本发明涉及提取技术领域，特别涉及一种马栗提取物的制备方法。
背景技术：
马栗树为落叶乔木，分布于欧洲的落叶林地。世界四大行道树之一。树体高大雄伟，树冠宽阔，绿荫浓密，花序美丽，在欧美广泛作为行道树及庭院观赏树。
从马栗种子中提取出“七叶皂苷”，其是一种良好的消肿抗炎药物，具有降低毛细血管通透性，抗炎抗渗出，保护静脉，提高静脉弹性与张力，促进静脉及淋巴回流，改善微循环，抗氧自由基的作用。
现有马栗种子提取物主要通过发酵方式进行提取，其提取物中成分复杂，且提取花费时间较长，如发酵7天以上才能将有效成分七叶皂甙的提取率提高到65％，提取效率低，成本高。
技术实现要素：
为解决上述技术问题，本发明的目的是提供一种马栗提取物的制备方法，即通过将马栗种子进行粉碎后，采用乙醇和乙酸为溶剂，通过加压及常压联合进行抽提的方式，在短时间内完成马栗种子提取物的提取，且有效成分七叶皂甙的提取率提高到75％以上。
本发明提供一种马栗提取物的制备方法，包括以下步骤：
制备马栗粉末：将在0℃条件下干燥的马栗种子粉碎，得到马栗粉末，粒径为80目-150目；
抽提：采用乙醇、乙酸和水的混合溶液对马栗粉末进行抽提，乙醇体积含量为50％-70％，乙酸体积含量为2％-5％，1g马栗粉末用8ml-15ml混合溶液进行抽提，所述抽提包含第一抽提阶段和第二抽提阶段，所述第一抽提阶段条件为，抽提压力为3个大气压，抽提温度为60℃，抽提时间保持10min-15min，所述第二抽提阶段条件为抽提压力为1个大气压，抽提温度为25℃，抽提时间保持80min-150min；
抽滤：将抽提后的混合物进行抽滤，得到滤饼和滤液；
喷雾干燥：将滤液进行喷干燥，得到马栗提取物粉末，所述马栗提取物粉末含水率不高于3％；
保存：向马栗提取物粉末中添加质量比为5％-10％的微晶纤维素，并进行真空包装保存。
进一步地，所述抽提步骤，在所述第一抽提阶段和第二抽提阶段，进行超声辅助抽提，所述超声波频率为35khz，功率500w。
进一步地，对所述抽滤步骤所得到的滤饼进行二次抽提，二次抽提采用乙醇、乙酸和水的混合溶液对马栗粉末进行抽提，1g滤饼用8ml-15ml混合溶液进行抽提，乙醇体积含量为50％-70％，乙酸体积含量为2％-5％，抽提压力为1个大气压，抽提温度为25℃，抽提时间保持80min-150min。
进一步地，对所述二次抽提时采用超声辅助抽提，所述超声波频率为35khz，功率500w。
进一步地，对所述二次抽提所得的混合物进行抽滤，并将滤液进行喷雾干燥，得到马栗提取物粉末。
进一步地，在保存步骤，向马栗提取物粉末中添加甲壳素粉，添加质量比例为0.1％-0.5％。
进一步地，在抽滤步骤，所述抽滤采用的滤纸精度为0.2μm-0.5μm。
进一步地，在喷雾干燥步骤，所述喷雾干燥时温度为25℃-50℃。
进一步地，在保存步骤，所述微晶纤维素的粒径为0.1μm-1μm。
进一步地，在保存步骤，所述微晶纤维素的结晶度为65％-75％。
通过上述步骤，马栗种子进行粉碎后，采用乙醇和乙酸为溶剂，通过加压及常压分段进行抽提的方式，在165min内完成马栗种子提取物的提取步骤，经检测，有效成分七叶皂甙的提取率提高到75％以上。
另外，还通过喷雾干燥方式得到了马栗提取物粉末，且添加了微晶纤维素并通过抽真空方式进行包装保存，因微晶纤维素本身是后续马栗提取物在制作药剂时常用的赋形剂，在保存时添加，一方面可以保持马栗提取物粉末的干燥，另一方面不影响其后续的应用。
具体实施方式
下面将结合具体实施例，对发明的技术方案作详细说明，应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落入本申请所附权利要求所限定的范围内。
实施例1
本发明提供一种马栗提取物的制备方法，包括以下步骤：
制备马栗粉末：将在0℃条件下干燥的马栗种子粉碎，得到马栗粉末，粒径为80目-150目；
抽提：采用乙醇、乙酸和水的混合溶液对马栗粉末进行抽提，乙醇体积含量为50％-70％，乙酸体积含量为2％-5％，1g马栗粉末用8ml-15ml混合溶液进行抽提，所述抽提包含第一抽提阶段和第二抽提阶段，所述第一抽提阶段条件为，抽提压力为3个大气压，抽提温度为60℃，抽提时间保持10min-15min，所述第二抽提阶段条件为抽提压力为1个大气压，抽提温度为25℃，抽提时间保持80min-150min，在所述第一抽提阶段和第二抽提阶段，进行超声辅助抽提，所述超声波频率为35khz，功率500w；
抽滤：将抽提后的混合物进行抽滤，得到滤饼和滤液；
为了进一步提取马栗种子提取物，对所述抽滤步骤所得到的滤饼进行二次抽提，二次抽提采用乙醇、乙酸和水的混合溶液对马栗粉末进行抽提，1g滤饼用8ml-15ml混合溶液进行抽提，乙醇体积含量为50％-70％，乙酸体积含量为2％-5％，抽提压力为1个大气压，抽提温度为25℃，抽提时间保持80min-150min，对所述二次抽提时采用超声辅助抽提，所述超声波频率为35khz，功率500w。
对上述二次抽提所得的混合物进行抽滤，并将滤液进行喷雾干燥，得到马栗提取物粉末；
喷雾干燥：将滤液进行喷干燥，得到马栗提取物粉末，所述马栗提取物粉末含水率不高于3％；
保存：向马栗提取物粉末中添加质量比为5％-10％的微晶纤维素，并进行真空包装保存，并进行真空包装保存，在保存步骤，向马栗提取物粉末中添加甲壳素粉，添加质量比例为0.1％-0.5％。
进一步地，在保存步骤，向马栗提取物粉末中添加甲壳素粉，添加质量比例为0.1％-0.5％。
进一步地，在抽滤步骤，所述抽滤采用的滤纸精度为0.2μm-0.5μm。
进一步地，在喷雾干燥步骤，所述喷雾干燥时温度为25℃-50℃。
进一步地，在保存步骤，所述微晶纤维素的粒径为0.1μm-1μm。
进一步地，在保存步骤，所述微晶纤维素的结晶度为65％-75％。
在抽提步骤，经多次实验验证得到如下结论，1g马栗粉末所使用的混合溶液的体积与抽提所用时间负相关，即，假设1g马栗粉末所使用的混合溶液的体积为x，第二阶段抽提所用时间为y，则y＝kx+b，其中k为负数，具体实验结果如下表。
通过上述步骤，马栗种子进行粉碎后，采用乙醇和乙酸为溶剂，通过加压及常压分段进行抽提的方式，在165min内完成马栗种子提取物的提取步骤，经检测，有效成分七叶皂甙的提取率提高到75％以上。
另外，还通过喷雾干燥方式得到了马栗提取物粉末，且添加了微晶纤维素并通过抽真空方式进行包装保存，因微晶纤维素本身是后续马栗提取物在制作药剂时常用的赋形剂，在保存时添加，一方面可以保持马栗提取物粉末的干燥，另一方面不影响其后续的应用。
通过超声步骤，使得抽提效率高，且使七叶皂甙提取率普遍提高3-5个百分点，如在实验1的基础上，通过超声辅助提取，七叶皂甙提取率提高到了81.5％。
在保存步骤，添加质量比例为0.1％-0.5％甲壳素粉，因甲壳素粉具有天然的抗菌性能，不会污染马栗提取粉末，也不会影响马栗提取物的药效，使得马栗提取粉末的保存期更长。
实施例2
本发明提供一种马栗提取物的制备方法，包括以下步骤：
制备马栗粉末：将在0℃条件下干燥的马栗种子粉碎，得到马栗粉末，粒径为100目；
抽提：采用乙醇、乙酸和水的混合溶液对马栗粉末进行抽提，乙醇体积含量为60％，乙酸体积含量为3％，1g马栗粉末用10ml混合溶液进行抽提，所述抽提包含第一抽提阶段和第二抽提阶段，所述第一抽提阶段条件为，抽提压力为3个大气压，抽提温度为60℃，抽提时间保持12min，所述第二抽提阶段条件为抽提压力为1个大气压，抽提温度为25℃，抽提时间保持100min，在所述第一抽提阶段和第二抽提阶段，进行超声辅助抽提，所述超声波频率为35khz，功率500w；
抽滤：将抽提后的混合物进行抽滤，得到滤饼和滤液；
为了进一步提取马栗种子提取物，对所述抽滤步骤所得到的滤饼进行二次抽提，二次抽提采用乙醇、乙酸和水的混合溶液对马栗粉末进行抽提，1g滤饼用12ml混合溶液进行抽提，乙醇体积含量为60％，乙酸体积含量为3％，抽提压力为1个大气压，抽提温度为25℃，抽提时间保持100min，对所述二次抽提时采用超声辅助抽提，所述超声波频率为35khz，功率500w。
对上述二次抽提所得的混合物进行抽滤，并将滤液进行喷雾干燥，得到马栗提取物粉末；
喷雾干燥：将滤液进行喷干燥，得到马栗提取物粉末，所述马栗提取物粉末含水率不高于3％；
保存：向马栗提取物粉末中添加质量比为7％的微晶纤维素，并进行真空包装保存，并进行真空包装保存，在保存步骤，向马栗提取物粉末中添加甲壳素粉，添加质量比例为0.3％。
进一步地，在抽滤步骤，所述抽滤采用的滤纸精度为0.3μm。
进一步地，在喷雾干燥步骤，所述喷雾干燥时温度为40℃。
进一步地，在保存步骤，所述微晶纤维素的粒径为0.5μm。
进一步地，在保存步骤，所述微晶纤维素的结晶度为70％。
通过上述步骤，马栗种子进行粉碎后，采用乙醇和乙酸为溶剂，通过加压及常压分段进行抽提的方式，112min完成马栗种子提取物的提取步骤，经检测，有效成分七叶皂甙的提取率提高到78.2％。
另外，还通过喷雾干燥方式得到了马栗提取物粉末，且添加了微晶纤维素并通过抽真空方式进行包装保存，因微晶纤维素本身是后续马栗提取物在制作药剂时常用的赋形剂，在保存时添加，一方面可以保持马栗提取物粉末的干燥，另一方面不影响其后续的应用。
通过超声步骤，使得抽提效率高，且使七叶皂甙提取率普遍提高3-5个百分点，如在本实施例实验的基础上，通过超声辅助提取，七叶皂甙提取率提高到了81.5％。
在保存步骤，添加质量比例为0.3％甲壳素粉，因甲壳素粉具有天然的抗菌性能，不会污染马栗提取粉末，也不会影响马栗提取物的药效，使得马栗提取粉末的保存期更长。
实施例3
本发明提供一种马栗提取物的制备方法，包括以下步骤：
制备马栗粉末：将在0℃条件下干燥的马栗种子粉碎，得到马栗粉末，粒径为80目；
抽提：采用乙醇、乙酸和水的混合溶液对马栗粉末进行抽提，乙醇体积含量为70％，乙酸体积含量为2％-，1g马栗粉末用8ml混合溶液进行抽提，所述抽提包含第一抽提阶段和第二抽提阶段，所述第一抽提阶段条件为，抽提压力为3个大气压，抽提温度为60℃，抽提时间保持15min，所述第二抽提阶段条件为抽提压力为1个大气压，抽提温度为25℃，抽提时间保持80min，在所述第一抽提阶段和第二抽提阶段，进行超声辅助抽提，所述超声波频率为35khz，功率500w；
抽滤：将抽提后的混合物进行抽滤，得到滤饼和滤液；
为了进一步提取马栗种子提取物，对所述抽滤步骤所得到的滤饼进行二次抽提，二次抽提采用乙醇、乙酸和水的混合溶液对马栗粉末进行抽提，1g滤饼用15ml混合溶液进行抽提，乙醇体积含量为70％，乙酸体积含量为5％，抽提压力为1个大气压，抽提温度为25℃，抽提时间保持150min，对所述二次抽提时采用超声辅助抽提，所述超声波频率为35khz，功率500w。
对上述二次抽提所得的混合物进行抽滤，并将滤液进行喷雾干燥，得到马栗提取物粉末；
喷雾干燥：将滤液进行喷干燥，得到马栗提取物粉末，所述马栗提取物粉末含水率不高于3％；
保存：向马栗提取物粉末中添加质量比为5％的微晶纤维素，并进行真空包装保存，并进行真空包装保存，在保存步骤，向马栗提取物粉末中添加甲壳素粉，添加质量比例为0.5％。
进一步地，在抽滤步骤，所述抽滤采用的滤纸精度为0.5μm。
进一步地，在喷雾干燥步骤，所述喷雾干燥时温度为50℃。
进一步地，在保存步骤，所述微晶纤维素的粒径为1μm。
进一步地，在保存步骤，所述微晶纤维素的结晶度为75％。
通过上述步骤，马栗种子进行粉碎后，采用乙醇和乙酸为溶剂，通过加压及常压分段进行抽提的方式，95min完成马栗种子提取物的提取步骤，经检测，有效成分七叶皂甙的提取率提高到78.8％。
另外，还通过喷雾干燥方式得到了马栗提取物粉末，且添加了微晶纤维素并通过抽真空方式进行包装保存，因微晶纤维素本身是后续马栗提取物在制作药剂时常用的赋形剂，在保存时添加，一方面可以保持马栗提取物粉末的干燥，另一方面不影响其后续的应用。
通过超声步骤，使得抽提效率高，且使七叶皂甙提取率普遍提高3-5个百分点，如在实验1的基础上，通过超声辅助提取，七叶皂甙提取率提高到了82.6％。
在保存步骤，添加质量比例为0.5％甲壳素粉，因甲壳素粉具有天然的抗菌性能，不会污染马栗提取粉末，也不会影响马栗提取物的药效，使得马栗提取粉末的保存期更长。