本发明属于植物提取领域，具体涉及一种石榴皮中多酚类物质的提取方法。
背景技术：
石榴(punicagranatum)多酚[1]是一类具有多酚羟基化合物的总称，包括鞣花单宁、没食子单宁、鞣花酸、没食子酸、儿茶素、花色素、绿原酸、阿魏酸和栎精等多种化合物，主要存在于石榴皮中，含量约为其干质量的10%~20%，具有抗氧化、抗衰老、抗癌防癌、抗菌、润肤美容、降血压和预防心脑血管疾病等多种生理和药理活性。石榴多酚在食品、医药和日用化学品等领域显示出巨大的应用价值。
目前对石榴多酚的提取和石榴皮的利用方法多为煎煮法。该法具有操作简便和成本低等特点，但容易造成石榴皮中多酚类和其它抗氧化成分的破坏，并且提取液中杂质含量较高，不利于多酚的分离与纯化。上述煎煮法多以有机溶剂作为提取介质，尚未见以水为提取介质的相关报道。
技术实现要素：
本发明所解决的技术问题是提供一种全新的石榴皮中多酚类物质的提取方法，该方法具有操作简便、提取效率高的优点。
本发明石榴皮中多酚类物质的提取方法，其特征在于：以水为溶剂，采用微波提取得到石榴皮多酚粗提物，然后经过大孔树脂分离，减压浓缩、真空冻干后得到石榴皮多酚。其中，所得石榴皮多酚粗提物中总多酚含量30-55%；所得石榴皮多酚中总多酚含量为65-80%。
具体的，本发明石榴皮中多酚类物质的提取方法，包括如下步骤：
a、粉碎石榴皮；优选的，石榴皮粉碎至>40目，进一步优选粉碎至80-100目；
b、提取：溶剂为水，采用微波提取，干燥提取液，得石榴皮多酚粗提物；其中，微波
提取条件为：微波功率200-800w，温度60-95℃、液料比15:1-40:1，提取时间60-180s；优选微波提取条件为：温度75℃、液料比30:1，提取时间140s；
c、纯化：石榴皮多酚粗提物加水配制成4-12mg/ml的溶液，过d101、d140或ab-8大孔树脂，速度为0.5-5.5bv/h；采用用量大于5bv的水清洗；采用用量为1-6.5bv、浓度大于60%v/v/的乙醇洗脱；收集洗脱液，干燥，得石榴皮多酚；
进一步的，优选纯化条件为：石榴皮多酚粗提物加水配制成10mg/ml的溶液；大孔树脂树脂采用d101大孔树脂；石榴皮多酚粗提物加水配制的溶液过大孔树脂的速度为2bv/h；采用用量5bv的水清洗；采用浓度大于70%v/v/的乙醇，用量为5.5bv洗脱。
综上，本发明提取方法以水为溶剂，利用微波从石榴皮中可有效提取石榴皮多酚，所得石榴皮多酚粗提物与石榴皮多酚中总多酚含量较高，粗提物收率达40-50%，为获得石榴皮多酚提供了一种新的选择。
实施例：
实施例1
1、粉碎、过筛
取石榴皮，烘干、粉碎，过筛，80目；
2、粗多酚提取
采用微波萃取仪进行辅助提取，优化提取参数为：提取温度75℃、液料比30:1、提取时间140s，以80-100目的石榴皮粉提取多酚类物质，粗提物中总多酚含量为22.06%，经减压浓缩和真空冻干后，总多酚含量为49.31%；
3、分离、纯化
采用d101大孔树脂，速度为2bv/h，进柱浓度为10mg/ml，清洗用水为5bv，70%乙醇洗脱剂，使用量为5.5bv，得到石榴皮多酚，经减压浓缩和真空冻干后，得石榴皮多酚，总多酚含量为71.64%。
实施例2
1、粉碎、过筛
取石榴皮，烘干、粉碎，过筛，100目；
2、粗多酚提取
采用微波萃取仪进行辅助提取，优化提取参数为：提取温度70℃、液料比35:1、提取时间150s，以100目的石榴皮粉提取多酚类物质，粗提物中总多酚含量为21.20%，经减压浓缩和真空冻干后，总多酚含量为48.95%；
3、分离、纯化
采用d101大孔树脂，速度为2.5bv/h，进柱浓度为11mg/ml，清洗用水为6bv，70%乙醇洗脱剂，使用量为5bv，得到石榴皮多酚，经减压浓缩和真空冻干后，得石榴皮多酚，总多酚含量为70.05%。
实施例3
1、粉碎、过筛
取石榴皮，烘干、粉碎，过筛，90目；
2、粗多酚提取
采用微波萃取仪进行辅助提取，优化提取参数为：提取温度80℃、液料比30:1、提取时间120s，以90目的石榴皮粉提取多酚类物质，粗提物中总多酚含量为22.03%，经减压浓缩和真空冻干后，总多酚含量为50.06%；
3、分离、纯化
采用d101大孔树脂，速度为3bv/h，进柱浓度为9mg/ml，清洗用水为4.5bv，70%乙醇洗脱剂，使用量为4.5bv，得到石榴皮多酚，经减压浓缩和真空冻干后，得石榴皮多酚，总多酚含量为72.18%。
1.一种石榴皮中多酚类物质的提取方法，其特征在于：以水为溶剂，采用微波提取得到石榴皮多酚粗提物，然后经过大孔树脂分离，减压浓缩、真空冻干后得到石榴皮多酚。
2.根据权利要求1所述的石榴皮中多酚类物质的提取方法，其特征在于：
a、粉碎石榴皮；
b、提取：溶剂为水，采用微波提取，干燥提取液，得石榴皮多酚粗提物；
其中，微波提取条件为：温度60-95℃、液料比15:1-40:1，提取时间60-180s；
c、纯化：石榴皮多酚粗提物加水配制成4-12mg/ml的溶液，过d101、d140或ab-8大孔树脂，速度为0.5-5.5bv/h；采用用量大于5bv的水清洗；采用用量为1-6.5bv、浓度大于60%v/v/的乙醇洗脱；收集洗脱液，干燥，得石榴皮多酚。
3.根据权利要求2所述的石榴皮中多酚类物质的提取方法，其特征在于：步骤b优选微波提取条件为：温度75℃、液料比30:1，提取时间140s。
4.根据权利要求2所述的石榴皮中多酚类物质的提取方法，其特征在于：步骤c纯化条件中：石榴皮多酚粗提物加水配制成10mg/ml的溶液。
5.根据权利要求2所述的石榴皮中多酚类物质的提取方法，其特征在于：步骤c纯化条件中：大孔树脂树脂采用d101大孔树脂。
6.根据权利要求2所述的石榴皮中多酚类物质的提取方法，其特征在于：步骤c纯化条件中：石榴皮多酚粗提物加水配制的溶液过大孔树脂的速度为2bv/h。
7.根据权利要求2所述的石榴皮中多酚类物质的提取方法，其特征在于：步骤c纯化条件中：采用用量5bv的水清洗。
8.根据权利要求2所述的石榴皮中多酚类物质的提取方法，其特征在于：步骤c纯化条件中：采用浓度大于70%v/v/的乙醇，用量为5.5bv洗脱。
9.根据权利要求2所述的石榴皮中多酚类物质的提取方法，其特征在于：步骤a粉碎石榴皮粒度至>40目。
10.根据权利要求1所述的石榴皮中多酚类物质的提取方法，其特征在于：步骤a粉碎石榴皮粒度至80-100目。