包含白僵菌素或白僵菌素衍生物作为有效成分的皮肤美白用组合物的制作方法

本发明涉及一种包含白僵菌素或白僵菌素衍生物作为有效成分的皮肤美白用组合物。
背景技术：
：通常，人的眼球、头发、肤色等取决于皮肤中黑色素(melanin)的浓度和分布，除此之外，还受紫外线、压力、激素等多种环境或生理因素的影响。黑色素是从以下过程开始通过一系列酶促氧化过程和非酶促氧化过程而生成的：在表皮基层中存在的黑色素细胞(melanocyte)的黑色素体中将作为氨基酸之一的酪氨酸(tyrosine)通过酪氨酸酶(tyrosinase)氧化为多巴，从而转化为多巴色素。已知，这种黑色素具有吸收一定量的紫外线，从而保护皮肤，同时保持体温的正向功能，但过度合成的黑色素使肤色暗沉，产生黄褐斑、雀斑、皮肤斑点等的皮肤过色素沉着症等，并促进皮肤老化。一直以来，将显示出酪氨酸酶抑制活性的物质，例如对苯二酚(hydroquinone)、抗坏血酸(ascorbicacid)、谷胱甘肽(glutathione)、半胱氨酸(cystein)等用于美白皮肤或改善皮肤过色素沉着症。然而，对苯二酚对皮肤的刺激性高，因此存在必须限制以极少量进行配入的问题，并且抗坏血酸对热、光、氧气等外部刺激的稳定性低，因此在应用抗坏血酸的化妆料或药学组合物的情况下，存在变色或变味的问题。此外，谷胱甘肽、半胱氨酸等的硫醇基化合物不仅由于特有的不快的气味而降低了消费者的喜好度，而且存在经皮吸收率低和长期稳定性低的问题。因此，需要开发利用具有美白效果而不刺激皮肤的天然材料或天然材料衍生化合物等的化妆料或药学组合物。韩国授权专利第10-1776692号公开了一种皮肤美白用组合物，其包含通过抑制酪氨酸酶的活性而具有皮肤美白效果的柊树提取物作为有效成分。此外，韩国授权专利第10-1069907号公开了一种皮肤美白用组合物，其通过包含红果钓樟衍生提取物、分馏物或将其纯化的环戊二酮化合物作为有效成分，显示出比熊果苷更高的黑色素抑制活性。然而，包括上述专利的常规天然物质或天然物质衍生化合物等存在以下问题：美白效果不足，并且仍存在稳定性、变色或变味的问题。另一方面，据报道，白僵菌素(beauvericin)是作为抗生物质之一的恩镰孢菌素(enniatin)系列的环状缩羧肽(depsipeptide)，具有抗癌、抗菌、抗炎等的效果。然而，目前，对上述白僵菌素或白僵菌素衍生物的美白用途鲜为人知。因此，本发明人通过确认白僵菌素或白僵菌素衍生物显示出黑色素生成抑制活性而不刺激皮肤，并且可将其用于皮肤美白用途，表明白僵菌素可用作皮肤美白用组合物的有效成分，从而完成了本发明。技术实现要素：技术课题本发明的目的是提供一种皮肤美白用组合物，其包含可以实现优异的美白效果而不刺激皮肤的白僵菌素(beauvericin)或白僵菌素衍生物作为有效成分。本发明的目的不限于如上所述的技术课题，并且可以从以下说明中得出另一技术课题。解决课题手段为了实现上述目的，本发明提供了一种包含白僵菌素(beauvericin)或白僵菌素衍生物作为有效成分的皮肤美白用组合物。上述皮肤美白用组合物可以抑制黑色素(melanin)色素的生成。基于上述皮肤美白用组合物的总重量，上述皮肤美白用组合物可以包含0.0001～15重量％的上述白僵菌素或白僵菌素衍生物。上述皮肤美白用组合物可以是化妆料组合物或药学组合物。上述化妆料组合物可以是选自由柔软化妆水、营养化妆水、收敛化妆水、护肤水、护肤露、精华、霜、按摩霜、面膜、妆前底乳、bb霜、粉底、粉末、清洁泡沫、清洁霜和清洁水组成的组的一种以上的剂型。上述药学组合物可以是选自由颗粒剂、柠檬水剂、散剂、糖浆剂、液剂、提取剂、酏剂、流浸膏剂、乳剂、悬浮剂、煎剂、浸剂、片剂、酒精剂、胶囊剂、酊剂、丸剂、经皮吸收剂、露剂、搽剂、气雾剂、软膏剂、贴付剂、膏剂、巴布剂、霜剂、糊状制剂、非水溶性溶剂、冻干制剂、栓剂和注射剂组成的组的一种以上的剂型。上述白僵菌素可以是从冬虫夏草中提取的。发明的效果本发明的包含白僵菌素(beauvericin)或白僵菌素衍生物作为有效成分的皮肤美白用组合物可以具有优异的美白效果而不刺激皮肤。特别地，本发明的包含白僵菌素或白僵菌素衍生物作为有效成分的皮肤美白用组合物可通过抑制或降低与黑色素生成有关的转录因子、酶、信号传递物质等的活性或浓度而具有美白效果。附图说明图1是示出实验例1的结果的图。图2是示出实验例2的结果的图。图3是示出实验例3的结果的图。图4是示出实验例4中(1)的结果的图。图5是示出实验例4中(2)的结果的图。图6是示出实验例5的结果的图。具体实施方式在下文中，将参考附图详细说明本发明的实施例，使得本领域技术人员可以容易地实施本发明。然而，本发明可以以各种不同的形式实施，并且不限于在此说明的实施例。而且，为了在附图中明确说明本发明，省略了与说明无关的部分。在本发明的说明书和权利要求书中使用的术语或词语不应被限定地解释为普通或词典的含义，并且应基于发明人可以适当地定义术语的概念以最佳方式说明其自己的发明的原则，被解释为与本发明的技术思想一致的含义和概念。在本发明的整个说明书中，当某个部件“包括”某个构成要素时，这表示除非有特别相反的记载，否则还可以包括其他构成要素而非排除其他构成要素。在本发明的整个说明书中，“a和/或b”是指a或者b或者a和b。在下文中，将参考附图具体说明本发明，但本发明不限于此。本发明提供包含白僵菌素(beauvericin)或白僵菌素衍生物作为有效成分的皮肤美白用组合物。根据本发明的一个实施例的皮肤美白用组合物可通过包含白僵菌素(beauvericin)或白僵菌素衍生物作为有效成分而具有皮肤美白效果。特别地，根据本实施例的皮肤美白用组合物可通过抑制黑色素(melanin)色素生成来实现皮肤美白效果，更具体地，可通过抑制或降低与黑色素生成有关的转录因子、酶、信号传递物质等的活性或浓度而具有美白效果。据报道，白僵菌素(beauvericin)是环状缩羧肽(depsipeptide)，属于作为抗生物质之一的恩镰孢菌素(enniatin)系列，具有抗癌、抗菌、抗炎、抗胆固醇等的效果。此外，据报道，白僵菌素在生物化学过程中参与细胞凋亡(apoptosis)、抗血小板凝集等(shivanietal.,jproteomicsbioinform2017,10:1,pp18-23)。白僵菌素的iupac名称是(3s,6r,9s,12r,15s,18r)-3,9,15-tribenzyl-6,12,18-triisopropyl-4,10,16-trimethyl-1,7,13-trioxa-4,10,16-triazacyclooctadecane-2,5,8,11,14,17-hexone，并具有以下化学式1的结构。[化学式1]本实施例的白僵菌素可以是从冬虫夏草(cordyceps)或药用植物的内生菌类(endophyticfungi)中分离、提取、纯化或生产的。优选地，本实施例的白僵菌素可以是从冬虫夏草中提取的。上述冬虫夏草可以是选自由雪花冬虫夏草(paecilomycesjaponica,paecilomycestenuipes,isariajaponica)、蛹虫草(cordycepsmilitaris)、蝙蝠蛾冬虫夏草(ophiocordycepssinensis,cordycepssinensis)、球孢虫草(cordycepsbassiana)、粉被虫草(cordycepspruinosa)、蝉花虫草(cordycepssobolifera)、珊瑚虫草(cordycepsmartialis)、垂头虫草(cordycepsnutans)和大团囊虫草(elaphocordycepsophioglossoides)组成的组的一种以上。优选地，上述冬虫夏草可以是蛹虫草(cordycepsmilitaris)，但不限于此。生成上述白僵菌素的菌类包括beauveria,paecilomyces,polyporus,isaria,fusarium等。上述fusarium包括fusariumproliferatum,fusariumsemitectum,fusariumsubglutinans,fusariumbegoniae等，上述beauveria包括beauveriabassiana等。基于上述皮肤美白用组合物的总重量，本实施例的皮肤美白用组合物可以包含0.0001～15重量％，优选0.001～10重量％，更优选0.001～5重量％的白僵菌素。如果，当基于上述皮肤美白用组合物的总重量，本实施例的皮肤美白用组合物包含小于0.0001重量％的白僵菌素时，可能存在白僵菌素引起的美白效果不足的问题。相反，当基于上述皮肤美白用组合物的总重量，本实施例的皮肤美白用组合物包含超过15重量％的白僵菌素时，白僵菌素引起的美白效果的增加不明显，因此不经济，并且可能存在组合物的剂型稳定性降低的问题。此外，本实施例的皮肤美白用组合物可包含白僵菌素衍生物。在本实施例中，白僵菌素衍生物可以是指将白僵菌素通过本领域通常实施的取代基的加成或取代反应而获得的，但不限于此，并且可以包括将白僵菌素的部分通过化学变化而获得的所有化合物。基于上述皮肤美白用组合物的总重量，本实施例的皮肤美白用组合物可以包含0.0001～15重量％，优选0.001～10重量％，更优选0.001～5重量％的白僵菌素衍生物。如果，当基于上述皮肤美白用组合物的总重量，本实施例的皮肤美白用组合物包含小于0.0001重量％的白僵菌素衍生物时，可能存在白僵菌素衍生物引起的美白效果不足的问题。相反，当基于上述皮肤美白用组合物的总重量，本实施例的皮肤美白用组合物包含超过15重量％的白僵菌素衍生物时，白僵菌素衍生物引起的美白效果的增加不明显，因此不经济，并且可能存在组合物的剂型稳定性降低的问题。此外，本实施例的皮肤美白用组合物可以同时包含白僵菌素和白僵菌素衍生物。基于上述皮肤美白用组合物的总重量，本实施例的皮肤美白用组合物可以包含0.0001～15重量％，优选0.001～10重量％，更优选0.001～5重量％的白僵菌素和白僵菌素衍生物。此时，其混合比例没有特别限制。本发明的包含白僵菌素和白僵菌素衍生物的皮肤美白用组合物可以是化妆料组合物。本实施例的皮肤美白用组合物可以是化妆料组合物。除了上述白僵菌素或白僵菌素衍生物之外，本实施例的皮肤美白用化妆料组合物还可以包含美容学上可接受的载体或添加剂。例如，包括脂肪物质、有机溶剂、溶解剂、浓缩剂、胶凝剂、软化剂、抗氧化剂、悬浮剂、稳定剂、发泡剂、芳香剂、表面活性剂、乳化剂、填充剂、金属离子封锁剂、螯合剂、保存剂、维生素、阻断剂、润湿剂、油、染料、颜料、亲水性或亲油性活性剂、脂质小囊等，但不限于此，并且可以包括可适用于化妆料组合物的所有公知的物质。此外，本实施例的皮肤美白用化妆料组合物可以形成为选自由柔软化妆水、营养化妆水、收敛化妆水、护肤水、护肤露、精华、霜、按摩霜、面膜、妆前底乳、bb霜、粉底、粉末、清洁泡沫、清洁霜和清洁水组成的组的一种以上的剂型，但不限于此，并且可以形成为所有公知的剂型。另一方面，当具有上述剂型的本实施例的皮肤美白用化妆料组合物形成为膏、霜或凝胶状时，还可以包括动物油、植物油、蜡、石蜡、淀粉、黄蓍胶、纤维素衍生物、聚乙二醇、硅酮、膨润土、二氧化硅、滑石、氧化锌等。当上述本实施例的皮肤美白用化妆料组合物形成为溶液或乳浊液形式时，还可以包括溶剂、溶解剂、乳浊剂等。上述溶剂、溶解剂、乳浊剂可以包括水、乙醇、异丙醇、碳酸乙酯、乙酸乙酯、苯甲醇、苯甲酸苄酯、丙二醇、1,3-丁基乙二醇油、甘油脂肪族酯、聚乙二醇、脱水山梨醇的脂肪酸酯等。当上述本实施例的皮肤美白用化妆料组合物形成为悬浮液形式时，还可以包括水、乙醇、丙二醇等的液体稀释剂、乙氧基化异硬脂醇、聚氧乙烯山梨糖醇酯、聚氧乙烯脱水山梨醇酯等的悬浮剂、微晶纤维素、偏氢氧化铝、膨润土、琼脂、黄蓍胶等。当上述本实施例的皮肤美白用化妆料组合物是清洁泡沫、清洁霜或清洁水时，还可以包括脂肪醇硫酸盐、脂肪醇醚硫酸盐、磺基琥珀酸单酯、羟乙基磺酸盐、咪唑啉鎓衍生物、牛磺酸甲酯、肌氨酸盐基化合物、脂肪酸酰胺醚硫酸盐、烷基酰胺甜菜碱、脂肪醇、脂肪酸甘油酯、脂肪酸二乙醇酰胺、植物油、羊毛脂衍生物、乙氧基化甘油脂肪酸酯等。本实施例的包含白僵菌素或白僵菌素衍生物的皮肤美白用化妆料组合物可以包括上述包含白僵菌素或白僵菌素衍生物的皮肤美白用组合物的所有构成。本发明的包含白僵菌素或白僵菌素衍生物的皮肤美白用组合物可以是药学组合物。本实施例的皮肤美白用组合物可以是药学组合物。本实施例的皮肤美白用药学组合物的给药剂型可以以其药学上可接受的盐的形式使用，并且可以单独使用或以与其他药学活性化合物结合的形式使用。上述盐没有特别限制，只要其是药学上接受的盐即可，例如，可以使用盐酸、硫酸、硝酸、磷酸、氢氟酸、氢溴酸、甲酸、乙酸、酒石酸、乳酸、柠檬酸、富马酸、马来酸、琥珀酸、甲磺酸、苯磺酸、甲苯磺酸、萘磺酸等。上述药学组合物可以是选自由颗粒剂、柠檬水剂、散剂、糖浆剂、液剂、提取剂、酏剂、流浸膏剂、乳剂、悬浮剂、煎剂、浸剂、片剂、酒精剂、胶囊剂、酊剂、丸剂、经皮吸收剂、露剂、搽剂、气雾剂、软膏剂、贴付剂、膏剂、巴布剂、霜剂、糊状制剂、非水溶性溶剂、冻干制剂、栓剂和注射剂组成的组的一种以上的剂型。因此，除了上述白僵菌素或白僵菌素衍生物之外，本实施例的皮肤美白用药学组合物还可以包括填充剂、增量剂、结合剂、润湿剂、崩解剂、表面活性剂等的稀释剂、赋形剂、载体。例如，用于口服给药的固体制剂包括片剂、丸剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂等，并且除了白僵菌素或白僵菌素衍生物之外，上述固体制剂还可以包括至少一种以上的赋形剂。例如，上述赋形剂可以包括淀粉、碳酸钙、蔗糖(sucrose)、乳糖(lactose)、明胶等。此外，除了简单的赋形剂之外，还使用诸如硬脂酸镁、滑石等润滑剂。用于口服给药的液体制剂包括悬浮剂、柠檬水剂、酏剂、乳剂、糖浆剂等，并且除了常用的简单的稀释剂，即水、液体石蜡之外，还可以包括各种赋形剂，例如润湿剂、甜味剂、芳香剂、保存剂等。用于非口服给药的制剂包括无菌水溶液、非水性溶剂、悬浮剂、乳剂、冻干制剂、栓剂。作为非水性溶剂和悬浮溶剂，可以使用丙二醇(propyleneglycol)、聚乙二醇、诸如橄榄油等植物油、诸如油酸乙酯等可注射的酯等。作为栓剂的基剂，可以使用维特普索(witepsol)、聚乙二醇(macrogol)、吐温(tween)61、可可脂、月桂酸甘油酯、甘油明胶等。本实施例的皮肤美白用药学组合物可以通过多种途径对大鼠、小鼠、家畜、人等的哺乳动物进行给药。可以预期所有给药的方式，但例如，可以通过口服、腹腔内、直肠或静脉、肌肉、皮下、子宫内硬膜或脑血管内注射来进行给药。此时，作为非口服途径，优选经皮给药，其中，可以最优选局部涂布。本实施例的皮肤美白用药学组合物的优选给药量根据患者的状态、体重、疾病的程度、药物形式、给药途径和期间而不同，并且可以由本领域技术人员适当地选择。然而，为了优选的效果，可以将本实施例的皮肤美白用药学组合物的0.1～100mg/kg的量分成每日1次至数次来进行给药，但不限于此。本实施例的皮肤美白用药学组合物的非口服途径给药量根据患者的状态和体重、疾病的程度、药物形式、给药途径和期间而不同，但在外用剂的情况下，可以将1.0～3.0ml/每日分成1次至数次来进行涂布，但不限于此。本实施例的包含白僵菌素或白僵菌素衍生物的皮肤美白用药学组合物可以包括上述包含白僵菌素或白僵菌素衍生物的皮肤美白用组合物的所有构成。在下文中，将通过实验例具体说明本发明的包含白僵菌素或白僵菌素衍生物作为有效成分的皮肤美白用组合物。这些实施例仅用于示例本发明，并且本发明的范围不应被解释为限于这些实施例。实验例实验例1：细胞毒性试验将murinemelanoma(b16f10)细胞以1×105个/well接种到6-wellplate(利用含有10％的fbs(fetalbovineserum)的dmem培养基)中后，在5％co2和37℃条件下培养直至细胞在wellplate底部上粘附约80％以上。培养后，将白僵菌素[购买：sigma-aldrich,≥97％(hplc)]以(1μm,10μm,100μm)的浓度分别处理于b16f10细胞中，并以5％co2、37℃条件培养约1天。随后，利用mtt(3-(4,5-dimetylthiazol-2-yl)2,5-diphenyltetrazoliumbromide)测定方法测量了细胞毒性，为了进行比较，一起测量了未处理组(control)的细胞存活率，其结果示于图1中。另一方面，mtt是淡黄色的基质，因活细胞线粒体中的呼吸链酶而开裂，从而生成暗青色的甲瓒(formazan)，但在死细胞中不反应，因此可以利用甲瓒的生成量来测量活细胞的数量。如图1所示，根据mtt测定方法，可以确认，白僵菌素在约1～100μm处理浓度下几乎没有细胞毒性。即，这表示白僵菌素对皮肤的刺激性低。实验例2：评价黑色素生成抑制能力将murinemelanoma(b16f10)细胞以1×105个/well接种到6-wellplate(利用含有10％的fbs(fetalbovineserum)的dmem培养基)中后，在5％co2和37℃条件下培养直至细胞在wellplate底部上粘附约80％以上。在培养后，去除培养基，然后将白僵菌素[购买：sigma-aldrich,≥97％(hplc)]以(1μm,5μm,10μm)的浓度分别处理于b16f10细胞中，并作为其对照组，将已知抑制黑色素生成的h89(n-[2-(p-bromocinnamylamino)ethyl]-5-isoquinolinesulfonamide)以10μm处理，在稀释的培养基中以5％co2,37℃条件培养约1天。将去除培养基的细胞用pbs(phosphatedbufferedsaline)洗涤，并将其用胰蛋白酶处理以收集细胞。在利用hematocytometer测量收集到的细胞的细胞数之后，将各处理组的细胞数按相等数量均分而装入2ml管中后，以5,000至10,000rpm离心10分钟，并去除上清液以获得pelletcell(细胞沉淀物)。将获得的细胞沉淀物放入300ml的含有10％dmso的1m氢氧化钠溶液中，并将其在65℃的恒温槽中放置一定时间，同时溶解黑色素色素。之后，利用microplatereader测量溶解有上述黑色素色素的溶液在405nm下的吸光度，从而获得了每个一定量的细胞的黑色素的量，其结果示于图2中。参考图2可以确认，随着白僵菌素的处理浓度增加，黑色素生成受到抑制。特别地，将对照组h89和白僵菌素以相同的浓度处理的结果，可以确认，白僵菌素显示出比h89显著优异的黑色素生成抑制能力，并且可以看出可以具有美白效果。实验例3：评价与黑色素生成有关的基因的表达抑制能力将murinemelanoma(b16f10)细胞接种到含有10％的fbs(fetalbovineserum)的dmem培养基中的dish中后，在5％co2和37℃条件下培养直至细胞在wellplate底部上粘附约80％以上。在培养后，将白僵菌素[购买：sigma-aldrich,≥97％(hplc)]以(1μm,5μm,10μm)的浓度分别处理于b16f10细胞中，并以5％co2、37℃条件培养约1天。将去除培养基的细胞用pbs(phosphatedbufferedsaline)洗涤，然后利用刮板收集细胞。随后，利用ripa(radioimmunoprecipitationassay)lysisbuffer溶解收集到的细胞，从而收集蛋白质。利用8％～10％十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳法将收集到的蛋白质按大小分离，然后转移至聚偏二氟乙烯膜。之后，利用5％脱脂乳将上述膜封闭1小时，并将一抗在4℃下孵育过夜。将上述膜用含有tween20的tbs(tris-bufferedsaline)洗涤，然后将二抗在室温下孵育1小时。通过ecl(enchancedchemiluminescence)检测出了最终获得的膜的蛋白质，其结果示于下图3中。参考图3，可以确认处理白僵菌素的结果，与黑色素生成阶段有关的酶或传递因子，即酪氨酸酶、trp1、trp2、mitf的表达受到抑制。特别地，随着白僵菌素的处理浓度增加，酪氨酸酶、trp1、trp2、mitf的表达受到抑制，其中，在白僵菌素的浓度为10μm时，酪氨酸酶、trp1、trp2、mitf的表达受到显著抑制。即，通过上述结果可以看出，通过处理白僵菌素可以抑制黑色素生成，从而具有美白效果。实验例4(1)camp(cyclicadenosinemonophosphate)的生成抑制测量试验将murinemelanoma(b16f10)细胞以1×105个/well接种到6-wellplate(含有10％的fbs(fetalbovineserum)的dmem培养基)中后，在5％co2和37℃条件下培养直至细胞在wellplate底部上粘附约80％以上。在培养后，去除培养基，然后将白僵菌素[购买：sigma-aldrich,≥97％(hplc)]以(1μm,5μm,10μm)的浓度分别处理于b16f10细胞中，并将其在稀释的培养基中以5％co2,37℃条件培养约1天。将去除培养基的细胞用pbs(phosphatedbufferedsaline)洗涤，然后利用刮板收集细胞。随后，使用0.1m的氯化氢将收集到的细胞在室温下经过约30分钟的孵育而溶解，然后将上清液添加到具有兔多克隆抗体的96-wellplate中。随后，将其在4℃下孵育18小时，然后利用ellman's溶液确认camp的量，并用microplatereader测量在405nm下的吸光度，其结果示于下图4中。此时，作为对照组，处理了h89(10μm)和fk(forskolin,20μm)。参考图4，可以确认，白僵菌素抑制诱导mitf和酪氨酸酶的表达的camp的生成。特别地，将白僵菌素和h89以相同的浓度处理的结果，可以确认白僵菌素的camp生成抑制效果更佳优异。因此，可以看出，白僵菌素可以通过抑制camp的生成来抑制mitf和酪氨酸酶的表达，由此可以通过抑制黑色素生成而具有美白效果。(2)creb(cyclic-ampresponseelementbindingprotein)的表达抑制测量试验将murinemelanoma(b16f10)细胞接种到含有10％的fbs(fetalbovineserum)的dmem培养基中的dish中后，在5％co2和37℃条件下培养直至细胞在wellplate底部上粘附约80％以上。在培养后，将白僵菌素[购买：sigma-aldrich,≥97％(hplc)]以10μm处理于b16f10细胞中，并在5％co2、37℃条件下，在0至90分钟内，以约30分钟的间隔测量了creb蛋白的磷酸化(phosphorylation)程度。更具体地，在培养后，将白僵菌素处理于b16f10细胞中，并且在约0分钟、30分钟、60分钟和90分钟时部分分离各自的b16f10细胞和白僵菌素混合物，从而以如下方法评价了creb的表达程度。将去除培养基的细胞用pbs(phosphatedbufferedsaline)洗涤，然后利用刮板收集细胞。随后，利用ripa(radioimmunoprecipitationassay)lysisbuffer溶解收集到的细胞，从而收集蛋白质。根据8％～10％十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳法将收集到的蛋白质按大小分离，然后转移至聚偏二氟乙烯膜。之后，利用5％脱脂乳将蛋白质转移的膜封闭1小时，并将一抗在4℃下孵育过夜。将上述膜用含有tween20的tbs(tris-bufferedsaline)洗涤，然后将二抗在室温下孵育1小时。通过ecl(enchancedchemiluminescence)检测出了最终获得的膜的蛋白质，其结果示于图5中。参考图5，可以确认，将白僵菌素以10μm处理后，随着时间的流逝，creb的磷酸化降低。即，表示白僵菌素可以通过抑制creb的活性来抑制黑色素生成。即，根据上述图4和5，表示白僵菌素可以通过抑制camp生成或creb的磷酸化来抑制黑色素生成，从而具有美白效果。实验例5：评价在黑色素合成抑制过程中mapk和nf-kb的关联性将murinemelanoma(b16f10)细胞接种到含有10％的fbs(fetalbovineserum)的dmem培养基中的dish中后，在5％co2和37℃条件下培养直至细胞在wellplate底部上粘附约80％以上。在培养后，将白僵菌素[购买：sigma-aldrich,≥97％(hplc)]以10μm处理于b16f10细胞中，并在5％co2、37℃条件下，在0至90分钟内，以约30分钟的间隔测量了mapk蛋白和nf-kb蛋白的磷酸化(phosphorylation)程度。更具体地，在培养后，将白僵菌素处理于b16f10细胞中，并且在约0分钟、30分钟、60分钟和90分钟时部分分离各自的b16f10细胞和白僵菌素混合物，从而以如下方法评价了mapk和nf-kb的磷酸化(phosphorylation)程度。将去除培养基的细胞用pbs(phosphatedbufferedsaline)洗涤，然后利用刮板收集细胞。随后，利用ripa(radioimmunoprecipitationassay)lysisbuffer溶解收集到的细胞，从而收集蛋白质。利用8％～10％十二烷基硫酸钠聚丙烯酰胺凝胶电泳法将收集到的蛋白质按大小分离，然后转移至聚偏二氟乙烯膜。之后，利用5％脱脂乳将蛋白质转移的膜封闭1小时，并将一抗在4℃下孵育过夜。将上述膜用含有tween20的tbs(tris-bufferedsaline)洗涤，然后将二抗在室温下孵育1小时。通过ecl(enchancedchemiluminescence)检测出了最终获得的膜的蛋白质，其结果示于图6中。参考图6，可以确认，白僵菌素不影响erk、jnk和nf-kb蛋白的磷酸化，相反，抑制p38mapk蛋白的磷酸化。众所周知，p38mapk的磷酸化是增加黑色素生物合成的主要机制(kor.j.aesthet.cosmetol.,vol.11no.3,417-426,june2013参考)。即，在本发明中，白僵菌素可以通过抑制p38mapk蛋白的磷酸化来抑制creb蛋白的磷酸化，从而抑制黑色素生成。因此，可以看出可以具有美白效果。剂型例剂型例1.柔软化妆水的制备包含上述白僵菌素或白僵菌素衍生物作为有效成分的柔软化妆水的组成如下表1所示。具体而言，用螺旋桨式混合器(3000rpm)将透明质酸钠分散在纯净水中，从而制成1％溶液状。使用螺旋桨式混合器将除透明质酸钠以外的原料1至8在水相溶解槽中以500rpm进行均质化，并在75℃下加热以完全溶解，然后冷却至室温。之后，将原料9至11完全溶解在另外的溶解槽中后，投入到上述水相溶解槽中并搅拌混合。向其中投入白僵菌素或白僵菌素衍生物，并充分搅拌混合以制备柔软化妆水。另一方面，除了表中公开的用于上述制备的成分之外，还可以包括制备所需的公知的成分。[表1]柔软化妆水制备成分含量(重量％)1白僵菌素或白僵菌素衍生物0.012聚氧乙烯氢化蓖麻油0.53甘氨酸3.34甘草酸二钾0.151,3-丁二醇3.06透明质酸钠0.17乙醇5.08抗氧化剂0.19三乙醇胺0.110edta0.111防腐剂适量12纯净水余量剂型例2.营养化妆水的制备包含上述白僵菌素或白僵菌素衍生物作为有效成分的营养化妆水的组成如下表2所示。具体而言，利用螺旋桨式混合器将卡波姆以4000rpm分散以制成2％溶液状。将原料1至6投入到水相溶解槽中，用均质混合机(2000rpm)搅拌，分散后，加热至75℃。将原料7至14投入到油相溶解槽中，加热至75℃而溶解。然后，将溶解的油相投入到水相溶解槽中，进行乳化(3000rpm/5分钟)后，冷却至室温。向其中投入白僵菌素或白僵菌素衍生物，并充分搅拌混合以制备营养化妆水。另一方面，除了表中公开的用于上述制备的成分之外，还可以包括制备所需的公知的成分。[表2]营养化妆水制备成分含量(重量％)1白僵菌素或白僵菌素衍生物0.012甘油7.03脱水山梨醇硬脂酸酯蔗糖椰油酸酯2.04矿物油4.05三辛酸甘油酯1.06硬脂酸1.07硬脂酸甘油酯0.58脱水山梨醇单硬脂酸酯1.09聚二甲基硅氧烷0.510抗氧化剂0.311三乙醇胺0.112卡波姆0.213edta0.114防腐剂适量15纯净水余量剂型例3.精华的制备包含上述白僵菌素或白僵菌素衍生物作为有效成分的精华的组成如下表3所示。具体而言，用螺旋桨式混合器(2000rpm)将透明质酸钠、羟乙基纤维素分别分散在纯净水中以制成含有1重量％的溶液。此外，用螺旋桨式混合器(4000rpm)将卡波姆分散在纯净水中以制成含有2重量％的溶液。另一方面，将原料1至12投入到水相溶解槽中，用均质混合机(2000rpm)搅拌，分散后，加热至75℃，再将所加热的水相冷却至室温。在将原料13至15完全溶解在另外的溶解槽中后，投入到上述水相溶解槽中并搅拌混合。因此，制备了包含白僵菌素或白僵菌素衍生物作为有效成分的精华。另一方面，除了表中公开的用于上述制备的成分之外，还可以包括制备所需的公知的成分。[表3]精华制备成分含量(重量％)1白僵菌素或白僵菌素衍生物0.012甘油5.031,3-丁二醇2.04聚乙二醇2.05卡波姆1.06透明质酸钠0.17甘氨酸3.08聚丙烯酰胺2.09羟乙基纤维素0.210乙醇3.011抗氧化剂0.312三乙醇胺0.113聚氧乙烯氢化蓖麻油1.014edta0.115防腐剂适量16纯净水余量剂型例4.霜的制备包含上述白僵菌素或白僵菌素衍生物作为有效成分的霜的组成如下表4所示。具体而言，将原料1至8投入到水相溶解槽中，用均质混合机(2000rpm)搅拌，分散后，加热至75℃。将原料9至16投入到另外的油相溶解槽中，加热至80℃而溶解，然后将溶解的油相投入到上述水相溶解槽中，进行乳化(3000rpm/10分钟)后，冷却至室温。向其中投入白僵菌素或白僵菌素衍生物，并充分搅拌混合以制备霜。另一方面，除了表中公开的用于上述制备的成分之外，还可以包括制备所需的公知的成分。[表4]霜制备成分含量(重量％)1白僵菌素或白僵菌素衍生物0.0121,3-丁二醇3.03甘油3.04氢化卵磷脂1.05辛基十二醇3.06三辛酸甘油酯2.07硬脂酸1.58十八十六醇2.09聚山梨酯601.510脱水山梨醇倍半油酸酯2.011聚二甲基硅氧烷3.012抗氧化剂0.313黄原胶0.214三乙醇胺0.115edta0.116防腐剂适量17纯净水余量剂型例5.面膜的制备包含上述白僵菌素或白僵菌素衍生物作为有效成分的面膜的组成如下表5所示。具体而言，将原料1至8完全溶解在另外的溶解槽中，搅拌混合，并向其中投入白僵菌素或白僵菌素衍生物，然后充分搅拌混合以制备面膜。另一方面，除了表中公开的用于上述制备的成分之外，还可以包括制备所需的公知的成分。[表5]面膜的组成成分含量(重量％)1白僵菌素或白僵菌素衍生物0.012甘油7.031,3-丁二醇3.04角鲨烯3.05聚二甲基硅氧烷3.06透明质酸钠0.17甘氨酸2.08聚丙烯酰胺5.09抗氧化剂0.310三乙醇胺0.111edta0.112防腐剂适量13纯净水余量剂型例6：清洁泡沫的制备包含上述白僵菌素或白僵菌素衍生物作为有效成分的清洁泡沫的组成如下表6所示。将水相和油相分别分散溶解，混合皂化后，冷却至室温以制备清洁泡沫。另一方面，除了表中公开的用于上述制备的成分之外，还可以包括制备所需的公知的成分。[表6]清洁泡沫的组成成分含量(重量％)1白僵菌素或白僵菌素衍生物0.012硬脂酸6.53肉豆蔻酸28.04自乳化单硬脂酸甘油酯3.05丙二醇5.06浓甘油10.07氢氧化钠7.08乙二胺四乙酸钠0.19香料适量10纯净水余量剂型例7.散剂的制备将50mg的上述白僵菌素或白僵菌素衍生物、2g结晶纤维素混合后，通过常规方法制备了包含上述白僵菌素或白僵菌素衍生物作为有效成分的散剂。另一方面，除了用于上述制备的上述成分之外，还可以包括制备所需的公知的成分。剂型例8.片剂的制备将50mg的上述白僵菌素或白僵菌素衍生物、400mg的结晶纤维素、5mg的硬脂酸镁混合后，通过常规方法制备了包含上述白僵菌素或白僵菌素衍生物作为有效成分的片剂。除了上述成分之外，还可以包括制备所需的公知的成分。剂型例9.胶囊剂的制备将30mg的上述白僵菌素或白僵菌素衍生物、100mg的乳清蛋白、400mg的结晶纤维素、6mg的硬脂酸镁混合后，通过常规方法制备了包含上述白僵菌素或白僵菌素衍生物作为有效成分的胶囊剂。另一方面，除了用于上述制备的上述成分之外，还可以包括制备所需的公知的成分。剂型例10.注射剂的制备通过将100mg的白僵菌素或白僵菌素衍生物、注射用蒸馏水、ph调节剂混合而填充至2ml容量的安瓿瓶中并进行灭菌的常规方法制备了包含上述白僵菌素或白僵菌素衍生物作为有效成分的注射剂。另一方面，除了用于上述制备的上述成分之外，还可以包括制备所需的公知的成分。剂型例11.软膏剂的制备包含上述白僵菌素或白僵菌素衍生物作为有效成分的软膏剂的组成如下表7所示。另一方面，除了表中公开的用于上述制备的成分之外，还可以包括制备所需的公知的成分。[表7]软膏剂的组成成分含量(重量％)1白僵菌素或白僵菌素衍生物0.012甘油8.031,3-丁二醇4.04液体石蜡15.05β-葡聚糖7.06卡波姆0.17辛酸/癸酸甘油三酯3.08角鲨烷1.09鲸蜡硬脂基葡糖苷1.510脱水山梨醇硬脂酸酯0.411鲸蜡硬脂醇1.012防腐剂适量13香适量14色素适量15纯净水余量如上所述，本发明的说明是为了示例，并且本领域技术人员将理解，在不改变本发明的技术精神或必要特征的情况下，可以以其他具体形式容易地变形本发明。因此，应当理解，上述实施例在所有方面都是示例性的，而不是限制性的。例如，以单一型说明的各构成要素可以以分散形式实施，同样，以分散形式说明的构成要素也可以以结合的形式实施。本发明的范围应根据后述的权利要求书而非上述详细的说明书来表示，并且应解释为本发明的范围包括权利要求书的意思以及范围和从其等同概念导出的所有的变更或者变形的方式。当前第1页12