润滑油制剂的制作方法

本发明涉及阴道润滑油制剂及其在治疗阴道干涩中的用途。

背景技术：

虽然阴道干涩在更年期期间及之后是特别常见的，但是它在所有年龄段的女性中都是存在的。报导的数值存在变化，但是估计大约25％的绝经前女性和高达60％的绝经后女性经受过这种病症。

在很多女性中，与阴道干涩相关的症状对她们的生活质量产生了负面影响，影响着她们的日常活动、情绪和两性关系。润滑不足是所有年龄段的女性都有的苦恼，其结果是她们遭受灼热感、刺痛和外阴阴道不适的发作，这些会造成性行为期间的疼痛(性交困难)。

阴道干涩，也称作泌尿生殖道萎缩或萎缩性阴道炎，是由雌激素水平降低造成的。

当阴道里有充足的雌激素时，覆盖泌尿生殖道的上皮组织较厚并具有较多的褶皱，使得在发生性关系和性爱过程中上皮组织得以舒展开。当雌激素水平下降时，阴道粘膜变得较薄并具有较少的褶皱，造成阴道粘膜变得更加脆弱并且弹性较差。此外，阴道分泌物减少，因此润滑降低。当这发生时，外阴阴道上皮更容易损伤和出血，并且很多女性遭受局部症状(干涩、刺激、灼热感、瘙痒和/或性交困难)。

雌激素水平在绝经以后会自然地降低，或者，由于使用抗雌激素药物(治疗乳腺癌、子宫内膜异位、子宫肌瘤或不孕)、卵巢切除、盆腔放射治疗、化疗、母乳哺育、压力或过度的体育锻炼，雌激素水平会升高。

使用个人护理产品(肥皂、润肤乳、香水或阴道冲洗液)、烟草消费，以及使用缓冲液或避孕套，也会损伤外阴阴道上皮。

阴道萎缩的一线治疗包括非激素性阴道润滑油和保湿霜。润滑油已显示对于快速、短期缓解阴道干涩和性较困难是有效的。必须频繁施用它们来提供更持久的缓解，并需要在性交之前再次施用，以便使摩擦和随后的刺激降至最低程度。

虽然已经证实阴道润滑油在缓解阴道干涩方面是有效的，但是它们的组分和/或特性在特定的情况下为内科医师或患者所担忧。

乳杆菌在正常情况下构成了阴道中的优势微生物菌群，并且通过防止其它常见微生物(诸如阴道加德纳菌)过度增殖和阻止病原微生物(诸如大肠杆菌)定植而在保持阴道生态系统方面发挥重要作用。

因此，考虑到阴道腔内生态失调会造成阴道感染(阴道病)，强烈推荐不影响局部微生物菌群的阴道润滑油。

此外，润滑油的ph和渗透压(osmolarity)必须与正常情况下的阴道相似，以便不会使阴道上皮改变或对阴道上皮造成刺激。

who推荐润滑油制剂的渗透压不超过380mosm/kg。较高的渗透压与更大的造成粘膜刺激和阴道上皮损伤的可能性有关。尽管如此，市售阴道润滑油的渗透压变化很大，其中有很多超过了1200mosm/kg。

基于女性处于的月经周期的阶段，育龄女性的阴道ph范围是3.8-5，而绝经后女性的阴道ph大约是7。不同商业润滑油的ph在很大范围内变化。在动物体进行的研究表明小于等于3的值不可供人类使用。

如上所述，阴道干涩是最主要的病状，其影响所有年龄段的女性。

对于那些希望怀孕的女性而言，重要的是润滑油制剂不影响精子完整性和功能，因为这会降低精子受精潜力。尽管如此，几项研究已经报导了市售润滑油对精子运动与功能的有害作用。

最后，对于只希望改善她们的两性关系的女性而言，重要的是润滑油制剂的组分不影响避孕套完整性。

润滑油可以基于水、硅酮或油性衍生物来配制。然而，经常劝阻使用油基制剂，因为油基制剂除了难于清洗和易造成阴道感染之外还会损坏乳胶避孕套。

技术实现要素：

因此，需要同时具有如下特性的阴道润滑油制剂：

-不改变正常的阴道菌群，

-不刺激阴道粘膜，

-与避孕套相适，

-保持精子活力。

本发明的发明人已经发现，对其组分进行慎重选择能得到满足所有这些要求的润滑油制剂，并且该润滑油制剂还显示与正常阴道分泌物相似的感官/理化特性。

特别地，本发明的发明人已经研发了集合了如下性质的含水制剂：

-ph：5.5-7.5，优选6-7；

-粘度：2000-4800mpas，优选2500-4500mpas；

-渗透压：小于等于380mosm/kg，优选300-380mosm/kg。

因此，本发明第一方面涉及水基阴道润滑油制剂，包括：

-湿润剂；

-润滑剂；

-稠化剂。

本发明的第二方面涉及阴道润滑油制剂在缓解与阴道干涩有关的症状中的用途。

本发明的第三方面涉及阴道润滑油制剂的制备方法。

附图说明

图1显示了工业规模制备润滑油制剂的流程图。

具体实施方式

在一种优选的实施方案中，润滑油制剂是包括如下组分的含水凝胶：

-选自甘油(或丙三醇)和丙二醇的湿润剂，

-选自甘油丙烯酸酯/丙烯酸共聚物和甲基乙烯基醚/顺丁烯二酸酐共聚物(pvm/ma共聚物)及其混合物的润滑剂，

-选自羟乙基纤维素(具有不同粘度)、黄原胶、阿拉伯胶及其混合物的稠化剂。

优选地，湿润剂是含量是1-2％w/w、更优选是(1.2±0.1)％w/w的甘油。

可选地，它可以含有含量是1-3％w/w的丙二醇或者1％w/w的甘油和0.25％w/w的丙二醇的混合物作为湿润体系。

优选地，润滑剂是含有含量是0.005-0.007％w/w的至少一种甘油丙烯酸酯/丙烯酸共聚物和含量是0.0025-0.0035％w/w的甲基乙烯基醚/顺丁烯二酸酐共聚物的混合物。

更优选地，润滑剂是含量是(0.006±0.0005)％w/w的甘油丙烯酸酯/丙烯酸共聚物和含量是(0.003±0.0002)％w/w的pvm/ma的共聚物的混合物。

在一种特别优选的方式中，润滑剂作为还包含湿润剂和防腐剂的润滑体系的一部分而包括在制剂中。例如，可以使用以制剂的重量计含量是(0.5±0.1)％的品牌为的润滑体系，其含有甘油(36.5–44.6％w/w)、甘油丙烯酸酯/丙烯酸共聚物(1.07–1.31％w/w)、pvm/ma共聚物(0.56–0.68％w/w)和苯氧乙醇(0.99–1.2％w/w)以及水(50.8–60％w/w)。

优选地，稠化剂选自具有不同粘度、水合作用和生物及降解耐性的羟乙基纤维素。

在一种更优选的实施方案中，稠化剂是高粘度的羟乙基纤维素(例如，品牌是natrosol的市售羟乙基纤维素)，含量是0.6-1％w/w，优选是(0.8±0.1)％w/w。

本发明的润滑油制剂还可含有其它赋形剂。优选地，它还含有至少一种防腐剂和ph调节体系(缓冲液)。

防腐剂选自苯氧乙醇、尼泊金甲酯钠、尼泊金丙酯钠及其混合物。

此外，它可含有防腐剂增强剂，选自乙基己基甘油(ethylhexylglycerin)(或乙基己基丙三醇(ethylhexylglycerol))、苯乙醇、苯丙醇和辛乙二醇。

在一种优选的实施方案中，制剂含有含量是0.45-1％w/w、优选是(0.9±0.1)％w/w的苯氧乙醇。

在另一种优选的实施方案中，制剂含有含量是(0.9±0.1)％w/w的苯氧乙醇和含量是(0.09±0.01)％w/w的乙基己基甘油。

可选地，防腐剂可预先与增强剂合并混合。可使用以制剂重量计含量是0.5-1％的品牌为euxyl的市售防腐体系，其含有苯氧乙醇(90％w/w)和乙基己基甘油(10％w/w)。

缓冲液是可将制剂的ph保持在6-7、优选6.5±0.2的任何药学上可接受的ph调节体系。

优选地，它选自磷酸钾(磷酸二氢钾)缓冲液、柠檬酸盐(柠檬酸三钠)缓冲液和乳酸的(lactic)(乳酸)缓冲液，并且根据欧洲药典来制备。

在一种优选的实施方案中，ph调节体系由含量是0.65-0.70％w/w、更优选是(0.68±0.02)％w/w的磷酸二氢钾和含量是0.2％-1.2％、更优选是(0.7±0.1)％w/w的10％w/v氢氧化钠组成。

本发明的润滑油制剂还可含有其它的药学上可接受的赋形剂。从这个意义上说，它可包括具有镇静和/或再生性能的成分，诸如生物糖胶-1，其是半乳糖醛酸、l-岩藻糖和d-半乳糖的多糖，具有皮肤水化和镇静性能(例如市售的品牌)，或者，生物糖胶-2，其是半乳糖醛酸、半乳糖和鼠李糖的多糖，发挥减轻炎症反应和促进皮肤再生的作用(例如市售的品牌)。

在一种优选的实施方案中，本发明的润滑油制剂集合了如下特性：

-ph：6-7，优选6.5±0.2(与外生殖器和游动精子以及阴道菌群相适)；

-粘度：2500-4500mpas，更优选3000±500mpas；

-渗透压：300-380mosm/kg，优选365±10mosm/kg。

粘度采用旋转式粘度计(博勒飞rvt或等同物)来测量，4根转子(spinof4)，转速20rpm。制剂在分析时必须在20±1℃的温度。

粘度按照欧洲药典来测定，ph使用ph计来测定。

本发明的润滑油制剂用于治疗与阴道干涩有关的外阴阴道症状，尤其是性交困难，并且用于提高性交过程中的润滑。

本发明的润滑油制剂可按照本领域技术人员已知的任何方法来制备。

在一种特定的实施方案中，本发明的润滑油制剂按照下面描述的方法制备。

采用下述非限制性的实施例来说明本发明。

实施例1：制备方法

向反应器中加入总重量的85％-90％的纯净水。

然后，在搅拌的条件下一个接一个地逐步加入所有的水溶性赋形剂(湿润剂、润滑剂、防腐剂和缓冲液)，以便有充足的时间保证在任何情况下都能完全溶解。

一旦加入了水溶性组分，检查溶液的ph并将其调至确定的ph范围(6.3-6.7)以便保证随后适当的润湿稠化剂并达到所期望的粘度值。

当溶液的ph已经调至预定值时，将稠化剂分散在溶液中，一点一点地将其加入，并保证充足的时间使其适当分布和润湿。

一旦形成凝胶，加入纯净水直至达到最终重量的制剂，最后采用新的搅拌方法对产物进行均质处理。

图1示意性描绘了工业规模制备方法。

实施例2.制剂a

实施例3.制剂b

实施例4.测试

1.无阴道菌群改变：

进行了评价本发明的阴道润滑油制剂与各种乳杆菌菌株(典型的阴道菌群)可适性的研究。

为了该目的，将0.1ml的3株菌在生理盐水(0.9％nacl)中的混悬液：

-嗜酸乳杆菌(lactobacillusacidophilus)cect3624.3x10⁷cfu/ml,

-詹氏乳杆菌(lactobacillusjensenii)cect43065.7x10⁷cfu/ml,和

-卷曲乳杆菌(lactobacilluscrispatus)cect48406.8x10⁷cfu/ml,

接种至10ml的制剂b(实施例3)在生理盐水(0.9％nacl)中的不同的稀释液：

-100％凝胶b：1％细菌悬液+99％制剂b

-80％凝胶b：1％细菌悬液+80％制剂b+19％生理盐水

-60％凝胶b：1％细菌悬液+60％制剂b+39％生理盐水

-40％凝胶b：1％细菌悬液+40％制剂b+59％生理盐水

-20％凝胶b：1％细菌悬液+20％制剂b+79％生理盐水

还将3株乳杆菌菌株的混悬液接种至10ml的生理盐水(无制剂b，作为阴性对照)和10ml的杀菌液(作为阳性对照)中。

所有的样本都在室温(20-25℃)培养预定的接触时间(30分钟)。

一旦接触时间结束，通过涂布平板来进行乳杆菌计数。

搅动样本并从每个样本取1ml。在中和剂(蛋白胨-卵磷脂-聚山梨醇酯液体培养基)中进行初始稀释，在生理盐水(0.9％nacl)中进行随后的稀释。

将每一稀释液1毫升接种在tsa中，30-35℃培养。一旦培养时间结束，进行计数。

研究得出了如下结论：杀菌产品得到的计数(显示菌落数3-对数下降)与其余样本(显示菌落数没有或几乎没有下降)之间存在清晰的区别。

2.无阴道粘膜刺激：

按照欧洲药典采用4个不同的防腐剂浓度来研究制剂b(实施例3)的渗透压：

·具有0.45％苯氧乙醇的凝胶b

·具有0.63％苯氧乙醇的凝胶b

·具有0.81％苯氧乙醇的凝胶b

·具有0.90％苯氧乙醇的凝胶b

在所有情况下都得到了低于380mosm/kg的值，380mosm/kg是who推荐的使人体润滑油可能造成的上皮细胞损伤最小化的限度。特别地，具有0.81％苯氧乙醇和0.90％苯氧乙醇的制剂b分别显示365mosm/kg和368mosm/kg的渗透压。

根据关于润滑油产品渗透压对阴道粘膜影响的科学参考书目，从本发明制剂得到的渗透压值对阴道上皮细胞没有副作用。

3.与避孕套的可适性：

研究了本发明的阴道润滑油制剂与乳胶避孕套和聚氨酯避孕套的可适性。

为了该目的，按照标准方法(astmd7661-10)使避孕套与制剂b(实施例3)进行接触并且评估断裂和应力特性的变化。

基于测试结果，可以得出：本发明的制剂显示了与这两种类型避孕套的完全相适性。

4.保持精子活力

进行体外研究以评估本发明阴道润滑油制剂对人精子活力的影响。为了该目的，分析了制剂对精子运动性和生命力的影响。

首先，健康捐赠者的精液样本在37℃进行液化30分钟，对其进行分析以确保其特性在who制定的参考限之内。

一旦液化，对每个样本中存在的精子总数进行计数，然后将它们在不同的培养基中稀释：htf+10％hsa(人输卵管液+10％血清白蛋白，阴性对照)，辛苯聚醇-9(octoxinol-9)的htf杀精溶液+10％hsa(阳性对照)和10％凝胶b的htf溶液+10％has。

样本在37℃、5％co2孵育30分钟。

最后，对这些样本进行如下研究：

·运动性研究，使用200倍或400倍相差显微镜测定前向游动(pr)、非前向游动(np)和不游动(im)精子的百分比。

·采用伊红苯胺黑(eosin-nigrosin)进行活力研究，对未染色的(活的)和染色的(死的)精子数目进行计数。

·采用低渗肿胀(hypo-osmoticswelling)进行活力测试，对有肿胀膜的(活的)和无肿胀膜的(死的)精子数目进行计数。

由研究得出，本发明制剂的存在：

·与阴性对照的运动性相比，不会影响精子的运动性；

·与从阴性对照观察到的活力相比，不会显著改变使用伊红苯胺黑测得的精子活力；

·与从阴性对照观察到的活力相比，不会显著改变采用低渗肿胀测定的精子活力。

此外，渗透压研究证实了本发明的制剂与精子的可适性，因为对于精液浆、子宫液和睾丸液(渗透压是300-400mosm/kg)，精子(渗透压大约是365mosm/kg)实际上是等渗的。