鸡胆粉在制备解酒护肝药物中的用途

1.本发明属于医药技术领域，具体涉及鸡胆粉在制备解酒护肝药物中的用途。


背景技术：

2.鸡(gallus domestica)胆汁是鸟纲鸡型目雉科家禽鸡的胆囊汁，其原汁呈墨绿色，粘性、易溶于水，性寒，味苦，入肝经，具有清热、解毒、止咳、平喘、消炎、利胆、明目等功效。鸡胆汁含有多种成分，主要含鹅去氧胆酸(cdca)、牛磺酸(tca)、甘氨酸(gca)、胆酸(ca)、去氧胆酸(dca)、胆绿素、粘蛋白、无机盐等成分。《名医别录》载：鸡胆“主疗目不明，肌疮”。《本草纲目》亦载其：“灯心蘸点胎赤眼甚良，水化揉痔疮亦效。”现代药理研究表明，鸡胆能促进胆汁分泌，促进胆汁排入十二指肠，改变胆汁中胆汁酸的构成，使胆石形成率降低，使已形成的胆石逐渐溶解，缩小，以至消失；可乳化不溶于水的脂肪，利于胰脂肪酶对脂肪的消化和脂溶性维生素的吸收；有镇咳、抗高血压作用；对多种致病菌有明显抗菌作用。
3.该鸡胆粉(cbp)的制作步骤简要表述为：
①
将新鲜鸡胆进行酶解；
②
酶解后的鸡胆用乙醇进行蛋白质变性沉淀；
③
过滤沉淀物并进行真空干燥，即可得鸡胆粉。和原鸡胆中的成分含量相比较，该鸡胆粉中的鹅去氧胆酸含量降低。
4.酒精性肝病(alcoholic liver disease，ald)是由于长期大量饮酒导致的肝脏疾病。饮酒后，酒精会通过肝脏代谢，经乙醇脱氢酶转化为乙醛，再经乙醛脱氢酶转化为乙酸，最后分解为二氧化碳和水排出体外。人体摄入的c2h6o主要经肝脏代谢，对肝细胞可产生氧化损伤，其损伤肝细胞的机制是c2h6o代谢过程中产生的超氧离子(o
2-)、过氧化氢(h2o2)、羟基自由基(oh-)等活性氧(ros)攻击细胞膜脂质、蛋白和核酸，使细胞处于氧化应激状态，损害细胞结构与功能。
5.目前国内外对鸡胆汁的研究甚少，对于鸡胆粉在解酒护肝方面的作用并未有过研究，本发明的重要意义就在于发现了鸡胆粉具有解酒护肝的医药新用途。


技术实现要素：

6.本发明的目的在于提出鸡胆粉在制备解酒护肝药物方面的新用途。
7.本发明的另一目的是提供鸡胆粉在制备用于预防或者治疗酒精性肝损伤的保健品的用途。
8.本发明提供一种解酒护肝药物的制备方法，以鸡胆粉作为有效成分、加入药用辅料，制得药物。
9.在本发明的一种实施方式中，所述药用辅料包括如下任意一种或多种：溶剂、抛射剂、增溶剂、助溶剂、乳化剂、着色剂、黏合剂、崩解剂、填充剂、润滑剂、润湿剂、渗透压调节剂、稳定剂、助流剂、矫味剂、防腐剂、助悬剂、包衣材料、芳香剂、抗黏合剂、整合剂、渗透促进剂、ph值调节剂、缓冲剂、增塑剂、表面活性剂、发泡剂、消泡剂、增稠剂、包合剂、保湿剂、絮凝剂与反絮凝剂、助滤剂以及释放阻滞剂。
10.在本发明的一种实施方式中，所述方法还包括制成如下任意一种剂型：注射液、注
射用冻干粉针、混悬剂、植入剂、栓塞剂、胶囊剂、片剂、丸剂和口服液。
11.在本发明的一种实施方式中，还包括加入其他有效组分、与鸡胆粉进行联用；其他有效组分包括如下任意一种或多种：c族维生素、b族维生素等。
12.本发明的有益效果在于：
13.本发明通过动物实验，采取与正常人饮酒途径类似的灌胃注射，对小鼠进行酒精性肝损伤造模，以小鼠翻正消失为检验标准，每次灌胃结束，记录小鼠的醉酒时间和醒酒时间，从而证明了鸡胆粉具有显著的解酒作用，最后通过检测小鼠血清中谷丙转氨酶(alt)和谷草转氨酶(ast)指标及肝组织中乙醇脱氢酶(adh)和乙醛脱氢酶(aldh)等指标来证明鸡胆粉对酒精肝小鼠具有优异的护肝作用。
附图说明
14.图1中六组分别为空白对照组(control)，模型组(红星二锅头，c2h5oh)，阳性对照组(海王金樽片，agb)，鸡胆粉低剂量组(l-cbp)，鸡胆粉中剂量组(m-cbp)和鸡胆粉高剂量组(h-cbp)的肝重比结果对比图。
15.图2中分别为造模后小鼠的alt，ast，adh，aldh水平对比图。
16.附图中所有数据以均数
±
标准差表示，应用spss 23.0软件进行单因素方差分析，以p《0.05表示差异有统计学意义，其中*p《0.05，**p《0.01，***p《0.001；#p《0.05，##p《0.01，###p《0.001。
具体实施方式
17.下面结合附图对本发明提供的具体实施方式作详细说明。
18.实施例1：鸡胆粉的解酒作用
19.1.材料
20.试药与试剂：鸡胆粉(山东白羽食品有限公司生产)；海王金樽片(海王健康科技发展有限公司生产)；红星二锅头(乙醇含量为56％，北京红星股份有限公司生产)。
21.实验动物：spf级昆明种雄性小鼠(n＝78)，20
±
2g，来源于北京维通利华实验动物技术有限公司，本次动物实验全程在江南大学实验动物中心进行。
22.2.实验方法
23.第一阶段：适应期
24.实验前将78只小鼠共18笼进行分笼，对其中60只小鼠每5只一笼共12笼进行分笼，对另外18只小鼠每3只一笼共6笼进行分笼，并按spf级饲养标准先适应性喂养1周，让小鼠自由摄食普通饲料，自由饮水，对笼盒进行编号。
25.第二阶段：预实验
26.对其中60只小鼠灌胃56
°
红星二锅头，灌胃剂量为0.10ml/10g，连续灌胃1周；对另外18只小鼠随机分为3组，各组分别给予0.12ml/10g，0.14ml/10g，0.16ml/10g的56
°
红星二锅头灌胃，灌胃1周，观察醉酒数量和死亡数量，如表1所示，确定小鼠最适醉酒浓度。醉酒的指标为翻正反射消失，记录给药时间、翻正反射消失时间，翻正反射恢复时间，醉酒潜伏期和醉酒时间。其中，翻正反射消失时间减去给药时间为醉酒潜伏期；翻正反射恢复时间减去翻正消失时间为醉酒时间。最后一次灌胃1h后对该18只小鼠进行co2安乐死处置。
27.由表1可知，小鼠最适醉酒浓度为0.14ml/10g。
28.表1酒精浓度对小鼠醉酒的影响
[0029][0030]
第三阶段：实验期
[0031]
将海王金樽片研磨成粉后配成1g/ml的混悬液，鸡胆粉同理。除空白组外，每天给药30min后再对其他50只小鼠灌胃56
°
红星二锅头，灌胃剂量为小鼠最适醉酒浓度0.14ml/10g，按照表2的实验分组，根据小鼠相应的体重(body weight，bw)连续15天进行灌胃。
[0032]
表2实验分组
[0033][0034][0035]
3.结果
[0036]
由表3可知，与模型组相比，鸡胆粉中剂量组和鸡胆粉高剂量组能显著延长动物的醉酒潜伏期(p《0.05或p《0.01)，有效降低动物的醉酒时间(p《0.05或p《0.01)。这说明鸡胆粉对昆明小鼠显示出显著的解酒作用并具有一定的量效关系。
[0037]
表3鸡肝粉对小鼠醉酒的预防作用
[0038][0039]
注：与模型组相比，a:p《0.05，b:p《0.01。
[0040]
实施例2：鸡胆粉的护肝作用
[0041]
1.材料
[0042]
试药与试剂：鸡胆粉(山东白羽食品有限公司生产)；海王金樽片(海王健康科技发展有限公司生产)；红星二锅头(乙醇含量为56％，北京红星股份有限公司生产)。
[0043]
实验动物：spf级昆明种雄性小鼠(n＝78)，20
±
2g，来源于北京维通利华实验动物技术有限公司，本次动物实验全程在江南大学实验动物中心进行。
[0044]
2.实验方法
[0045]
实验内容和步骤同上述实施例1，结束时对小鼠采用浓度为1％的异氟烷对小鼠进行吸入式麻醉，然后摘眼球取血，血生化学检查(alt、ast)等指标，取血后脱颈椎处死，取小鼠肝脏，计算肝脏/体重比，测定肝组织(adh、aldh)等指标。
[0046]
3.结果
[0047]
如图2结果显示，与空白组相比，模型组小鼠血清中的alt活性和ast活性显著升高(p《0.01或p《0.001)，模型组小鼠肝组织中的adh活性和aldh活性也显著升高(p《0.01或p《0.001)，模型组小鼠肝重比较空白组也显著升高(p《0.001)，这说明昆明小鼠的酒精性肝损伤模型成立。
[0048]
与模型组相比，鸡胆粉各剂量组和海王金樽组均能显著降低小鼠血清中alt活性(p《0.05或p《0.01或p《0.001)；与模型组相比，鸡胆粉中、高剂量组和海王金樽组均能显著降低小鼠血清中ast活性(p《0.05或p《0.01或p《0.001)，鸡胆粉低剂量组对小鼠血清中ast活性有降低趋势，但与模型组比较无显著性差异(p》0.05)；与模型组相比，鸡胆粉各剂量组和海王金樽组均能显著降低小鼠肝组织中adh活性(p《0.01或p《0.001)；与模型组相比，鸡胆粉各剂量组和海王金樽组均能显著降低小鼠肝组织中aldh活性(p《0.01或p《0.001)；与模型组相比，鸡胆粉各剂量组和海王金樽组小鼠肝重比明显降低(p《0.05或p《0.001)。具体结果如表4所示。
[0049]
表4
[0050]
组别肝重比alt水平ast水平adh水平aldh水平空白组4.42
±
0.26102.00
±
3.4690.35
±
4.265.28
±
0.190.54
±
0.05模型组5.48
±
0.26121.82
±
3.85115.53
±
7.497.00
±
0.170.74
±
0.03海王金樽对照组4.72
±
0.23c109.87
±
1.91c101.42
±
6.13c5.76
±
0.32c0.55
±
0.03c鸡胆粉低剂量组5.13
±
0.26a118.25
±
2.04a109.72
±
2.036.32
±
0.14b0.61
±
0.02b鸡胆粉中剂量组4.85
±
0.33c110.33
±
2.96b107.7
±
5.80a6.13
±
0.19b0.57
±
0.03c鸡胆粉高剂量组4.81
±
0.20c108.63
±
1.55c104.85
±
7.50b5.69
±
0.22c0.55
±
0.03c[0051]
注：与模型组相比较，a:p《0.05，b:p《0.01，c:p《0.001。
[0052]
以上结果表明，鸡胆粉对酒精性肝损伤小鼠具有保护作用，即鸡胆粉具有护肝作用。