本发明属中药制药领域，具体涉及一种用于治疗糖尿病肾病的中药组合物及其应用。
背景技术：
糖尿病是一种全球性的常见病和多发病，已成为继肿瘤和心血管疾病之后的第三大疾病。糖尿病临床上常合并其它疾病，如糖尿病合并肾病和糖尿病合并高血脂症。糖尿病合并肾病一方面是因阴虚燥热，肾气亏耗，精微失固；另一方面是热灼血液，形成瘀血，瘀阻肾络，开阖失司，精微下泄，均可致糖尿病肾脏损害，严重影响到人们的生活质量。
目前治疗糖尿病的药物较多，临床上使用的西药，虽具有一定的疗效，但多数存在较大的不良反应，如出现停药后反弹，患者肝肾损害、横纹肌融解症等副作用，治标不治本，而中医药在治疗糖尿病方面具有其独特的优势，中医防治糖尿病方药众多，疗效较持久，且多数无明显毒副作用。
雷允上药业有限公司生产的中药组合物胶囊，国药准字z20020086，用于轻、中度慢性原发性普通型肾炎的治疗。未报到用于糖尿病或糖尿病肾病的治疗。
技术实现要素：
发明目的：本发明的目的在于提供一种用于治疗糖尿病肾病的中药组合物及其应用。
技术方案：为了实现本发明的目的是通过如下技术方案实现的：
中药组合物在制备治疗糖尿病药物中的应用，所述的中药组合物包括黄芪、枸杞子、山药、薏苡仁、玄参、北沙参、墨旱莲、紫河车、杜仲、三七、益母草、水蛭、蝉蜕、车前子、牛膝。
中药组合物在制备治疗糖尿病肾病药物中的应用，所述的中药组合物包括黄芪、枸杞子、山药、薏苡仁、玄参、北沙参、墨旱莲、紫河车、杜仲、三七、益母草、水蛭、蝉蜕、车前子、牛膝。
作为优选，以上所述的应用，所述的糖尿病为ii型糖尿病。
作为优选，以上所述的应用，将中药组合物的提取物与药学上可接受的载体制备成胶囊剂、片剂、颗粒剂、丸剂或口服液。
作为优选，以上所述的应用，中药组合物的提取物制备方法为将各中药原料加水煎煮或者加乙醇回流、连续回流、超声提取后浓缩得到。
作为优选，以上所述的应用，所述的中药组合物由黄芪680～1360份、枸杞子170～340份、山药255～510份、薏苡仁170～340份、玄参170～340份、北沙参170～340份、墨旱莲170～340份、紫河车38～76份、杜仲340～680份、三七153～306份、益母草510～1020份、水蛭38～76份、蝉蜕51～102份、车前子170～340份、牛膝170～340份制成。
作为优选，以上所述的应用，所述的中药组合物由黄芪680份、枸杞子170份、山药255份、薏苡仁170份、玄参170份、北沙参170份、墨旱莲170份、紫河车38份、杜仲340份、三七153份、益母草510份、水蛭38份、蝉蜕51份、车前子170份、牛膝170份制成。
作为优选，以上所述的应用，中药组合物的制备方法为：
(1)按重量比例取三七、紫河车和水蛭粉碎成细粉，过100目筛，灭菌，备用；
(2)按重量比例取黄芪、枸杞子、山药、薏苡仁、玄参、北沙参、墨旱莲、杜仲、益母草、蝉蜕、车前子、牛膝，加水煎煮二次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至得清膏，加乙醇，搅匀，静置24小时，取上清液减压回收乙醇并浓缩至清膏；加入步骤(1)的三七、紫河车和水蛭细粉，混匀，制粒，干燥，粉碎成细粉，加入药学上可接受的载体制备成药物制剂。
作为优选，以上所述的应用，中药组合物的制备方法为：
(1)首先按重量比例取三七、紫河车和水蛭粉碎成细粉，过100目筛，灭菌，备用；
(2)然后按重量比例取黄芪、枸杞子、山药、薏苡仁、玄参、北沙参、墨旱莲、杜仲、益母草、蝉蜕、车前子、牛膝，加水煎煮二次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至60℃相对密度为1.16～1.20的清膏，加乙醇使含醇量达63％，搅匀，静置24小时，取上清液减压回收乙醇并浓缩至60℃相对蜜度为1.36～1.39的清膏；加入步骤(1)三七、紫河车和水蛭细粉，混匀，制粒，干燥，粉碎成细粉，加入药学上可接受的载体制备成药物制剂。
药理实验结果表明，本发明中药组合物具有显著的防治糖尿病和糖尿病肾病功效。
有益效果：本发明提供的具有治疗糖尿病肾病的中药组合物制剂具有以下优点：
本发明提供的具有治疗糖尿病肾病的中药组合物制剂，实验结果表明，具有很好的降低糖尿病肾病大鼠空腹血糖功效，并且能显著降低糖尿病肾病大鼠血清肌酐、尿素氮、肾脏系数和尿蛋白的含量。并且实验结果表明，本发明也具有很好的防治肾小管上皮细胞纤维化的功效。实验过程中，未见明显毒副作用，安全性好。
具体实施方式
根据下述实施例，可以更好地理解本发明。然而，本领域的技术人员容易理解，实施例所描述的具体的物料配比及其结果仅用于说明本发明，而不应当也不会限制权利要求书中所详细描述的本发明。凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
实施例1
一种具有治疗糖尿病肾病的中药组合物，其由以下方法制备得到：
(1)按重量比例取三七153g、紫河车38g和水蛭38g粉碎成细粉，过100目筛，灭菌，备用；
(2)按重量比例取黄芪680g、枸杞子170g、山药255g、薏苡仁170g、玄参170g、北沙参170g、墨旱莲170g、杜仲340g、益母草510g、蝉蜕51g、车前子170g和牛膝170g，加水煎煮二次，每次1小时，合并煎液，滤过，滤液减压浓缩至60℃相对密度为1.16～1.20的清膏，加乙醇使含醇量达63％，搅匀，静置24小时，取上清液减压回收乙醇并浓缩至60℃相对蜜度为1.36～1.39的清膏；加入步骤(1)三七、紫河车和水蛭细粉，混匀，制粒，干燥，粉碎成细粉，干燥，整粒，过筛，包衣，装人胶囊，制成1000粒，即得。
实施例2降血糖、降血脂以及保护肾损伤实验
取14-16周龄sd大鼠，体重(220±20)g，雄性屏障环境大鼠(spf级)，适应性饲养5天，实验期间空白组10只大鼠一直喂养常规饲料，其余大鼠一直喂养高糖高脂及0.5％葡萄糖水，3周后，按30mg/kg连续3天腹腔内注射stz，高糖高脂及葡萄糖水继续喂养4天后，大鼠禁食不禁水，12h后尾静脉取血测定空腹血糖，以血糖值高于13.1mmol/l为造模成功。将造模成功的糖尿病大鼠根据空腹血糖水平随机分5组，每组10只，分别为模型组、连续15天灌胃二甲双胍(阳性对照药)组(13.5mg/kg·d)，实施例1制备得到的中药组合物胶囊高剂量组(1.25g/kg·d)、中剂量组(0.65g/kg·d)、低剂量组(0.25g/kg·d)。给药期间，空白组与模型组大鼠灌胃相同剂量的0.5％羧甲基纤维素钠。实验期间动物饲养在室温21～23℃、相对湿度60％、12h光照周期的spf级屏障环境中。给药完后，将大鼠禁食不禁水置于代谢笼中，收集24h尿液，第24h时称大鼠体质量，随后尾静脉取血测定各组大鼠空腹血糖值，最后腹主动脉取血收集每只大鼠血清，并迅速剥离大鼠左右肾组织称其质量，随后迅速切取左肾部分皮质部位于福尔马林中用于he染色、masson染色、pas染色。用考马斯亮蓝g-250法检测24h尿中蛋白的含量，相应的试剂盒分别测定血清中高密度脂蛋白、低密度脂蛋白、总胆固醇、甘油三酯、糖化血清蛋白、血清肌酐、尿素氮、大鼠胱抑素c、血β2微球蛋白，并计算肾脏指数(肾脏指数＝(左肾质量+右肾质量)/(大鼠体质量*100))。
1.对空腹血糖的影响
通过尾静脉取血测定空白组、模型组、阳性药组及中药组合物胶囊给药组大鼠的空腹血糖，结果发现，阳性药给药组及中药组合物胶囊给药组大鼠的空腹血糖均明显低于模型组(p<0.01)。具体结果如表1所示。
表1药物对糖尿病模型大鼠空腹血糖的影响
注：#与正常组比较有显著差异。*与模型组比较有显著差异p<0.05；**与模型组比较有极显著差异p<0.001。
2.对肾功能损伤相关指标的影响
通过试剂盒测定空白组、模型组、中药组合物胶囊组大鼠血清中血清肌酐、尿素氮的含量，用考马斯亮蓝g-250法检测24h尿中蛋白的含量，并计算肾脏指数(肾脏指数＝(左肾质量+右肾质量)/(大鼠体质量*100))。结果发现，中药组合物胶囊组大鼠血清肌酐、尿素氮、24h尿蛋白的含量及肾脏指数值均明显低于模型组(p<0.05)。如表2所示。
表2药物对糖尿病模型大鼠肾功能相关指标的影响
注：#与正常组比较有显著差异。*与模型组比较有显著差异p<0.05；**与模型组比较有极显著差异p<0.001。
3、对肾组织病理状态的影响
给药结束后，取各组大鼠肾组织进行he染色、pas染色、masson染色，光镜下所见正常组大鼠肾小管及肾小球正常，模型组肾小管上皮空泡变性、肾间质大量炎细胞浸润、肾小球囊腔扩张，中药组合物胶囊给药组大鼠肾脏结构接近正常组。
实施例3改善肾小管纤维化的功能实验
1.实验细胞
肾小管上皮细胞株hk-2，细胞培养于内含10％的胎牛血清+100u/ml青霉素+100μg/ml链霉素的dmem高糖培养基中，放置于37℃，5％co2培养箱中。
2.药物
阳性药dpi(nadph氧化酶抑制剂)，购自calbiochemcorp.(lajolla，ca)。
3.细胞的分组与处理
用96孔板铺板细胞，用dmem高糖培养基预处理，37℃、5％co2中培养6h，使其处于同步化状态。每24h换液。实验分为：空白对照组，即不加入干预因素)；高糖处理组；给药组分别为dpi(10μm)及实施例1中药组合物胶囊治疗组(50μm)。
4.实验分析
利用蛋白质印迹法分析方法测定e-cadherin，α-sma，fn，p-erk，nox1，nox2，nox4，tgf-β，tgf-βri，tgf-βrii，smad2，smad3，smad7的相对含量。
5.实验结果
(1)对高糖诱导的hk-2细胞形态的影响
各组hk-2细胞经干预48h后，生物倒置显微镜分析结果表明，正常组hk-2细胞呈现明显的铺路石状态，模型组细胞出现明显纤维化，阳性药给药组及中药组合物胶囊治疗组细胞与正常组接近。
(2)对高糖诱导的hk-2细胞e-cadherin，α-sma，p-erk，nox1，nox2，nox4蛋白表达量的影响。
表3各组对e-cadherin，α-sma，fn，p-erk，nox1，nox2，nox4蛋白表达量的影响
注：#与正常组比较有显著差异。*与模型对照组比较有显著差p<0.05；
以上实验结果表明，本发明具有显著的降血糖作用，同时还具有良好的保护肾损伤、改善肾小管纤维化和防治糖尿病肾病的作用。可作为糖尿病或糖尿病肾病的治疗。