一种具有辅助降血脂、减肥保肝作用的食品组合物及其制备方法、制剂与应用与流程

本发明属于保健食品及医药
技术领域：
，具体涉及一种具有辅助降血脂、减肥保肝及改善肠道菌群作用的功能性食品组合物。
背景技术：
：人们生活水平日益提高和生活习惯的改变，膳食营养随之丰富，摄取的高脂肪、高胆固醇及高糖分食物越来越多，从而导致高脂血症及肥胖人群越来越多，而且日益低龄化。高脂血症(hyperlipidemia,hlp)是体内脂类代谢紊乱导致血脂水平增高的一种疾病，是指各种原因导致的血浆中胆固醇(tc)、甘油三酯(tg)、极低密度脂蛋白(vldl)、低密度脂蛋白(ldl)升高、和(或)高密度脂蛋白(hdl)降低的一种全身脂代谢异常疾病。据统计，我国血脂异常患病率18.6％，血脂异常患病率部分地区高脂血症患病率已达30％，部分年龄组有达40％。现患人数1.6亿，大于35岁高血压合并高脂血症达3700万人。肥胖是指人体脂肪组织过度蓄积导致机体正常生理功能不同程度损害的一种病理状态。其病因复杂，认为与环境、遗传、生理、代谢、行为及心理等诸多因素有关。肥胖是心血管病、糖尿病、慢性肾病、多种癌症和一系列骨骼肌肉病的风险因素，这一点已经被大量流行病学研究结果证实，但全球超重和肥胖的人仍是越来越多。高脂血症和肥胖已成为心脑血管疾病的主要危害因素之一，容易诱发动脉粥样硬化、冠状动脉粥样硬化性心脏病、脑卒中等多种心脑血管疾病，是目前世界上死亡率最高的疾病。临床流行病学调查结果表明，全世界心脑血管疾病的平均患病率为10～30％，并且有逐年增长的趋势。近年来，研究表明肠道菌群与高脂血症与肥胖具有紧密联系。肠道菌群，占机体微生物总量的78.67％，是机体微生态系统最重要的组成部分。肠道菌群参与了宿主的代谢、免疫、生理、生化、药理等过程，其代谢活动影响宿主营养物质的吸收和能量的平衡。肠道正常菌群具有调节血脂及调节体重的作用，肠道菌群中的乳酸杆菌、双歧杆菌、肠球菌等与胆固醇代谢有直接关系。高脂血症及肥胖可使肠道中微生物赖以生存的环境发生改变，其理化性质及物质结构的改变影响双歧杆菌、乳酸杆菌和肠球菌等肠道正常菌群的新陈代谢及生长繁殖，使其数量明显减少，肠杆菌数量则相对增多，从而出现菌群失调。此外，对同窝的胖瘦小鼠和肥瘦志愿者的肠道菌群研究发现，肥胖个体的肠道中厚壁菌群(firmicutes，“胖菌”)与拟杆菌群(bacteriodetes，“瘦菌”)的比例增加，菌群的多样性减少，这两种菌群的数量与饮食和体脂含量密切相关。而补充特定食物，在一定程度可增加有益菌、抑制有害菌，从而改善失调的肠道菌群，调节代谢，降低血脂及减轻肥胖。目前临床常用降脂药物有羟甲基戊二酸单酰辅酶a还原酶抑制剂(他汀类)、苯氧芳酸类、烟酸类、氯贝丁酯类、胆酸螯合树脂类、选择性胆固醇吸收抑制剂(衣折麦布)等。这些药物虽有较好的降低甘油三酯和胆固醇的作用，但多数会引起腹胀、恶心、腹泻等不良反应，有些药物还会引起血糖升高及肝功能损害等。目前，手术、运动以及药物是治疗肥胖症的主要方法，但这些治疗方法及手段多存在并发症。而在中医理论的指导下，药食同源中药已广泛应用于高脂血症及肥胖的治疗，其通过多途径、多靶点调节脂质代谢，降脂减重，同时可促进肝脏脂质代谢、减少脂肪沉积，保护肝脏；此外，中药经口服后，其有效成分进入胃肠道后与肠道菌群相互作用而改善肠道菌群。因此，开发一种具有疗效好、无毒副作用的多功能食品组合物具有广阔的开发和应用前景。技术实现要素：本发明的目的在于提供了一种由药食同源的中药材组成的辅助降血脂、减肥保肝及改善肠道菌群的多功能食品组合物及其制备方法、制剂与应用，其制备工艺简单，疗效好，安全无副作用。本发明的上述目的是通过以下技术方案予以实现的：一种具有辅助降血脂、减肥保肝作用的食品组合物，由以下组分按重量份组成：山楂20～25份、荷叶20～25份、葛根10～16份、绿茶10～18份、枸杞子4～6份、茯苓4～8份、沙棘2～4份、芹菜粉1～3份、桑叶1～3份、魔芋精粉1～2份、木瓜1～3份、黄精1～2份。其中，各组分的质量份优选如下：(1)组方1：山楂20份、荷叶20份、葛根10份、绿茶10份、枸杞子5份、茯苓5份、沙棘2份、芹菜粉2份、桑叶3份、魔芋精粉1份、木瓜1份、黄精1份。(2)组方2：山楂25份、荷叶25份、葛根15份、绿茶18份、枸杞子6份、茯苓4份、沙棘4份、芹菜粉1份、桑叶2份、魔芋精粉1份、木瓜3份、黄精2份。(3)组方3：山楂24份、荷叶20份、葛根12份、绿茶12份、枸杞子4份、茯苓8份、沙棘2份、芹菜粉2份、桑叶1份、魔芋精粉2份、木瓜2份、黄精1份。一种具有辅助降血脂、减肥保肝作用的食品组合物的制备方法，包括以下步骤：(1)按重量份分别称取山楂20～25份、荷叶20～25份、葛根10～16份、绿茶10～18份、枸杞子4～6份、茯苓4～8份、沙棘2～4份、芹菜粉1～3份、桑叶1～3份、魔芋精粉1～2份、木瓜1～3份、黄精1～2份，除杂、净化、晾干、粉碎，过120目筛，得粉末；(2)将上述粉末混匀后，再加入上述粉末总重量20％甘露醇，混合均匀，然后制粒、干燥，得混合颗粒；(3)在混合颗粒加入其总重量0.5％的硬脂酸镁，混合均匀，然后制成所需的剂型。所述具有辅助降血脂、减肥保肝作用的食品组合物作为制备辅助降血脂、减肥、保护肝脏、改善肠道菌群的保健食品中的用途。所述具有辅助降血脂、减肥保肝作用的食品组合物作为制备辅助降血脂、减肥、保护肝脏、改善肠道菌群的药物的用途。本发明的具有辅助降血脂、减肥保肝作用的食品组合物可以根据需要加入辅料制备成任何适宜的口服制剂。所述口服剂型为颗粒剂、片剂、胶囊剂、袋泡剂、泡腾剂、散剂、口服液、丸剂等，优选为颗粒剂、片剂、胶囊剂和袋泡剂。所述辅料为一般药学上可接受的辅料。本发明各组分功效如下：(1)山楂，为蔷薇科植物山里红crataeguspinnatifidabge.var.majorn.e.br.或山楂crataeguspinnatifidabge.的干燥成熟果实。酸、甘，微温。归脾、胃、肝经。消食健胃，行气散瘀，化浊降脂。用于肉食积滞，胃脘胀满，泻痢腹痛，瘀血经闭，产后瘀阻，心腹刺痛，胸痹心痛，疝气疼痛，高脂血症。(2)荷叶，为睡莲科植物莲nelumbonuciferagaertn.的干燥叶。苦，平。归肝、脾、胃经。清暑化湿，升发清阳，凉血止血。用于暑热烦渴，暑湿泄泻，脾虚泄泻，血热吐衄，便血崩漏。(3)葛根，为豆科葛属植物野葛puerarialobate(willd.)ohwi的干燥根。甘、辛，凉。归脾、胃、肺经。解肌退热，生津止渴，透疹，升阳止泻，通经活络，解酒毒。(4)绿茶，化学成分主要包括多酚、咖啡因和氨基酸,绿茶中含有丰富的儿茶素,其中茶多酚是最丰富的。绿茶及其中的多酚在治疗多种疾病方面发挥积极作用,如癌症、糖尿病、心血管疾病、肥胖症等。(5)枸杞子，为茄科植物宁夏枸杞lyciumbarbaruml.的干燥成熟果实。甘，平。归肝、肾经。中药枸杞子始载于《神农本草经》，并列为上品，久服坚筋骨,主治肝肾不足、精血虚损、耳鸣和人遗精。(6)茯苓，为多孔菌科真菌茯苓poriacocos(schw.)wolf的干燥菌核。甘、淡，平。归心、肺、脾、肾经。利水渗湿，健脾宁心。用于水肿尿少，痰饮眩悸，脾虚食少，便溏泄泻，心神不安，惊悸失眠，利水渗湿，健脾化痰，宁心安神；补脾，运化营养物质入血，补血不足，助消化；运化水液，消除痰湿之邪，性平寒热均可。(7)沙棘，为胡颓子科植物沙棘hippophaethamnoidesl.的干燥成熟果实。酸、涩，温。归脾、胃、肺、心经。健脾消食，止咳祛痰，活血散瘀。用于脾虚食少，食积腹痛，咳嗽痰多，胸痹心痛，瘀血经闭，跌扑瘀胂。(8)芹菜粉，含有多种活性成分，如黄酮类化合物、挥发油、不饱和脂肪酸、萜类、香豆素类化合物等。芹菜中的膳食纤维及黄酮类化合物在降脂过程中发挥着重要作用。(9)桑叶，为桑科植物桑morusalbal.的干燥叶。甘、苦，寒。归肺、肝经。疏散风热，清肺润燥，清肝明目。用于风热感冒，肺热燥咳，头晕头痛，目赤昏花。(10)魔芋精粉，含有多种维生素和钾、磷、硒等矿物质元素，还含有魔芋多糖，并具有低热量、低脂肪和高纤维素的特点。活血化瘀、润肠通便、减少对脂肪的吸收、充饥减肥。(11)木瓜，为蔷薇科植物贴梗海棠chaenomelesspeciosa(sweet)nakai的干燥近成熟果实。酸，温。归肝、脾经。舒筋活络，和胃化湿。用于湿痹拘挛，腰膝关节酸重疼痛，暑湿吐泻，转筋挛痛，脚气水肿。(12)黄精，为百合科植物滇黄精polygonatumkingianumcoll.ethemsl、黄精polygonatumsibiricumred.或多花黄精polygonatumcyrtonemahua的干燥根茎。甘，平。具有补中益气、润心肺、补肾益精、强筋骨、安五脏、止寒热、填精髓等功效。上述12种药食同源的天然植物原料协同作用，可发挥辅助降血脂、减肥、保护肝脏、改善肠道菌群的作用。按照传统中医药理论及中药系统药理学大数据分析得到治疗高脂血症和肥胖的组方，并通过现代生物化学的手段进行验证，组方配比合理，具有非常显著的作用。按照传统中医理论，高脂血症及肥胖属本虚(脾虚失运)标实(痰热、瘀滞)虚实错杂之证，发病部位在脾，涉及他脏。本发明以山楂、荷叶、葛根和绿茶为主药，通过扶正(补气)，调理脾气为主，重用理气、活血化瘀、清热利湿(痰)类降脂药以治其标。本发明以山楂、荷叶、葛根、绿茶为主药，运用健脾助运(山楂、沙棘)、益肾(枸杞子、黄精)法以治其本；运用祛痰湿(荷叶、木瓜、茯苓)、清热毒(荷叶、葛根、绿茶、桑叶)、消积滞(山楂、沙棘)法以治其标；同时辅以高膳食纤维的芹菜和魔芋精粉润肠通便。本发明采用山楂、荷叶、葛根、绿茶等12种药物配合，现有技术中并没有将这12种药物原料组合用于降血脂，而我们知道不同的中药原料之间的配伍作用是不一样的，君臣佐使，即君药相同的情况下，选择不同的臣药，其配伍作用不同，最终得到的药物的效果可能千差万别，同样的臣药相同，君药不同的情况下，其最终药物的效果也有差别，甚至可能治疗疾病的种类也不一样。因此，虽然上述部分原料在不同的文献中公开了在降血脂、减肥方面的应用，但是其组合在一起的配伍作用是不可预想的，最终药物的效果是难以预测的。本发明组方中山楂、荷叶、葛根、绿茶为君，功以调理脾气，活血化痰；以枸杞子、茯苓、沙棘、黄精为臣，有益气行气活血、利湿化痰之效，进一步增强君药理气、活血化痰之功，桑叶、木瓜为佐使之品。纵观该方药多理气、活血化瘀、利湿化痰，并予益气行气、清肝、利湿等药既能巩固活血化痰之效，又各司其职达到治疗次要病症的目的，针对高脂血症和肥胖痰瘀互结证者，可谓是有的放矢，直达病所。全方君臣佐使既主从有序，又各司其职，能直达病所，还统筹兼顾，为活血化痰、行气消浊之良方。其相配合，得到的功能性食品组合物的降血脂、减肥、保肝、改善肠道菌群效果显著，取得了意想不到的技术效果。与现有技术相比，本发明的有益效果在于：(1)本发明提供的具有辅助降血脂、减肥保肝作用的食品组合物，在各组分剂量范围内均可显著降低高脂模型大鼠体重、脂/体比、食物利用率及血甘油三酯、总胆固醇及低密度脂蛋白胆固醇水平；亦可降低高脂模型大鼠肝脏指数及谷丙转氨酶、碱性磷酸酶水平；并可显著提高拟杆菌门相对丰度，并降低厚壁菌门相对丰度，具有明确的辅助降血脂、减肥及改善肠道菌群的功效。(2)本发明结合传统的中医药理论和中药系统药理学大数据分析得到辅助降血脂的组方，并通过现代生物化学的手段进行验证，具有非常显著的作用。安全无副作用，适合长期服用。(3)本发明的具有辅助降血脂、减肥保肝的食品组合物，其配伍合理，简单易行，为药食同源组合物，安全无副作用，适合长期服用。附图说明图1为组方1～3对高脂模型大鼠tg和tc影响。图2为本发明4味主药山楂、荷叶、葛根、绿茶的成分-靶点网络图。其中图形内部代表化学成分，外周代表靶点，外周黑色六边形代表与高脂血症相关的靶点。图3为本发明4味主药山楂、荷叶、葛根、绿茶根据成分、靶点富集到的与高脂血症相关的生物过程或通路排名前15的高级气泡图。图4为本发明对高脂模型大鼠体重增重、摄食量、食物利用率和脂体比的影响。图5为本发明对高脂模型大鼠血脂四项的影响(a-d分别为tg、tc、ldl-c和hdl-c水平)。图6为本发明对大鼠肝脏脂肪合成基因mrna表达水平的影响。图7为本发明对大鼠肝脏指数的影响。图8为本发明对大鼠肝功六项的影响(a-f分别为谷丙转氨酶(alt)、谷草转氨酶(ast)、谷氨酰转肽酶(γ-gt)、碱性磷酸酶(alp)、总蛋白(tp)和白蛋白(alb)水平)。图9为本发明对肠道菌群的影响(a-d分别为厚壁菌门(firmicutes)丰度、拟杆菌门(bacteroidetes)丰度、变形菌门(proteobacteria)丰度和科水平热图)。图10为拆方1～3对高脂模型大鼠tg和tc影响。以上各图中：#p<0.05，##p<0.01，###p<0.001，与空白组相比；*p<0.05，**p<0.01，***p<0.01，与模型组相比(n＝10)。具体实施方式以下通过实施例形式，对本发明的上述内容再作进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明上述主题的范围仅限于以下的实例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。实施例1：最优组方筛选实验组方1：一种具有辅助降血脂、减肥保肝作用的食品组合物，由以下原料重量份数的组分组成：山楂10份、荷叶30份、葛根5份、绿茶5份、枸杞子5份、茯苓3份、沙棘2份、芹菜粉4份、桑叶3份、魔芋精粉1份、木瓜1份、黄精1份。组方2：一种具有辅助降血脂、减肥保肝作用的食品组合物，由以下原料重量份数的组分组成：山楂25份、荷叶15份、葛根10份、绿茶6份、枸杞子3份、茯苓3份、沙棘2份、芹菜粉1份、桑叶3份、魔芋精粉1份、木瓜1份、黄精1份。组方3(最优组方)：一种具有辅助降血脂、减肥保肝作用的食品组合物，由以下原料重量份数的组分组成：山楂20份、荷叶20份、葛根10份、绿茶10份、枸杞子5份、茯苓3份、沙棘2份、芹菜粉4份、桑叶2份、魔芋精粉1份、木瓜1份、黄精1份。所述的组合物的制备方法为：分别称取适量各原料，除杂、净化、晾干、粉碎，过120目筛，将粉末混匀后可用于实验。实验方法：【动物分组与给药】选取健康成年动物90只(spf级别雄性大鼠，180±20g)，普通维持饲料适应饲养7天，随机选取10只分别作为空白组。80只给予高脂模型饲料(10％蔗糖、12％猪油、10％蛋黄、1％胆固醇、0.5％胆酸钠、66.5％基础饲料)1周后分组，按照组方1-3配置混悬液(按大鼠体重每kg等计量的生药材给药，给药剂量为1.26g/kg)，实验动物按体重随机分组为模型组、组方1组、组方2组、组方3组，每组10只。空白对照组、模型组灌胃给予同体积溶剂，即蒸馏水；其余各组分别灌胃给予相应组方1～3。空白对照组继续给予维持饲料，模型对照组及各药物组继续给予高脂模型饲料，每周称取体重，并按新体重调整灌胃剂量，给药42天。各组大鼠自由饮水、摄食。【实验步骤】仰卧位固定各组动物，取静脉血，1500r/min离心15min，分离血清，全自动生化仪分别测定血脂水平(tg和tc)。【数据分析】所有实验数据以平均数±标准差表示，数据采用spss16.0统计分析软件包进行统计学处理，组间比较采用单因素方差分析，两两比较采用turkeyhsdposthoctest法进行统计学分析。设定检验水准为α＝0.05，p>0.05差异无显著性，p<0.05差异具有显著性。【实验结果】与空白对照组比较，模型组血清tg和tc水平显著升高(p<0.001，见表1，图1)。组方1～3不同程度地降低了血清tg和tc水平(p<0.05，见表1，图1)，其中组方3降血脂作用最为明显，故选取组方3为最优组方，用于后期药效学实验。表1不同组方对高脂模型大鼠血脂的影响(mmol/l，n＝10)组别tgtc空白组0.42±0.091.75±0.25模型组1.48±0.22###3.02±0.35###组方10.90±0.15*2.33±0.18*组方20.73±0.20**2.12±0.11**组方30.62±0.15**2.03±0.40**注：与空白对照组比较，#p<0.05，##p<0.01，###p<0.001；与模型组比较，*p<0.05，**p<0.01实施例2：通过文献检索及利用网络药理学大数据分析进行组方【实验原理与方法】网络药理学是在系统生物学、蛋白组学、基因组学的基础上发展的新学科，基于对“药物-靶标-基因-疾病表型”相互作用网络的理解，通过网络的分析观察药物对疾病的干预和影响，使药物开发与疾病的实际情况更加接近，提高药物开发的成功率。中药是一个含有丰富成分的复杂体系,应用网络药理学和生物信息学对中药系统进行研究，分析分子-分子、分子-靶标，靶标-疾病间的相互作用，对本发明组合物中4味主药材的成分、靶点的筛选、富集分析，筛选出与高脂血症发生发展相关的靶点和基因，为本发明组合物的开发和优化提供了理论支撑。tcmsp数据库(http://sm.nwsuaf.edu.cn/lsp/tcmsp.php)；tcmid数据库(http://www.megabionet.org/tcmid/)；tcmdatabase@taiwan数据库(http://tcm.cmu.edu.tw/)；ttd数据库(http://bidd.nus.edu.sg/group/ttd/ttd.asp)；uniprot数据库(http://www.uniprot.org/)；david数据库(https://david.ncifcrf.gov/summary.jsp)。【实验结果】本发明的4味主药材共筛选出178个潜在活性成分，352个靶点，其中所富集到的与高脂血症相关的靶点共计90个，占到筛选靶点的1/4以上，见图2。气泡图中排名前15的通路都与糖、脂代谢过程息息相关，从大数据生物信息学分析的角度，充分说明本发明组方的合理性和具有辅助降血脂功能的潜在性，如表2和图3所示。表2气泡图中与糖脂代谢相关生物过程或通路条目名称termgo-bp或pathway名称p值inflammatoryresponse炎症反应3.24e-09regulationoflipolysisinadipocytes调节脂肪细胞的脂肪分解2.22e-06insulinresistance胰岛素抵抗2.37e-06insulinsignalingpathway胰岛素信号通路1.78e-05oxidation-reductionprocess氧化还原过程2.53e-05campsignalingpathwaycamp信号通路5.47e-05lipidmetabolicprocess脂质代谢过程1.11e-04non-alcoholicfattyliverdisease(nafld)非酒精性脂肪性肝病2.32e-04sphingolipidsignalingpathway鞘脂信号通路0.0020fattyacidbiosyntheticprocess脂肪酸生物合成过程0.0020glucosemetabolicprocess葡萄糖代谢过程0.0041brownfatcelldifferentiation棕色脂肪细胞分化0.010ampksignalingpathwayampk信号通路0.010positiveregulationoffatcelldifferentiation脂肪细胞分化的正调节0.021pparsignalingpathwayppar信号通路0.037实施例3：最优组方辅助降血脂、减肥作用的药效学评价选用实施例1中筛选出的最优组方进行药效学评价，以确认其辅助降血脂、减肥、保肝及改善肠道菌群的功效。最优组方：一种辅助降血脂、减肥、保肝及改善肠道菌群的多功能食品组合物，由以下原料重量份数的组分组成：山楂20份、荷叶20份、葛根10份、绿茶10份、枸杞子5份、茯苓3份、沙棘2份、芹菜粉4份、桑叶2份、魔芋精粉1份、木瓜1份、黄精1份。所述的组合物的制备方法为：分别称取适量各原料，除杂、净化、晾干、粉碎，过120目筛，将粉末混匀后可用于实验。【动物分组与给药】选取健康成年动物70只(spf级别雄性大鼠，180±20g)，普通维持饲料适应饲养7天，随机选取20只分别作为空白组、正常高剂组(即不造模，给予高剂量)，每组10只。50只给予高脂模型饲料(10％蔗糖、12％猪油、10％蛋黄、1％胆固醇、0.5％胆酸钠、66.5％基础饲料)1周后分组，按照最优组方(即组方3)配置成低、中、高三种混悬液(按大鼠体重每kg等计量的生药材给药，给药剂量分别为0.42g/kg、0.84g/kg和1.26g/kg)，实验动物按体重随机分组为模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组，阳性对照组(辛伐他汀，给药剂量为10mg/kg大鼠体重)，每组10只。空白对照组、模型组灌胃给予同体积溶剂，即蒸馏水；其余各组灌胃给予不同剂量组合物配方和阳性对照药。空白对照组继续给予维持饲料，模型对照组及各药物组继续给予高脂模型饲料，每周称取体重，并按新体重调整灌胃剂量，给药42天。各组大鼠自由饮水、摄食。每周记录摄食量，称量体重1次。【实验步骤】1、测定各组动物每周体重增重、摄食量，计算食物利用率＝体重增重/摄食量×100％。2、仰卧位固定大鼠，取静脉血，1500r/min离心15min，分离血清，全自动生化仪分别测定血脂四项(tg，tc，hdl-c，ldl-c)。3、分别取各组大鼠肾周围脂肪、睾丸周围脂肪垫，并称重，计算脂/体比。4、取大鼠肝脏组织，以trizol提取组织中mrna，进行反转录为cdna，并以其为模板，进行cdna扩增，实时荧光定量测定肝脏组织中脂肪合成相关基因fas、srebp-1、ppar-γ的mrna表达水平。【数据分析】同实施例1。【实验结果】1、最优组方对高脂模型大鼠体重增重、摄食量、食物利用率及脂/体比的影响各组大鼠摄食量未见显著差别(p>0.05，图4b)，提示各组动物的食物摄入量一致，无促进食欲作用。而与空白对照组相比，高脂饮食模型组大鼠体重增重、脂/体比和食物利用率均显著增加(p<0.05，图4a、c、d)。与模型组相比，高、中剂量组可以显著降低高脂饮食大鼠体重增重、脂体比和食物利用率(p<0.05，图4a、c、d)。提示最优组方高、中剂量组可减少脂肪蓄积，具有减肥作用，见表3，图4所示。表3最优组方各剂量组对高脂模型大鼠体重增重、摄食量、食物利用率和脂体比的影响(n＝10)组别体重增重(g)摄食量(g/天)食物利用率(％)脂/体比(％)空白组107.0±11.425.7±1.94.16±0.443.11±0.21正常+高剂量组98.2±17.622.4±1.24.38±0.793.02±0.23模型组152.2±9.0#21.5±3.17.12±0.48##3.96±0.28##低剂量组133.5±20.820.1±2.96.64±1.083.80±0.35中剂量组115.7±10.2*21.3±2.95.43±0.80*3.34±0.31*高剂量组113.9±17.8*20.3±3.25.61±0.88*3.27±0.24*阳性对照组112.4±21.7*20.7±2.75.42±0.94*3.20±0.09*注：与空白对照组比较，#p<0.05，##p<0.01，###p<0.001；与模型组比较，*p<0.05，**p<0.012、最优组方对高脂模型大鼠血脂四项的影响与空白对照组相比，高脂饮食模型组大鼠血清甘油三酯(tg)、总胆固醇(tc)和低密度脂蛋白胆固醇(ldl-c)均显著升高(p<0.001)，提示造模成功。与模型组相比，中、高剂量组及阳性对照组均能显著降低血清tc、tg和ldl-c水平(p<0.05)，其作用与阳性对照药相当，各给药组血清高密度脂蛋白胆固醇(hdl-c)较模型对照组略有升高趋势，无显著统计学差异(p>0.05)。提示本发明最优组方高、中剂量组具有辅助降血脂作用。同时，最优组方高剂量组对正常动物不具有降血脂作用，见表4，图5。表4最优组方各剂量组对高脂模型大鼠血脂的影响(mmol/l，n＝10)组别tgtcldl-chdl-c空白组0.58±0.171.87±0.180.49±0.131.17±0.25正常+高剂量组0.48±0.151.96±0.180.57±0.101.19±0.08模型组1.15±0.27###2.92±0.40###1.08±0.19###1.35±0.14低剂量组0.95±0.252.55±0.350.97±0.121.56±0.16中剂量组0.77±0.20*2.26±0.19**0.80±0.091.32±0.17高剂量组0.67±0.16**2.16±0.16**0.75±0.07*1.40±0.15阳性对照组0.66±0.21**2.36±0.29**0.75±0.14*1.37±0.21注：与空白对照组比较，#p<0.05，##p<0.01，###p<0.001；与模型组比较，*p<0.05，**p<0.013、最优组方对高脂模型大鼠肝脏脂肪合成相关基因表达水平的影响与空白组相比，模型组肝脏脂肪酸合成酶(fas)、固醇调节元件结合蛋白-1(srebp-1)和过氧化物酶体增殖物激活受体-γ(ppar-γ)的mrna表达水平均显著升高(p<0.01)。而与模型组相比，高剂量组可显著降低高脂饮食大鼠肝脏fas、srebp-1和ppar-γ的mrna表达水平(p<0.05)，提示本发明可通过抑制脂肪合成基因表达减少脂肪积累及血脂水平，具有预防肥胖和辅助降血脂的作用，如图6所示。实施例4：最优组方对肝脏的保护作用【动物分组与给药】同实施例3。【实验步骤】1、仰卧位固定大鼠，取静脉血，1500r/min离心15min，分离血清，全自动生化仪分别测定肝功六项(alt，ast，γ-gt，alp，tp，alb)。2、充分暴露并剥离取出肝脏，称重并记录，计算脏器指数＝脏器重量/体重×100％。【数据分析】同实施例1。【实验结果】1、最优处方对高脂模型大鼠肝脏指数的影响与空白对照组相比，模型组肝脏指数显著增大(p<0.01)，提示高脂饮食诱导可能使肝脏脂肪沉积。而仅最优组方高剂量组可以显著降低高脂饮食诱导大鼠的肝脏指数(p<0.05)，而阳性对照组对肝脏指数无显著影响(p>0.05)，见图7。2、最优处方对高脂模型大鼠肝功六项的影响与空白对照组相比，模型组大鼠血清谷丙转氨酶(alt)和碱性磷酸酶(alp)含量显著增高(p<0.05)，提示高脂饮食可能使肝脏代谢异常。而与模型组比较，最优组方高、中剂量组均可不同程度地降低血清谷丙转氨酶(alt)和碱性磷酸酶(alp)含量，而阳性对照组则无显著差异(p>0.05)。同时，谷草转氨酶(ast)、谷氨酰转肽酶(γ-gt)、总蛋白(tp)和白蛋白(alb)含量各组间无明显差异(p>0.05)。结合肝脏指数和肝功指标，提示最优组方高、中剂量组可促进肝脏脂质代谢、减少脂肪沉积，具有护肝作用，见图8，表5。表5最优组方对高脂模型大鼠肝功六项的影响(u/l，n＝10)注：与空白对照组比较，#p<0.05，##p<0.01，###p<0.001；与模型组比较，*p<0.05，**p<0.01实施例5：最优组方对高脂大鼠肠道菌群的调节作用【动物分组与给药】同实施例3。【实验步骤】取各组大鼠直肠内新鲜粪便，进行肠道菌群检测。使用qubit2.0fluorometer(invitrogen,carlsbad,ca)检测dna样品的浓度，使用metavxtm文库构建试剂盒、测序文库。以30-50ngdna为模板，使用设计的一系列pcr引物扩增原核生物16srdna上包括v3及v4的2个高度可变区。使用agilent2100生物分析仪(agilenttechnologies,paloalto,ca,usa)检测文库质量，并且通过qubit2.0fluorometer(invitrogen,carlsbad,ca)检测文库浓度。结果分析并绘制热图。【数据分析】同实施例1。【实验结果】物种丰度差异结果显示(如图9a～c所示)，1)在门水平层面上，与空白对照组相比，高脂饮食模型组大鼠的粪便中厚壁菌门(firmicutes)丰度显著增加(p<0.05)，而拟杆菌门(bacteroidetes)丰度显著降低(p<0.05)，条件致病菌变形菌门(proteobacteria)丰度显著升高(p<0.05)，提示高脂饮食会导致肠道微生物中厚壁菌门细菌数量增加，拟杆菌门细菌数量减少，从而影响体重及体脂水平。而最优组方中剂量组可分别使厚壁菌门、变形菌门丰度降低(p<0.05)，同时是拟杆菌门丰度升高(p<0.05)，从而通过调节肠道菌群而发挥调脂减重的作用。2)在科水平层面上(见图9d)，与空白对照组相比，高脂饮食模型组大鼠的物种丰度明显异常，多种菌群丰度异常升高，个别菌群丰度异常降低，而本发明可以使物种组成比例恢复至接近正常的水平。因此，本发明可以调节高脂饮食诱导的肠道菌群结构变化。实施例6：最优组方的安全性评价【动物分组与给药】选取健康成年动物40只(spf级别大鼠，雌雄各半，180±20g)，普通维持饲料适应饲养7天，随机分为空白组和最优组方组，每组20只(雌雄各半)。按照最优组方(即组方3)配置成混悬液(按大鼠体重每kg等计量的生药材给药，给药剂量分别为1.26g/kg)灌胃给药，空白对照组灌胃给予同体积溶剂，即蒸馏水。每周称取体重，并按新体重调整灌胃剂量，给药90天。各组大鼠自由饮水、摄食。每周记录摄食量，称量体重1次。【实验步骤】1、测定各组动物每周体重、摄食量及食物利用率。2、一般行为，表现，中毒症状及死亡状况。3、各脏器病理组织学检测。【实验结果】在本试验过程中，大鼠无异常行为表现，毛发正常，无死亡情况。连续给药90天，大鼠无明显的中毒反应和死亡。与空白对照组相比，最优组方组的大鼠每周体重、摄食量及食物利用率均无显著差异；大鼠胸腹腔内器官正常，无明显病变出现；各器官镜下观察未见中毒性病理改变。因此，本发明安全无副作用，适合长期服用。实施例7：最优组方拆方比较分析为了进一步验证最优组方的合理性和优效性，分别就最优组方中四种主药成分进行了成分替换，分别得到比较方1～4，用于与最优组方功效的对比(如下所示)。最优组方：一种辅助降血脂、减肥、保肝及改善肠道菌群的多功能食品组合物，由以下原料重量份数的组分组成：山楂20份、荷叶20份、葛根10份、绿茶10份、枸杞子5份、茯苓3份、沙棘2份、芹菜粉4份、桑叶2份、魔芋精粉1份、木瓜1份、黄精1份。比较方1：一种辅助降血脂、减肥、保肝及改善肠道菌群的多功能食品组合物，由以下原料重量份数的组分组成：玉竹20份、荷叶20份、葛根10份、绿茶10份、枸杞子5份、茯苓3份、沙棘2份、芹菜粉4份、桑叶3份、魔芋精粉1份、木瓜1份、黄精1份，制备方法同实施例1。比较方2：一种辅助降血脂、减肥、保肝及改善肠道菌群的多功能食品组合物，由以下原料重量份数的组分组成：山楂20份、甘草20份、葛根10份、绿茶10份、枸杞子5份、茯苓3份、沙棘2份、芹菜粉4份、桑叶3份、魔芋精粉1份、木瓜1份、黄精1份，制备方法同实施例1。比较方3：一种辅助降血脂、减肥、保肝及改善肠道菌群的多功能食品组合物，由以下原料重量份数的组分组成：山楂20份、荷叶20份、白芷10份、绿茶10份、枸杞子5份、茯苓3份、沙棘2份、芹菜粉4份、桑叶3份、魔芋精粉1份、木瓜1份、黄精1份，制备方法同实施例1。比较方4：一种辅助降血脂、减肥、保肝及改善肠道菌群的多功能食品组合物，由以下原料重量份数的组分组成：山楂20份、荷叶20份、葛根10份、薏苡仁10份、枸杞子5份、茯苓3份、沙棘2份、芹菜粉4份、桑叶3份、魔芋精粉1份、木瓜1份、黄精1份，制备方法同实施例1。所述的组合物的制备方法为：分别称取适量各原料，除杂、净化、晾干、粉碎，过120目筛，将粉末混匀后可用于实验。实验方法：【动物分组与给药】同实施例1。【实验步骤】同实施例1。【数据分析】同实施例1。【实验结果】模型组血清tg和tc水平显著高于空白对照组(p<0.001，见表6，图10)，且仅最优处方组可显著降低模型组tg和tc水平(p<0.001，见表6，图10)，而比较方1～4均未显著降低模型大鼠的tg和tc水平(p>0.05)。同时，与最优处方组相比，比较方1～4均与其存在显著统计学差别(p<0.05)，提示更换最优组方中主药任一成分均不能发挥显著的功效，最优组方的药材配比是最优配比，具有发挥功效的唯一性和重要性。表6不同组方对高脂模型大鼠血脂影响的对比分析(mmol/l，n＝10)组别tgtc空白组0.42±0.091.75±0.25模型组1.48±0.22###3.02±0.35###最优组方组0.62±0.15**2.03±0.40**比较方11.35±0.25▲2.85±0.18▲比较方21.25±0.19▲2.76±0.19▲比较方31.23±0.11▲2.54±0.25▲比较方41.30±0.10▲2.50±0.15▲注：与空白对照组比较，#p<0.05，##p<0.01，###p<0.001；与模型组比较，*p<0.05，**p<0.01；与最优组方组比较，▲p<0.05，▲▲p<0.01。以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用于限制本发明，对于本领域的技术人员来说，本发明可以有各种更改和变化。凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等，均应包含在本发明的保护范围之内。当前第1页12