中药组合物在制备提高免疫功能药物中的应用的制作方法

本发明涉及中药领域，具体而言，涉及一种中药组合物在制备提高免疫功能药物中的应用。

背景技术：

海马补肾丸为临床名方，用鹿茸、鹿肾、海马等36味药材提炼而成，具有滋阴补肾，强壮健脑的功效，用于身体衰弱，气血两亏，肾气不足，面黄肌瘦，心跳气短，腰酸腿疼，健忘虚喘等临床症候。虽然海马补肾丸已经广泛应用于上述临床症状，但是目前对于海马补肾丸的适应症发现的并不充分。

有鉴于此，特提出本发明。

技术实现要素：

本发明的目的在于提供一种中药组合物在制备提高非特异性免疫和/或体液免疫的药物中的应用，提供该中药组合物在提高免疫功能方面的应用，填补该中药组合物在该方面应用的空白。

为了实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

一种中药组合物在如下a)和/或b)中的应用：

a)制备提高非特异性免疫的药物；

b)制备提高体液免疫的药物；

其中，按重量份数计，所述中药组合物的原料包括：狗肾1500-2500份，鹿筋20-80份，带头去嘴去爪鲜雀肉5500-9500份，驴肾750-1100份，干海米300-900份，鹿茸500-1200份，海马100-1500份，海蛆200-1000份，制豹骨10-100份和蛤蚧100-850份。

进一步地，所述中药组合物的用量为1.1～2.2g/kg/天。

进一步地，所述a)中，中药组合物在制备抑制抗肿瘤药物引起的胸腺萎缩的药物中的应用；

优选地，所述抗肿瘤药物包括烷化剂类抗肿瘤药物，优选为环磷酰胺、白消安、噻替派或卡莫司汀，进一步优选为环磷酰胺。

进一步地，所述a)中，中药组合物在制备提高巨噬细胞的吞噬能力的药物中的应用；

优选地，抗肿瘤药物造成所述巨噬细胞的吞噬能力降低；

优选地，所述抗肿瘤药物包括烷化剂类抗肿瘤药物，优选为环磷酰胺、白消安、噻替派或卡莫司汀，进一步优选为环磷酰胺。

进一步地，所述b)中，中药组合物在制备提高血清溶血素的生产量、提高血液白细胞数量、提高血液免疫球蛋白igg含量、提高血液免疫球蛋白igm含量或提高血液免疫球蛋白iga含量中至少一种的药物中的应用；

优选地，抗肿瘤药物造成所述血清溶血素的生产量、血液白细胞数量、血液免疫球蛋白igg含量、血液免疫球蛋白igm含量或血液免疫球蛋白iga含量中至少一种降低；

优选地，所述抗肿瘤药物包括烷化剂类抗肿瘤药物，优选为环磷酰胺、白消安、噻替派或卡莫司汀，进一步优选为环磷酰胺。

进一步地，按重量份数计，所述中药组合物的原料还包括：人参300-1200份，黄芪100-1200份，当归300-1500份，熟地黄3000-6000份，制附子3500-7000份，肉桂200-750份，母丁香1500-4500份，盐制茴香950-1800份，牛膝300-1200份和盐制补骨脂700-1700份。

进一步地，按重量份数计，所述中药组合物的原料还包括：党参1200-3000份，茯苓500-1500份，山药950-2500份，杜仲炭300-1200份，狗脊100-1500份，酒制肉苁蓉3000-6500份，核桃仁900-1700份，制淫羊藿900-3500份和盐炒沙苑子900-1700份。

进一步地，按重量份数计，所述中药组合物的原料还包括：覆盆子1000-3000份，枸杞子500-1500份，酒制五味子300-1200份，菟丝子600-1700份，酒制山茱萸500-1800份，煅龙骨250-1500份，甘草100-900份。

进一步地，按重量份数计，所述中药组合物的原料包括：狗肾1875份，鹿筋40份，带头去嘴去爪鲜雀肉7500份，驴肾930份，干海米500份，鹿茸750份，海马375份，海蛆375份，制豹骨40份，蛤蚧240份，人参750份，黄芪625份，当归1000份，熟地黄5000份，制附子5000份，肉桂375份，母丁香2500份，盐制茴香1250份，牛膝750份，盐制补骨脂1250份，党参1875份，茯苓750份，山药1500份，杜仲炭750份，狗脊375份，酒制肉苁蓉5000份，核桃仁1250份，制淫羊藿2000份，盐炒沙苑子1250份，覆盆子2000份，枸杞子750份，酒制五味子750份，菟丝子1250份，酒制山茱萸750份，煅龙骨625份和甘草375份。

进一步地，所述中药组合物通过以下方法制备得到：水提浓缩膏、酒制粉末和29味原料的混合粉末混合制丸，用包衣剂包衣，得到所述中药组合物；

所述29味原料的混合粉末包括：鹿茸，海马，海蛆，制豹骨，蛤蚧，人参，黄芪，当归，制附子，肉桂，母丁香，盐制茴香，牛膝，盐制补骨脂，党参，茯苓，山药，狗脊，酒制肉苁蓉，核桃仁，制淫羊藿，盐炒沙苑子，覆盆子，枸杞子，酒制五味子，菟丝子，酒制山茱萸，煅龙骨和甘草的混合粉末；

所述酒制粉末为将驴肾、狗肾、鹿筋和干海米加3000-5000重量倍黄酒置容器内，密封，蒸至黄酒被药材吸尽为止，取出，干燥，粉碎过筛得到；

所述水提浓缩膏为将熟地黄和带头去嘴去爪鲜雀肉加5-10重量倍的水前煮2-3次，每次煮2-5小时，合并水煎液，滤过，滤液浓缩成在45-55℃相对密度为1.1-1.5的水提浓缩膏；

所述包衣剂为将杜仲炭粉碎成粉，过120目筛得到；

优选地，所述水提浓缩膏、酒制粉末和29味原料的混合粉末混合，加入适量蜂蜜和水，再进行制丸的步骤。

将本发明的中药组合物命名为“海马补肾丸”。

与现有技术相比，本发明的有益效果为：

本发明的中药组合物原料包括狗肾，鹿筋，带头去嘴去爪鲜雀肉，驴肾，干海米，鹿茸，海马，海蛆，制豹骨和蛤蚧，不仅具有滋阴补肾、强壮健脑的功效，本发明通过试验发现：一方面，该中药组合物可以有效提高机体吞噬细胞的吞噬能力，并且可以有效提高胸腺系数；另一方面，该中药组合物提高机体血清中溶血素的含量，并且可以提高血液中白细胞、igg、igm、iga的含量，因此，该中药组合物可以有效提高非特异性免疫功能和体液免疫功能，即增强机体的免疫功能。该中药组合物都是自然取材，利用各中药的有效成分和各药材间的配伍关系达到治疗的目的。本发明在现有适应症的基础上，发现了该中药组合物新的适应症，作为提高机体免疫力的药物，为药物的充分利用开发提供了新的方向。

附图说明

图1为本发明实施例2中中药组合物对免疫抑制小鼠廓清指数的影响结果图；

图2为本发明实施例2中中药组合物对免疫抑制小鼠吞噬指数的影响结果图；

图3为本发明实施例2中中药组合物对免疫抑制小鼠肝指数的影响；

图4为本发明实施例2中中药组合物对免疫抑制小鼠脾、胸腺脏器指数的影响；

图5为本发明实施例3中中药组合物对免疫抑制小鼠体液免疫功能的影响；

图6为本发明实施例4中中药组合物对对免疫抑制小鼠白细胞数的影响；

图7为本发明实施例4中中药组合物对免疫抑制小鼠免疫球蛋白－igg的影响；

图8为本发明实施例4中中药组合物对免疫抑制小鼠免疫球蛋白－igm的影响；

图9为本发明实施例4中中药组合物对免疫抑制小鼠免疫球蛋白－iga的影响。

具体实施方式

下面将结合实施例对本发明的实施方案进行详细描述，但是本领域技术人员将会理解，下列实施例仅用于说明本发明，而不应视为限制本发明的范围。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。

一种中药组合物在如下a)和/或b)中的应用：

a)制备提高非特异性免疫的药物；

b)制备提高体液免疫的药物；

其中，按重量份数计，中药组合物的原料包括：狗肾1500-2500份，鹿筋20-80份，带头去嘴去爪鲜雀肉5500-9500份，驴肾750-1100份，干海米300-900份，鹿茸500-1200份，海马100-1500份，海蛆200-1000份，制豹骨10-100份和蛤蚧100-850份。

本发明的中药组合物原料包括狗肾，鹿筋，带头去嘴去爪鲜雀肉，驴肾，干海米，鹿茸，海马，海蛆，制豹骨和蛤蚧，不仅具有滋阴补肾、强壮健脑的功效，本发明通过试验发现：一方面，该中药组合物可以有效提高机体吞噬细胞的吞噬能力，并且可以有效提高胸腺系数；另一方面，该中药组合物提高机体血清中溶血素的含量，并且可以提高血液中白细胞、igg、igm、iga的含量，因此，该中药组合物可以有效提高非特异性免疫功能和体液免疫功能，即增强机体的免疫功能。该中药组合物都是自然取材，利用各中药的有效成分和各药材间的配伍关系达到治疗的目的。本发明在现有适应症的基础上，发现了该中药组合物新的适应症，作为提高机体免疫力的药物，为药物的充分利用开发提供了新的方向。

需要说明的是，按重量份数计，狗肾典型但非限制性的为1500份、1700份、1900份、2000份、2200份或2500份；鹿筋典型但非限制性的为20份、40份、60份或80份；带头去嘴去爪鲜雀肉典型但非限制性的为5500份、6500份、7500份、8500份或9500份；驴肾典型但非限制性的为750份、850份、950份、1050份或1100份；干海米典型但非限制性的为300份、500份、700份或900份；鹿茸典型但非限制性的为500份、700份、900份、1000份或1200份；海马典型但非限制性的为100份、300份、500份、700份、900份、1100份、1400份或1500份；海蛆典型但非限制性的为200份、400份、600份、800份或1000份；制豹骨典型但非限制性的为10份、30份、50份、70份、90份或100份；蛤蚧典型但非限制性的为100份、300份、500份、700份或850份。

在本发明一些优选地实施方式中，中药组合物的用量为1.1～2.2g/kg/天。该用量下，该中药组合物可以有效地提高机体的免疫功能。

在本发明的一些实施方式中，应用a)中，中药组合物在制备抑制抗肿瘤药物引起的胸腺萎缩的药物中的应用。免疫器官的脏器系数是衡量机体非特异性免疫功能的指标之一，该中药组合物可以明显抑制抗肿瘤药物引起的胸腺萎缩，表明该中药组合物具有明显的非特异性免疫增强作用功能。

在本发明的一些实施方式中，抗肿瘤药物包括烷化剂类抗肿瘤药物，优选为环磷酰胺、白消安、噻替派或卡莫司汀，进一步优选为环磷酰胺。

在本发明的一些实施方式中，应用a)中，中药组合物在制备提高巨噬细胞的吞噬能力的药物中的应用。单核巨噬细胞的吞噬能力是衡量机体非特异性免疫功能的重要指标。巨噬细胞碳粒廓清指数κ和吞噬指数α的大小可以反映内皮网状系统吞噬功能的强弱，当细菌、异物等抗原性物质进入机体后，可迅速被单核巨噬系统吞噬和清除。本发明的实验结果显示该中药组合物可以明显增加免疫功能低下小鼠的碳粒廓清指数κ和吞噬指数α。进而说明，该中药组合物可以提高机体巨噬细胞的巨噬能力。

在一些实施方式中，中药组合物可以用于改善由于抗肿瘤药物造成的巨噬细胞吞噬能力的降低。

在本发明的一些实施方式中，应用b)中，中药组合物在制备提高血清溶血素的生产量、提高血液白细胞数量、提高血液免疫球蛋白igg含量、提高血液免疫球蛋白igm含量或提高血液免疫球蛋白iga含量中至少一种的药物中的应用。血清溶血素反映机体体内抗体量，是体液免疫功能的重要指标，免疫球蛋白在体液免疫中起着重要的作用，是免疫系统的重要组成部分，igg、igm、iga是3种体内重要的免疫球蛋白，igg含量最高，具有抗菌、抗病毒、抗毒素的作用；igm在初次体液免疫应答早期产生，具有杀菌、溶菌、促吞噬、抗病毒的作用；iga对机体呼吸道、消化道等局部黏膜免疫起着相当重要的作用。本发明通过试验发现：中药组合物显著增加免疫抑制小鼠的白细胞数量及igg、igm、iga的含量。说明本方法的中药组合物通过增加免疫球蛋白igg、igm、iga的含量及白细胞的数量来增强免疫抑制小鼠的免疫功能。

在本发明的一些实施方式中，由于抗肿瘤药物的使用，机体血液中的溶血素，白细胞，igg，igm和igm都要有可能降低，该中药组合物可以有效改善上述问题，作为提高免疫功能的药物使用。

在本发明一个优选地实施方式中，按重量份数计，中药组合物还包括：人参300-1200份，黄芪100-1200份，当归300-1500份，熟地黄3000-6000份，制附子3500-7000份，肉桂200-750份，母丁香1500-4500份，盐制茴香950-1800份，牛膝300-1200份和盐制补骨脂700-1700份。需要说明的是，人参典型但非限制性的为300份、500份、700份、900份、1000份或1200份；黄芪典型但非限制性的为100份、300份、500份、700份、900份、1000份或1200份；当归典型但非限制性的为300份、500份、700份、900份、1000份、1200份或1500份；熟地黄典型但非限制性的为3000份、4000份、5000份或6000份；制附子典型但非限制性的为3500份、4500份、5500份、6500份或7500份；肉桂典型但非限制性的为200份、400份、600份或750份；母丁香典型但非限制性的为1500份、2500份、3500份或4500份；盐制茴香典型但非限制性的为950份、1050份、1350份、1550份、1750份或1800份；牛膝典型但非限制性的为300份、500份、700份、900份、1000份或1200份；盐制补骨脂典型但非限制性的为700份、900份、1100份、1300份、1500份或1700份。

在本发明一个优选地实施方式中，按重量份数计，中药组合物还包括：党参1200-3000份，茯苓500-1500份，山药950-2500份，杜仲炭300-1200份，狗脊100-1500份，酒制肉苁蓉3000-6500份，核桃仁900-1700份，制淫羊藿900-3500份和盐炒沙苑子900-1700份。需要说明的是，党参典型但非限制性的为1200份、1400份、1600份、1800份、2000份、2200份、2400份、2600份、2800份或3000份；茯苓典型但非限制性的为500份、700份、900份、1100份、1300份或1500份；山药典型但非限制性的为950份、1150份、1350份、1550份、1750份、1950份、2150份、2350份或2500份；杜仲炭典型但非限制性的为300份、500份、700份、900份、1000份或1200份；狗脊典型但非限制性的为100份、300份、500份、700份、900份、1100份、1300份或1500份；酒制肉苁蓉典型但非限制性的为3000份、4000份、5000份、6000份或6500份；核桃仁典型但非限制性的为900份、1100份、1300份、1500份或1700份；制淫羊藿典型但非限制性的为900份、1100份、2100份、3100份或3500份；盐炒沙苑子典型但非限制性的为900份、1100份、1300份、1500份或1700份。

在本发明一个优选地实施方式中，按重量份数计，中药组合物还包括：覆盆子1000-3000份，枸杞子500-1500份，酒制五味子300-1200份，菟丝子600-1700份，酒制山茱萸500-1800份，煅龙骨250-1500份，甘草100-900份。需要说明的是，覆盆子典型但非限制性的为1000份、2000份或3000份；枸杞子典型但非限制性的为500份、700份、900份、1100份、1300份或1500份；酒制五味子典型但非限制性的为300份、500份、700份、900份、1000份或1200份；菟丝子典型但非限制性的为600份、800份、1000份、1200份、1400份、1600份或1700份；酒制山茱萸典型但非限制性的为500份、800份、1100份、1400份、1600份或1800份；煅龙骨典型但非限制性的为250份、550份、850份、1150份、1350份或1500份；甘草典型但非限制性的为100份、300份、500份、700份或900份。

在本发明一个优选地实施方式中，按重量份数计，中药组合物包括：狗肾1875份，鹿筋40份，带头去嘴去爪鲜雀肉7500份，驴肾930份，干海米500份，鹿茸750份，海马375份，海蛆375份，制豹骨40份，蛤蚧240份，人参750份，黄芪625份，当归1000份，熟地黄5000份，制附子5000份，肉桂375份，母丁香2500份，盐制茴香1250份，牛膝750份，盐制补骨脂1250份，党参1875份，茯苓750份，山药1500份，杜仲炭750份，狗脊375份，酒制肉苁蓉5000份，核桃仁1250份，制淫羊藿2000份，盐炒沙苑子1250份，覆盆子2000份，枸杞子750份，酒制五味子750份，菟丝子1250份，酒制山茱萸750份，煅龙骨625份和甘草375份。该中药组合物之间配比合理，可以有效提高机体免疫功能。

在本发明一个优选地实施方式中，按重量份数计，中药组合物通过以下方法制备得到：29味原料的混合粉末、酒制粉末和水提浓缩膏混合制丸，用包衣剂包衣，得到中药组合物，

其中，29味原料的混合粉末包括：鹿茸，海马，海蛆，制豹骨，蛤蚧，人参，黄芪，当归，制附子，肉桂，母丁香，盐制茴香，牛膝，盐制补骨脂，党参，茯苓，山药，狗脊，酒制肉苁蓉，核桃仁，制淫羊藿，盐炒沙苑子，覆盆子，枸杞子，酒制五味子，菟丝子，酒制山茱萸，煅龙骨和甘草的混合粉末；

酒制粉末为将驴肾、狗肾、鹿筋和干海米加3000-5000重量倍黄酒置容器内，密封，蒸至黄酒被药材吸尽为止，取出，干燥，粉碎过筛得到；

水提浓缩膏为将熟地黄和带头去嘴去爪鲜雀肉加5-10重量倍的水前煮2-3次，每次煮2-5小时，合并水煎液，滤过，滤液浓缩成在45-55℃相对密度为1.1-1.5的水提浓缩膏；

包衣剂为将杜仲炭粉碎成粉，过120目筛得到；

在本发明一个优选地实时方式中，水提浓缩膏、酒制粉末和29味原料的混合粉末混合，加入适量蜂蜜和水，再进行制丸的步骤。

下面通过具体的实施例进一步说明本发明，但是，应当理解为，这些实施例仅仅是用于更详细地说明之用，而不应理解为用于以任何形式限制本发明。

实施例1中药组合物及其制备方法

(a)称取狗肾1875份，鹿筋40份，带头去嘴去爪鲜雀肉7500份，驴肾930份，干海米500份，鹿茸750份，海马375份，海蛆375份，制豹骨40份，蛤蚧240份，人参750份，黄芪625份，当归1000份，熟地黄5000份，制附子5000份，肉桂375份，母丁香2500份，盐制茴香1250份，牛膝750份，盐制补骨脂1250份，党参1875份，茯苓750份，山药1500份，杜仲炭750份，狗脊375份，酒制肉苁蓉5000份，核桃仁1250份，制淫羊藿2000份，盐炒沙苑子1250份，覆盆子2000份，枸杞子750份，酒制五味子750份，菟丝子1250份，酒制山茱萸750份，煅龙骨625份和甘草375份。

(b)将杜仲炭粉碎成粉，过120目筛备用；

(c)将熟地黄、带头去嘴去爪鲜雀肉加8重量倍的水前煮8次，每次煮3小时，合并水煎液，滤过，滤液浓缩成在50℃相对密度为1.5的浓缩膏；

(d)将驴肾、狗肾、鹿筋、干海米加4000重量倍黄酒置容器内，密封，蒸至黄酒被药材吸尽为止，取出，干燥，粉碎过筛；

(e)将其余29味原料粉碎过筛；加入步骤(d)制得的粉末，加入步骤(c)制得的浓缩膏，加入适量蜂蜜及水，制丸，闯圆，干燥，用杜仲炭粉包衣，打光，干燥，即得。

实施例2中药组合物对非特异性免疫的影响

采用注射盐酸环磷酰胺致小鼠免疫抑制模型。选用健康昆明种小鼠84只，雌雄各半，体重(18-20)g，随机分组，每组12只，实验设正常对照组、模型对照组、香菇菌多糖100mg/kg，龟龄集0.24g/kg，中药组合物(0.55、1.1、2.2)g/kg三个剂量组，共7组。各剂量组每天灌胃给药1次，连续14天，给药容积为20ml/kg.bw，正常对照组给予等量的蒸馏水，模型组给予相应容积0.5％cmc-na。实验第11天，除正常对照组外，其余动物均每天腹腔注射盐酸环磷酰胺80mg/kg，连续3天。实验第14天，尾静脉注射25％印度墨汁(10ml/kg)，于注射后2、10min用毛细管从眼眶静脉丛取血20ul，溶于2ml0.1％na2co3溶液中摇匀，置分光光度计在波长600nm测吸光度，以na2co3溶液作空白对照，校零。将小鼠处死，摘除肝、脾和胸腺，称重。分别以每10克小鼠体重的肝重、脾重及胸腺重，作为肝指数、脾指数和胸腺指数，观察药物的作用，并计算廓清指数和吞噬指数，结果见表1-2、图1-4。

廓清指数：κ＝(logod10-logod2)/(t2-t1)式1

肝脾网状内皮系统吞噬指数α：

(注：式1中od2、od10、为2min和10min时的od值，t为时间。)

表1.中药组合物对免疫抑制小鼠吞噬指数和廓清指数的影响

与正常对照组比较，^△p<0.05，^△△p<0.01；与模型组比较，^*p<0.05，^**p<0.01。

表2.中药组合物对免疫抑制小鼠脏器系数的影响

与正常对照组，比较^△△p<0.01；与模型组比较，^*p<0.05，^**p<0.01。

表1结果显示：与正常对照组比较，模型对照组廓清指数、吞噬指数显著减小，显示已造成免疫功能明显抑制。与模型对照组比较，中药组合物2.2g/kg能显著增加增加吞噬指数及廓清指数，中药组合物1.1g/kg能显著增加廓清指数。龟龄集0.24g/kg能显著增加廓清指数，阳性药香菇菌多糖作用相似。

表2结果显示：与正常对照组比较，模型对照组脾指数、胸腺指数显著减小，已造成免疫免疫功能低下。与模型对照组比较，中药组合物1.1、2.2g/kg剂量组能显著增加胸腺指数，龟龄集0.24g/kg显著增加胸腺指数，阳性药香菇菌多糖作用相似。

结果提示：中药组合物能明显增强免疫抑制小鼠的非特异性免疫功能。

实施例3中药组合物对体液免疫的影响

采用注射盐酸环磷酰胺致小鼠免疫抑制模型。选用健康昆明种小鼠70只，体重(18-20)g，随机分组，每组10只，实验设正常对照组、模型对照组、香菇菌多糖100mg/kg，龟龄集0.24g/kg，中药组合物(0.55、1.1、2.2)g/kg三个剂量组，共7组。各给药组每天灌胃给药1次，正常对照组给予等量的蒸馏水，模型对照组给予相应容积0.5％cmc-na，连续14天，给药容积为20ml/kg.bw。实验第9天，除正常对照组腹腔注射相应量的生理盐水外，其余动物均腹腔注射盐酸环磷酰胺100mg/kg。实验第7、10天，每鼠腹腔注射5％鸡红细胞悬液0.3ml致敏。实验第14天，给药后1h，用毛细管于小鼠眼球后静脉丛采血，静置30min，2000r/min，离心15min，分离血清，取稀释血清(血清2μl+生理盐水1ml)，加入5％鸡红细胞悬液0.5ml，将反应体系放入冰水浴中，然后，加入1.0ml10％补体，在37℃水浴中保温30min后，冰水浴中终止反应，2000rpm离心10min，取上清液用紫外分光光度计540nm处比色读取吸光度，以生理盐水代替小鼠血清依法作空白管。结果见表3、图5。

表3.中药组合物对免疫抑制小鼠体液免疫的影响

与正常对照组比较，^△△p<0.01；与模型组比较，^*p<0.05，^**p<0.01；n：动物数。

表3结果显示：与正常对照组比较，模型对照组od值显著减少，表明血清溶血素生成量减少，已造成免疫抑制。与模型对照组比较，中药组合物不同程度地增加血清溶血素生成量，龟龄集0.24g/kg显著增加血清溶血素生成量，阳性药香菇菌多糖作用相似。

结果提示中药组合物能明显增强免疫抑制小鼠的体液免疫。

实施例4中药组合物对外周血白细胞及免疫球蛋白水平的影响

选用健康昆明种小鼠70只，体重(18-20)g，雌雄各半。实验第1天，按体重随机分成7组，即：实验设正常对照组、模型对照组、香菇菌多糖100mg/kg，龟龄集0.24g/kg，中药组合物(0.55、1.1、2.2g)g/kg三个剂量组，共7组。第2天，开始灌胃给药，正常对照组给予等量的蒸馏水，模型组给予相应容积0.5％cmc-na，给药容积均为20ml/kg，每天给药1次，连续14天。给药第8-10天，除正常组注射相应量的生理盐水外，剩余各组开始腹腔注射环磷酰胺80mg/kg，连续3天，继续给药，至给药第14天眼眶静脉取血，测定白细胞数及免疫球蛋白igg、igm、iga含量，结果见表4-5、图6-9。

白细胞计数：20μl血液加入白细胞稀释液380μl，充分混匀；滴入计数盘内，静置(2-3)min；计数4个大方格的白细胞数。

白细胞数(个/mm³)＝4个大方格的白细胞数*10*20/4

白细胞稀释液：

冰醋酸2.0ml，1％甲紫1.0ml，定容至100ml。

表4.中药组合物对免疫抑制小鼠白细胞数的影响(n＝10)

与正常对组比较，^△△p<0.01；与模型组比较，^*p<0.05，^**p<0.01；与龟龄集组比较，^◆p<0.05；n：动物数。

表5.中药组合物对免疫抑制小鼠免疫球蛋白的影响(n＝10)

与正常组比较：^△p<0.05，^△△p<0.01；与模型组比较：^*p<0.05，^**p<0.01；n：动物数。

表4结果显示：与正常对照组比较，模型对照组白细胞数显著减少，显示已造成免疫抑制。与模型对照组比较，中药组合物2.2g/kg剂量组显著增加白细胞数量，龟龄集0.24g/kg未见显著作用，阳性药香菇菌多糖能显著增加白细胞数量。

表5结果显示：与正常对照组比较，模型对照组血清中免疫球蛋白含量显著减少。与模型对照组比较，中药组合物2.2g/kg显著增加免疫球蛋白igg、igm、iga的含量，龟龄集0.24g/kg显著增加免疫球蛋白igg、igm、iga的含量，阳性药香菇菌多糖作用相似。

结果提示：中药组合物通过增加免疫球蛋白igg、igm、iga含量及白细胞数量，增强免疫抑制小鼠的特异性体液免疫。

尽管已用具体实施例来说明和描述了本发明，然而应意识到，在不背离本发明的精神和范围的情况下可以作出许多其它的更改和修改。因此，这意味着在所附权利要求中包括属于本发明范围内的所有这些变化和修改。