本发明涉及美容技术领域，具体而言，涉及一种能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物及制备方法。
背景技术：
皮肤是覆盖于整个体表的一个最大的一个器官，其是人体内部器官和组织的保护者，同时，也是内部器官、精神与周围环境的效应器官，对人体的健康和美丽起着尤为重要的作用。抗衰老护肤是护肤品的主要功能之一，利用现代生物科技成果的基因美容，从皮肤细胞结构层面来改善肤质、延缓衰老、淡化皱纹已经成为世界性趋势。胶原蛋白对皮肤的重要性毋庸置疑，它对于皮肤，就像大楼中的钢筋架构，起到支撑的作用。皮肤凹陷和皱纹一直是爱美人士的关注话题，一般皮肤皱纹和凹陷都与自体胶原再生有关，如何改下面部的皮肤凹陷和皱纹，就需要提升面部皮肤的自体胶原再生能力。目前市场上一些能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物都存在改善效果不佳的问题。
技术实现要素：
本发明的目的在于提供一种能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物，此组合物能够极大的提升面部凹陷皱纹处的自体胶原再生能力，使皮肤凹陷和皱纹得到极大的改善。
本发明的另一目的在于提供一种能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物的制备方法，该制备方法能够极大的保留组合物中的能够改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生的因子，保证使用该制备方法制备的组合物效果极佳。
本发明解决其技术问题是采用以下技术方案来实现的。
一方面，本申请实施例提供一种能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物，包括以下重量份的组分：10～20份龟胶、5～10份黄连、2～4份冰片、10～15份川芎、20～30份鹿茸和10～20份大黄和80～100份缓冲剂。
在本发明的一些实施例中，上述龟胶制备方法为：按以下重量份称取新鲜龟板5～15份、葛根3-8份、生地5-10份、铁皮石斛10-30份和灵芝5-10份，用中火熬制5～6h，熬制完成后，用过滤网过滤出固体成分，保留液体；继续加热液体，加热过程中对液体进行搅拌，加热搅拌至糊化后停止加热，冷却成龟胶。
在本发明的一些实施例中，上述组合物还包括：20～25份的壳聚糖。
在本发明的一些实施例中，上述组合物还包括：5～10份杜仲。
在本发明的一些实施例中，上述组合物还包括：1～5份马勃。
在本发明的一些实施例中，上述缓冲剂包括粘稠剂。
在本发明的一些实施例中，上述缓冲剂还包括以下质量百分比的组分5～10％的蜂蜜和90～95％的水。
另一方面，本申请实施例提供一种能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物的制备方法，其包括：
1)材料准备，将龟胶、黄连、冰片、川芎和大黄清洗干净后，放入薄膜蒸发器，进行蒸发浓缩，得到混合浓缩液；
2)炮制鹿茸，用液氮和搅拌珠研磨法将鹿茸粉碎成粉末，以料液比为1g：5ml～1g：10ml的比例分别加入鹿茸粉末和乙醇，用强电场萃取25～35分钟，得到含有鹿茸活性物质萃取液，最后用低温离心机以3500～4000r/min的速度离心7～10min，取上层提取液，再以料液比为1g：5ml～1g：10ml的比例将乙醇加入到下层沉淀中继续进行强电场提取和离心分离，连续提取3次，除去下层沉淀，合并上层提取液，将鹿茸活性物质提取液采用真空刮板式薄膜浓缩，浓缩条件为温度35～45℃，真空度为0.1～0.15mbar，得到鹿茸活性物质浓缩液；
3)混合制膏，将缓冲剂、鹿茸活性物质浓缩液和混合浓缩液混合搅拌，搅拌温度控制在70～80℃，搅拌至液体凝膏后停止搅拌，待膏体冷却后可得到组合物。
在本发明的一些实施例中，上述1)步骤中蒸发浓缩温度控制在100～110℃。
在本发明的一些实施例中，上述2)步骤中，乙醇浓度为60～65％。
相对于现有技术，本发明的实施例至少具有如下优点或有益效果：
本发明提供一种能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物，包括以下重量份的组分：10～20份龟胶、5～10份黄连、2～4份冰片、10～15份川芎、20～30份鹿茸和10～20份大黄和80～100份缓冲剂。
上述龟胶又称龟甲胶具有滋阴、补血，止血的功效，龟胶中含有丰富的胶原蛋白，能够在胶原再生中提供各种基础物质。同时龟胶中含有十四酸甾醇酯，其可以激活毛囊干细胞中的wnt/β-catenin信号通路参与皮肤创面的修复，通过调控毛囊干细胞中的wnt/β-catenin信号通路，促进毛囊干细胞增殖并参与皮肤组织重建，加快急性创面的修复能够有效的促进面部皮肤的自体胶原再生。因此，龟胶中的有效成分能加快胶原纤维的形成，促进组织外基质的重建，提高面部凹陷和皱纹修复的质量。
上述黄连含有盐酸小檗碱，盐酸小檗碱能够起到抑菌作用，能够保持面部皮肤的干净，其与上述龟胶中的十四酸甾醇酯配合能够有效的提升面部凹陷和修复时出现细菌感染问题，进而提升皮肤的胶原再生速度。
上述大黄中含有的大黄酚，是一种能够促进成纤维细胞增殖的物质。成纤维细胞参与修复的整个过程，其分裂、增殖、迁移、合成与分泌细胞外基质，形成结缔组织使创伤或皮肤凹陷修复。细胞外基质中，胶原是最为重要的有形成分，目前已经发现的胶原至少有10多种类型，其中ⅰ型胶原、ⅲ型胶原是最主要成分，是成纤维细胞修复组织创伤过程中的主要角色。研究发现，胶原纤维可以激活盘状结构域受体(ddr)2，再通过作用于基质金属蛋白酶研究发现，胶原纤维可以激活盘状结构域受体(ddr)2，再通过作用于基质金属蛋白酶(mmps)降解胶原参与胶原的合成与分泌及细胞外基质重构。大黄酚促使成纤维细胞的增殖活性增加则说明细胞的数量增加较快，有利于产生较多的细胞外基质，有利于组织创伤的修复。结合上述大黄酚对ⅰ型胶原、ⅲ型胶原表达的调控作用，大黄酚虽然抑制成纤维细胞ⅰ型胶原的表达，但是可以增加成纤维细胞的增殖活性，从而促进组织创伤的修复。同时大黄酚促进ⅲ型胶原的表达，则可能通过该机制促进皮肤胶原再生的同时，减少瘢痕的形成。因此，大黄与龟胶的配合能够进一步的改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生。
上述冰片含有右旋龙脑，右旋龙脑与上述盐酸小檗碱和十四酸甾醇酯结合使用，能够提升皮肤的胶原再生能力，促进面部皮肤凹陷和皱纹的修复。其中，冰片中的冰片酯能够作为载体承载上述龟胶中有效改善皮自体胶原再生的物质，在进入皮肤深层后将十四酸甾醇酯等有效物质释放，有效的克服看挥发性问题和冰片不能与其他药物做成组合物的缺点，能够极大的提升龟胶的作用效果。
上述川芎主要含苯酞及其二聚体、生物碱、酚酸、多糖、神经酰胺和脑苷脂等多种类型的化学成分，其能够有效的促进ⅰ型胶原蛋白的生成，而ⅰ型胶原蛋白作为面部细胞分泌生成的重要原胶原，其能够有效的促进面部凹陷和皱纹的修复。川芎与龟胶配伍，能够有效的提升龟胶和川芎对皮肤胶原再生的促进能力，进而达到美容皮肤的效果。
上述鹿茸鹿茸中含有大量的胶原蛋白，其中ⅰ型胶原蛋白约占90％，ⅰ型胶原蛋白已被证实作为医用生物材料对缺损组织修复、再生和重建具有重要意义，是促进胶原再生的有效物质。鹿茸中含有磷脂、糖脂、胶脂、激素、脂肪酸、氨基酸、蛋白质及钙、磷、镁、钠等成分，其中氨基酸成分占总成分的一半以上。古代医家认为，鹿之精气全在于角，而茸为角之嫩芽，气体全而未发泄，故补阳益血之力最盛。明代李时珍在《本草纲目》上称鹿茸“善于补肾壮阳，生精益血，补髓健骨”。鹿茸中含有大量的胶原蛋白，其中ⅰ型胶原蛋白约占90％，已被证实作为医用生物材料对缺损组织修复、再生和重建具有重要意义。其中，i型胶原蛋白是人体中最丰富的胶原蛋白。它形成大的嗜酸性纤维，称为胶原纤维。胶原纤维是主要含有胶原蛋白，氨基酸有甘氨酸、脯氨酸和羟脯氨酸等的纤维组合物。胶原纤维是三种纤维中分布最广泛，含量最多的一种纤维。广泛分布于各脏器内，在皮肤、巩膜和肌腱最为丰富。胶原纤维染色主要用于和肌纤维的鉴别。胶原纤维是皮肤中的主要成分，占皮肤全部纤维质量的95％-98％。新鲜的胶原纤维呈白色，故又称白纤维。在he染色标本中，胶原纤维被染成粉红色，较粗大，直径0.5-20um，成束分布，排列紧密，交织成网。因此，鹿茸中的i型胶原蛋白能够有效的促进皮肤胶原蛋白的再生。
此外鹿茸多肽增强超氧化物歧化酶活性，清除体内过多的氧自由基的作用，在延缓衰老方面有显著的功效。
龟胶和鹿茸配伍后，氧化活性会明显提升，二者具有协同作用。两者配伍能够进一步的提升皮肤胶原再生能力和人体抗氧化能力。
因此，该能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物能够极大的提升面部凹陷皱纹处的自体胶原再生能力，使皮肤凹陷和皱纹得到极大的改善。
本发明还提供一种能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物的制备方法，其包括：
1)材料准备，将龟胶、黄连、冰片、川芎和大黄清洗干净后，放入薄膜蒸发器，进行蒸发浓缩，得到混合浓缩液；2)炮制鹿茸，用液氮和搅拌珠研磨法将鹿茸粉碎成粉末，以料液比为1g：5ml～1g：10ml的比例分别加入鹿茸粉末和乙醇，用强电场萃取25～35分钟，得到含有鹿茸活性物质萃取液，最后用低温离心机以3500～4000r/min的速度离心7～10min，取上层提取液，再以料液比为1g：5ml～1g：10ml的比例将乙醇加入到下层沉淀中继续进行强电场提取和离心分离，连续提取3次，除去下层沉淀，合并上层提取液，将鹿茸活性物质提取液采用真空刮板式薄膜浓缩，浓缩条件为温度35～45℃，真空度为0.1～0.15mbar，得到鹿茸活性物质浓缩液；3)混合制膏，将缓冲剂、鹿茸活性物质浓缩液和混合浓缩液混合搅拌，搅拌温度控制在70～80℃，搅拌至液体凝膏后停止搅拌，待膏体冷却后可得到组合物。该制备方法能够极大的保留组合物中的能够改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生的因子，保证使用该制备方法制备的组合物效果极佳。
具体实施方式
为使本发明实施例的目的、技术方案和优点更加清楚，下面将对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述。实施例中未注明具体条件者，按照常规条件或制造商建议的条件进行。所用试剂或仪器未注明生产厂商者，均为可以通过市售购买获得的常规产品。
需要说明的是，在不冲突的情况下，本申请中的实施例及实施例中的特征可以相互组合。下面将参考具体实施例来详细说明本发明。
本发明提供一种能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物，包括以下重量份的组分：10～20份龟胶、5～10份黄连、2～4份冰片、10～15份川芎、20～30份鹿茸和10～20份大黄和80～100份缓冲剂。
上述龟胶又称龟甲胶具有滋阴、补血，止血的功效，龟胶中含有丰富的胶原蛋白，能够在胶原再生中提供各种基础物质。同时龟胶中含有十四酸甾醇酯，其可以激活毛囊干细胞中的wnt/β-catenin信号通路参与皮肤创面的修复，通过调控毛囊干细胞中的wnt/β-catenin信号通路，促进毛囊干细胞增殖并参与皮肤组织重建，加快急性创面的修复能够有效的促进面部皮肤的自体胶原再生。因此，龟胶中的有效成分能加快胶原纤维的形成，促进组织外基质的重建，提高面部凹陷和皱纹修复的质量。
上述黄连含有盐酸小檗碱，盐酸小檗碱能够起到抑菌作用，能够保持面部皮肤的干净，其与上述龟胶中的十四酸甾醇酯配合能够有效的提升面部凹陷和修复时出现细菌感染问题，进而提升皮肤的胶原再生速度。
上述大黄中含有的大黄酚，是一种能够促进成纤维细胞增殖的物质。成纤维细胞参与修复的整个过程，其分裂、增殖、迁移、合成与分泌细胞外基质，形成结缔组织使创伤或皮肤凹陷修复。细胞外基质中，胶原是最为重要的有形成分，目前已经发现的胶原至少有10多种类型，其中ⅰ型胶原、ⅲ型胶原是最主要成分，是成纤维细胞修复组织创伤过程中的主要角色。研究发现，胶原纤维可以激活盘状结构域受体(ddr)2，再通过作用于基质金属蛋白酶研究发现，胶原纤维可以激活盘状结构域受体(ddr)2，再通过作用于基质金属蛋白酶(mmps)降解胶原参与胶原的合成与分泌及细胞外基质重构。大黄酚促使成纤维细胞的增殖活性增加则说明细胞的数量增加较快，有利于产生较多的细胞外基质，有利于组织创伤的修复。结合上述大黄酚对ⅰ型胶原、ⅲ型胶原表达的调控作用，大黄酚虽然抑制成纤维细胞ⅰ型胶原的表达，但是可以增加成纤维细胞的增殖活性，从而促进组织创伤的修复。同时大黄酚促进ⅲ型胶原的表达，则可能通过该机制促进皮肤胶原再生的同时，减少瘢痕的形成。因此，大黄与龟胶的配合能够进一步的改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生。
上述冰片含有右旋龙脑，右旋龙脑与上述盐酸小檗碱和十四酸甾醇酯结合使用，能够提升皮肤的胶原再生能力，促进面部皮肤凹陷和皱纹的修复。其中，冰片中的冰片酯能够作为载体承载上述龟胶中有效改善皮自体胶原再生的物质，在进入皮肤深层后将十四酸甾醇酯等有效物质释放，有效的克服看挥发性问题和冰片不能与其他药物做成组合物的缺点，能够极大的提升龟胶的作用效果。
上述川芎主要含苯酞及其二聚体、生物碱、酚酸、多糖、神经酰胺和脑苷脂等多种类型的化学成分，其能够有效的促进ⅰ型胶原蛋白的生成，而ⅰ型胶原蛋白作为面部细胞分泌生成的重要原胶原，其能够有效的促进面部凹陷和皱纹的修复。川芎与龟胶配伍，能够有效的提升龟胶和川芎对皮肤胶原再生的促进能力，进而达到美容皮肤的效果。
上述鹿茸鹿茸中含有大量的胶原蛋白，其中ⅰ型胶原蛋白约占90％，ⅰ型胶原蛋白已被证实作为医用生物材料对缺损组织修复、再生和重建具有重要意义，是促进胶原再生的有效物质。鹿茸中含有磷脂、糖脂、胶脂、激素、脂肪酸、氨基酸、蛋白质及钙、磷、镁、钠等成分，其中氨基酸成分占总成分的一半以上。古代医家认为，鹿之精气全在于角，而茸为角之嫩芽，气体全而未发泄，故补阳益血之力最盛。明代李时珍在《本草纲目》上称鹿茸“善于补肾壮阳，生精益血，补髓健骨”。鹿茸中含有大量的胶原蛋白，其中ⅰ型胶原蛋白约占90％，已被证实作为医用生物材料对缺损组织修复、再生和重建具有重要意义。其中，i型胶原蛋白是人体中最丰富的胶原蛋白。它形成大的嗜酸性纤维，称为胶原纤维。胶原纤维是主要含有胶原蛋白，氨基酸有甘氨酸、脯氨酸和羟脯氨酸等的纤维组合物。胶原纤维是三种纤维中分布最广泛，含量最多的一种纤维。广泛分布于各脏器内，在皮肤、巩膜和肌腱最为丰富。胶原纤维染色主要用于和肌纤维的鉴别。胶原纤维是皮肤中的主要成分，占皮肤全部纤维质量的95％-98％。新鲜的胶原纤维呈白色，故又称白纤维。在he染色标本中，胶原纤维被染成粉红色，较粗大，直径0.5-20um，成束分布，排列紧密，交织成网。因此，鹿茸中的i型胶原蛋白能够有效的促进皮肤胶原蛋白的再生。
此外鹿茸多肽增强超氧化物歧化酶活性，清除体内过多的氧自由基的作用，在延缓衰老方面有显著的功效。
龟胶和鹿茸配伍后，氧化活性会明显提升，二者具有协同作用。两者配伍能够进一步的提升皮肤胶原再生能力和人体抗氧化能力。
因此，该能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物能够极大的提升面部凹陷皱纹处的自体胶原再生能力，使皮肤凹陷和皱纹得到极大的改善。
进一步的，上述龟胶制备方法为：按以下重量份称取新鲜龟板5～15份、葛根3-8份、生地5-10份、铁皮石斛10-30份和灵芝5-10份，用中火熬制5～6h，熬制完成后，用过滤网过滤出固体成分，保留液体；继续加热液体，加热过程中对液体进行搅拌，加热搅拌至糊化后停止加热，冷却成龟胶。上述龟胶的熬制加入新鲜龟板，用于提取新鲜龟板中提取龟胶质。
上述葛根的主要成分异黄酮类、三萜类、皂苷类和多糖类等，其主要药理活性成分为葛根异黄酮类，包括葛根素，3′-甲氧基葛根素，3′-羟基葛根素，大豆素，大豆苷，3′-甲氧基大豆素等，具有改善血液循环、降低血压、降低血糖和抗癌等作用。另外，葛根中富含淀粉及多种功能性成分，如人体必需氨基酸、人体必需的矿物质和微量元素，是营养丰富的保健类成分。生地主要含环烯醚萜、苷类、糖等成分，具有清热凉血的作用。葛根性甘、辛，凉，有解肌退热，透疹，生津止渴，升阳止泻之功效，与龟胶质这种补血益气配合，能够发挥处更好的补血益气作用。其与新鲜龟板中的龟胶质，作用是传统的中药配伍，能够极大的提升龟胶的功效。
上述铁皮石斛具有滋阴清热、生津益胃、润肺止咳等功能。目前已确定铁皮石斛的化学成分有：多糖、生物碱、茋类、酚类和木质素等，其具有多种生物活性：免疫、抗氧化、抗肿瘤、降血糖、抗菌等作用。铁皮石斛和龟胶都具有滋阴的功效，具体反应为铁皮石斛和龟胶合用对机体特异性免疫功能具有增强作用，能够增强滋阴的功效。铁皮石斛与龟胶成分合用能够极大的提升皮肤的胶原再生能力。
上述生地主要含环烯醚萜、苷类、糖等成分，具有清热凉血的作用。葛根性甘、辛，凉，有解肌退热，透疹，生津止渴，升阳止泻之功效，与龟胶这种补血益气配合，能够发挥处更好的补血益气作用，可作为皮肤的滋补品。
进一步的，上述组合物还包括：20～25份的壳聚糖。壳聚糖为天然多糖甲壳素脱除部分乙酰基的产物，具有生物降解性、生物相容性、无毒性、抑菌、抗癌、降脂、增强免疫等多种生理功能。壳聚糖能够作为一种天然的连接剂，能够起到调和作用。
进一步的，上述组合物还包括：5～10份杜仲。杜仲提取物可抑制纤维母细胞中的mmp-1和mmp-3蛋白的合成和对应mrna的表达，且上调胶原合成，达到改善创伤皮肤的作用。松脂醇二葡萄糖苷是来源于杜仲的双环氧木脂素类化合物，具有类似雌激素作用的成分基础。松脂醇二葡萄糖苷能够作用于皮肤成纤维细胞，可促进细胞增殖，提高细胞弧形，上调ⅰ型胶原蛋白、ⅲ型胶原蛋白、细胞咋红timp-1、timp-2mrna表达，增强皮肤细胞的胶原再生能力。同时，松脂醇二葡萄糖苷具有雌激素作样作用，能改善皮肤功能。由此，松脂醇二葡萄糖苷可通过促进细胞增殖、胶原蛋白合成来修复皮肤的凹陷和皱纹。
进一步的，上述组合物还包括：1～5份马勃。成纤维细胞增殖以及胶原更新是影响伤口重建的关键，其主要依赖于胶原酶的作用，而胶原酶来源于纤维细胞。研究证明：成纤维细胞生物学特性改变，即增殖能力增强和胶原蛋白合成增多在创面愈合形成过程中发挥着重要作用。因而通过改善成纤维细胞的生物学特性能够促进创面愈合的速度。成纤维细胞又是参与创伤修复的主要细胞，具有合成胶原、纤维黏连蛋白及透明质酸等细胞外基质的功能，同时还可分泌多种生长因子来调控修复创面愈合。本研究结果显示：马勃有效组分在细胞水平上对皮肤成纤维细胞的生物学作用，具有剂量和时间的依赖关系，随着马勃剂量的增加，对成纤维细胞增殖效果随之增加。通过调节马勃有效组分剂量，可以对成纤维细胞增殖幅度进行调控也可以对成纤维细胞胶原合成进行调控。
进一步的，上述缓冲剂包括粘稠剂。粘稠剂主要用使组合物中的有效物质粘稠化，方便使用在面部皮肤上。
进一步的，上述缓冲剂还包括以下质量百分比的组分5～10％的蜂蜜和90～95％的水。
本发明还提供一种能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物的制备方法，其包括：
1)材料准备，将龟胶、黄连、冰片、川芎和大黄清洗干净后，放入薄膜蒸发器，进行蒸发浓缩，得到混合浓缩液；2)炮制鹿茸，用液氮和搅拌珠研磨法将鹿茸粉碎成粉末，以料液比为1g：5ml～1g：10ml的比例分别加入鹿茸粉末和乙醇，用强电场萃取25～35分钟，得到含有鹿茸活性物质萃取液，最后用低温离心机以3500～4000r/min的速度离心7～10min，取上层提取液，再以料液比为1g：5ml～1g：10ml的比例将乙醇加入到下层沉淀中继续进行强电场提取和离心分离，连续提取3次，除去下层沉淀，合并上层提取液，将鹿茸活性物质提取液采用真空刮板式薄膜浓缩，浓缩条件为温度35～45℃，真空度为0.1～0.15mbar，得到鹿茸活性物质浓缩液；3)混合制膏，将缓冲剂、鹿茸活性物质浓缩液和混合浓缩液混合搅拌，搅拌温度控制在70～80℃，搅拌至液体凝膏后停止搅拌，待膏体冷却后可得到组合物。该制备方法能够极大的保留组合物中的能够改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生的因子，保证使用该制备方法制备的组合物效果极佳。
进一步的，上述1)步骤中蒸发浓缩温度控制在100～110℃。
进一步的，上述2)步骤中，乙醇浓度为60～65％。
以下结合实施例对本发明的特征和性能作进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供一种能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物，包括以下原料：10g龟胶、5g份黄连、2g份冰片、10g份川芎、20g鹿茸和10g大黄、80g缓冲剂、20g的壳聚糖、5g份杜仲和1g份马勃。
上述缓冲剂还包括4g蜂蜜和76g的水。
上述能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物的制备方法如下：
1)材料准备，将龟胶、黄连、冰片、川芎和大黄清洗干净后，放入薄膜蒸发器，在100℃下进行蒸发浓缩，得到混合浓缩液；
2)炮制鹿茸，用液氮和搅拌珠研磨法将鹿茸粉碎成粉末，以料液比为1g：5ml的比例分别加入鹿茸粉末和60％的乙醇，用强电场萃取25分钟，得到含有鹿茸活性物质萃取液，最后用低温离心机以3500r/min的速度离心7min，取上层提取液，再以料液比为1g：5ml的比例将60％的乙醇加入到下层沉淀中继续进行强电场提取和离心分离，连续提取3次，除去下层沉淀，合并上层提取液，将鹿茸活性物质提取液采用真空刮板式薄膜浓缩，浓缩条件为温度35℃，真空度为0.1mbar，得到鹿茸活性物质浓缩液；
3)混合制膏，将缓冲剂、鹿茸活性物质浓缩液和混合浓缩液混合搅拌，搅拌温度控制在70℃，搅拌至液体凝膏后停止搅拌，待膏体冷却后可得到组合物。
实施例2
本实施例提供一种能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物，包括以下重量份的组分：12g龟胶、6g黄连、2.5g冰片、10.5g川芎、22g鹿茸和12g大黄、84g缓冲剂、21g壳聚糖、6g杜仲、2g马勃。
缓冲剂还包括以下质量百分比的组分5g的蜂蜜和79g的水
上述能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物的制备方法如下：
2)材料准备，将龟胶、黄连、冰片、川芎和大黄清洗干净后，放入薄膜蒸发器，在100℃下进行蒸发浓缩，得到混合浓缩液；
2)炮制鹿茸，用液氮和搅拌珠研磨法将鹿茸粉碎成粉末，以料液比为1g：5ml的比例分别加入鹿茸粉末和60％的乙醇，用强电场萃取25分钟，得到含有鹿茸活性物质萃取液，最后用低温离心机以3500r/min的速度离心8min，取上层提取液，再以料液比为1g：5ml的比例将60％的乙醇加入到下层沉淀中继续进行强电场提取和离心分离，连续提取3次，除去下层沉淀，合并上层提取液，将鹿茸活性物质提取液采用真空刮板式薄膜浓缩，浓缩条件为温度35℃，真空度为0.1mbar，得到鹿茸活性物质浓缩液；
3)混合制膏，将缓冲剂、鹿茸活性物质浓缩液和混合浓缩液混合搅拌，搅拌温度控制在72℃，搅拌至液体凝膏后停止搅拌，待膏体冷却后可得到组合物。
实施例3
本实施例提供一种能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物，包括以下重量份的组分：14g份龟胶、7g黄连、3g份冰片、13g份川芎、24g鹿茸和14g份大黄、86g份缓冲剂、23g的壳聚糖、7g份杜仲和3g份马勃。
缓冲剂还包括以下质量百分比的组分6g的蜂蜜和80g的水
上述能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物的制备方法如下：
3)材料准备，将龟胶、黄连、冰片、川芎和大黄清洗干净后，放入薄膜蒸发器，在104℃下进行蒸发浓缩，得到混合浓缩液；
2)炮制鹿茸，用液氮和搅拌珠研磨法将鹿茸粉碎成粉末，以料液比为1g：5ml的比例分别加入鹿茸粉末和60％的乙醇，用强电场萃取30分钟，得到含有鹿茸活性物质萃取液，最后用低温离心机以3500r/min的速度离心8min，取上层提取液，再以料液比为1g：5ml的比例将60％的乙醇加入到下层沉淀中继续进行强电场提取和离心分离，连续提取3次，除去下层沉淀，合并上层提取液，将鹿茸活性物质提取液采用真空刮板式薄膜浓缩，浓缩条件为温度40℃，真空度为0.1mbar，得到鹿茸活性物质浓缩液；
3)混合制膏，将缓冲剂、鹿茸活性物质浓缩液和混合浓缩液混合搅拌，搅拌温度控制在76℃，搅拌至液体凝膏后停止搅拌，待膏体冷却后可得到组合物。
实施例4
本实施例提供一种能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物，包括以下重量份的组分：15g龟胶、8g份黄连、3.5g冰片、13.5g川芎、25g份鹿茸和15g大黄、90g缓冲剂、23.5g壳聚糖、7.5g份杜仲和3.5g份马勃。
缓冲剂还包括以下质量百分比的组分6.3g蜂蜜和83.7g水
上述能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物的制备方法如下：
4)材料准备，将龟胶、黄连、冰片、川芎和大黄清洗干净后，放入薄膜蒸发器，在108℃下进行蒸发浓缩，得到混合浓缩液；
2)炮制鹿茸，用液氮和搅拌珠研磨法将鹿茸粉碎成粉末，以料液比为1g：10ml的比例分别加入鹿茸粉末和65％的乙醇，用强电场萃取30分钟，得到含有鹿茸活性物质萃取液，最后用低温离心机以3500～4000r/min的速度离心9min，取上层提取液，再以料液比为1g：10ml的比例将65％的乙醇加入到下层沉淀中继续进行强电场提取和离心分离，连续提取3次，除去下层沉淀，合并上层提取液，将鹿茸活性物质提取液采用真空刮板式薄膜浓缩，浓缩条件为温度44℃，真空度为0.15mbar，得到鹿茸活性物质浓缩液；
3)混合制膏，将缓冲剂、鹿茸活性物质浓缩液和混合浓缩液混合搅拌，搅拌温度控制在75℃，搅拌至液体凝膏后停止搅拌，待膏体冷却后可得到组合物。
实施例5
本实施例提供一种能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物，包括以下重量份的组分：16g龟胶、8.5g黄连、4g份冰片、14g份川芎、26g鹿茸和16g大黄、94g缓冲剂、24g的壳聚糖、9g杜仲和4g马勃。
缓冲剂还包括以下质量百分比的组分7.5g的蜂蜜和86.5g水
上述能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物的制备方法如下：
5)材料准备，将龟胶、黄连、冰片、川芎和大黄清洗干净后，放入薄膜蒸发器，在109℃下进行蒸发浓缩，得到混合浓缩液；
2)炮制鹿茸，用液氮和搅拌珠研磨法将鹿茸粉碎成粉末，以料液比为1g：10ml的比例分别加入鹿茸粉末和65％的乙醇，用强电场萃取30分钟，得到含有鹿茸活性物质萃取液，最后用低温离心机以3500～4000r/min的速度离心9min，取上层提取液，再以料液比为1g：10ml的比例将65％的乙醇加入到下层沉淀中继续进行强电场提取和离心分离，连续提取3次，除去下层沉淀，合并上层提取液，将鹿茸活性物质提取液采用真空刮板式薄膜浓缩，浓缩条件为温度40℃，真空度为0.15mbar，得到鹿茸活性物质浓缩液；
3)混合制膏，将缓冲剂、鹿茸活性物质浓缩液和混合浓缩液混合搅拌，搅拌温度控制在78℃，搅拌至液体凝膏后停止搅拌，待膏体冷却后可得到组合物。
实施例6
本实施例提供一种能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物，包括以下重量份的组分：17g龟胶、9g黄连、4g份冰片、14.5g份川芎、27g鹿茸和17g份大黄、96g缓冲剂、24.5g的壳聚糖、9.5g杜仲和4.5g份马勃。
缓冲剂还包括以下质量百分比的组分7.6g蜂蜜和88.4g水
上述能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物的制备方法如下：
6)材料准备，将龟胶、黄连、冰片、川芎和大黄清洗干净后，放入薄膜蒸发器，在110℃下进行蒸发浓缩，得到混合浓缩液；
2)炮制鹿茸，用液氮和搅拌珠研磨法将鹿茸粉碎成粉末，以料液比为1g：10ml的比例分别加入鹿茸粉末和65％的乙醇，用强电场萃取34分钟，得到含有鹿茸活性物质萃取液，最后用低温离心机以4000r/min的速度离心10min，取上层提取液，再以料液比为1g：10ml的比例将65％的乙醇加入到下层沉淀中继续进行强电场提取和离心分离，连续提取3次，除去下层沉淀，合并上层提取液，将鹿茸活性物质提取液采用真空刮板式薄膜浓缩，浓缩条件为温度45℃，真空度为0.15mbar，得到鹿茸活性物质浓缩液；
3)混合制膏，将缓冲剂、鹿茸活性物质浓缩液和混合浓缩液混合搅拌，搅拌温度控制在80℃，搅拌至液体凝膏后停止搅拌，待膏体冷却后可得到组合物。
实施例7
本实施例提供一种能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物，包括以下重量份的组分：18g龟胶、9.5g份黄连、4g冰片、15g川芎、28g鹿茸和118g大黄、100g缓冲剂、25g壳聚糖、10g份杜仲和5g马勃。
缓冲剂还包括以下质量百分比的组分9g的蜂蜜和91g的水
上述能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物的制备方法如下：
7)材料准备，将龟胶、黄连、冰片、川芎和大黄清洗干净后，放入薄膜蒸发器，在110℃下进行蒸发浓缩，得到混合浓缩液；
2)炮制鹿茸，用液氮和搅拌珠研磨法将鹿茸粉碎成粉末，以料液比为1g：10ml的比例分别加入鹿茸粉末和65％的乙醇，用强电场萃取34分钟，得到含有鹿茸活性物质萃取液，最后用低温离心机以4000r/min的速度离心10min，取上层提取液，再以料液比为1g：10ml的比例将65％的乙醇加入到下层沉淀中继续进行强电场提取和离心分离，连续提取3次，除去下层沉淀，合并上层提取液，将鹿茸活性物质提取液采用真空刮板式薄膜浓缩，浓缩条件为温度45℃，真空度为0.15mbar，得到鹿茸活性物质浓缩液；
3)混合制膏，将缓冲剂、鹿茸活性物质浓缩液和混合浓缩液混合搅拌，搅拌温度控制在80℃，搅拌至液体凝膏后停止搅拌，待膏体冷却后可得到组合物。
实施例8
本实施例提供一种能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物，包括以下重量份的组分：20g龟胶、10g黄连、4g冰片、15g川芎、30g鹿茸和20g大黄、100g缓冲剂、25g的壳聚糖、10g杜仲进而5g马勃。
缓冲剂还包括以下质量百分比的组分10g的蜂蜜和90g的水
上述能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物的制备方法如下：
8)材料准备，将龟胶、黄连、冰片、川芎和大黄清洗干净后，放入薄膜蒸发器，在110℃下进行蒸发浓缩，得到混合浓缩液；
2)炮制鹿茸，用液氮和搅拌珠研磨法将鹿茸粉碎成粉末，以料液比为1g：10ml的比例分别加入鹿茸粉末和65％的乙醇，用强电场萃取35分钟，得到含有鹿茸活性物质萃取液，最后用低温离心机以4000r/min的速度离心10min，取上层提取液，再以料液比为1g：10ml的比例将65％的乙醇加入到下层沉淀中继续进行强电场提取和离心分离，连续提取3次，除去下层沉淀，合并上层提取液，将鹿茸活性物质提取液采用真空刮板式薄膜浓缩，浓缩条件为温度45℃，真空度为0.15mbar，得到鹿茸活性物质浓缩液；
3)混合制膏，将缓冲剂、鹿茸活性物质浓缩液和混合浓缩液混合搅拌，搅拌温度控制在80℃，搅拌至液体凝膏后停止搅拌，待膏体冷却后可得到组合物。
对比例
本对比例提供一种市购的能够促进皮肤胶原再生的祛皱、修复凹陷的面霜，备用。
试验例1
分别对实施例1、实施例3、实施例5、实施例7制备的组合物与对比例中市购的面霜进行感官评价，评价标准如表1所示：
表1感官评价评分表
选择70名志愿者，平均分成7组，每组10人，对实施例1、实施例3、实施例5、实施例7、实施例9、实施例11制备的组合物和对比例中的面霜根据上表中的评价标准进行感官评分，评价结果如表2所示：
表2实施例1、实施例3、实施例5、实施例7和对比例的面霜感官评价结果
通过上表可以观察到，由实施例1、实施例3、实施例5、实施例7与对比例提供的面霜的评分结果可以看出，使用实施例1、实施例3、实施例5和实施例7提供的组合物后的皮肤色泽、皮肤顺滑性、组合物的气味、是否有不良反应均优于对比例提供的面霜。由实施例1、实施例3、实施例5和实施例7制得的组合物对皮肤有明显的美白、爽肤、修复凹陷和祛皱功效，且基本不会出现不良反应。
试验例2
对实施例2、实施例4、实施例6、实施例8和对比例提供的面霜测试方法如下：
选取60只去毛小鼠，将小鼠平均分成6组，每组10只，分别用实施例2、实施例4、实施例6、实施例8和对比例提供的面霜对小鼠的相同部位进行涂抹，涂抹量相同，涂抹面积相同。同时，设置空白对照组，对空白对照组的小鼠涂抹生理盐水，涂抹量相同，涂抹面积相同。涂抹30天以后，每组随机抽取5只小鼠，取相涂抹处同面皮肤进行皮肤胶原蛋白含量测试，并取平均值，测试结果中设定空白对照组的皮肤胶原蛋白含量平均值为1。测试结果如下：
表3实施例2、实施例4、实施例6、实施例8、实施例10和对比例及空白对照组中胶原蛋白含量
通过上表观察可知，采用本发明实施例2、实施例4、实施例6和实施例8提供的组合物涂抹小鼠皮肤后，胶原蛋白含量平均值均高于空白对照组和对比例中小鼠的胶原蛋白含量平均值。与空白对照组中小鼠的胶原蛋白含量平均值相比较，实施例2、实施例4实施例6、实施例8和实施例10提供的组合物涂抹小鼠后的胶原蛋白含量平均值有明显提高，而对比例中小鼠的胶原蛋白含量平均值提高不明显。从以上对比结果可知，本发明提供的组合物明显提高了胶原蛋白含量的效果，具有明显的促进小鼠皮肤胶原蛋白再生的效果。
综上所述，本发明实施例的一种能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物，包括以下重量份的组分：10～20份龟胶、5～10份黄连、2～4份冰片、10～15份川芎、20～30份鹿茸和10～20份大黄和80～100份缓冲剂。上述龟胶又称龟甲胶具有滋阴、补血，止血的功效，龟胶中含有丰富的胶原蛋白，能够在胶原再生中提供各种基础物质。同时龟胶中含有十四酸甾醇酯，其可以激活毛囊干细胞中的wnt/β-catenin信号通路参与皮肤创面的修复，通过调控毛囊干细胞中的wnt/β-catenin信号通路，促进毛囊干细胞增殖并参与皮肤组织重建，加快急性创面的修复能够有效的促进面部皮肤的自体胶原再生。因此，龟胶中的有效成分能加快胶原纤维的形成，促进组织外基质的重建，提高面部凹陷和皱纹修复的质量。上述黄连含有盐酸小檗碱，盐酸小檗碱能够起到抑菌作用，能够保持面部皮肤的干净，其与上述龟胶中的十四酸甾醇酯配合能够有效的提升面部凹陷和修复时出现细菌感染问题，进而提升皮肤的胶原再生速度。上述大黄中含有的大黄酚，是一种能够促进成纤维细胞增殖的物质。成纤维细胞参与修复的整个过程，其分裂、增殖、迁移、合成与分泌细胞外基质，形成结缔组织使创伤或皮肤凹陷修复。细胞外基质中，胶原是最为重要的有形成分，目前已经发现的胶原至少有10多种类型，其中ⅰ型胶原、ⅲ型胶原是最主要成分，是成纤维细胞修复组织创伤过程中的主要角色。研究发现，胶原纤维可以激活盘状结构域受体(ddr)2，再通过作用于基质金属蛋白酶研究发现，胶原纤维可以激活盘状结构域受体(ddr)2，再通过作用于基质金属蛋白酶(mmps)降解胶原参与胶原的合成与分泌及细胞外基质重构。大黄酚促使成纤维细胞的增殖活性增加则说明细胞的数量增加较快，有利于产生较多的细胞外基质，有利于组织创伤的修复。结合上述大黄酚对ⅰ型胶原、ⅲ型胶原表达的调控作用，大黄酚虽然抑制成纤维细胞ⅰ型胶原的表达，但是可以增加成纤维细胞的增殖活性，从而促进组织创伤的修复。同时大黄酚促进ⅲ型胶原的表达，则可能通过该机制促进皮肤胶原再生的同时，减少瘢痕的形成。因此，大黄与龟胶的配合能够进一步的改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生。上述冰片含有右旋龙脑，右旋龙脑与上述盐酸小檗碱和十四酸甾醇酯结合使用，能够提升皮肤的胶原再生能力，促进面部皮肤凹陷和皱纹的修复。其中，冰片中的冰片酯能够作为载体承载上述龟胶中有效改善皮自体胶原再生的物质，在进入皮肤深层后将十四酸甾醇酯等有效物质释放，有效的克服看挥发性问题和冰片不能与其他药物做成组合物的缺点，能够极大的提升龟胶的作用效果。上述川芎主要含苯酞及其二聚体、生物碱、酚酸、多糖、神经酰胺和脑苷脂等多种类型的化学成分，其能够有效的促进ⅰ型胶原蛋白的生成，而ⅰ型胶原蛋白作为面部细胞分泌生成的重要原胶原，其能够有效的促进面部凹陷和皱纹的修复。川芎与龟胶配伍，能够有效的提升龟胶和川芎对皮肤胶原再生的促进能力，进而达到美容皮肤的效果。上述鹿茸鹿茸中含有大量的胶原蛋白，其中ⅰ型胶原蛋白约占90％，ⅰ型胶原蛋白已被证实作为医用生物材料对缺损组织修复、再生和重建具有重要意义，是促进胶原再生的有效物质。鹿茸中含有磷脂、糖脂、胶脂、激素、脂肪酸、氨基酸、蛋白质及钙、磷、镁、钠等成分，其中氨基酸成分占总成分的一半以上。古代医家认为，鹿之精气全在于角，而茸为角之嫩芽，气体全而未发泄，故补阳益血之力最盛。明代李时珍在《本草纲目》上称鹿茸“善于补肾壮阳，生精益血，补髓健骨”。鹿茸中含有大量的胶原蛋白，其中ⅰ型胶原蛋白约占90％，已被证实作为医用生物材料对缺损组织修复、再生和重建具有重要意义。其中，i型胶原蛋白是人体中最丰富的胶原蛋白。它形成大的嗜酸性纤维，称为胶原纤维。胶原纤维是主要含有胶原蛋白，氨基酸有甘氨酸、脯氨酸和羟脯氨酸等的纤维组合物。胶原纤维是三种纤维中分布最广泛，含量最多的一种纤维。广泛分布于各脏器内，在皮肤、巩膜和肌腱最为丰富。胶原纤维染色主要用于和肌纤维的鉴别。胶原纤维是皮肤中的主要成分，占皮肤全部纤维质量的95％-98％。新鲜的胶原纤维呈白色，故又称白纤维。在he染色标本中，胶原纤维被染成粉红色，较粗大，直径0.5-20um，成束分布，排列紧密，交织成网。因此，鹿茸中的i型胶原蛋白能够有效的促进皮肤胶原蛋白的再生。此外鹿茸多肽增强超氧化物歧化酶活性，清除体内过多的氧自由基的作用，在延缓衰老方面有显著的功效。龟胶和鹿茸配伍后，氧化活性会明显提升，二者具有协同作用。两者配伍能够进一步的提升皮肤胶原再生能力和人体抗氧化能力。因此，该能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物能够极大的提升面部凹陷皱纹处的自体胶原再生能力，使皮肤凹陷和皱纹得到极大的改善。本发明还提供一种能改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生组合物的制备方法，其包括：1)材料准备，将龟胶、黄连、冰片、川芎和大黄清洗干净后，放入薄膜蒸发器，进行蒸发浓缩，得到混合浓缩液；2)炮制鹿茸，用液氮和搅拌珠研磨法将鹿茸粉碎成粉末，以料液比为1g：5ml～1g：10ml的比例分别加入鹿茸粉末和乙醇，用强电场萃取25～35分钟，得到含有鹿茸活性物质萃取液，最后用低温离心机以3500～4000r/min的速度离心7～10min，取上层提取液，再以料液比为1g：5ml～1g：10ml的比例将乙醇加入到下层沉淀中继续进行强电场提取和离心分离，连续提取3次，除去下层沉淀，合并上层提取液，将鹿茸活性物质提取液采用真空刮板式薄膜浓缩，浓缩条件为温度35～45℃，真空度为0.1～0.15mbar，得到鹿茸活性物质浓缩液；3)混合制膏，将缓冲剂、鹿茸活性物质浓缩液和混合浓缩液混合搅拌，搅拌温度控制在70～80℃，搅拌至液体凝膏后停止搅拌，待膏体冷却后可得到组合物。该制备方法能够极大的保留组合物中的能够改善面部凹陷皱纹的自体胶原再生的因子，保证使用该制备方法制备的组合物效果极佳。
以上所描述的实施例是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。本发明的实施例的详细描述并非旨在限制要求保护的本发明的范围，而是仅仅表示本发明的选定实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。