一种胺碘酮的新应用方法与流程

1.本发明涉及胺碘酮应用技术领域，具体为一种胺碘酮的新应用方法。


背景技术：

2.胺碘酮是一种抗心律失常药物，广泛应用于临床，其主要用于治疗室性心率失常和心房颤动，其副作用为肺纤维化，作用机理不明。在分子水平上用胺碘酮诱导肺纤维化有广泛报道，但未有使用胺碘酮用于肺纤维化动物模型的报道。
3.随着国内空气污染程度的加重，污染物中的颗粒直接进入肺部，对肺泡和血管内皮造成缓慢持续的的伤害，诱发肺纤维化的产生。肺纤维化是一种原因不明的弥漫性肺部疾病，最终将导致肺脏结构的和功能的严重破坏。由于肺纤维化的发病机理尚不明确，因此探索肺纤维化的动物模型，是开发治疗药物的关键。
4.肺纤维化动物模型必须具有能复制典型普通型间质性肺炎的组织学特征，动物模型的肺纤维化具有持续和不可逆性，经济成本底、模型可重复、成模时间短的特点。目前有许多动物可作为试验肺纤维化模型载体，包括小鼠、大鼠、仓鼠、兔子、狗和非人灵长类动物等，但最常用的是c57bl/6小鼠。
5.迄今为止，有许多方法用于诱导实验动物肺纤维化，包括化学药物法(博来霉素、二氧化硅、异硫氰酸荧光素)、放射线和基因诱导法(应用转基因系统或病毒载体转导特殊基因表达)等。但每一种方法都存在缺陷和不足，主要局限于所诱导肺纤维化模型缺少普通型间质性肺炎的组织学特征和方法技术经济成本昂贵，致使其无法推广使用。例如，二氧化硅雾化吸入、异硫氰酸荧光素气管内给药、放射线照射等方法诱导肺纤维化模型均缺少寻常型间质性肺炎特征，二氧化硅雾化吸入模型、转基因系统或病毒载体转导特殊基因表达模型技术要求高，经济成本高。
6.博来霉素价格相对低廉、获取途径便利、可重复性强，成为目前最常用的诱导肺纤维化的药物。c57bl/6小鼠对博来霉素最敏感，是目前最常用的肺纤维化实验动物。博来霉素给药途径包括腹腔内注射、静脉注射、皮下注射和气管内滴注，目前最常用气管内滴注，以单剂量滴注最常用。但有研究表明单次气管内滴注博来霉素药物分布不均匀，缺少典型寻常型间质性肺炎特征，病灶主要分布于肺门及支气管周围，与特发性肺间质纤维化病灶主要分布于胸膜下有所不同，且模型稳定性较差，与特发性肺间质纤维化逐渐进展恶化的病程不同多次气管内滴入博来霉素肺纤维化模型复制了许多特发性肺间质纤维化病理特点(肺纤维化空间异质性、上皮细胞间质细胞转化、肺泡上皮细胞增生)，且模型稳定性好，但造模耗时极长(16周)，且容易造成实验动物死亡。尾静脉注射和腹腔内注射博来霉素属于全身给药，其病灶主要分布于胸膜下和血管周围，与特发性肺间质纤维化病理学改变类似。单剂量尾静脉注射博来霉素模型稳定性不足，其肺纤维化于给药后6周出现明显自限性。多次尾静脉注射博来霉素模型稳定性较好，但造模耗时6周，且反复尾静脉注射博来霉素技术要求高，可操作性稍差。


技术实现要素：

7.本发明的目的在于提供一种胺碘酮的新应用方法，以解决快速稳定建立并能稳定存续的肺纤维化动物模型的方法。
8.为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种胺碘酮的新应用方法，所述该胺碘酮应用方法如下：
9.第一步：材料准备，准备定量的博莱霉素和胺碘酮，准备足够数量的鼠类；
10.第二步：通过博莱霉素对鼠类进行诱导；
11.第三步：通过对第二步中诱导后的鼠类，进行胺碘酮的雾化吸入。
12.优选的，所述使用博莱霉素诱导的方法包括腹腔内注射、静脉注射、皮下注射、气管内滴注和雾化吸入。
13.优选的，所述博来霉素诱导的用药方式包括单剂量给药和多次给药。
14.优选的，所述使用博雷霉素诱导后的鼠类是指实验室用大鼠和小鼠。
15.优选的，所述小鼠包括c57bl/6小鼠。
16.优选的，所述雾化吸入胺碘酮的方式包括使用雾化盒雾化和麻醉后插入雾化。
17.优选的，所述麻醉后雾化吸入胺碘酮的方法为将鼠类麻醉后，以动物镜压下鼠类舌根暴露声门，雾化器从声门插入器官注入胺碘酮。
18.优选的，所述鼠类雾化吸入的胺碘酮的量为2.5-10mg/kg。
19.优选的，所述上述方法中博莱霉素诱导的方法还包括雾化吸入博来霉素。
20.与现有技术相比，本发明的有益效果是：
21.1.本发明制备得到的肺纤维化模型，具有诱导肺纤维化时间短，肺纤维化分布均匀，试验动物死亡率小，模型成功率高，模型稳定性好，成本底的特点，克服了单用博来霉素模型出现的肺纤维化分布不均匀和自愈倾向。
附图说明
22.图1为本发明的肺泡炎评分；
23.图2为本发明的肺纤维化评分。
具体实施方式
24.下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
25.实施例ⅰ26.请参阅图1和图2，一种胺碘酮的新应用方法，该胺碘酮应用方法如下：
27.第一步：材料准备，准备定量的博莱霉素和胺碘酮，准备足够数量的鼠类；
28.第二步：通过博莱霉素对鼠类进行诱导；
29.第三步：通过对第二步中诱导后的鼠类，进行胺碘酮的雾化吸入。
30.使用博莱霉素诱导的方法包括腹腔内注射、静脉注射、皮下注射、气管内滴注和雾化吸入。
31.博来霉素诱导的用药方式包括单剂量给药和多次给药。
32.使用博雷霉素诱导后的鼠类是指实验室用大鼠和小鼠。
33.小鼠包括c57bl/6小鼠。
34.雾化吸入胺碘酮的方式包括使用雾化盒雾化和麻醉后插入雾化。
35.麻醉后雾化吸入胺碘酮的方法为将鼠类麻醉后，以动物镜压下鼠类舌根暴露声门，雾化器从声门插入器官注入胺碘酮。
36.鼠类雾化吸入的胺碘酮的量为2.5-10mg/kg。
37.上述方法中博莱霉素诱导的方法还包括雾化吸入博来霉素。
38.本实施例在使用时：
①
、动物分组：8龄c57bl/6小鼠，雌雄各半，随机分为模型组和对照组，每组适应性饲养7d。
39.②
、将全部小鼠腹腔注射水合氯醛麻醉，麻醉生效后分离气管，气管内滴入适量博来霉素(5mg/kg)，滴入后将小鼠直立，垂直旋转小鼠，使药物在肺内均匀分布。
40.③
、将全部小鼠置于18-20℃，相对湿度53-58％，昼夜交替环境下正常喂食。
41.④
、采用小鼠雾化盒对全部小鼠进行雾化，其中模型组雾化吸入5mg/kg胺碘酮，每天一次，对照组吸入生理盐水，每天一次，分别于2、4、6、8、10周，分批将小鼠处死获取标本.
42.实施例ⅱ43.请参阅图1和图2，本实施方式对于实施例1进一步说明，一种胺碘酮的新应用方法，该胺碘酮应用方法如下：
44.第一步：材料准备，准备定量的博莱霉素和胺碘酮，准备足够数量的鼠类；
45.第二步：通过博莱霉素对鼠类进行诱导；
46.第三步：通过对第二步中诱导后的鼠类，进行胺碘酮的雾化吸入。
47.使用博莱霉素诱导的方法包括腹腔内注射、静脉注射、皮下注射、气管内滴注和雾化吸入。
48.博来霉素诱导的用药方式包括单剂量给药和多次给药。
49.使用博雷霉素诱导后的鼠类是指实验室用大鼠和小鼠。
50.小鼠包括c57bl/6小鼠。
51.雾化吸入胺碘酮的方式包括使用雾化盒雾化和麻醉后插入雾化。
52.麻醉后雾化吸入胺碘酮的方法为将鼠类麻醉后，以动物镜压下鼠类舌根暴露声门，雾化器从声门插入器官注入胺碘酮。
53.鼠类雾化吸入的胺碘酮的量为2.5-10mg/kg。
54.上述方法中博莱霉素诱导的方法还包括雾化吸入博来霉素。
55.本实施例在使用时：伊文斯蓝的肺组织分布：向小鼠气管内雾化伊文斯蓝溶液，给药后5min后处死，并分离全肺，可以看出对照组小鼠肺部成不均匀块状分布，模型组小鼠肺部伊文斯蓝分布较为均匀，成散状分布。
56.实施例ⅲ57.请参阅图1和图2，本实施方式对于其它实施例进一步说明，一种胺碘酮的新应用方法，该胺碘酮应用方法如下：
58.第一步：材料准备，准备定量的博莱霉素和胺碘酮，准备足够数量的鼠类；
59.第二步：通过博莱霉素对鼠类进行诱导；
60.第三步：通过对第二步中诱导后的鼠类，进行胺碘酮的雾化吸入。
61.使用博莱霉素诱导的方法包括腹腔内注射、静脉注射、皮下注射、气管内滴注和雾化吸入。
62.博来霉素诱导的用药方式包括单剂量给药和多次给药。
63.使用博雷霉素诱导后的鼠类是指实验室用大鼠和小鼠。
64.小鼠包括c57bl/6小鼠。
65.雾化吸入胺碘酮的方式包括使用雾化盒雾化和麻醉后插入雾化。
66.麻醉后雾化吸入胺碘酮的方法为将鼠类麻醉后，以动物镜压下鼠类舌根暴露声门，雾化器从声门插入器官注入胺碘酮。
67.鼠类雾化吸入的胺碘酮的量为2.5-10mg/kg。
68.上述方法中博莱霉素诱导的方法还包括雾化吸入博来霉素。
69.本实施例在使用时：肺泡炎和肺纤维化评分：模型组造模后2周肺泡炎症和肺纤维化炎症水平较高，造模后4周即达到峰值，造模后10周下降不明显；对照组造模后4-6周肺泡炎症和肺纤维化炎症达到峰值，造模后8周开始明显下降，10周降至最低值。(肺泡炎程度评分。0分：无肺泡炎，肺组织正常；1分轻度肺泡炎，单核细胞清润、肺泡间隔增厚，病变局限于胸膜下，病变范围《20％；2分：中度肺泡炎，炎症病变主要位于胸膜下，病变范围为20％-50％；3分：重度肺泡炎，炎症病变弥漫，病变范围》50％。)(肺纤维化程度评分。0分无纤维化，肺泡结构正常；1分散在轻度纤维化灶，肺泡间隔厚度≤3倍正常值，部分肺泡腔扩大，肺泡壁变薄，但无成团肺纤维化；2分：明显的肺纤维化改变，肺泡间隔厚度》3倍正常值，并伴有绳结样改变，但病变未融合，部分肺泡腔扩大，肺泡壁变薄，但无成团肺纤维化；3分：连续肺纤维化，肺泡间隔厚度》3倍正常值，部分肺泡腔扩大，肺泡壁变薄；4分：单个成团肺纤维化灶，病灶范围10％-50％视野，肺形态结构严重受损但还能依稀可见；6分：大片融合成团肺纤维化灶，病灶范围》50％视野，大部分肺泡间隔消失，大部分肺结构损毁；7分：肺泡内几乎充满成片的纤维组织，肺泡间隔消失，但仍可见至少5个气泡样改变；8分：满视野成团的纤维组织。)。
70.需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
71.尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。