丛枝菌根真菌孢子消毒方法及装置与流程

本发明涉及一种消毒方法及装置，具体是一种丛枝菌根真菌孢子消毒方法及装置，属于微生物领域。

背景技术：

丛枝菌根真菌(amf)是一类广泛存在于土壤中的植物根系共生真菌，能够与大部分高等植物根系形成共生关系。amf孢子是丛枝菌根真菌的繁殖器官，为了对amf孢子进行扩增，利用人工纯培养对amf孢子进行扩繁是最有效的技术，然而目前的技术不能实现amf孢子的人工纯培养的目的，只能通过活体宿主植物根系形成共生关系才能完成其繁殖过程。

通过毛状根和表面消毒的amf孢子在特定培养基上形成共生关系，可以用来研究amf和植物的共生机制，然而在将amf孢子接种到毛状根周围的时候，由于孢子表面消毒不彻底，很容易导致整个平板的污染而失败。所以彻底有效的amf孢子消毒方法及装置对于孢子表面消毒至关重要。

目前尚未发现为amf孢子消毒所设计的专用消毒装置。而传统的菌根孢子消毒方法有两种：一种是将amf孢子放置在无菌滤膜上，再用一层无菌滤膜覆盖在上面，利用无菌枪头吸取amf孢子消毒液，不断滴加到无菌滤膜上，从而达到amf孢子消毒的目的。但是此种方法不能够使消毒液和amf孢子表面进行充分接触，amf孢子由于在两个滤膜中不能充分活动，不能将连孢菌丝与孢子交接处消毒充分；另一种方法是利用离心的方法，将amf孢子放入无菌的带滤膜的离心柱中，将消毒液加入离心柱中，经过多次离心过程达到amf孢子消毒的目的。此种方法会使amf孢子在离心过程中由于离心力的作用而造成amf孢子之间的黏连，不能够充分消毒amf孢子之间的黏连部分，并且由于离心力的作用会使部分amf孢子受损，降低了amf孢子的活性。目前尚未发现一种既无需离心，又能对amf孢子彻底消毒的方法及装置。

技术实现要素：

本发明的目的是为了解决传统丛枝菌根真菌孢子消毒过程中的多次离心问题，而公开一种丛枝菌根真菌孢子消毒方法及装置。

本发明丛枝菌根真菌孢子消毒装置的技术方案是：

主消毒室1下端与副消毒室2上端通过丝扣连接形成密闭消毒室，主消毒室1上端覆盖400目滤布5，副消毒室2中套装气密性良好的活塞3，活塞3下端连接推拉杆4。

本发明丛枝菌根真菌孢子的消毒方法如下：

a.通过湿筛倾析法从菌剂中获得丛枝菌根真菌孢子，将其放入主消毒室1内；

b.将主消毒室1上端浸入孢子消毒液中，抽动推拉杆4吸取孢子消毒液，每间隔2分钟上下颠倒一次，经数次颠倒后静置5-20分钟，推进推拉杆4将孢子消毒液喷出；

c.将主消毒室1上端浸入无菌水中，并抽动推拉杆4吸取无菌水，上下颠倒数次后，推进推拉杆4将无菌水喷出；

d.将主消毒室1和副消毒室2分离，主消毒室1中即为消毒好的丛枝菌根真菌孢子，可用于后续试验。

本发明各个部件都可以通过提前高压灭菌防止杂菌的引入，同时也防止了离心消毒方法孢子之间的缠绕，通过上下颠倒消毒室可以实现消毒液和孢子表面的充分接触，大大提高了孢子消毒效率，以便于后续孢子萌发的研究。所需要的材料在一般的实验室条件下均可达到，操作使用简单，且装置可重复利用，可行性高。

附图说明

附图1是本发明的主视剖面结构示意图。

附图2是本发明的俯视结构示意图。

附图标记说明如下：

主消毒室1，副消毒室2，活塞3，推拉杆4，滤布5。

具体实施方式

下面结合具体实施例及附图对本发明做进一步详细说明，本实施例只是为了解释本发明而不是限制本发明：

本发明丛枝菌根真菌孢子消毒装置的技术方案是：

主消毒室1下端与副消毒室2上端通过丝扣连接形成密闭消毒室，主消毒室1上端覆盖400目滤布5，副消毒室2中套装气密性良好的活塞3，活塞3下端连接推拉杆4。

本发明丛枝菌根真菌孢子的消毒方法如下：

a.通过湿筛倾析法从菌剂中获得丛枝菌根真菌孢子1000个，将其放入主消毒室1内；

b.将主消毒室1上端浸入1%氯胺t中，抽动推拉杆4吸取1%氯胺t，

每间隔2分钟上下颠倒一次，经颠倒10次后，静置10分钟，推进推拉杆4将1%氯胺t喷出；

c.将主消毒室1上端浸入无菌水中，并抽动拉杆4吸取无菌水，上下颠倒10次后，推进推拉杆4将无菌水喷出；

d.将主消毒室1和副消毒室2分离，主消毒室1中即为消毒好的丛枝菌根真菌孢子，可用于后续试验。

技术特征：

技术总结
本发明丛枝菌根真菌孢子消毒装置是：主消毒室与副消毒室连接形成密闭消毒室，主消毒室上端覆盖滤布，副消毒室中套装气密性良好的活塞，活塞下端连接推拉杆。将丛枝菌根真菌孢子放入主消毒室内并浸入孢子消毒液中，抽动推拉杆吸取孢子消毒液，经数次颠倒后静置，将孢子消毒液喷出，再将主消毒室浸入无菌水中吸取无菌水，上下颠倒数次后将无菌水喷出，主消毒室中即为消毒好的丛枝菌根真菌孢子。避免了离心方法孢子之间的缠绕，通过上下颠倒消毒室实现了消毒液和孢子表面的充分接触，提高了孢子消毒效率，所需要的材料在一般的实验室均可达到，操作使用简单，且装置可重复利用，可行性高。

技术研发人员：唐明;张翔宇;陈辉;张好强
受保护的技术使用者：华南农业大学
技术研发日：2018.12.15
技术公布日：2019.03.01