一种抗氧化的复合食用菌提取物及其制备方法和应用与流程

本发明涉及一种复合食用菌提取物，尤其涉及一种抗氧化的复合食用菌提取物及其制备方法和应用。

背景技术：

虎奶菇(pleurotustuber)，又名菌核侧耳、茯苳侧耳、核耳菇等，是一种名贵的真菌，属于担子菌亚门，层菌纲，伞菌目，侧耳科，侧耳属，目前在我国云南省的腾冲和章凤等地均有发现，在马来西亚、尼日利亚和肯尼亚等国也有此菌。虎奶菇菌核及子实体均可食用，《本草纲目》中记载，虎奶菇菌核对胃病、发烧、哮喘和高血压等疾病有一定的功效，其子实体也具有一定的食疗功效。该菇含有的多糖及其衍生物具有多种生物活性物质。硫酸酯化及羧甲基化的虎奶菇多糖衍生物具有较强的抗氧化作用。

绣球菌(sparassiscrispa)，又名绣球菇，绣球蕈，是一种珍稀名贵的食药用菌，新鲜的绣球菌不仅肉质鲜嫩，营养丰富，而且具有抗肿瘤等效果，在日本被誉为“梦幻神奇的菇”。多糖是绣球菌的主要活性物质，据日本食品分析中心报道，绣球菌中含有大量的β葡聚糖，而β型葡聚糖是一种生物活性物质，具有抗肿瘤、抗氧化、抗病毒、降血脂、抗辐射、免疫调节、降血糖、抗炎、保肝等多种功能。

以上两种多糖均能清除超氧阴离子、羟基自由基等氧化物，清除体内过多自由基对机体的损害，进而起到抗氧化抗衰老的作用。

目前，市场对于抗氧化产品主要以单一的成分研究为主。

技术实现要素：

针对以上不足，本发明提供一种抗氧化的复合食用菌提取物及其制备方法和应用，所述复合食用菌提取物具有抗氧化效果好、副作用低、纯度高等特点。

本发明通过以下方案达到上述目的：

第一方面，一种抗氧化的复合食用菌提取物，以重量百分比计，由10％-80％的虎奶菇提取物和10％-80％绣球菌提取物组成；

以重量百分比计，所述虎奶菇提取物包括10％-80％虎奶菇乙酸乙酯提取物、10％-80％虎奶菇醇提物和10％-80％提取物虎奶菇水提取物；

以重量百分比计，所述绣球菌提取物包括10％-80％绣球菌乙酸乙酯提取物、10％-80％绣球菌醇提物和10％-80％提取物绣球菌水提取物。

第二方面，提供一种抗氧化的复合食用菌提取物的制备方法，包括以下步骤：

(1)将虎奶菇子实体在20℃以下温度中进行脱水粉碎，加入2-10倍体积的乙酸乙酯浸提1-3次，每次1-4小时，并使用超声波震荡，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成粉末得到虎奶菇乙酸乙酯提取物；

(2)将酯提后的滤渣加入2-10倍体积乙醇浸提1-3次，每次1-4小时，并使用超声波震荡，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成粉末得到虎奶菇醇提取物；

(3)将醇提后的滤渣加入5-30倍20℃水超声提取1-4次，每次1-4小时，过滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成粉末得到虎奶菇水提取物；

(4)将虎奶菇水提取物、虎奶菇醇提取物和虎奶菇乙酸乙酯提取物按10％-80％：10％-80％：10％-80％的重量比例混合得到虎奶菇提取物；

(5)将绣球菌子实体在20℃以下温度中进行脱水粉碎，加入2-10倍体积的乙酸乙酯浸提1-3次，每次1-4小时，并使用超声波震荡，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成绣球菌乙酸乙酯提取物；

(6)将酯提后的滤渣加入2-10倍体积乙醇浸提1-3次，每次1-4小时，并使用超声波震荡，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成绣球菌醇提取物；

(7)将醇提后的滤渣加入5-30倍20℃水超声提取1-4次，每次1-4小时，过滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成绣球菌水提取物；

(8)将绣球菌水提取物、绣球菌醇提取物和绣球菌乙酸乙酯提取物按10％-80％：10％-80％：10％-80％的重量比例混合得到绣球菌提取物；

(9)将虎奶菇提取物与绣球菌提取物按10-80％：10-80％的重量比例混合，得到复合食用菌提取物。

第三方面，提供一种上述制备方法制备得到的复合食用菌提取物。

第四方面，提供一种上述复合食用菌提取物在抗氧化和/或抗衰老方面的应用。

第五方面，提供一种上述复合食用菌提取物在制备抗氧化和/或抗衰老化药物或保健品的应用。

第六方面，提供一种抗氧化和/或抗衰老化药物或保健品，包括上述的复合食用菌提取物。

本发明制备过程控制在低温的条件下进行，有效预防活性成分的分解和失活。本发明制备过程中根据酯与醇、醇与水之间的相溶性，增加了提取率，缩短了总的提取时间，三种提取介质提取得到的提取物混合进一步保持食用菌中活性物质的原始结构状态，以维持其天然药理作用，使其活性成份得到充分释放。

本发明两种食用菌的提取物按照比例混合，使得两种提取物之间发挥显著的抗氧化抗衰老协同增效作用，效果显著使得作为抗氧化抗衰老的药物或保健品具有现实性，发挥经济效益和社会效益。

附图说明

图1为试验例2的三种样品的还原力测定结果。

图2为试验例2的三种样品的超氧阴离子自由基清除率测定结果。

图3为试验例2的三种样品的dpph自由基清除率测定结果。

图4为试验例2的三种样品的羟自由基清除率测定结果。

具体实施方式

以下结合具体实施例对本发明进行进一步说明。

发明人发现，对虎奶菇、绣球菌的提取物以一定比例复合后的复合食用菌多糖提取物，具有与单独的菌多糖提取物相比，更加显著的抗氧化作用。

第一方面，一种抗氧化的复合食用菌提取物，以重量百分比计，由10％-80％的虎奶菇提取物和10％-80％绣球菌提取物组成；

以重量百分比计，所述虎奶菇提取物包括10％-80％虎奶菇乙酸乙酯提取物、10％-80％虎奶菇醇提物和10％-80％提取物虎奶菇水提取物；

以重量百分比计，所述绣球菌提取物包括10％-80％绣球菌乙酸乙酯提取物、10％-80％绣球菌醇提物和10％-80％提取物绣球菌水提取物。

在上述抗氧化的复合食用菌提取物中，虎奶菇提取物和绣球菌提取物的总和为100％。

优选的，一种抗氧化的复合食用菌提取物，以重量百分比计，由50％的虎奶菇提取物和50％绣球菌提取物组成。

进一步优选的，一种抗氧化的复合食用菌提取物，以重量百分比计，由50％的虎奶菇提取物和50％绣球菌提取物组成；

以重量百分比计，所述虎奶菇提取物包括30％虎奶菇乙酸乙酯提取物、30％虎奶菇醇提物和40％提取物虎奶菇水提取物；

以重量百分比计，所述绣球菌提取物包括30％绣球菌乙酸乙酯提取物、30％绣球菌醇提物和40％提取物绣球菌水提取物。

优选的，虎奶菇乙酸乙酯提取物包括以下步骤方法制备得到：将虎奶菇子实体在20℃以下温度中进行脱水粉碎，加入2-10倍体积的乙酸乙酯浸提1-3次，每次1-4小时，并使用超声波震荡，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥得到虎奶菇乙酸乙酯提取物。

优选的，虎奶菇醇提取物虎奶菇乙醇提取物。

进一步优选的，虎奶菇醇提取物包括以下步骤方法制备得到：将酯提后的滤渣加入2-10倍体积乙醇浸提1-3次，每次1-4小时，并使用超声波震荡，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥得到虎奶菇醇提取物。

进一步优选的，虎奶菇醇提取物包括以下步骤方法制备得到：将酯提后的滤渣加入2-10倍体积90％的乙醇浸提1-3次，每次1-4小时，并使用超声波震荡，促进活性物质溶解，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥得到虎奶菇醇提取物。

优选的，虎奶菇水提取物包括以下步骤方法制备得到：将醇提后的滤渣加入5-30倍20℃水超声提取1-4次，每次1-4小时，过滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥得到虎奶菇水提取物。

优选的，绣球菌乙酸乙酯提取物包括以下步骤方法制备得到：将绣球菌子实体在20℃以下中进行脱水粉碎，加入2-10倍体积的乙酸乙酯浸提1-3次，每次1-4小时，并使用超声波震荡，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥得到绣球菌乙酸乙酯提取物。

优选的，绣球菌醇提取物绣球菌乙醇提取物。

进一步优选的，绣球菌醇提取物包括以下步骤方法制备得到：将酯提后的滤渣加入2-10倍体积乙醇浸提1-3次，每次1-4小时，并使用超声波震荡，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥得到绣球菌醇提取物。

进一步优选的，绣球菌醇提取物包括以下步骤方法制备得到：将酯提后的滤渣加入2-10倍体积90％的乙醇浸提1-3次，每次1-4小时，并使用超声波震荡，促进活性物质溶解，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥得到绣球菌醇提取物。

优选的，绣球菌水提取物包括以下步骤方法制备得到：将醇提后的滤渣加入5-30倍20℃水超声提取1-4次，每次1-4小时，过滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥得到绣球菌水提取物。

第二方面，提供一种抗氧化的复合食用菌提取物的制备方法，包括以下步骤：

(1)将虎奶菇子实体在20℃以下进行脱水粉碎，加入2-10倍体积的乙酸乙酯浸提1-3次，每次1-4小时，并使用超声波震荡，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成粉末得到虎奶菇乙酸乙酯提取物；

(2)将酯提后的滤渣加入2-10倍体积乙醇浸提1-3次，每次1-4小时，并使用超声波震荡，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成粉末得到虎奶菇醇提取物；

(3)将醇提后的滤渣加入5-30倍20℃水超声提取1-4次，每次1-4小时，过滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成粉末得到虎奶菇水提取物；

(4)将虎奶菇水提取物、虎奶菇醇提取物和虎奶菇乙酸乙酯提取物按10％-80％：10％-80％：10％-80％的重量比例混合得到虎奶菇提取物；

(5)将绣球菌子实体在20℃以下温度中进行脱水粉碎，加入2-10倍体积的乙酸乙酯浸提1-3次，每次1-4小时，并使用超声波震荡，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成绣球菌乙酸乙酯提取物；

(6)将酯提后的滤渣加入2-10倍体积乙醇浸提1-3次，每次1-4小时，并使用超声波震荡，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成绣球菌醇提取物；

(7)将醇提后的滤渣加入5-30倍20℃水超声提取1-4次，每次1-4小时，过滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成绣球菌水提取物；

(8)将绣球菌水提取物、绣球菌醇提取物和绣球菌乙酸乙酯提取物按10％-80％：10％-80％：10％-80％的重量比例混合得到绣球菌提取物；

(9)将虎奶菇提取物与绣球菌提取物按10-80％：10-80％的重量比例混合，得到复合食用菌提取物。

优选的，所述步骤(2)的乙醇为90％的乙醇。

优选的，所述步骤(6)的乙醇为90％的乙醇。

第三方面，提供一种上述制备方法制备得到的复合食用菌提取物。

第四方面，提供一种上述复合食用菌提取物在抗氧化和/或抗衰老方面的应用。

优选的，复合食用菌提取物在1000μg/ml-2000μg/ml之间的浓度下在抗氧化和/或抗衰老方面的应用，具有更加显著的效果和协同增效作用。

第五方面，提供一种上述复合食用菌提取物在制备抗氧化和/或抗衰老化药物或保健品的应用。

优选的，复合食用菌提取物在1000μg/ml-2000μg/ml之间的浓度下在制备抗氧化和/或抗衰老化药物或保健品的应用，具有更加显著的效果和协同增效作用。

进一步地，一种上述复合食用菌提取物在制备抗氧化和/或抗衰老化口服液的应用。

优选的，复合食用菌提取物在1000μg/ml-2000μg/ml之间的浓度下在制备抗氧化和/或抗衰老化口服液的应用，具有更加显著的效果和协同增效作用。

第六方面，提供一种抗氧化和/或抗衰老化药物或保健品，包括上述的复合食用菌提取物。

优选的，一种抗氧化和/或抗衰老化药物或保健品，包括1000μg/ml-2000μg/ml之间浓度的复合食用菌提取物。具有更加显著的效果和协同增效作用。

进一步地，一种抗氧化和/或抗衰老化口服液，包括上述的复合食用菌提取物。

优选的，一种抗氧化和/或抗衰老化口服液，包括1000μg/ml-2000μg/ml之间浓度的复合食用菌提取物。具有更加显著的效果和协同增效作用。

实施例1：

一种抗氧化的复合食用菌提取物的制备方法，步骤如下：

1、将虎奶菇子实体在10℃以下的低温中进行脱水粉碎。

2、加入10倍体积的乙酸乙酯浸提2次，每次2小时，并使用超声波震荡，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成虎奶菇乙酸乙酯提取物粉末。

3、将酯提后的滤渣加入8倍体积90％的乙醇浸提2次，每次2小时，并使用超声波震荡，促进活性物质溶解，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成虎奶菇醇提取物粉末。

4、将醇提后的滤渣加入20倍20℃水超声提取2次，每次2小时，过滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成虎奶菇水提取物粉末。

5、将水提物粉末、醇提取物粉末和乙酸乙酯提取物粉末按4:3:3混合，制成虎奶菇多糖提取物。

6、将绣球菌子实体在10℃以下的低温中进行脱水粉碎。

7、加入10倍体积的乙酸乙酯浸提2次，每次2小时，并使用超声波震荡，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成绣球菌乙酸乙酯提取物粉末。

8、将酯提后的滤渣加入8倍体积90％的乙醇浸提2次，每次2小时，并使用超声波震荡，促进活性物质溶解，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成绣球菌醇提取物粉末。

9、将醇提后的滤渣加入20倍20℃水超声提取2次，每次2小时，过滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成绣球菌水提取物粉末。

10、将水提取物粉末、醇提取物粉末和乙酸乙酯提取物粉末按4:3:3混合，制成绣球菌多糖提取物。

11、最后将虎奶菇多糖提取物与绣球菌多糖提取物按5:5混合得到复合食用菌提取物，提取物可以用于制备口服液等产品。

实施例2

一种抗氧化的复合食用菌提取物的制备方法，步骤如下：

1、将虎奶菇子实体在10℃以下的低温中进行脱水粉碎。

2、加入10倍体积的乙酸乙酯浸提2次，每次2小时，并使用超声波震荡，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成虎奶菇乙酸乙酯提取物粉末。

3、将酯提后的滤渣加入8倍体积90％的乙醇浸提2次，每次2小时，并使用超声波震荡，促进活性物质溶解，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成虎奶菇醇提取物粉末粉末。

4、将醇提后的滤渣加入20倍20℃水超声提取2次，每次2小时，过滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成虎奶菇水提取物粉末。

5、将水提物粉末、醇提物粉末和乙酸乙酯提取物的粉末按4:4:2混合，制成虎奶菇多糖提取物。

6、将绣球菌子实体在10℃以下的低温中进行脱水粉碎。

7、加入10倍体积的乙酸乙酯浸提2次，每次2小时，并使用超声波震荡，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成绣球菌乙酸乙酯提取物粉末。

8、将酯提后的滤渣加入8倍体积90％的乙醇浸提2次，每次2小时，并使用超声波震荡，促进活性物质溶解，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成绣球菌醇提取物粉末。

9、将醇提后的滤渣加入20倍20℃水超声提取2次，每次2小时，过滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成绣球菌水提取物粉末。

10、将水提物粉末、醇提物粉末和乙酸乙酯提取物粉末按4:4:2混合，制成绣球菌多糖提取物。

11、最后将虎奶菇多糖提取物与绣球菌多糖提取物按7:3混合得到复合食用菌提取物，提取物可以用于制备口服液等产品。

实施例3

一种抗氧化的复合食用菌提取物的制备方法，步骤如下：

1、将虎奶菇子实体在10℃以下的低温中进行脱水粉碎。

2、加入10倍体积的乙酸乙酯浸提2次，每次2小时，并使用超声波震荡，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成虎奶菇乙酸乙酯提取物粉末。

3、将酯提后的滤渣加入8倍体积90％的乙醇浸提2次，每次2小时，并使用超声波震荡，促进活性物质溶解，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成虎奶菇醇提取物粉末。

4、将醇提后的滤渣加入20倍20℃水超声提取2次，每次2小时，过滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成虎奶菇水提取物粉末。

5、将水提物粉末、醇提物的粉末和乙酸乙酯提取物的粉末按3:4:3混合，制成虎奶菇多糖提取物。

6、将绣球菌子实体在10℃以下的低温中进行脱水粉碎。

7、加入10倍体积的乙酸乙酯浸提2次，每次2小时，并使用超声波震荡。抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成绣球菌乙酸乙酯提取物粉末。

8、将酯提后的滤渣加入8倍体积90％的乙醇浸提2次，每次2小时，并使用超声波震荡，促进活性物质溶解，抽滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成绣球菌醇提取物粉末。

9、将醇提后的滤渣加入20倍20℃水超声提取2次，每次2小时，过滤后合并滤液，将滤液浓缩冷冻干燥成绣球菌水提取物粉末。

10、将水提物粉末、醇提取物粉末和乙酸乙酯提取物粉末按3:4:3混合，制成绣球菌多糖提取物。

11、最后将虎奶菇多糖提取物与绣球菌多糖提取物按4:6混合得到复合食用菌提取物，提取物可以用于制备口服液等产品。

试验例1多糖含量测定

1、标准曲线的制备

准确称取葡萄糖标准品0.1g(使用前于105℃烘箱内烘干至恒重)，用去离子水溶解并定容至100ml，混合均匀后再准确吸取10ml定容至100ml，即为100μg/ml的葡萄糖标准溶液。将配制好的100μg/ml的葡萄糖标准溶液稀释成浓度梯度为10、20、30、40、50、60μg/ml的葡萄糖溶液。各浓度葡萄糖各吸取1ml于具塞试管中，另取1支具塞试管加入1ml去离子水作空白。再依次向各个试管中加入去离子水1ml，6％苯酚溶液1ml和浓硫酸5ml，震荡摇匀后静置30min，待冷却至室温后于490nm波长处测定od值。以葡萄糖浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制得到标准曲线(图1)，并得到回归方程y＝10.579x-0.0122，回归系数r²＝0.9995。

2、多糖含量的测定

取1ml待测样品溶液，依次加入1ml去离子水、1ml苯酚溶液(5％)和5ml浓硫酸，摇匀后静置至室温，测定490nm波长处od值，根据葡萄糖标准曲线的回归方程计算得待测样品的浓度。每个待测样品测定三次，计算平均值。

经检测，实施例1的虎奶菇多糖提取物、绣球菌多糖提取物以及复合食用菌提取物的多糖含量分别为45％、42％、61％。

试验例2体外抗氧化实验

一、实验方法

采用总还原抗氧化能力、超氧阴离子自由基清除能力、dpph自由基清除能力、羟基自由基清除能力4种体外抗氧化试验，对本发明的复合食用菌提取物进行体外抗氧化活性对比分析。

1、还原力—普鲁士蓝法

将样品配置成不同浓度的待测样品水溶液(500，1000，1500，2000，2500，3500，4500μg/ml)，向试管中依次加入2.5ml磷酸缓冲液(ph6.6，0.2mol/l)、1ml待测样品水溶液和2.5ml铁氰化钾溶液(1％，w/v)，将反应混合液充分混匀，50℃水浴20min。待冷却后，加入2.5ml三氯乙酸(10％，w/v)终止反应。最后加入氯化铁(0.1％，w/v)于室温下反应10min，在700nm处测定各个反应体系的od值。

2、清除超氧阴离子自由基的能力

将样品进行梯度稀释，配制不同浓度(500、1000、1500、2000、2500、3500、4500μg/ml)的待测样品水溶液。取1ml待测样品水溶液与4.5mltris-hcl缓冲液(ph8.2，50mmol/l)于试管中，置于25℃水浴锅中20min。再加入0.3ml邻苯三酚溶液(5mmol/l)，反应3min后，加入1ml抗坏血酸(5％)终止反应。10min后，测定od420nm的大小。空白管使用等体积10mmol/l的hcl代替邻苯三酚，并按以下公式计算超氧阴离子自由基的清除率：

清除率(％)＝(1-a/a0)×100％

其中，a0为空白组的od值

a为样品组的od值。

3、清除dpph自由基的能力—dpph分析法

将样品进行梯度稀释，配制不同浓度(500、1000、1500、2000、2500、3500、4500μg/ml)的待测样品水溶液。取2ml待测样品水溶液于试管中，加入2mldpph乙醇溶液(0.2mmol/l)，混合均匀后室温下避光反应30min，于517nm处测定其od值。根据od值计算dpph自由基的清除率的公式为：

清除率(％)＝[1-(a-a0)/a1]×100

其中，a是2ml待测样品水溶液与2mldpph乙醇溶液混合液的od值

a0是2ml待测样品水溶液与2ml乙醇混合液的od值

a1是2ml去离子水与2mldpph乙醇溶液混合液的od值。

4、清除羟基自由基的能力—fenton法

将样品进行梯度稀释，配制不同浓度(500、1000、1500、2000、2500、3500、4500μg/ml)的待测样品水溶液。依次向试管中加入1ml硫酸亚铁(0.9mmol/l)，1ml待测样品水溶液，1ml过氧化氢(0.03％，v/v)和1ml水杨酸(9mmol/l)。将各反应体系置于37℃水浴反应30min，于510nm处测定各个反应体系的od值，并按照以下公式计算羟基自由基的清除率：

清除率(％)＝(1-a/a0)×100％

其中，a：样品组的od值

a0：空白组的od值。

二、实验结果

采用以上方法对实施例1的复合食用菌提取物配制的水溶液(口服液)以及虎奶菇多糖提取物、绣球菌多糖提取物配制的水溶液(口服液)进行相应测定对比。

1、对三种样品进行还原抗氧化能力的测定，结果如图1所示。从图1的结果可以看出，三种口服液的抗氧化能力均随剂量的增加而增强，但是，复合食用菌提取物的口服液的抗氧化还原能力最高并且随着剂量的增加其效果增加更加显著，特别在1000μg/ml和2000μg/ml范围其效果显著比分别的两种的虎奶菇多糖提取物、绣球菌多糖提取物单独的更加显著。

2、对三种样品进行超氧阴离子自由基清除率测定，结果如图2所示。从图2结果可以看出，三种口服液对超氧阴离子的清除能力均随剂量的增加而增强，但是，复合食用菌提取物的口服液的抗氧化还原能力最高并且随着剂量的增加其效果增加更加显著，特别在500μg/m、1000μg/ml和2000μg/ml范围其效果显著比分别的两种的虎奶菇多糖提取物、绣球菌多糖提取物单独的更加显著并且大于两种的叠加，证明了其协同增效效果。

3、对三种样品进行dpph自由基清除率测定，结果如图3所示。从图3的结果可以看出，三种口服液对dpph自由基的清除能力均随剂量的增加而增强，但是，复合食用菌提取物的口服液的抗氧化还原能力最高并且随着剂量的增加其效果增加更加显著，特别在1000μg/ml和2000μg/ml范围其效果显著比分别的两种的虎奶菇多糖提取物、绣球菌多糖提取物单独的更加显著并且大于两种的叠加，证明了其协同增效效果。

4、对三种样品进行羟自由基清除率测定，结果如图4所示。从图4的结果可以看出，种口服液对羟自由基的清除能力均随剂量的增加而增强，复合食用菌提取物的口服液的抗氧化还原能力最高并且随着剂量的增加其效果增加更加显著，特别在1000μg/ml和2000μg/ml范围其效果显著比分别的两种的虎奶菇多糖提取物、绣球菌多糖提取物单独的更加显著。

综上所述，本发明具有较强的抗氧化能力，实验结果显示，与单一菌制成的提取物相比其还原抗氧化能力，对超氧阴离子自由基、dpph自由基及对羟基自由基清除均具有显著的功效。

以上所述，仅为本发明的较佳的具体实施例，但本发明的保护范围并不局限于此，任何熟悉本技术领域的技术人员在本发明揭露的技术范围内，根据本发明的技术方案及其构思加以等同替换或改变，都应涵盖在本发明的保护范围内。