本发明涉及变叶树参提取物的功能研究，具体涉及变叶树参提取物在制备抗抑郁天然药物中的应用。
背景技术：
抑郁症是一种常见的心理疾病，患病因素很多且病因尚不明确。由于现代经济的飞速发展，人们的生活质量不断提高，生活节奏逐渐地加快，心理压力亦在不断增加，一直积压在心里，很容易患上抑郁症。抑郁症的主要表现是明显而持续的心情低落，严重的会出现自杀的想法和行为。
有资料显示，抑郁症患者是自杀率很高的人群，据WHO数据显示，世界每年由抑郁症而自杀死亡的约有100万人。抑郁症在很大的程度上影响了人们的身心健康、社会交往、职业能力和躯体活动，主要表现为不能上班、工作能力下降、婚姻不和谐以及亲子关系问题等。抑郁症患者不仅给患者和家庭造成痛苦，还会使患者劳动能力降低，造成严重的经济损失。
现有的抗抑郁合成药价格昂贵、副作用大且抗抑郁谱很窄。而中药抗抑郁具有多成分、多靶点、多通道、复合协同作用，不良反应及副作用小的优点。中药治抑郁症历史悠久，研究发现已有很多中药具有抗抑郁的效果。
变叶树参(Dendropanax proteus(Champ.)Benth.)为五加科树参属植物，主要分布于福建、江西、湖南、广东、广西等地，生于海拔400～600m的山谷溪边较阴湿密林中，其特点是叶二型或多型，叶形变异较大，其根和茎入药，为常用民间草药，树参属植物是人参、三七、刺五加等名贵中药的近缘植物。但是，人们对变叶树参的研究甚少。
技术实现要素：
本发明的目的是，针对上述现有技术的不足，提供一种变叶树参提取物在制备抗抑郁天然药物中的应用，为找出效果好、不良反应少的抗抑郁药提供了依据。
为达上述目的，本发明所采用的技术方案是：变叶树参提取物在制备抗抑郁药物中的应用，其中，该变叶树参提取物为变叶树参用乙醇提取后的石油醚萃取物。
上述变叶树参用乙醇提取后的石油醚萃取物，是取变叶树参茎秆，粉碎，加入纯净水后加热煮沸、过滤，所得浸出液先用质量浓度为90％-95％的乙醇提取，再用乙醇质量含量为70％-75％浓度的乙醇提取，将提取液加热至乙醇挥化无醇味后用石油醚萃取，将萃取液浓缩、干燥，得到其浸膏。
具体地，上述变叶树参用乙醇提取后的石油醚萃取物的制备为：取变叶树参茎秆，粉碎，加入纯净水后加热至沸腾，保持4.5-6.1小时，过滤，将滤液浓缩至原体积的1/3-1/5，冷却至室温，于18-23℃下，先用90％-95％质量浓度的乙醇提取2次，每次提取12-16小时，乙醇用量为浓缩后滤液体积的1.5-2.5倍，再用70％-75％质量浓度的乙醇提取3次，每次提取12-16小时，乙醇用量为浓缩后滤液体积的1.5-2.5倍，合并提取液，将提取液加热至乙醇全部都挥发(无醇味)后用等体积的石油醚萃取2-3次，每次4-6小时，合并萃取液，将萃取液浓缩、干燥，得到干提取浸膏，4℃冰箱保存，备用。
所述纯净水的加入量为每克变叶树参粉加3mL纯净水。
本发明的变叶树参用乙醇提取后的石油醚萃取物可作为活性成分，与药品生产上可接受的辅料制成抗抑郁的口服中药。
本发明的优点及其抗抑郁效果等有益方面:本发明利用单个中药的石油醚萃取物制备抗抑郁药物，具有多成分、多靶点、多通道、抗抑郁作用谱较广的药效药理，以及不良反应、副作用小的优点。
具体实施方式
本实验中用到的材料与方法
1.提取原料与实验动物
变叶树参采于江西省丰城市玉华山自然区；动物：ICR雄性小鼠，体重20-23g，SPF级，合格证号：SCXK(湘)2018-0003，控制在温度(22±2)℃、湿度(45±3)％下饲养，自由饮食，喂养3天后开始实验。
2.试剂与仪器
盐酸氟西汀，生产批号：I1508018，实验前用蒸馏水溶解成混悬液；SOP电子天平：sartorius北京有限公司；天然产物提取装置与仪器设备：成都普拉仪器有限公司；纯化水；量筒；锥形瓶等若干。
实施例1变叶树参用乙醇提取后的石油醚萃取物(以下简称变叶树参提取物)的制备
取5kg变叶树参茎秆，粉碎，加入纯净水(液固比为3mL:1g)后加热至沸腾，保持5小时，过滤，将滤液浓缩至原体积的1/3，冷却至室温，于18-23℃下，边搅拌边缓慢加入95％质量浓度的乙醇提取2次，每次提取14小时(乙醇用量为浓缩后滤液体积的2倍)，再用70％-75％质量浓度的乙醇(乙醇用量为浓缩后滤液体积的2倍)提取3次，每次提取14小时，合并提取液；将提取液加热至乙醇全部都挥发(无醇味)后加入等体积的石油醚，室温搅拌浸泡5小时，然后分离出上层石油醚萃取液，重复2次，合并萃取液，将萃取液浓缩、干燥，得到150g稠状浸膏，相当于含生药66.6g/kg的浸膏。4℃冰箱保存，备用。
实施例2抗抑郁动物模拟药效实验
以变叶树参用乙醇提取后的石油醚萃取物进行动物抗抑郁药效实验。
1.小鼠的强迫游泳预实验
把小鼠随机分为3个小组，分别是模型组(溶剂组，不给药只实验)、盐酸氟西汀组(0.02g/kg)、变叶树参提取物治疗高剂量组(8g/kg)，每组3只。实验前预游泳15分钟，24小时后进行正式强迫游泳预实验，即小鼠灌胃给药30分钟后，将其置于高20cm、直径14cm的2000ml的大烧杯中，烧杯的水高约为10cm，水温为23±2℃，强迫试验小鼠游泳6分钟，记录后4分钟内强迫游泳小鼠不动的累积时间。
2.小鼠的悬尾实验
将小鼠随机分为模型组(溶剂组，不给药只实验)、盐酸氟西汀组(0.02g/kg)、变叶树参提取物治疗高剂量组(8g/kg)3个小组，每组3只。小鼠灌胃给药30分钟后，将小鼠的尾巴端用透明胶带贴在水平铁棍的挂钩上(距离尾端2cm),使小鼠其头部距离水平地面约40cm，为了防止实验中小鼠之间相互妨碍，影响结果，小鼠其悬挂两边用全黑的挡板阻断小鼠的视线，试验小鼠悬尾6分钟，记录后4分钟内小鼠悬尾不动的累积时间。
3.小鼠的强迫游泳实验
将44小鼠随机分为4个小组，分别是模型组(溶剂组，不给药只实验)、盐酸氟西汀组(0.02g/kg)、变叶树参提取物治疗低剂量组(2g/kg)、变叶树参提取物治疗高剂量组(8g/kg),每组11只。实验前预游泳15分钟，24小时后进行正式强迫游泳实验，即小鼠灌胃给药30分钟后，将其放于高20cm、直径14cm的2000ml的大烧杯中，烧杯水高约为10cm、水温为23±2℃，强迫小鼠游泳6分钟，记录后4分钟内实验小鼠不动的累积时间。
4.结果与分析
4.1小鼠的强迫预游泳结果
小鼠的强迫预游泳结果见下表1，可看出变叶树参提取物治疗高剂量组(8g/kg)的累积不动时间比模型组明显缩短，与氟西汀组的累积不动时间相近。由此可得变叶树参提取物可能有抗抑郁作用。在预实验过程中，小鼠灌胃给药后，状态稳定，活动自然，未出现昏睡或肢体抽搐中毒反应或死亡，说明其石油醚提物药性温和。
表1小鼠强迫游泳预实验结果
4.2小鼠的强迫游泳实验结果
本发明的变叶树参提取物的小鼠强迫游泳实验结果见下表2，由表2可知，各处理组给药后，阳性对照药物盐酸氟西汀组的小鼠的不动时间减少24.5s，本发明的变叶树参提取物治疗高剂量组的小鼠的不动时间减少28.1s，药效优于阳性对照药物；虽然变叶树参提取物治疗低剂量组的小鼠的不动时间减少不如盐酸氟西汀组，但效果要明显优于模型组。因此，结果表明变叶树参提取物的抗抑郁效果接近阳性对照药物盐酸氟西汀。
表2变叶树参提取物的小鼠强迫游泳实验
注：与模型对照组比较(*p﹤0.05，**p﹤0.01)。
4.3小鼠的悬尾实验结果
小鼠悬尾试验结果见下表3，盐酸氟西汀组的小鼠悬尾不动的时间减少31.4s，本发明的变叶树参提取物治疗高剂量组的小鼠悬尾不动的时间减少38.9s，变叶树参提取物治疗低剂量组的效果要优于模型组。表明：本发明的变叶树参提取物高剂量组在起效时间上非常显著地快于盐酸氟西汀组，作用效果上与氟西汀相似或较强。
表3变叶树参提取物与氟西汀的小鼠悬尾试验
注：与模型对照组比较(*p﹤0.05，**p﹤0.01)。
在小鼠的强迫游泳试验、悬尾试验中，与模型组均有统计学差异，表明本发明的变叶树参提取物抗抑郁效果显著，具有很好的治疗抑郁症功效。且在长期的小鼠毒性试验观察中，未发现小鼠表现异常，肝脏、肾脏切片无异常，安全性好，有望将本发明的变叶树参提取物开发成为新的抗抑郁天然药物。