用于治疗癌症的组合物及其应用的制作方法

[0001]
本发明涉及一种生物医药技术领域，具体涉及一种用于治疗癌症的组合物及其应用。


背景技术：

[0002]
恶性肿瘤是严重威胁人类生命安全的重大疾病，发病率与死亡率高。目前，化疗是临床上治疗肿瘤主要手段之一，常用的化疗药物有阿霉素、紫杉醇、顺铂等。然而，化疗药物在体内非选择性分布会引起较大的毒副作用，且长期服用会引发耐药性。因此，高效低毒的治疗方法在肿瘤的治疗中具有重要的现实意义。近年来，分子靶向药物的研究研发已成为抗肿瘤药物研发的热点领域。分子靶向药物主要针对恶性肿瘤病理生理发生、发展的关键靶点进行治疗干预，而不影响正常细胞的活性。目前，一些分子靶向药物在相应的肿瘤治疗中已经表现出较好的疗效。双硫仑(dsf)是临床上常用的戒酒药，其代谢物二硫卡钠与铜离子形成配合物(简称为cuet)，能特异性识别细胞核内核定位蛋白4(npl4)并诱导其聚集，干扰肿瘤细胞生长的重要通路p97-npl4-ufd1途径，进而引起蛋白降解受损、泛素化蛋白聚集，最终诱导细胞凋亡，其抗肿瘤机制具有分子靶向特性。然而cuet本身溶解度极差，无法直接口服。必须负载在纳米材料或其他材料中，才能被人体所利用，导致用药成本高。
[0003]
对于dsf的药效机制进行分析，可以发现cu
2+
是其发挥药效的关键。与此同时，dsf自身无活性，需要在体内经代谢成dtc方能与cu
2+
结合，而dsf血浆清除迅速，半衰期短暂，与cu
2+
在肿瘤部位形成cuet效率低，且自身具有一定毒副作用。


技术实现要素：

[0004]
为解决上述问题，本发明的目的在于提供一种用于治疗癌症的组合物及其应用。
[0005]
为了实现上述目的，本发明提供了一种用于治疗癌症的组合物，包括a药和b药，所述a药为二硫卡纳，所述b药为葡萄糖酸铜。
[0006]
上述的用于治疗癌症的组合物，进一步的，所述a药的剂量为0.1mg/kg～50mg/kg，所述b药的剂量为0.1mg/kg～5mg/kg。
[0007]
基于一个总的技术构思，本发明提供了一种所述用于治疗癌症的组合物在制备治疗癌症药物中的应用。
[0008]
上述的应用，进一步的，所述治疗癌症的药物为治疗浆细胞瘤、胰腺癌、多发性骨髓瘤、急性淋巴性白血病、卵巢癌、非小细胞肺癌、结直肠癌、乳腺癌和恶性胶质瘤等实体瘤中的一种或多种的药物。
[0009]
上述的应用，进一步的，所述应用的方法为：先口服二硫卡钠，间隔5～10小时后再口服葡萄硫酸铜。
[0010]
与现有技术相比，本发明具有以下有益效果：
[0011]
本发明提供了一种用于治疗癌症的组合物一二硫卡钠与葡萄硫酸铜的组合物。相比于dsf，dtc具有更长半衰期，结合口服葡萄糖酸铜后在肿瘤部位形成cuet的效率更高，抗
肿瘤活性更强。dtc与葡萄硫酸铜在肿瘤部位结合形成cuet后，可以有效杀死肿瘤细胞，抑制实体瘤的生长。
附图说明
[0012]
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。
[0013]
图1为本发明实施例中双硫仑(dsf)和二硫卡钠(dtc)的药动学曲线；
[0014]
图2为本发明实施例中分别口服dsf、dtc、dsf+葡萄糖酸铜(cuglu)，dtc+cuglu后肿瘤部位生成的cuet含量。
[0015]
图3为本发明实施例中分别口服dsf、dtc、dsf+cuglu、dtc+cuglu后小鼠肿瘤生长曲线。
[0016]
图4为本发明实施例中分别口服不同比例的dtc和cuglu后小鼠肿瘤生长曲线。
[0017]
图5为本发明实施例中口服不同剂量dtc和cuglu后小鼠肿瘤生长曲线。
具体实施方式
[0018]
以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。在不背离本发明精神和实质的情况下，对本发明方法、步骤或条件所作的修改或替换，均属于本发明的范围。
[0019]
若未特别指明，实施例中所用的技术手段为本领域技术人员所熟知的常规手段；若未特别指明，实施例中所用试剂均为市售。
[0020]
本发明涉及到的百分号“％”，若未特别说明，是指质量百分比；但溶液的百分比，除另有规定外，是指100ml溶液中含有溶质的克数。
[0021]
本发明所述重量份可以是μg、mg、g、kg等本领域公知的重量单位，也可以是其倍数，如1/10、1/100、10倍、100倍等。
[0022]
以下实施例中，所采用的仪器及生产厂家的详细信息参见表1：
[0023]
表1主要仪器名称及生产厂家
[0024]
仪器名称生产厂家cp225d型电子天平德国赛多利斯(sartorius)公司bp224s型电子天平德国赛多利斯(sartorius)公司
[0025]
以下实施例中，所采用的主要试剂名称及生产厂家参见表2：
[0026]
表2主要试剂名称及生产厂家
[0027]
试剂名称生产厂家二硫卡钠美国sigma公司双硫仑美国sigma公司葡萄糖酸铜阿拉丁试剂有限公司
[0028]
实施例1
[0029]
一种用于治疗癌症的组合物，包括二硫卡钠与葡萄糖酸铜。
[0030]
一种实施例1的用于治疗癌症的组合物在制备治疗癌症药物中的应用，其应用方
法为：口服二硫卡钠，间隔5～10小时后再口服铜剂葡萄糖酸铜。
[0031]
实验例2：
[0032]
考察dsf和dtc的血浆半衰期，具体步骤如下：
[0033]
将sd大鼠随机分为两组，分别为dsf给药组和dtc给药组，每组6只。dsf给药组以50mg/kg的剂量灌胃给药。dtc给药组以50mg/kg的剂量灌胃给药。于0、1、2、4、8、12、24、48h眼眶采血，采集的血样中均加入100μl肝素钠，然后置于-80℃冰箱保存。样品采集完成后，每个血样均取出200μl加入1.5ml ep管中并加入10μl 100mm gsh溶液共孵育10min，随后3000rpm离心10min取上清血浆，血浆中继续加入100μl甲醇涡旋120s提取药物，10000rpm离心5min，取有机相氮吹仪干燥完全后加入定量体积溶解hplc-ms/ms进样分析。
[0034]
图1为dsf和dtc的药代动力学曲线，显示dtc具有更长的血浆半衰期。
[0035]
实验例3：
[0036]
考察二硫卡钠与葡萄糖酸铜在小鼠肿瘤内形成cuet的含量。
[0037]
考察步骤为：
[0038]
(1)建立荷瘤裸鼠模型：收集对数生长的m231细胞分散于pbs中，细胞密度为1
×
107/100μl，等体积与基质胶混合，注射于balb/c裸鼠(雌性，6周)的腋下部位。雌性balb/c裸鼠，6周龄，购自常州卡文斯实验动物有限公司。
[0039]
(2)将荷瘤裸鼠随机分为四组，分别为dsf、dtc、dsf+cuglu，dtc+cuglu组，每组6只。
[0040]
dsf或dtc组以50mg/kg的剂量分别灌胃给药。
[0041]
dsf+cuglu和dtc+cuglu组早上9:00灌胃给药dsf或dtc，晚上19:00给药cuglu(剂量：1mg/kg)。
[0042]
24h后取出各组小鼠体内的肿瘤，采用hplc-ms/ms进样分析检测各组cuet的含量。
[0043]
图2为给药dsf、dtc、dsf+cuglu，dtc+cuglu后各组小鼠肿瘤内cuet的含量。由图2可以得知，dtc+cuglu组的cuet含量最高，表明dtc+cuglu的组合生成cuet效率更高。
[0044]
实施例4：
[0045]
考察二硫卡钠与葡萄糖酸铜的抑瘤效果。具体步骤为：
[0046]
将荷瘤裸鼠培养至肿瘤长至200mm3左右，将荷瘤裸鼠随机分为四组，分别为dsf、dtc、dsf+cuglu、dtc+cuglu组，每组6只。分别于0、3、6、9天口服给pbs、dsf、dtc、dsf+cuglu、dtc+cuglu(剂量：dsf或dtc 50mg/kg；cuglu：1mg/kg)。每两天给小鼠称重并用游标卡尺测量肿瘤的体积至第14天，通过各组肿瘤的相对体积比较各组抗肿瘤效率。肿瘤体积计算公式：v＝长
×
宽2/2。
[0047]
图3为分别于0、3、6、9天口服给pbs、dsf、dtc、dsf+cuglu、dtc+cuglu后的肿瘤体积变化曲线。由图3可知，dsf、dtc、dsf+cuglu、dtc+cuglu均具有一定的抑瘤效果。其中加入了cuglu的两组的抑瘤效果显著增强，dtc+cuglu组的疗效强于dsf+cuglu组。该结果表明，dtc与cuglu是最优的组合。
[0048]
实施例5：
[0049]
考察dtc与cuglu的质量比对抗肿瘤功效的影响，具体步骤为：
[0050]
将荷瘤裸鼠随机分为四组，每组6只，分别给不同比例的dtc和cuglu(dtc和cuglu质量比分别为：50∶0.5、50∶1、50∶2、50∶5)。给药时间间隔、给药次数以及评价指标参考实施
例3。
[0051]
图4为分别于0、3、6、9天口服pbs和不同质量比的dtc+cuglu后的肿瘤体积变化曲线。由图4可知，各比例的dtc+cuglu组均具有明显的抑瘤效果，其中50∶1、50∶2和50∶5的疗效差异不大。该结果表明，dtc与cuglu以50∶1的质量比联用就可发挥显著的抗肿瘤功效，继续增加cuglu剂量未能提高疗效。
[0052]
实施例6：
[0053]
考察不同剂量的dtc+cuglu后的肿瘤体积变化曲线，具体步骤为：
[0054]
将荷瘤裸鼠随机分为四组，每组6只。固定dtc和cuglu给药质量比为50∶1。分别给不同剂量的dtc和cuglu(dtc和cuglu剂量分别为：5mg/kg和0.1mg/kg、10mg/kg和0.2mg/kg、20mg/kg和0.4mg/kg、50mg/kg和1mg/kg)。给药时间间隔、给药次数以及评价指标参考实施例3。
[0055]
图5为分别于0、3、6、9天口服pbs和不同剂量的dtc+cuglu后的肿瘤体积变化曲线。由图5可知各组抑瘤效果随着剂量的增加而增强，在dtc和cuglu的剂量分别为50mg/kg和1mg/kg时抑瘤效果最强。
[0056]
显然，上述实施例仅仅是为清楚地说明所作的举例，而并非对实施方式的限定。对于所属领域的普通技术人员来说，在上述说明的基础上还可以做出其它不同形式的变化或变动。这里无需也无法对所有的实施方式予以穷举。而由此所引伸出的显而易见的变化或变动仍处于本发明创造的保护范围之中。