一种用于水产养殖动物疾病防治的杀菌组合物及其应用的制作方法

1.本发明涉及水产养殖动物疾病防治领域，具体涉及一种用于水产养殖动物疾病防治的杀菌组合物及其应用。


背景技术：

2.副溶血弧菌是一种广泛分布于海洋与盐湖中的嗜盐性细菌，是夏季食物中毒最常见的病原菌之一，近几年副溶血性弧菌导致的食源性疾病一直是我国微生物食源性疾病的首要病因，严重威胁人们的身体健康。同时弧菌病也是海水养殖业中的常见疾病之一，副溶血弧菌可感染多种鱼类和虾类并造成大量死亡，造成巨大经济损失。近年来，海水鱼虾类的集约化养殖，特别是网箱养殖成为主要海水养殖品种的养殖模式，弧菌病的危害日益严重，所以鱼虾养殖业中对弧菌病的防治尤为重要。
3.化学药剂是防治作物病害的重要手段，而利用不同作用机理的农药有效成分进行复配是目前研制农药新产品和防治抗性病虫害的一种有效快捷的方式。不同农药有效成分进行复配后，会表现出三种作用类型：相加作用、增效作用和拮抗作用。通常，只有通过大量的试验才能得知不同农药有效成分复配后的作用类型。如授权公告号为cn 102919248b的中国发明专利，公开了弧菌属细菌杀菌剂，它由以下重量百分比的原料制成：二甲胺四环素10-20％、万古霉素5-15％、5,6,7-三羟基黄酮15-25％和水余量。上述的弧菌属细菌杀菌剂设计合理，将二甲胺四环素、万古霉素和5,6,7-三羟基黄酮合理的复配在一起，具有很强的增效效果，对弧菌病防治效果好，防治率可达到95％以上。
4.但是传统的弧菌属细菌杀菌剂的组分都是抗生素类物质，用量较大，长期在饲料中添加抗生素所引起动物内源性感染，药物残留，产生耐药菌珠，使水产养殖动物对于弧菌病的防治效果越来越差，因此急需提供一种新的杀菌组合物以满足市场需求。


技术实现要素：

5.本发明的目的在于，提供一种用于水产养殖动物疾病防治的杀菌组合物及其应用，该组合物具有提高药效、减少污染、降低成本的效果，能有效解决困扰对虾养殖多年的弧菌病难以有效防控的问题。
6.为达到上述技术目的，本技术采用以下技术方案：
7.第一方面，本技术提供一种用于水产养殖动物疾病防治的杀菌组合物，至少包括如下组分：溴硝醇、聚六亚甲基胍盐酸盐。
8.优选的，所述溴硝醇与所述聚六亚甲基胍盐酸盐的质量比为10:1-1:10。
9.优选的，所述溴硝醇与所述聚六亚甲基胍盐酸盐的质量比为5:1-1：1。
10.优选的，所述溴硝醇与所述聚六亚甲基胍盐酸盐的质量比为2:1。
11.第二方面，本技术提供一种包含杀菌组合物的杀菌剂，所述杀菌组合物占杀菌剂总质量的30-60％。
12.优选的，还包括助剂。
13.优选的，所述助剂包括崩解剂、粘接剂、乳化剂、填料中的混合物。
14.第三方面，本技术还提供一种杀菌组合物在制备防治水产养殖细菌性疾病中的应用。
15.第四方面，本技术还提供一种杀菌组合物在制备防治副溶血性弧菌疾病药物中的应用。
16.第五方面，本技术还提供一种杀菌组合物在制备防治同时防治细菌性疾病和真菌性疾病药物中的应用。
17.本发明的有益效果是：本发明的复配组合物，可起到优势互补，合理地混配，配伍性好，既延长了农药使用寿命，又延缓病原菌抗药性的产生，复配组合物的杀菌效果较其单剂有明显的提高；该组合物杀菌作用强，对水产养殖动物细菌性病害尤其副溶血弧菌有很好的防治效果；两种主效成分无明显的交互抗性，复配制剂对副溶血弧菌的抑制作用具有明显的增效作用，同时，还可防治养殖动物真菌性疾病；有效降低了使用成本；毒副作用小，对环境友好，对养殖动物安全。
具体实施方式
18.下面将结合本发明实施例，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，均属于本发明保护的范围。
19.副溶血弧菌是一种嗜盐性的革兰氏阴性菌，棒状、弧状、卵圆状无芽孢菌，属于弧菌属，可以发酵葡萄糖，不产气，不能利用蔗糖和乳糖，不产生硫化氢，氧化酶试验呈现阳性，赖氨酸脱缩酶和鸟氨酸脱缩酶试验呈现阳性，二精氨酸脱缩酶试验呈现阴性。其主要的栖息地在海水中。如果食用了遭此菌污染的海鲜，会引发食物中毒。副溶血弧菌是一种常见的水产养殖动物的病原菌，对虾养殖过程中经常受到该菌危害，引起对虾肠炎、白便等，造成养殖动物死亡及养殖失败。
20.聚六亚甲基胍盐酸盐是阳离子聚合物，其抗菌作用主要是通过溶解脂质，改变细菌细胞膜的通透性，使菌体内的代谢发生障碍而抗菌；抗菌谱较广，对革兰氏阳性和阴性菌及霉菌均有效力。易溶于水，水溶液无毒、无色、无嗅；不燃、不爆；有极强的杀灭细菌的能力，安全无毒，温和无刺激，而且广谱、高效、无耐药性；对环境无污染，对物体无腐蚀。因此，聚六亚甲基胍盐酸盐被广泛用于医学消毒、皮肤创面消毒、家庭消毒、公共场所消毒及日化与纺织行业消毒等。虽然聚六亚甲基胍盐酸盐(phmg)消毒剂对细菌、真菌及部分病毒均具有良好的杀菌效果，但由于单方水溶液受诸多因素影响，目前聚六亚甲基胍盐酸盐(phmg)作为医用消毒剂与其他增效成分进行复配。
21.基于此，创立了本技术。
22.本技术的实施例提供一种用于水产养殖动物疾病防治的杀菌组合物，包括质量份数如下的组分：溴硝醇、聚六亚甲基胍盐酸盐。
23.溴硝醇即2-溴-2-硝基-1,3-丙二醇，俗称布罗波尔(bronopol)、皮乐宝、拌棉醇，分子式为c3h6brno4。常温下为白色至淡黄色结晶性粉末，无臭、无味，易溶于水、乙醇、丙二醇，难溶于氯仿、丙酮、苯等。主要作为防霉、防腐和杀真菌剂，用在农业、化妆品、造纸、涂料
等领域，在工业水处理方面也有少量应用。目前未见溴硝醇在水产养殖动物疾病防治方面的应用报道。
24.发明人意外的发现，由溴硝醇和聚六亚甲基胍盐酸盐复配的杀菌组合物对水产细菌性疾病有很好的防治作用，尤其对引起对虾病变的副溶血弧菌的抑制杀灭作用具有显著的增效作用；同时，在试验过程中发现该杀菌组合物对水产真菌性病害如水霉菌也具有很好的抑制和杀灭作用，可有效防治水产真菌性病害，利用两种种活性成分的不同作用机理，可起到优势互补，合理地混配，实现对副溶血弧菌的抑制。
25.在一些实施例中，所述溴硝醇与所述聚六亚甲基胍盐酸盐的质量比为10:1-1:10。
26.在一些实施例中，所述溴硝醇与所述聚六亚甲基胍盐酸盐的质量比为5:1-1：1。
27.在一些实施例中，所述溴硝醇与所述聚六亚甲基胍盐酸盐的质量比为2:1。
28.本技术的实施例还提供一种包含杀菌组合物的杀菌剂，杀菌组合物占杀菌剂总质量的30-60％，还包括20-30％的助剂，余料为水。
29.在一些实施例中，助剂包括崩解剂、粘接剂、乳化剂、填料中的混合物，且不排除加入其他常用类型的助剂，如乳化剂、增稠剂、分散剂、润湿剂等。
30.在一些实施例中，崩解剂包括膨润土、尿素、硫酸铵、氯化铝、柠檬酸、丁二酸、碳酸氢钠中的一种或多种。
31.在一些实施例中，粘接剂包括乙基纤维素、聚乙烯醇、淀粉中的一种或几种。
32.在一些实施例中，乳化剂包括op-10、脂肪酸聚氧乙烯醚、烷基酚聚氧乙烯醚磺基琥珀酸酯、苯乙烯基苯酚聚氧乙烯醚、壬基酚聚氧乙烯醚、蓖麻油聚氧乙烯醚、脂肪酸聚氧乙烯基酯、聚氧乙烯脂肪醇醚中的一种或多种。
33.在一些实施例中，填料包括轻质碳酸钙、高岭土、膨润土、硅藻土、泥土粉、尿素、蒙脱石的一种或多种。
34.本技术的实施例还提供一种杀菌剂在水产养殖动物疾病防治中的应用，其应用方式可以将杀菌剂制备成可湿性粉剂、水分散粒剂、悬浮剂等形式投入至水产养殖动物的养殖环境中。
35.本技术的实施例还提供一种杀菌组合物在制备防治水产养殖细菌性疾病中的应用。
36.本技术的实施例还提供一种杀菌组合物在制备防治副溶血性弧菌疾病药物中的应用。
37.本技术的实施例还提供一种杀菌组合物在制备防治同时防治细菌性疾病和真菌性疾病药物中的应用。
38.实施例1
39.一种用于水产养殖动物疾病防治的杀菌组合物，按照如下质量份数配比：
[0040][0041]
本发明的杀菌组合物的制备为上述重量份的组分按照常规方式混合均匀即可，以下同。
[0042]
实施例2
[0043]
一种用于水产养殖动物疾病防治的杀菌组合物，按照如下质量份数配比：
[0044][0045][0046]
实施例3
[0047]
一种用于水产养殖动物疾病防治的杀菌组合物，按照如下质量份数配比：
[0048][0049]
实施例4
[0050]
一种用于水产养殖动物疾病防治的杀菌组合物，按照如下质量份数配比：
[0051][0052]
实施例5
[0053]
一种用于水产养殖动物疾病防治的杀菌组合物，按照如下质量份数配比：
[0054][0055]
实施例6
[0056]
一种用于水产养殖动物疾病防治的杀菌组合物，按照如下质量份数配比：
[0057][0058][0059]
实施例7
[0060]
一种用于水产养殖动物疾病防治的杀菌组合物，按照如下质量份数配比：
[0061][0062]
实施例8
[0063]
一种用于水产养殖动物疾病防治的杀菌组合物，按照如下质量份数配比：
[0064][0065]
实施例9
[0066]
一种用于水产养殖动物疾病防治的杀菌组合物，按照如下质量份数配比：
[0067][0068]
实施例10
[0069]
一种用于水产养殖动物疾病防治的杀菌组合物，按照如下质量份数配比：
[0070][0071]
测试例
[0072]
对实施例1-10中的杀菌组合物进行副溶血弧菌的抑菌实验。
[0073]
抑菌试验方法：采用打孔抑菌圈直径法测定各杀菌剂对弧菌的生长抑制作用，具体步骤如下：
[0074]
菌种的活化及菌液的制备：将冷冻保存的菌种划线接种至平板培养基，37℃培养24h；挑单菌落接种至100ml液体培养基，37℃、200r/min摇床培养过夜，菌液备用。
[0075]
试验平板的制备：采用倾注平板法，先往已灭菌的平板中接种1ml菌液，然后倾注约20ml已冷却至50℃左右的平板培养基，混合均匀，水平静置凝固后备用。
[0076]
用灭菌打孔器(φ6mm)打孔，加入0.2ml待测样品溶液，置于37℃恒温培养箱内培养24h后，用十字交叉法测量抑菌圈直径，结果如表1所示。
[0077]
根据上述方法测出各单剂及混剂的抑菌圈直径φ，并按照下述公式计算毒力指数，以溴硝醇为a,聚六亚甲基胍盐酸盐为b，将a的毒力指数(tia)设为100，然后按下述公式分别求出b的毒力指数(tib)、混剂的实际毒力指数(ati)和理论毒力指数(tti)，再计算共毒系数(ctc)，结果如表1所示。
[0078]
b的毒力指数(tib)＝b的φ/a的φ
×
l00
[0079]
混配制剂的实测毒力指数ati＝标准药剂a的φ/供试药剂φ
×
100
[0080]
混配制剂的理论毒力指数tti＝σ(某药的毒力指数ati
×
在混剂中该药有效成分的百分率)。
[0081]
混配制剂的共毒系数ctc＝混配制剂实际毒力指数ati/混配制剂的理论毒力指数tti
×
100
[0082]
共毒系数ctc大于120时为增效作用，小于80时为拮抗作用，介于80～120之间时为加和作用。
[0083]
表1杀菌剂的抑菌能力测试结果
[0084][0085]
从上述数据可以看出，当溴硝醇与聚六亚甲基胍盐酸盐(phmg)以不同比例复配时，配方的共毒系数(ctc)均大于120，表明复配制剂对副溶血弧菌的防治具有明显的增效作用，其中溴硝醇与聚六亚甲基胍盐酸盐(phmg)在4:1～1:2之间的增效最为显著，最优配比为2:1；可见溴硝醇与聚六亚甲基胍盐酸盐(phmg)复配制剂可成为防治弧菌病的理想药剂，两种有效成分复配有很好的增效作用。
[0086]
需要说明的是，以上各实施例均属于同一发明构思，各实施例的描述各有侧重，在个别实施例中描述未详尽之处，可参考其他实施例中的描述。
[0087]
以上实施例仅表达了本发明的实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。