本发明涉及中药破壁饮片技术领域，具体涉及一种用于治疗主治痈肿肺痨久咳的草河车破壁饮片的制备方法及由其制备的草河车破壁饮片。
背景技术：
中药破壁饮片是运用现代超微粉碎技术将传统饮片加工而成的一种以粉末形式入药的中药饮片。中药破壁饮片为全成分入药，药用物质基础不变，符合中药饮片的内涵，破壁后饮片的性味与归经、功能与主治等保持与传统饮片的性质相一致，破壁饮片可以直接冲泡服用，可连同药渣一起服用。但是，破壁饮片技术目前在国内饮片生产企业应用并不广泛，也没有形成真正的行业规范。因此，研究开发出一种中药破壁饮片的制备方法，充分发挥中药破壁饮片全成分入药的优势，通过破壁保留传统中药的全部药效成分，进而更利于服用者对药效成分的吸收，以缓解现有中药颗粒加水浓缩后提取，只能提取中药材部分药效成分的问题，变得十分必要和迫切。
草河车又名七叶一枝花，为多年生草本植物，主产于主产广东、广西、江西、福建、陕西、四川等地，主要成分为七叶一枝花皂苷，具有败毒抗癌、消肿止痛、清热定惊、镇咳平喘等功效，主治痈肿肺痨久咳、跌打损伤、蛇虫咬伤、淋巴结核、骨髓炎等症。然而，目前还没有关于草河车破壁饮片及其制备工艺的报道。
技术实现要素：
本发明的目的是提供一种用于治疗主治痈肿肺痨久咳的草河车破壁饮片的制备方法及由其制备的草河车破壁饮片。
本发明提供了一种用于治疗主治痈肿肺痨久咳的草河车破壁饮片的制备方法，该方法包括以下步骤：
(a)将干燥的草河车药材预粉碎，得到粒度为10-100目的草河车药材颗粒；
(b)用30-60重量％的乙醇水溶液对所述草河车药材颗粒进行浸泡；
(c)过滤，将得到的滤饼冷冻干燥，冷冻干燥的温度为-10℃～-50℃，真空度为5-50pa；
(d)在-10℃～0℃的温度下放置1-3小时；
(e)在真空条件下对所得草河车颗粒进行微波处理，然后进行超微粉碎，得到40微米以下的超微细粉；
(f)将所述超微细粉与60-80重量％的乙醇水溶液混合，然后进行制粒和干燥。
本发明还提供了由上述方法制备的草河车破壁饮片。
按照本发明所述的草河车破壁饮片的制备方法，首先将草河车药材进行预粉碎，接着依次进行浸泡、冷冻干燥、冷冻储存和微波处理，这样一整套的处理工艺可以对草河车的细胞壁进行脆化，然后通过超微粉碎可以容易地使草河车细胞破壁，从而得到破壁比率较高的草河车破壁饮片。
而且，按照本发明所述的方法制备的草河车破壁饮片的产品成分一致性较好，质量稳定、可控，大大利于现代大产业化发展。
具体实施方式
以下对本发明的具体实施方式进行详细说明。应当理解的是，此处所描述的具体实施方式仅用于说明和解释本发明，并不用于限制本发明。
在本文中所披露的范围的端点和任何值都不限于该精确的范围或值，这些范围或值应当理解为包含接近这些范围或值的值。对于数值范围来说，各个范围的端点值之间、各个范围的端点值和单独的点值之间，以及单独的点值之间可以彼此组合而得到一个或多个新的数值范围，这些数值范围应被视为在本文中具体公开。
本发明所述的草河车破壁饮片的制备方法包括以下步骤：
(a)将干燥的草河车药材预粉碎，得到粒度为10-100目的草河车药材颗粒；
(b)用30-60重量％的乙醇水溶液对所述草河车药材颗粒进行浸泡；
(c)过滤，将得到的滤饼冷冻干燥，冷冻干燥的温度为-10℃～-50℃，真空度为5-50pa；
(d)在-10℃～0℃的温度下放置1-3小时；
(e)在真空条件下对所得草河车颗粒进行微波处理，然后进行超微粉碎，得到40微米以下的超微细粉；
(f)将所述超微细粉与60-80重量％的乙醇水溶液混合，然后进行制粒和干燥。
在本发明所述的方法中，通过预粉碎之后，所述草河车药材粉碎后得到的颗粒的尺寸为10-100目，具体地，例如可以为10目、20目、30目、40目、50目、60目、70目、80目、90目或100目。通过对所述草河车药材进行预粉碎，提高草河车药材的比表面积，从而更有利于后续的浸泡、冷冻以及微波处理等工序对草河车细胞壁的脆化。在本发明中，所述预粉碎的工序采用本领域常规的粉碎装置实施即可，在此不再赘述。
在本发明所述的方法中，对草河车颗粒进行浸泡所用的所述乙醇水溶液的浓度可以为30-60重量％，具体地，例如可以为30重量％、35重量％、40重量％、45重量％、50重量％、55重量％或60重量％。在优选情况下，所述乙醇水溶液的浓度为40-50重量％。在本发明中，使用上述浓度的乙醇水溶液对草河车颗粒进行浸泡，有利于对草河车细胞壁进行脆化，从而有利于获得高破壁率的草河车破壁饮片。
在本发明所述的方法中，浸泡的条件可以包括：温度为50-80℃(如50℃、60℃、70℃或80℃)，时间为1-3小时(如1小时、1.5小时、2小时、2.5小时或3小时)。在本发明中，通过使草河车颗粒在相对较高的温度下进行浸泡，然后在极低的温度下进行冷冻处理，使得草河车细胞暴露在较大温差下，这样有利于对对草河车细胞壁进行脆化，从而有利于获得高破壁率的草河车破壁饮片。
在本发明所述的方法中，在所述浸泡的过程中，草河车颗粒与乙醇水溶液的体积比可以为1：2-10，优选为1：3-8，更优选为1：3-5。
在本发明所述的方法中，冷冻干燥的条件可以包括：温度为-10℃～-50℃(如-10℃、-15℃、-20℃、-25℃、-30℃、-35℃、-40℃、-45℃或-50℃)，真空度为5-50pa(如5pa、10pa、20pa、30pa、40pa或50pa)。在本文中，真空度是指绝对压力。
在本发明所述的方法中，过滤可以采用本领域常规的滤网过滤。在具体的实施方式中，所述滤网可以是网孔尺寸为200目的不锈钢丝网。
在本发明所述的方法中，微波处理的条件可以包括：温度为10-40℃，优选为20-30℃；时间为10-60min，优选为20-40min；微波的功率为5-20kw，优选为10-20kw；真空度为5-50pa，优选为10-20pa。
在本发明所述的方法中，优选地，所述超微粉碎的过程将所述草河车颗粒粉碎为40微米以下(优选为5-40微米，更优选为5-30微米)的超微细粉。超微粉碎所使用的设备可以为破壁粉碎机，如cw5-100qa破壁超微粉碎机。
在步骤(f)中，所述乙醇水溶液的浓度可以为60-80重量％，具体地，例如可以为60重量％、65重量％、70重量％、75重量％或80重量％。
在步骤(f)中，所述超微细粉与所述乙醇水溶液的混合质量比为1：0.3-1，优选为1:0.5-0.7。
在步骤(f)中，所述干燥的方法可以为接触干燥、气流干燥、隧道式烘箱干燥、真空干燥、沸腾干燥、冷冻干燥、远红外干燥或微波干燥。在优选情况下，所述干燥的方法为冷冻干燥。
本发明还提供了由上述方法制备的草河车破壁饮片。
以下将通过实施例对本发明进行详细描述。
实施例1
(1)取2.0kg草河车药材，预粉碎至粒度为50目的颗粒，接着加入草河车颗粒4倍体积的45重量％的乙醇溶液，在70℃下浸泡2小时，用200目的不锈钢丝网过滤，将得到的滤饼在-20℃下、在30pa真空度下冷冻干燥。待草河车颗粒干燥后在-5℃下放置2小时。
(2)将步骤(1)得到的草河车颗粒置于真空条件下进行微波处理，微波处理的条件为：温度为25℃，时间为30min，微波的功率为15kw，真空度为15pa。
(3)用cw5-100qa破壁超微粉碎机对步骤(2)得到的草河车颗粒进行超微粉碎，得到粒度为5-30微米的超微细粉。
(4)将所述超微细粉与浓度为70重量％的乙醇水溶液以重量比为1：0.6进行混合，挤出制粒，然后在-20℃下、在30pa真空度下冷冻干燥，从而制得草河车破壁饮片样品a1。
实施例2
(1)取2.0kg草河车药材，预粉碎至粒度为80目的颗粒，接着加入草河车颗粒3倍体积的60重量％的乙醇溶液，在50℃下浸泡3小时，用200目的不锈钢丝网过滤，将得到的滤饼在-30℃下、在20pa真空度下冷冻干燥。待草河车颗粒干燥后在-8℃下放置1小时。
(2)将步骤(1)得到的草河车颗粒置于真空条件下进行微波处理，微波处理的条件为：温度为20℃，时间为40min，微波的功率为10kw，真空度为10pa。
(3)用cw5-100qa破壁超微粉碎机对步骤(2)得到的草河车颗粒进行超微粉碎，得到粒度为5-30微米的超微细粉。
(4)将所述超微细粉与浓度为60重量％的乙醇水溶液以重量比为1：0.7进行混合，挤出制粒，然后在-30℃下、在20pa真空度下冷冻干燥，从而制得草河车破壁饮片样品a2。
实施例3
(1)取2.0kg草河车药材，预粉碎至粒度为40目的颗粒，接着加入草河车颗粒5倍体积的40重量％的乙醇溶液，在80℃下浸泡1小时，用200目的不锈钢丝网过滤，将得到的滤饼在-10℃下、在10pa真空度下冷冻干燥。待草河车颗粒干燥后在-2℃下放置3小时。
(2)将步骤(1)得到的草河车颗粒置于真空条件下进行微波处理，微波处理的条件为：温度为30℃，时间为20min，微波的功率为20kw，真空度为20pa。
(3)用cw5-100qa破壁超微粉碎机对步骤(2)得到的草河车颗粒进行超微粉碎，得到粒度为5-30微米的超微细粉。
(4)将所述超微细粉与浓度为80重量％的乙醇水溶液以重量比为1：0.5进行混合，挤出制粒，然后在-10℃下、在10pa真空度下冷冻干燥，从而制得草河车破壁饮片样品a3。
实施例4
(1)取2.0kg草河车药材，预粉碎至粒度为100目的颗粒，接着加入草河车颗粒4倍体积的30重量％的乙醇溶液，在65℃下浸泡3小时，用200目的不锈钢丝网过滤，将得到的滤饼在-15℃下、在30pa真空度下冷冻干燥。待草河车颗粒干燥后在-5℃下放置2小时。
(2)将步骤(1)得到的草河车颗粒置于真空条件下进行微波处理，微波处理的条件为：温度为25℃，时间为30min，微波的功率为15kw，真空度为15pa。
(3)用cw5-100qa破壁超微粉碎机对步骤(2)得到的草河车颗粒进行超微粉碎，得到粒度为5-30微米的超微细粉。
(4)将所述超微细粉与浓度为75重量％的乙醇水溶液以重量比为1：0.6进行混合，挤出制粒，然后在-15℃下、在30pa真空度下冷冻干燥，从而制得草河车破壁饮片样品a4。
实施例5
(1)取2.0kg草河车药材，预粉碎至粒度为100目的颗粒，接着加入草河车颗粒3倍体积的30重量％的乙醇溶液，在65℃下浸泡3小时，用200目的不锈钢丝网过滤，将得到的滤饼在-15℃下、在20pa真空度下冷冻干燥。待草河车颗粒干燥后在-8℃下放置1小时。
(2)将步骤(1)得到的草河车颗粒置于真空条件下进行微波处理，微波处理的条件为：温度为20℃，时间为40min，微波的功率为10kw，真空度为10pa。
(3)用cw5-100qa破壁超微粉碎机对步骤(2)得到的草河车颗粒进行超微粉碎，得到粒度为5-30微米的超微细粉。
(4)将所述超微细粉与浓度为65重量％的乙醇水溶液以重量比为1：0.7进行混合，挤出制粒，然后在-15℃下、在20pa真空度下冷冻干燥，从而制得草河车破壁饮片样品a5。
实施例6
(1)取2.0kg草河车药材，预粉碎至粒度为50目的颗粒，接着加入草河车颗粒5倍体积的35重量％的乙醇溶液，在65℃下浸泡3小时，用200目的不锈钢丝网过滤，将得到的滤饼在-15℃下、在10pa真空度下冷冻干燥。待草河车颗粒干燥后在-2℃下放置3小时。
(2)将步骤(1)得到的草河车颗粒置于真空条件下进行微波处理，微波处理的条件为：温度为30℃，时间为20min，微波的功率为20kw，真空度为20pa。
(3)用cw5-100qa破壁超微粉碎机对步骤(2)得到的草河车颗粒进行超微粉碎，得到粒度为5-30微米的超微细粉。
(4)将所述超微细粉与浓度为75重量％的乙醇水溶液以重量比为1：0.5进行混合，挤出制粒，然后在-15℃下、在10pa真空度下冷冻干燥，从而制得草河车破壁饮片样品a6。
实施例7
(1)取2.0kg草河车药材，预粉碎至粒度为100目的颗粒，接着加入草河车颗粒4倍体积的35重量％的乙醇溶液，在65℃下浸泡3小时，用200目的不锈钢丝网过滤，将得到的滤饼在-15℃下、在30pa真空度下冷冻干燥。待草河车颗粒干燥后在-5℃下放置2小时。
(2)将步骤(1)得到的草河车颗粒置于真空条件下进行微波处理，微波处理的条件为：温度为25℃，时间为30min，微波的功率为15kw，真空度为15pa。
(3)用cw5-100qa破壁超微粉碎机对步骤(2)得到的草河车颗粒进行超微粉碎，得到粒度为5-30微米的超微细粉。
(4)将所述超微细粉与浓度为65重量％的乙醇水溶液以重量比为1：0.6进行混合，挤出制粒，然后在-15℃下、在30pa真空度下冷冻干燥，从而制得草河车破壁饮片样品a7。
对比例1
按照实施例1的方法制备草河车破壁饮片，所不同的是，不实施乙醇水溶液浸泡的工序，从而制得草河车破壁饮片样品d1。
对比例2
按照实施例1的方法制备草河车破壁饮片，所不同的是，用自然风干的方式代替冷冻干燥，从而制得草河车破壁饮片样品d2。
对比例3
按照实施例1的方法制备草河车破壁饮片，所不同的是，在冷冻干燥之后不进行冷冻储存，而是直接进行微波处理，从而制得草河车破壁饮片样品d3。
对比例4
按照实施例2的方法制备草河车破壁饮片，所不同的是，不实施乙醇水溶液浸泡的工序，从而制得草河车破壁饮片样品d4。
对比例5
按照实施例2的方法制备草河车破壁饮片，所不同的是，用自然风干的方式代替冷冻干燥，从而制得草河车破壁饮片样品d5。
对比例6
按照实施例2的方法制备草河车破壁饮片，所不同的是，在冷冻干燥之后不进行冷冻储存，而是直接进行微波处理，从而制得草河车破壁饮片样品d6。
对比例7
按照实施例3的方法制备草河车破壁饮片，所不同的是，不实施乙醇水溶液浸泡的工序，从而制得草河车破壁饮片样品d7。
对比例8
按照实施例3的方法制备草河车破壁饮片，所不同的是，用自然风干的方式代替冷冻干燥，从而制得草河车破壁饮片样品d8。
对比例9
按照实施例3的方法制备草河车破壁饮片，所不同的是，在冷冻干燥之后不进行冷冻储存，而是直接进行微波处理，从而制得草河车破壁饮片样品d9。
测试例
草河车破壁饮片的未破壁细胞限度采用如下方法进行测试：取草河车破壁饮片0.1g，加水合氯醛水溶液(水合氯醛试液与水的体积比为1：1)10ml置于载玻片上，装片，置于显微镜下观察，在10×10倍视野下，大于100微米且完整的细胞的粉末数目为0-5个。测试结果如下表1所示。
表1
通过表1的结果可以看出，采用本发明所述的方法可以制得破壁比率较高的草河车破壁饮片。
以上详细描述了本发明的优选实施方式，但是，本发明并不限于此。在本发明的技术构思范围内，可以对本发明的技术方案进行多种简单变型，包括各个技术特征以任何其它的合适方式进行组合，这些简单变型和组合同样应当视为本发明所公开的内容，均属于本发明的保护范围。