一种抗雾霾药品及其抗霾口罩和二氢杨梅素在防治雾霾及治疗季节性流感中的用途的制作方法

本发明属于生物医药领域，具体地，本发明涉及二氢杨梅素在防治雾霾及治疗季节性流感的应用。

背景技术：

雾霾是漂浮大气中的pm2.5等尺寸微粒、粉尘、气溶胶等粒子，在一定的湿度、温度等天气条件相对稳定状态下产生的天气现象。季节性流感的特征是突发高热，咳嗽(通常是干咳)，头痛，肌肉和关节痛，严重身体不适(感觉不适)，咽痛和流鼻涕。多数人在一周内康复，发热和其它症状消失，无需就医。但流感可在高危人群中造成严重疾病或死亡。甲型流感病毒h1n1，也称h1n1病毒，是甲型流感病毒的一种，也是人类最常感染的流感病毒之一。治疗流感的理想做法是在疾病早期(症状出现后48小时内)给药，如烷胺类药物(金刚烷胺和金刚乙胺)、流感神经氨酸酶抑制剂(奥司他韦和扎那米韦)。但有些流感病毒对抗病毒药物产生耐药性，限制治疗的有效性。

有报道称藤茶提取物对金黄色葡萄球菌和枯草杆菌的强烈抑制作用，它也对黄曲霉，黑曲霉，青霉和交链孢有抑制作用。二氢杨梅素(dhm)为葡萄属植物藤茶的提取物，是藤茶中的主要活性成分黄酮类化合物，二氢杨梅有金黄色葡萄球菌，金黄色葡萄球菌和绿脓杆菌的抑制作用，但是作用机制不详。

目前还未有二氢杨梅素应用在防治雾霾及治疗季节性流感中的报道。

技术实现要素：

本发明要解决的技术问题是提供二氢杨梅素在制备用于抗雾霾的产品中的用途，本发明还提供了一种抗霾口罩，本发明进一步提供了二氢杨梅素在制备用于治疗流感的产品中的用途。

本发明第一方面提供了二氢杨梅素在制备用于抗雾霾的产品中的用途。

在一优选例中，所述抗雾霾的产品为药品。

在一优选例中，所述药品为浓度为4-6mg/l的含二氢杨梅素的生理盐水溶液。

在一优选例中，所述药品为浓度为5mg/l的含二氢杨梅素的生理盐水溶液。

在一优选例中，所述药品的使用方法为：吸入规格为5mg/l的含二氢杨梅素的生理盐水溶液的气雾，持续30分钟以上。

在一优选例中，所述药品用于防止或减轻雾霾污染对肺器官的损害。

在一优选例中，所述抗雾霾的产品为抗霾口罩。

在一优选例中，所述抗霾口罩由外层、中层和内层组成；所述抗霾口罩的中层由过滤防菌达99％的无纺布和二氢杨梅素制成。

在一优选例中，所述抗霾口罩的中层的制作方法为：将二氢杨梅素溶于消毒净水，充分混匀成混悬液或悬浊液，均匀涂覆在过滤防菌达99％的无纺布表面，风干即得。

在一优选例中，所述二氢杨梅素在过滤防菌达99％的无纺布上的涂覆量为1mg/cm²。

在一优选例中，所述过滤防菌达99％的无纺布的尺寸为12cmx8cm。

在一优选例中，所述抗霾口罩的规格为：17.5cmx9.5cm。

在一优选例中，所述抗霾口罩的外层和内层均由医用纤维无纺

布制成。

在一优选例中，所述抗霾口罩用于过滤pm10～2.5颗粒和/或有害气体。

在一优选例中，所述抗霾口罩对pm10～2.5颗粒和/或有害气体的滤过率达95％以上。

本发明第二方面提供了一种抗霾口罩，所述抗霾口罩由外层、中层和内层组成，所述抗霾口罩的中层还设有抗霾层。

在一优选例中，所述抗霾口罩的中层由过滤防菌达99％以上的无纺布层和二氢杨梅素制成的抗霾层组成。

在一优选例中，所述抗霾口罩的中层的制作方法为：将二氢杨梅素溶于消毒净水，充分混匀成混悬液或悬浊液，均匀涂覆在过滤防菌达99％的无纺布表面形成抗霾层，风干即得。

在一优选例中，所述二氢杨梅素在过滤防菌达99％的无纺布上的涂覆量为1mg/cm²。

在一优选例中，所述过滤防菌达99％的无纺布的尺寸为12cmx8cm。

在一优选例中，所述抗霾口罩的规格为：17.5cmx9.5cm。

在一优选例中，所述抗霾口罩的外层和内层均由医用纤维无纺布制成。

在一优选例中，所述抗霾口罩的中层由过滤防菌达99％以上的无纺布层和二氢杨梅素制成的抗霾层组成。

在一优选例中，所述抗霾口罩用于过滤pm10～2.5颗粒和/或有害气体。

在一优选例中，所述抗霾口罩对pm10～2.5颗粒和/或有害气体的滤过率达95％以上。

本发明第三方面提供了二氢杨梅素在制备用于治疗流感的产品中的用途。

在一优选例中，所述流感为感染甲型h1n1流感病毒和/或链球菌。

在一优选例中，所述用于治疗流感的产品为含二氢杨梅素的琼脂冻或二氢杨梅素溶液喷雾。

在一优选例中，所述含二氢杨梅素的琼脂冻的规格为1-3mg/cm³。

在一优选例中，所述含二氢杨梅素的琼脂冻的规格为2mg/cm³。

在一优选例中，所述二氢杨梅素溶液喷雾的为浓度为4-6mg/l的含二氢杨梅素的生理盐水溶液。

在一优选例中，所述二氢杨梅素溶液喷雾的为浓度为5mg/l的含二氢杨梅素的生理盐水溶液。

本发明出现的术语“内层”指口罩佩戴时靠近面部的一层，“外层”指口罩佩戴时靠近外界空气的一层。

本发明出现的术语“二氢杨梅素”等同于“dhm”，两者可以互相替代使用。

依据本发明的第一方面，本发明提供一种防治雾霾的新方法。在一个实施例中，将实验分为三组，a：正常组，指在实验中，试验气雾器使用正常空气；b：受污染组，指在实验中，试验气雾器使用so2500μg/m³；c：受污染治疗组，指在实验中，试验气雾器使用so2500μg/m³，并再混入二氢杨梅素5mg/l。实验动物经过四天的不同方法处理，急速取出两侧肺脏拍照，余下半数送病理切片。通过实验观察，在有空气污染的情况下，以吸入的方式给二氢杨梅素(5mg/l)，可以明显防止或减轻空气污染对于肺器官的损害。

依据本发明的第二方面，本发明提供一种治疗季节性流感的新方法。在一个实施例中，用人类甲型流感(h1n1)病毒252(±34)μg/ml颗粒测定二氢杨梅素抗病毒作用，结果表明二氢杨梅素具有明显的剂量依赖性的对h1n1病毒感染抑制作用，是金刚烷胺的人类甲型流感h1n1病毒能力的三倍以上。

依据本发明的第三方面，本发明提供一种抗霾口罩。在一个实施例中，根据二氢杨梅素的特性，制成一次性复式抗霾口罩。该口罩规格：17.5x9.5cm²。复合纤维无纺布层(口罩)可以过滤pm10～2.5颗粒及有害气体。滤过率达95％以上。

本发明具有以下有益效果：

本发明通过二氢杨梅素制备了用于抗雾霾的产品，此抗雾霾的产品可以明显防止和/或减轻雾霾对肺器官的损害；进一步的，本发明还提供了一种抗霾口罩，使用此抗霾口罩可以过滤pm10～2.5颗粒和/或有害气体，滤过率达95％以上；更进一步的，本发明还通过二氢杨梅素制备了用于治疗流感的产品，因二氢杨梅素的抑制人类甲型流感h1n1病毒超病毒超出其他黄酮类化合物的100倍，同时可以明显防止及减轻感染对于呼吸系统的损害，因此用二氢杨梅素制备出用于治疗流感的产品可有效的治疗各种流感，重点治疗感染甲型h1n1流感病毒和/或链球菌的病患。

附图说明

图1为dhm结构示意图。

图2为dhm防治雾霾的实验效果示意图，其中a至c为从各实验组获取的肺器官；d至f为从各实验组获取的肺器官的病理切片。

图3为dhm对h1n1病毒感染的抑制作用的实验结果示意图。

图4为dhm对呼吸系统感染的恢复作用的实验结果示意图。

图5为dhm对基础代谢率影响示意图。

具体实施方式

下面通过具体实施方式结合附图对本发明作进一步详细说明。应该指出的是，所列举的实施例不应理解为对本发明的限制。

发明人在实施例中采用的动物为：spraguedawley常规实验白鼠，雄性/雌性体重分别为300/275克，6只一组。实验药物为：二氢杨梅素dihydromyricetin(dhm，图1)，来源：三九药业。根据who的标准和我们已有的技术研制出人工雾霾，即以500μg/m³的so2，混入空调排出气体，10分钟持续输入，制成pm2.5的人工雾霾，该气体使白鼠肺产生急性免疫反应。

实验药物用量按5mg/kg给予(5毫克98％纯度的hplc分离提纯的dhm粉剂)；实验药物的剂型可制成dhm溶液：5mg/l(5mg98％纯度的hplc分离提纯的dhm粉剂溶于1l生理盐水)；或制成dhm琼脂冻：将琼脂1g放入100ml实验用水，煮沸后放入0.2gdhm，搅匀后放凉至成冻状。按300g体重实验白鼠给1cm³琼脂冻(含2mgdhm)。

备注：以500mg/1cm³给75kg体重人体为准，500mg/75kg体重＝x/300克实验白鼠，x＝2mg；100ml需加0.2克dhm。

实施例1二氢杨梅素防治雾霾实验

将实验动物分为三组(a：正常组，指在实验中，试验气雾器使用正常空气；b：受污染组，指在实验中，试验气雾器使用so2500μg/m³；c：受污染治疗组，指在实验中，试验气雾器使用so2500μg/m³，并再混入二氢杨梅素5mg/l)。

前三日，每组每日处理方法：

a组：5％co2/95％o2，10分钟持续输入。

b组：试验气雾器使用so2500μg/m³(浓度0.5μg/l)，混入空调排出气体，气压力40psi，10分钟持续输入。

c组：试验气雾器使用so2500μg/m³(浓度0.5μg/l)混入空调排出气体，并再混入二氢杨梅素5mg/l，压力40psi，10分钟持续输入。停止so2输入后，继续二氢杨梅素输入并混入5％co2/95％o2，持续输入30分钟。

第四日：同组动物的半数，急速取出两侧肺脏拍照。余下半数送病理切片。

其结果如图2中所示。a至c为从各实验组获取的肺器官；相对应的d至f为从各实验组获取的肺器官的病理切片。和正常组(a)比较，受污染组(b)在受到so2500μg/m³及空调排出气体处理三天后，肺器官呈现严重充血，肺部边缘成不张状态。和受污染组(b)比较，受污染治疗组(c)在受到so2500μg/m³及空调排出气体并混入二氢杨梅素5mg/l处理三天后，肺器官充血明显减少，肺部边缘没有不张形成，其外观相似于正常组(a)。在进一步的病理切片检测中可见，和正常组的切片(d)比较，受污染组的切片(e)在受到so2500μg/m³及空调排出气体处理三天后，肺泡内呈现严重的炎性细胞浸润、充血。而受污染治疗组的切片(f)在接受dhm给药后，炎性细胞浸润、充血明显减少。

由此实验证明，在有空气污染的情况下，以吸入的方式给二氢杨梅素(5mg/l)，可以明显防止或减轻空气污染对于肺器官的损害。

实施例2二氢杨梅素对抗人类甲型流感(h1n1)病毒感染

本实施例用人类甲型流感(h1n1)病毒252(±34)μg/ml颗粒测定二氢杨梅素抗病毒作用。步骤为：h1n1病毒颗粒在含有二氢杨梅素的培养基中和狗肾细胞共同培养总共2小时，后洗涤3次。经过滤器过滤，用常用培养液除去未结合的化合物。病毒颗粒被收集后用直接结合测定法分析病毒—二氢杨梅素结合部分和未结合部分，然后进行比较。

实验结果如图3所示，二氢杨梅素对h1n1的50％抑制浓度(ic50)为2.4μg/ml(8μm)，而100％的抑制h1n1病毒感染的浓度(ic100)为8μg/ml(27μm)。表明二氢杨梅素具有明显的剂量依赖性的对h1n1病毒感染抑制作用。

我们进一步对二氢杨梅素抑制h1n1病毒的机理进行了分析，结果证明，二氢杨梅素是通过结合于h1n1流感病毒颗粒，阻断h1n1流感病毒进入和/或识别宿主细胞，从而达到抑制h1n1病毒的感染。而且，这种抑制作用是二氢杨梅素浓度依赖性的。和已知的抗流感药物比较，金刚烷胺的h1n150％抑制浓度是27μm，也就是二氢杨梅素抗人类甲型流感h1n1病毒能力是三倍以上，而且对h1n1的结合不是非具体的。二氢杨梅素的抑制人类甲型流感h1n1病毒超出其他黄酮类化合物的100倍。

实施例3二氢杨梅素对抗链球菌引起的呼吸系统感染

本实验采用实验白鼠经上门牙，将100μl的链球菌制剂(培养基)放置到口腔中，除去实验白鼠的液体摄入。在感染后第1天和第7感染，评估炎症。

a：正常组，指在实验中，将100μl(微升)生理盐水放置到口腔中后，除去实验白鼠的液体摄入30分钟。从第一天开始，每天给1cm³无药琼脂冻，共7天。

b：受污染组，指在实验中，将100μl的链球菌制剂(培养基)放置到口腔中后，除去实验白鼠的液体摄入30分钟。从第一天开始，每天给1cm³无药琼脂冻，共7天。

c：受污染治疗组，指在实验中，将100μl的链球菌制剂(培养基)放置到口腔中后，除去实验白鼠的液体摄入30分钟。从第一天开始，每天给1cm³dhm琼脂冻两次(早8和晚8时)，共7天。

除了琼脂冻给法，也测试了dhm吸入法。

a：正常组，指在实验中，将100μl(微升)生理盐水放置到口腔中后，除去实验白鼠的液体摄入30分钟。从第一天开始，每天给5％co2/95％o2，压力40psi，10分钟持续输入，共7天。

b：受污染组，指在实验中，将100μl的链球菌制剂(培养基)放置到口腔中后，除去实验白鼠的液体摄入30分钟。从第一天开始，每天给5％co2/95％o2，压力40psi，10分钟持续输入，共7天。

c：受污染治疗组，指在实验中，将100μl的链球菌制剂(培养基)放置到口腔中后，除去实验白鼠的液体摄入30分钟。从第一天开始，每天给5％co2/95％o2并混入二氢杨梅素5mg/l，压力40psi，10分钟持续输入，共7天。

第7天和14天，将所有实验白鼠进行测试，以测定动物受感染后的活动能力。完成之后，动物被进行病理解剖。

图4是呼吸系统感染的实验结果。图4a、图4b和图4c中从左到右的柱子依次为：白柱、黑柱、灰柱、深蓝柱和浅蓝柱，其中白柱是正常组(对照组)，黑柱是感染组第7天测试，灰柱是感染组第14天测试。深蓝柱是感染组加给药组第7天测试，浅蓝柱是感染组加给药组第14天测试。

和正常组(a)比较，受感染组(b,infection)在受到100μl的链球菌制剂(培养基)感染后，在第7天的活动能力测试中，体能明显下降，显示活动能力降低(a)；而和受感染组(b,infection)比较，受感染治疗组(c，infection+dhm)在受到感染后，接受每天1cm³dhm琼脂冻两次(早8和晚8时)，共7天的处理后，显示活动能力明显加强(a，绿色)。b)和c)表示动物特有的探索能力。受感染组显示明显的对周围无兴趣，而受感染治疗组则显示出和正常组相同的探索能力。

比较感染后恢复所需时间，受感染组在受感染两周后都没有明显自行恢复的迹象。而感染治疗组在受感染后一周显示明显的体力恢复，两周后现实完全恢复体力。给1cm³dhm琼脂冻法和dhm吸入法(5mg/l)的效果相似，这种给药效果是时间依赖性的。动物体力的恢复是由于给药所引起的。由此实验证明，在有感染的情况下，给1cm³dhm琼脂冻法和dhm吸入法(5mg/l)，可以明显防止及减轻感染对于呼吸系统的损害。

实施例4一次性复式抗霾口罩及其过滤效果测定

根据二氢杨梅素的特性，用于制成一次性复式抗霾口罩。该口罩规格：17.5x9.5cm²。为保证质量，口罩避光常温保存，口罩生产环境要求一般无菌(指无病原菌)。

该一次性复式抗霾口罩产品材质为：分为外层、中层和内层三层，佩戴口罩时口罩的紧贴鼻梁处采用环保型全塑条，不含任何金属，配带透气，舒适；外层和内层均由采用医用纤维无纺布制成；中层由过滤防菌达99％的无纺布层和二氢杨梅素制成的抗霾层组成，中层尺寸：12x8cm²，所述二氢杨梅素在过滤防菌达99％的无纺布上的涂覆量为1mg/cm²。所述中层的制作方式：将二氢杨梅素溶于消毒净水，充分混匀后(混悬液或悬浊液)，均匀涂于过滤防菌达99％的无纺布的表面形成抗霾层，风干即得。

将上述一次性复式抗霾口罩固定于直径10公分圆筒内。用试验气雾器喷出混入so2500μg/m³的空调排出气体，气压力40psi，持续10分钟。用迪拉斯(dylos)空气质量监测仪检测结果，此一次性复式抗霾口罩可以过滤pm10～2.5颗粒及有害气体，滤过率达95％以上。

该一次性复式抗霾口罩可有效防护空气中悬浮颗粒对人体的危害，可适用于污染区域人员、病毒传染可能区域人员、传染病流行期间各类人员的防护，以及有毒化学、矿山工作人员、花粉过敏人员及各种工业区及工作环境内的个人防护。目前初步计算一下，一个口罩大约0.23分钱，成本及其便宜。当然还可进一步开发的产品包括充有二氢杨梅素液体的喷雾器等。

实施例5dhm的安全性评价

1、dhm对基础代谢率影响

为了证明dhm的安全性，对其基础代谢进行了研究。首先大剂量服用dhm(2.5g/kg体重，即前实施例中用药量的500倍)，dhm加入到琼脂中制成琼脂冻，制成1cm³琼脂冻含1gdhm，每日一次，经口给药(总计半年)，对基础代谢进行了测定。

其结果如图5所示：a)至d)分别是体重、液体摄取、食物摄取和排出情况。圆符号代表对照组(无药琼脂冻)，三角符号代表给药组(含dhm的琼脂冻)。每两天测定指标一次，在整体测试中，两组的各项指标没有显著差异。

此实验证明，慢性大剂量口服二氢杨梅素，没有对基础代谢率产生影响，二氢杨梅素是安全的。

2、二氢杨梅素的药效及毒性测定

根据二氢杨梅素的药代动力学，测定二氢杨梅素的药效及其毒性。分四组进行测定。

第一组：二氢杨梅素以5mg/kg体重的量口服后，测定其清除率是8小时，体内最大浓度(cmax)是30分钟。

第二组：二氢杨梅素急性重复口服，间隔两周，未见药效降低。

第三组：二氢杨梅素慢性口服常用剂量的500倍即2.5g/kg体重，每日一次，持续6个月，未见基础代谢率改变，未见心血管系统呼吸系统改变及未见脑的病理性改变。

第四组：二氢杨梅素慢性口服常用剂量的1000倍即5g/kg体重，每日一次，持续1个月，未见基础代谢率改变。

慢性及大量口服未发现二氢杨梅素在器官的存留和沉积。

综上实施例所述，二氢杨梅素具有无毒安全无副作用的特性，是一个理想的可用来防治治疗雾霾、环境污染和工业环境所造成的呼吸道感染，防止及对抗甲型流感(h1n1)病毒及由口腔进入的其他病毒感染，及细菌性呼吸系统不适及损伤。

以上内容是结合具体的实施方式对本发明所作的进一步详细说明，不能认定本发明的具体实施只局限于这些说明。对于本发明所属技术领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干简单推演或替换，都应当视为属于本发明的保护范围。