.8实施例1293.1由表2可知，依照四川鼎润元生物科技有限公司企业标准q/dry0002s-2018计算本发明实施例10-实施例12的猪脑组织提取物中神经节苷脂的含量均不小于92％。实施例13本实施例提供一种改善脑神经组织的功能性口服液的制备方法，包括以下步骤：1)制备纯化水：制备纯化水使其在25℃±1℃下的电导率小于5us/cm；2)制备茶汤：将茶粉溶解于纯化水中，并加热至80℃搅拌使茶粉溶解制得茶汤；3)降温：称取纯化水加入步骤2)的茶汤中，降温至40℃；4)溶解猪脑组织提取物并定容：称取猪脑组织提取物并溶解到步骤3)的茶汤中；再加余量纯化水定容；5)调味：向步骤4)的茶汤中依次加入薄荷脑和吐温80搅拌使其溶解，再依次加入香精、甜味剂和保护剂并继续搅拌使其溶解；6)精滤：将步骤5)调配好的茶汤采用硅藻过滤机精滤以除去杂质和不溶物；7)灌装灭菌及冷却：将步骤6)的茶汤进行灌装，并将灌装好的茶汤在121℃下蒸汽灭菌15分钟，然后将灭菌处理后的茶汤放入水浴中冷却至室温，最后进行外包装即制得改善脑神经组织的功能性口服液。一、外观、口感和气味评价分别对实施例1-实施例9制备的改善脑神经组织的功能性口服液进行评分，评分方法为：随机选取40名群众对产品外观、口感和气味进行评价，非常满意为100分，不满意0分，其中男女比例为7:3，中老年和青少年比例为4:1，所得平均分如表3所示。表3本发明实施例1-实施例9的评分表外观/分口感/分气味/分实施例1808986实施例2888489实施例3868584实施例4838084实施例5908783实施例6918684实施例7909493实施例8828991实施例9848789如表3所示，实施例1-实施例9的外观、口感和气味基本符合大众的需求，其中实施例7的平均得分最高。二、稳定性评价分别对本发明实施例1-实施例9的产品进行稳定性检测，检测方法为：在37±2℃，相对湿度为75±5％下分别避光保存0天、5天、10天、1个月、2个月、3个月、6个月、9个月、12个月、18个月和24个月后观察其性状改变、测定其微生物含量和神经节苷脂的含量。1.性状改变检测方法为：分别取50ml被测样品于洁净无色透明烧杯中，置放明亮处，在自然光下迎光观察色泽、杂质、形态，嗅其气味，品尝其滋味。本发明实施例1-实施例9在37±2℃，相对湿度为75±5％下分别避光保存0天、5天、10天、1个月、2个月、3个月、6个月、9个月、12个月、18个月和24个月后，均为透明澄清液体，状态均匀、色泽均匀一致，无正常视力可见外来异物。2.微生物含量：根据q/dry0002s-2018，微生物中菌落总数的检验方法依照gb4789.2，大肠菌群的检验方法依照gb4789.3中的平板取样法，霉菌计数的检验方法依照gb4789.15，酵母计数的检验方法依照gb4789.16，沙门氏菌检验方法依照gb4789.4，金黄色葡萄球菌的检验方法依照gb4789.10第二法，样品的采样和处理按照gb4789.1和gb4789.21执行，检测所得的微生物结果如表4所示。表4实施例1-实施例9稳定性评价中微生物检测结果项目n菌落总数/(cfu/ml)≤5大肠菌群/(cfu/ml)≤5霉菌计数/(cfu/ml)≤20酵母计数/(cfu/ml)≤20沙门氏菌≤5金黄色葡萄球菌≤5微生物检测结果表明，本发明实施例1-实施例9在37±2℃、相对湿度为75±5％下分别避光保存0天、5天、10天、1个月、2个月、3个月、6个月、9个月、12个月、18个月和24个月后微生物含量检测均达标，即符合表4。3.神经节苷脂含量检测：分别取本发明实施例1-实施例9在37±2℃、相对湿度为75±5％下分别避光保存0天、5天、10天、1个月、2个月、3个月、6个月、9个月、12个月、18个月和24个月后依据四川鼎润元生物科技有限公司企业标准q/dry0002s-2018检测神经节苷脂的含量，结果表明神经节苷脂的含量均未发生变化，表明本发明口服液质量稳定性好。综上所述，稳定性评价结果表明，本发明实施例1-实施例9放置24个月后仍为透明澄清液体，状态均匀、色泽均匀一致，无正常视力可见外来异物；且微生物含量检测达标，符合q/dry0002s-2018；口服液中神经节苷脂含量均未发生变化，表明本发明口服液质量稳定性好。三、食用效果评价随机选取50例睡眠质量差、记忆力衰退和认知功能障碍的中老年人，通过在服用本发明实施例7前后分别行简易智能精神状态检查量表(mmse)评分和日常生活活动量(adl)评分，其中服用量为每日三次，每次18ml，服用3个月后得到评分平均值如表5所示。表5服用本发明实施例7前后的mmse和adl评分表mmse评分adl评分服用前19.45±5.7433.45±15.78服用后27.58±6.0356.42±16.32上表所有数据经spss13.0统计软件包进行统计处理，评分采用(x±s)表示，采用t检验。由表5可知，上述50例睡眠质量差、记忆力衰退和认知功能障碍的中老年人服用本发明实施例7后mmse和adl评分均较服用前有明显好转。以上所述，仅为本发明的较佳实施例，并不用以限制本发明，本发明的专利保护范围以权利要求书为准，凡是运用本发明的说明书内容所作的等同结构变化，同理均应包含在本发明的保护范围内。当前第1页12