本发明涉及一种止血生物材料，特别是涉及一种氨基糖止血医用材料及其制备方法和应用，属于医药生物
技术领域：
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背景技术：
：临床使用的医用敷料一般有水凝胶材料、薄膜材料、海绵材料、粉剂材料等。薄膜材料、海绵材料常具有良好的机械性能，可以覆盖创面并阻隔微生物、提供气体交换。理想的止血材料需要有快速止血、促愈合性能，同时具有良好的吸液性、组织相容性，能够覆盖创面，保护创面，加速创面愈合。多功能性止血材料一直是国内外止血材料的主要研究方向。临床上的止血材料主要有明胶海绵、胶原蛋白海绵、纤维蛋白胶等哺乳动物来源的止血材料制品，以及壳聚糖来源的止血材料。哺乳动物来源的止血材料，由于可能存在的病毒性疾病的传播和免疫原性风险，在生物安全性上受到关注。壳聚糖是一种天然高分子聚阳离子多糖，无免疫原性，无毒副作用，生物安全性好，同时具有止血、抗菌、促愈合等作用，具有制备止血、抑菌、溃疡愈合材料的良好性能。壳聚糖的止血作用主要是源于壳聚糖与红细胞之间电荷相互作用，发生凝集，从而止血。以壳聚糖为原料制备创伤止血、抗菌、促进创面愈合的材料已有报道。这些报道通常是将壳聚糖制成不溶于水的壳聚糖粉、壳聚糖膜、壳聚糖海绵、壳聚糖纤维和织物等，但由于壳聚糖本身的功能效果有限，制备的敷料效果不太理想，需要将壳聚糖与其它与其他材料复合使用，以提高材料的综合性能。技术实现要素：本发明的目的是提供一种氨基糖止血医用材料及其制备方法和应用，以满足现有技术的上述需求。一种氨基糖止血医用材料，其特征是由氨基多糖和氧化多糖交联反应而成的膜片状或海绵状产品；其中，所述的氨基多糖是透明质酸、硫酸软骨素、肝素、壳聚糖、羟乙基壳聚糖、羟丙基壳聚糖、磺酸化壳聚糖、羟丁基壳聚糖、羧甲基壳聚糖、琥珀酰壳聚糖或其它壳聚糖衍生物中的一种或几种；所述的氧化多糖，是含双醛基的氧化多糖中的一种或几种，其中含双醛基的糖单元占多糖分子总糖单元的百分数为1%～70%。上述氨基糖止血医用材料的制备方法，其特征是包括以下步骤：用无菌水或无菌生理盐水，分别配制重量百分浓度为0.5～20%的氧化多糖胶液，0.5～20%的氨基多糖胶液；将氧化多糖胶液与氨基多糖胶液混合、快速搅拌均匀，将得到的混合多糖胶液快速在玻璃平板或不锈钢平板或聚苯乙烯平板上延流并刮膜，自然干燥或加热干燥，得膜片状氨基糖止血医用材料；或将得到的混合多糖胶液快速在不锈钢或塑料模具中刮平，真空冷冻干燥，得海绵状氨基糖止血医用材料。上述氨基糖止血医用材料，在制备创伤止血、手术止血材料中应用，作为创伤止血、手术止血敷料医疗器械进行开发。本发明的氨基糖止血医用材料具有显著的止血作用，显著缩短创面的止血时间，材料无毒性，具有较好的生物相容性。因此，本发明的氨基糖止血医用材料可以在制备创伤止血、手术止血的医疗器械中应用，作为止血敷料医疗器械进行开发，用于创伤止血和手术止血，具有广阔的市场前景。具体实施方式下面通过具体实施例来进一步详细说明本发明。实施例1：氧化淀粉的制备称取淀粉15g，加入500ml玻璃三角瓶中，加水200ml，加热搅拌溶解，用5%（重量百分比，下同）的醋酸水溶液调ph值至ph5.5，加入氧化剂naio43.5g，封口，于室温下避光搅拌氧化反应24h。反应完毕，将反应液装入截留分子量为3000道尔顿的透析袋中，避光、4℃下蒸馏水透析24h，其中每6h更换蒸馏水一次。透析结束后，将透析袋内的液体于冷冻干燥机冷冻干燥48h，制得含双醛基的氧化淀粉13.5g，其双醛基百分含量为12.5%（双醛基百分含量是指多糖分子中含双醛基的糖单元占多糖分子总糖单元的百分数，下同）。实施例2：氧化羧甲基纤维素的制备称取羧甲基纤维素粉15g，加入1000ml玻璃三角瓶中，加水800ml，搅拌溶解，用5%的醋酸水溶液调ph值至ph5.5，加入氧化剂kio48g，封口，于室温下避光搅拌氧化反应60h。反应完毕，搅拌下加入4倍体积的95%的乙醇水溶液，沉淀，沉淀物抽滤，用95%的乙醇水溶液洗涤3次，无水乙醇脱水，真空干燥，制得含双醛基的氧化羧甲基纤维素12.1g，其双醛基百分含量为62.5%。实施例3：氧化海藻酸的制备称取海藻酸钠15g，加入1000ml玻璃三角瓶中，加水800ml，搅拌溶解，用1mol/l的盐酸水溶液调ph值至ph5.0，加入氧化剂kio49g，封口，于4℃下避光搅拌氧化反应36h。反应完毕，将反应液装入截留分子量为3000道尔顿的透析袋中，避光、4℃下蒸馏水透析24h，其中每6h更换蒸馏水一次。透析结束后，将透析袋内的液体于冷冻干燥机冷冻干燥48h，制得含双醛基的氧化海藻酸钠13g，其双醛基百分含量为48.5%。实施例4：氧化硫酸软骨素的制备称取硫酸软骨素12.0g，加入500ml玻璃三角瓶中，加水200ml，搅拌溶解，用1mol/l的盐酸水溶液调ph值至ph5.0，加入氧化剂naio41g，封口，于4℃下避光搅拌氧化反应18h。反应完毕，将反应液装入截留分子量为3000道尔顿的透析袋中，避光、4℃下蒸馏水透析24h，其中每6h更换蒸馏水一次。透析结束后，将透析袋内的液体于冷冻干燥机冷冻干燥48h，制得含双醛基的氧化硫酸软骨素11.3g，其双醛基百分含量为2.5%。实施例5：氧化透明质酸的制备称取透明质酸5g，加入1000ml玻璃三角瓶中，加水500ml，搅拌溶解，用5%（重量百分比，下同）的醋酸水溶液调ph值至ph5.5，加入氧化剂naio42.5g，封口，于室温下避光搅拌氧化反应24h。反应完毕，将反应液装入截留分子量为3000道尔顿的透析袋中，避光、4℃下蒸馏水透析24h，其中每6h更换蒸馏水一次。透析结束后，将透析袋内的液体于冷冻干燥机冷冻干燥48h，制得含双醛基的氧化透明质酸3.9g，其双醛基百分含量为30.8%。在上述实施例1～5中，采用高碘酸氧化法制备了含双醛基的氧化多糖。高碘酸氧化法可以对多种生物多糖进行氧化，如淀粉、醋酸酯淀粉及其它淀粉衍生物，羧甲基纤维素、羟乙基纤维素、羟丙基纤维素及其它纤维素衍生物，海藻酸钠，岩藻多糖，琼脂多糖，肝素，硫酸软骨素，透明质酸，壳聚糖、羟乙基壳聚糖、羟丙基壳聚糖、羟丁基壳聚糖、琥珀酰壳聚糖、羧甲基壳聚糖及其它壳聚糖衍生物，羟乙基甲壳素、羟丙基甲壳素、羟丁基甲壳素、羧甲基甲壳素及其它甲壳素衍生物，瓜尔胶、羟丙基瓜尔胶及其它瓜尔胶衍生物，葡聚糖，右旋糖酐，以及本领域技术人员能够制备的其它多糖，如白芨多糖、芦荟多糖等。上述多糖经高碘酸氧化后，分子中都含有双醛基，均可作为本发明所述的氨基糖止血医用材料制备的原材料。二、氨基糖止血医用材料的制备所述的氨基糖止血医用材料的制备中使用的原材料、容器、器皿等均为无菌状态，制备在无菌条件下完成，具体制备方法如下：实施例6：氨基糖止血医用材料1的制备称取氧化羧甲基纤维素（双醛基含量为62.5%）0.5g，置于100ml的玻璃烧杯中，加入溶剂无菌水40ml，搅拌下溶解，得重量百分比浓度为1.25%的氧化多糖胶液。称取磺酸化壳聚糖0.8g，置于100ml的玻璃烧杯中，加入溶剂无菌水40ml，搅拌下溶解，得重量百分浓度为2%的氨基多糖胶液。将40ml氧化多糖胶液倒入40ml氨基多糖胶液中，等比例、搅拌均匀，得到的混合多糖胶液快速倒在洁净的玻璃平板（或不锈钢平板或聚苯乙烯平板）上延流并刮膜，控制胶液用量，使干膜的厚度为100～1000μm，自然干燥（或加热干燥），得膜片状氨基糖止血医用材料1。实施例7：氨基糖止血医用材料2的制备称取氧化海藻酸（双醛基含量为48.5%）2g，置于100ml的玻璃烧杯中，加入溶剂无菌生理盐水40ml，搅拌下溶解，得重量百分比浓度为5%的氧化多糖胶液。羟丙基壳聚糖4g，置于100ml的玻璃烧杯中，加入溶剂无菌生理盐水40ml，搅拌下溶解，得重量百分浓度为10%的氨基多糖胶液。将40ml氧化多糖胶液倒入40ml氨基多糖胶液中，等比例、搅拌均匀，得到的混合多糖胶液快速倒在洁净的玻璃平板（或不锈钢平板或聚苯乙烯平板）上延流并刮膜，控制胶液用量，使干膜的厚度为200～1500μm，自然干燥（或加热干燥），得膜片状氨基糖止血医用材料2。实施例8：氨基糖止血医用材料3的制备称取氧化淀粉（双醛基含量为12.5%）3.5g，称取氧化透明质酸（双醛基含量为30.8%）2.5g，置于100ml的玻璃烧杯中，加入无菌水溶剂40ml，搅拌下溶解，得重量百分比浓度为15%的氧化多糖胶液。称取羟乙基壳聚糖3g，称取琥珀酰壳聚糖3g，置于100ml的玻璃烧杯中，加入无菌水溶剂40ml，搅拌下溶解，得重量百分浓度为15%的氨基多糖胶液。将40ml氧化多糖胶液倒入40ml氨基多糖胶液中，等比例、搅拌均匀，得到的混合多糖胶液快速倒入50mm×50mm×5mm的不锈钢（或塑料）模具中，刮平，放入真空冷冻干燥机中-45℃冷冻2～10小时后，真空冷冻干燥36～48小时，得海绵状氨基糖止血医用材料3。在上述实施例6～8氨基糖止血医用材料的制备中，所述的氧化多糖，其特征是含双醛基的氧化多糖中的一种或几种，其中含双醛基的糖单元占多糖分子总糖单元的百分数为1%～70%。所述的氧化多糖，是氧化淀粉衍生物、氧化纤维素衍生物、氧化海藻多糖衍生物、氧化氨基多糖衍生物、氧化瓜尔胶衍生物、氧化普鲁兰多糖衍生物、氧化黄原胶衍生物、氧化葡聚糖衍生物、氧化右旋糖酐衍生物，或其它氧化植物多糖衍生物；氧化多糖的分子中都含有双醛基，均能达到相似的效果。所述的氧化淀粉衍生物，是指氧化淀粉、氧化醋酸酯淀粉，或其它氧化淀粉衍生物；所述的氧化纤维素衍生物，是指氧化羧甲基纤维素、氧化羟乙基纤维素、氧化羟丙基纤维素，或其它氧化纤维素衍生物；所述的氧化海藻多糖衍生物，是指氧化海藻酸多糖、氧化岩藻多糖、或氧化琼脂多糖；所述的氧化氨基多糖衍生物，是指氧化肝素、氧化硫酸软骨素、氧化透明质酸、氧化壳聚糖、氧化羟乙基壳聚糖、氧化羟丙基壳聚糖、氧化羟丁基壳聚糖、氧化琥珀酰壳聚糖、氧化羧甲基壳聚糖、氧化羟乙基甲壳素、氧化羟丙基甲壳素、氧化羟丁基甲壳素、氧化羧甲基甲壳素，或其它含双醛基的氧化壳聚糖衍生物、氧化甲壳素衍生物；所述的氧化瓜尔胶衍生物，是指氧化瓜尔胶、氧化羟丙基瓜尔胶，或其它含氧化瓜尔胶衍生物；所述的其它氧化植物多糖衍生物，是指氧化白芨多糖、氧化芦荟多糖，或及其它氧化植物多糖。在上述实施例6～8氨基糖止血医用材料的制备中，所述的氨基多糖，是透明质酸、硫酸软骨素、肝素、壳聚糖、羟乙基壳聚糖、羟丙基壳聚糖、磺酸化壳聚糖、羟丁基壳聚糖、羧甲基壳聚糖、琥珀酰壳聚糖或其它壳聚糖衍生物中的一种或几种。三、氨基糖止血医用材料的应用实施例9：氨基糖止血医用材料作为止血敷料的应用采用大鼠作为试验动物，制作肝组织缺损模型，评价本发明的止血材料的止血作用。试验大鼠30只，雌雄兼半，体重200g±20g，分为阴性对照组、实验1组、实验2组，每组10只。试验前在无菌条件下，分别将止血材料剪切成1cm×1cm的大小，备用。采用戊巴比妥钠腹腔注射麻醉大鼠，剂量为30mg/kg。在大鼠腹部正中切长约3cm的切口，打开腹腔，无菌条件下游离出肝脏左叶，用组织钳于肝脏中部夹取5mm×5mm×2mm大小的肝组织块，造成肝组织缺损出血，医用棉纱布吸血，并立即贴敷对应的规格为1cm×1cm的止血材料。阴性对照组大鼠的出血创面使用医用纱布止血，止血1组在大鼠出血创面贴附无菌膜片状氨基糖止血医用材料2止血，止血2组在大鼠出血创面贴附无菌海绵状氨基糖止血医用材料3止血，分别按压20秒钟，观察创面出血情况20秒钟，重复上述步骤，观察出血情况，并记录。试验结果见表1，结果表明，止血1组和止血2组与阴性对照组比较，止血材料2和止血材料3均有显著止血效果，其中止血材料3的止血效果优于止血材料2，同时都优于医用纱布的止血效果，表明本发明的氨基糖止血医用材料具有显著的止血作用。表1止血材料的止血性能评价结果组别实验动物数量（只）止血时间（秒）阴性对照组10＞180实验1组1045-78实验2组1030-56本发明的氨基糖止血医用材料具有较好的机械强度、柔韧性，具有显著的止血作用，能明显缩短创面的止血时间，材料无毒性，具有较好的生物相容性。因此，本发明的氨基糖止血医用材料可以在制备创伤止血、手术止血的医疗器械中应用，作为止血医疗器械进行开发，用于创伤止血和手术止血，具有广阔的市场前景。当前第1页12