一种流感病毒免疫原性组合物及其应用的制作方法

文档序号:17191970发布日期:2019-03-22 22:22阅读:301来源:国知局
本发明涉及医药组合物
技术领域
,尤其是一种流感病毒免疫原性组合物及其应用。
背景技术
:流行性感冒(简称流感)是流感病毒引起的急性呼吸道感染,也是一种传染性强、传播速度快的疾病。其主要通过空气中的飞沫、人与人之间的接触或与被污染物品的接触传播。典型的临床症状是:急起高热、全身疼痛、显著乏力和轻度呼吸道症状。一般秋冬季节是其高发期,所引起的并发症和死亡现象非常严重。该病是由流感病毒引起,可分为甲(a)、乙(b)、丙(c)三型,甲型病毒经常发生抗原变异,传染性大,传播迅速,极易发生大范围流行。甲型h1n1也就是甲型一种。本病具有自限性,但在婴幼儿、老年人和存在心肺基础疾病的患者容易并发肺炎等严重并发症而导致死亡,流感病毒所致,该病毒不耐热,100℃1分钟或56℃30分钟灭活,对常用消毒剂敏感(1%甲醛、过氧乙酸、含氯消毒剂等)对紫外线敏感,耐低温和干燥,真空干燥或-20℃以下仍可存活。其中甲型流感病毒经常发生抗原变异,传染性大,传播迅速,极易发生大范围流行。目前针对预防流感病毒的药物,由于病毒不断升级,经常导致预防效果滞后,需要不断开发新药物才能针对预防,耗费大量的研究,预防效果差,针对以上,在此我们提出一种流感病毒免疫原性组合物及其应用。技术实现要素:本发明针对现有的预防流感药物功能性方面等技术上的不足,提供了一种流感病毒免疫原性组合物及其应用。本发明为解决上述现象,采用以下改性的技术方案,一种流感病毒免疫原性组合物及其应用,包括以下重量百分数的组分:核糖核酸3-8%、脱氧核糖核酸0.3-1%、寡核苷酸0.7-1.5%、多聚核苷酸0.9-3.2%、五碳糖0.6-2.3%、融合蛋白1.2-1.5%、胸腺嘧啶1-4%、胞嘧啶1.2-4.3%、抗病毒多肽0.8-1.5%、细胞因子模拟肽1.1-3.7%、小分子活性多肽0.4-2.8%、8型荚膜多糖0.6-1.5%、pn-血清型12f0.2-0.5%、乳酸1.2-1.8%、乙醇酸0.2-0.4%、聚山梨酸酯0.15-0.3%、失水山梨醇三油酸酯0.1-0.2%和余量多糖溶液。作为本发明的进一步优选方式,还包括以下重量百分数的组分:核糖核酸8%、脱氧核糖核酸1%、寡核苷酸1.5%、多聚核苷酸3.2%、五碳糖2.3%、融合蛋白1.5%、胸腺嘧啶4%、胞嘧啶4.3%、抗病毒多肽1.5%、细胞因子模拟肽3.7%、小分子活性多肽2.8%、8型荚膜多糖1.5%、pn-血清型12f0.5%、乳酸1.8%、乙醇酸0.4%、聚山梨酸酯0.3%、失水山梨醇三油酸酯0.2%和余量多糖溶液。作为本发明的进一步优选方式,还包括以下重量百分数的组分:核糖核酸3%、脱氧核糖核酸0.3%、寡核苷酸0.7%、多聚核苷酸0.9%、五碳糖0.6%、融合蛋白1.2%、胸腺嘧啶1%、胞嘧啶1.2%、抗病毒多肽0.8%、细胞因子模拟肽1.1%、小分子活性多肽0.4%、8型荚膜多糖0.6%、pn-血清型12f0.2%、乳酸1.2%、乙醇酸0.2-0.4%、聚山梨酸酯0.15%、失水山梨醇三油酸酯0.1%和余量多糖溶液。作为本发明的进一步优选方式,制作工艺步骤如下:s1,按照原料所占百分比进行准备材料;s2,将核糖核酸、脱氧核糖核酸、寡核苷酸、多聚核苷酸、五碳糖、融合蛋白、胸腺嘧啶、胞嘧啶、抗病毒多肽、细胞因子模拟肽、小分子活性多肽、8型荚膜多糖、pn-血清型12f加入容器中搅拌,升温到92-120℃,至各原料全部溶解,并不断的注入惰性气体氮气,保持25ml/min的传输速度输入,持续15min,加工过程中保持真空状态;s3,将步骤s2中的混合物中加入多糖溶液,再搅拌15-20分钟开始降温,降至65-85℃加入乳酸、乙醇酸,降温至45℃加入聚山梨酸酯、失水山梨醇三油酸酯,搅拌均匀降温到25-35℃,即得产品;s4,最终将混合后的液体,再进行紫外线消毒,并将杀菌好的溶液装入瓶装包装机中,包装后密封处理,完成生产。作为本发明的进一步优选方式,步骤b中,材料混合完成后,利用离心搅拌罐进行搅拌,搅拌转速设为800-1200r/min。作为本发明的进一步优选方式,所述融合蛋白制作包括以下步骤,s1,进行目的基因的克隆,根据基因序列互补原则,设计合适的引物序列,以cdna为模板,利用pcr技术扩增不同的目的dna片段。s2、在载体中进行重组:通过限制内切酶将两个dna片段进行酶切并回收,然后通过连接酶将两个具有相同末端酶切位点的基因片段进行体外连接,并克隆到高表达质粒载体中,构建重组质粒。s3、将重组表达载体转染宿主细胞并利用选择标志进行筛选及测序。s4、融合基因的诱导表达及表达蛋白的纯化。与现有技术相比:本发明制作的组合物可以进行高效的预防流感病毒,解决了现有药物针对病毒滞后性的问题,并使用过后且病毒无法进行抵抗和升级,大幅提高了预防的效率,且加工方法简单,值得推广。具体实施方式下面将结合本发明实施例中,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。本发明提供一种技术方案:一种流感病毒免疫原性组合物及其应用,包括以下重量百分数的组分:核糖核酸3-8%、脱氧核糖核酸0.3-1%、寡核苷酸0.7-1.5%、多聚核苷酸0.9-3.2%、五碳糖0.6-2.3%、融合蛋白1.2-1.5%、胸腺嘧啶1-4%、胞嘧啶1.2-4.3%、抗病毒多肽0.8-1.5%、细胞因子模拟肽1.1-3.7%、小分子活性多肽0.4-2.8%、8型荚膜多糖0.6-1.5%、pn-血清型12f0.2-0.5%、乳酸1.2-1.8%、乙醇酸0.2-0.4%、聚山梨酸酯0.15-0.3%、失水山梨醇三油酸酯0.1-0.2%和余量多糖溶液。还包括以下重量百分数的组分:核糖核酸8%、脱氧核糖核酸1%、寡核苷酸1.5%、多聚核苷酸3.2%、五碳糖2.3%、融合蛋白1.5%、胸腺嘧啶4%、胞嘧啶4.3%、抗病毒多肽1.5%、细胞因子模拟肽3.7%、小分子活性多肽2.8%、8型荚膜多糖1.5%、pn-血清型12f0.5%、乳酸1.8%、乙醇酸0.4%、聚山梨酸酯0.3%、失水山梨醇三油酸酯0.2%和余量多糖溶液。还包括以下重量百分数的组分:核糖核酸3%、脱氧核糖核酸0.3%、寡核苷酸0.7%、多聚核苷酸0.9%、五碳糖0.6%、融合蛋白1.2%、胸腺嘧啶1%、胞嘧啶1.2%、抗病毒多肽0.8%、细胞因子模拟肽1.1%、小分子活性多肽0.4%、8型荚膜多糖0.6%、pn-血清型12f0.2%、乳酸1.2%、乙醇酸0.2-0.4%、聚山梨酸酯0.15%、失水山梨醇三油酸酯0.1%和余量多糖溶液。制作工艺步骤如下:s1,按照原料所占百分比进行准备材料;s2,将核糖核酸、脱氧核糖核酸、寡核苷酸、多聚核苷酸、五碳糖、融合蛋白、胸腺嘧啶、胞嘧啶、抗病毒多肽、细胞因子模拟肽、小分子活性多肽、8型荚膜多糖、pn-血清型12f加入容器中搅拌,升温到92-120℃,至各原料全部溶解,并不断的注入惰性气体氮气,保持25ml/min的传输速度输入,持续15min,加工过程中保持真空状态;s3,将步骤s2中的混合物中加入多糖溶液,再搅拌15-20分钟开始降温,降至65-85℃加入乳酸、乙醇酸,降温至45℃加入聚山梨酸酯、失水山梨醇三油酸酯,搅拌均匀降温到25-35℃,即得产品;s4,最终将混合后的液体,再进行紫外线消毒,并将杀菌好的溶液装入瓶装包装机中,包装后密封处理,完成生产。步骤b中,材料混合完成后,利用离心搅拌罐进行搅拌,搅拌转速设为800-1200r/min。所述融合蛋白制作包括以下步骤,s1,进行目的基因的克隆,根据基因序列互补原则,设计合适的引物序列,以cdna为模板,利用pcr技术扩增不同的目的dna片段。s2、在载体中进行重组:通过限制内切酶将两个dna片段进行酶切并回收,然后通过连接酶将两个具有相同末端酶切位点的基因片段进行体外连接,并克隆到高表达质粒载体中,构建重组质粒。s3、将重组表达载体转染宿主细胞并利用选择标志进行筛选及测序。s4、融合基因的诱导表达及表达蛋白的纯化。本发明的组合物具体参数表格如下:表1试验白鼠口服频率治疗方式流感抵抗率1001-3/天药剂内服98%传统的药物参数表格如下:表2试验白鼠注射频率治疗方式流感抵抗率1001-2/天注射治疗78%。综上,通过表1和表2明显看出本发明的药物效果更优,本发明制作的组合物可以进行高效的预防流感病毒,解决了现有药物针对病毒滞后性的问题,并使用过后且病毒无法进行抵抗和升级,大幅提高了预防的效率,且加工方法简单,值得推广。以上显示和描述了本发明的基本原理和主要特征和本发明的优点,对于本领域技术人员而言,显然本发明不限于上述示范性实施例的细节,而且在不背离本发明的精神或基本特征的情况下,能够以其他的具体形式实现本发明。因此,无论从哪一点来看,均应将实施例看作是示范性的,而且是非限制性的,本发明的范围由所附权利要求而不是上述说明限定,因此旨在将落在权利要求的等同要件的含义和范围内的所有变化囊括在本发明内。此外,应当理解,虽然本说明书按照实施方式加以描述,但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案,说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见,本领域技术人员应当将说明书作为一个整体,各实施例中的技术方案也可以经适当组合,形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。当前第1页12
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