一种具有血管舒张活性的二硫缩醛类化合物在制备具有血管舒张活性药物方面的应用

1.本发明属于医药化学领域，具体涉及一种具有血管舒张活性的二硫缩醛类化合物。


背景技术：

2.高血压是最常见的中老年慢性病之一，也是心脑血管病最主要的危险因素。目前市场上主要的一线降压药主要为硝苯地平和卡托普利。但硝苯地平在制备方法上存在收率低，反应时间长，反应条件苛刻等问题；而卡托普利存在手性中心，合成较为复杂，成本较高。如何降低用药成本，筛选新的血管舒张药物一直是该领域研究课题。且现有降血压药物在长期使用后，往往会使机体产生耐药性，造成药效下降的缺陷，因此，在降压药领域，需要寻找新的具备血管舒张活性的药物在必要时对其进行替代。


技术实现要素：

3.针对现有技术中存在的缺点和弊端，本发明经试验探索偶然发现一些二硫缩醛类化合物具有血管舒张活性，据此提供了将这些二硫缩醛类化合物应用于制备具有血管舒张活性药物方面的应用，以丰富降压药物的种类，从而为解决降压药种类单一，成本较高的问题提供解决方案。
4.本发明提供的技术方案如下：
5.一种具有血管舒张活性的二硫缩醛类化合物在制备具有血管舒张活性药物方面的应用，其特征在于：所述具有血管舒张活性的二硫缩醛类化合物具有如下通式：
[0006][0007]
其中，所述r1可选自如下基团，甲氧基，卤素基，双甲基；所述r2可分别选择甲基或乙基。
[0008]
优选的，所述具有血管舒张活性的二硫缩醛类化合物具有如下结构中的一种以上：
[0009][0010]
优选的，所述具有血管舒张活性的二硫缩醛类化合物具有如下结构：
[0011][0012]
本发明所用的二硫缩醛类化合物合成步骤和方法如下所示，首先乙酰乙酸甲酯和相应的芳基胺在加热条件下反应，得到中间体i；之后中间体i再在碱性条件下与二硫化碳和烷基溴反应，经过萃取后浓缩，再重结晶纯化即可得到目标产物。合成目标物涉及的反应具有合成步骤简单，原料成本低，耗时短，反应操作简单等特点。
[0013][0014]
本发明的有益效果如下：
[0015]
1)提供了一种降压替代药物，毒性小，为耐药性提供了可替代方案。
[0016]
2)目标物合成路线短，合成工艺简单。
[0017]
3)目标物所用原料廉价易得，收率高，成本低。
[0018]
4)目标物结构简单，易于后期进一步改造和优化。
附图说明
[0019]
图1本发明提供的二硫缩醛类化合物结构通式
[0020]
图2化合物s1在不同浓度下的血管舒张率图
[0021]
图3化合物s2在不同浓度下的血管舒张率图
[0022]
图4化合物s3在不同浓度下的血管舒张率图
[0023]
图5化合物s4在不同浓度下的血管舒张率图
[0024]
图6化合物s5在不同浓度下的血管舒张率图
[0025]
图7研究人员正在将5mlna
+-pss缓冲溶液加入恒温离体浴槽图
[0026]
图8血管内皮细胞存活率试验照片
具体实施方式
[0027]
实施例1
[0028]
化合物s1的具体制备方法如下：
[0029]
(1)取乙酰乙酸甲酯(5ml,40mmol)置于两口瓶中，将温度计插到液面以下，加热至165-175℃。在此温度下缓慢加入对甲氧基苯胺(1.23g，10mmol)，保持温度再继续加热1小时。反应冷却至室温，置于冰箱中冷却结晶，过滤，得粗品。将粗品用正己烷洗涤后烘干得产物中间体i。
[0030]
(2)称取3-氧代-n-对甲氧基苯基丁酰胺(2.07g，10mmol),k2co3(3.45g，25mmol)，溶于dmf(20ml)中，在冰浴下逐滴加入cs2(0.66ml，11mmol)。在冰浴下搅拌半小时后，逐滴加入mei(1.37ml，22mmol)，15分钟内加毕。待升至室温后，反应24小时，之后将反应液倒入
冰水中。分层，用二氯甲烷萃取水相(3
×
20ml)萃取，合并有机相，用无水硫酸镁干燥，浓缩得粗品。粗品经柱色谱分离得到二硫缩醛黄色固体产物(2.78g，90％)。
[0031]
实施例2
[0032]
化合物s2的具体制备方法如下：
[0033]
(1)取乙酰乙酸甲酯(5ml,40mmol)置于两口瓶中，将温度计插到液面以下，加热至165-175℃。在此温度下缓慢加入对氯苯胺(1.28g，10mmol)，保持温度再继续加热1小时。反应冷却至室温，置于冰箱中冷却结晶，过滤，得粗品。将粗品用正己烷洗涤后烘干得产物中间体i。
[0034]
(2)称取3-氧代-n-对氯苯基丁酰胺(2.11g，10mmol),k2co3(3.45g，25mmol)，溶于dmf(20ml)中，在冰浴下逐滴加入cs2(0.66ml，11mmol)。在冰浴下搅拌半小时后，逐滴加入etbr(1.64ml，22mmol)，15分钟内加毕。待升至室温后，反应24小时，之后将反应液倒入冰水中。分层，用二氯甲烷萃取水相(3
×
20ml)萃取，合并有机相，用无水硫酸镁干燥，浓缩得粗品。粗品经柱色谱分离得到二硫缩醛黄色固体产物(3.20g，93％)。
[0035]
实施例3
[0036]
化合物s3的具体制备方法如下：
[0037]
(1)取乙酰乙酸甲酯(5ml,40mmol)置于两口瓶中，将温度计插到液面以下，加热至165-175℃。在此温度下缓慢加入对甲氧基苯胺(1.23g，10mmol)，保持温度再继续加热1小时。反应冷却至室温，置于冰箱中冷却结晶，过滤，得粗品。将粗品用正己烷洗涤后烘干得产物中间体i。
[0038]
(2)称取3-氧代-n-对甲氧基苯基丁酰胺(2.07g，10mmol),k2co3(3.45g，25mmol)，溶于dmf(20ml)中，在冰浴下逐滴加入cs2(0.66ml，11mmol)。在冰浴下搅拌半小时后，逐滴加入etbr(1.64ml，22mmol)，15分钟内加毕。待升至室温后，反应24小时，之后将反应液倒入冰水中。分层，用二氯甲烷萃取水相(3
×
20ml)萃取，合并有机相，用无水硫酸镁干燥，浓缩得粗品。粗品经柱色谱分离得到二硫缩醛黄色固体产物(3.12g，92％)。
[0039]
实施例4
[0040]
化合物s4的具体制备方法如下：
[0041]
(1)取乙酰乙酸甲酯(5ml,40mmol)置于两口瓶中，将温度计插到液面以下，加热至165-175℃。在此温度下缓慢加入苯胺(0.93g，10mmol)，保持温度再继续加热1小时。反应冷却至室温，置于冰箱中冷却结晶，过滤，得粗品。将粗品用正己烷洗涤后烘干得产物中间体i。
[0042]
(2)称取3-氧代-n-苯基丁酰胺(1.77g，10mmol),k2co3(3.45g，25mmol)，溶于dmf(20ml)中，在冰浴下逐滴加入cs2(0.66ml，11mmol)。在冰浴下搅拌半小时后，逐滴加入etbr(1.64ml，22mmol)，15分钟内加毕。待升至室温后，反应24小时，之后将反应液倒入冰水中。分层，用二氯甲烷萃取水相(3
×
20ml)萃取，合并有机相，用无水硫酸镁干燥，浓缩得粗品。粗品经柱色谱分离得到二硫缩醛黄色固体产物(2.84g，92％)。
[0043]
实施例5
[0044]
化合物s5的具体制备方法如下：
[0045]
(1)取乙酰乙酸甲酯(5ml,40mmol)置于两口瓶中，将温度计插到液面以下，加热至165-175℃。在此温度下缓慢加入2,4-二甲基苯胺(1.21g，10mmol)，保持温度再继续加热1
小时。反应冷却至室温，置于冰箱中冷却结晶，过滤，得粗品。将粗品用正己烷洗涤后烘干得产物中间体i。
[0046]
(2)称取3-氧代-n-2,4-二甲基苯基丁酰胺(2.05g，10mmol),k2co3(3.45g，25mmol)，溶于dmf(20ml)中，在冰浴下逐滴加入cs2(0.66ml，11mmol)。在冰浴下搅拌半小时后，逐滴加入etbr(1.64ml，22mmol)，15分钟内加毕。待升至室温后，反应24小时，之后将反应液倒入冰水中。分层，用二氯甲烷萃取水相(3
×
20ml)萃取，合并有机相，用无水硫酸镁干燥，浓缩得粗品。粗品经柱色谱分离得到二硫缩醛黄色固体产物(3.14g，93％)。
[0047]
苯肾上腺素(pe)预收缩血管环实验
[0048]
试验方法：
[0049]
sd大鼠断颈处死，无菌条件下迅速分离出大鼠肠系膜，浸泡于经滤过除菌并预冷的na
+-pss缓冲溶液(119mmol/l nacl、15mmol/l nahco3、4.6mmol/l kcl、1.2mmol/lmgcl2、1.2mmol/lnah2po4、1.5mmol/l cacl2和5.5mmol/l葡萄糖)中，于体视显微镜下分离出肠系膜动脉。将5mlna
+-pss缓冲溶液加入恒温离体浴槽内(如图7)，并将含95％o2和5％co2的混合气体不断通入浴槽内，将分离的动脉环穿入2根20μm的金属丝，其中一根金属丝与可调节预张力的张力微调装置相连，另一根连接张力换能器。固定好的动脉环平衡40min后，每15min施加0.5mn的预张力，直至2mn，加入60mmol/lk
+-pss缓冲液检验动脉环收缩活性，若动脉环在2次k
+-pss缓冲液中的收缩幅度均大于5mn并且2次收缩差异低于10％时，该动脉环用于后续实验，动脉环给予苯肾上腺素(pe)预收缩，待其收缩稳定后，梯度浓度法加入二硫缩醛类化合物(10-10-10-6.5
mol/l)，powerlab系统记录血管张力的变化曲线，研究二硫缩醛类化合物对大鼠血管舒张功能的影响。
[0050]
分别取正常雄性sd大鼠的肠系膜动脉制备血管环，预先10μm pe诱发血管环收缩，收缩曲线稳定后再累积加入浓度梯度的二硫缩醛类化合物，使用血管张力检测仪记录血管张力变化。
[0051]
试验结果：
[0052]
表1不同化合物对血管环的舒张率和ec
50
值
[0053]
组别浓度最大舒张率ec
50
s110mm83.29％652.7μms210mm84.28％478.1μms310mm81.00％411.8μms410mm87.28％544.4μms510mm89.45％903.0μm空白dmso——8.95％——
[0054]
药物安全性试验——血管内皮细胞毒性实验
[0055]
试验方法：
[0056]
首先进行细胞培养。取人脐静脉内皮细胞huvec采用含有20％胎牛血清、1％双抗(青霉素和链霉素)的dmem/f12培养基培养。之后进行细胞铺板，如图8。取对数生长期的人脐静脉内皮细胞huvec，胰酶消化，收集细胞，以1000rpm/min离心，弃上清，新鲜培养液重悬细胞。对细胞计数，调整细胞密度，吸取100μl细胞悬液加入96孔板中，使细胞密度为每孔1
×
104个细胞，每组设置6个复孔，并设置空白组及对照组，置培养箱中常规培养24h。之后给
药。次日，空白组及对照组更换新鲜培养液，给药组更换含药物(1、3、10、30、50、100μm)的培养液，置培养箱中常规培养24h。最后进行检测。24h后，每孔加入15μl浓度为5mg/ml的mtt溶液，置于培养箱中继续孵育3h。然后小心吸尽各孔中的培养液，每组各孔加入100μl的二甲基亚砜，使结晶物充分溶解。用酶联免疫检测仪在490nm波长处测定每孔的吸光度值a，计算每组吸光度的平均值，按照下列公式计算抑制率和存活率。抑制率％＝100％
×
[(a
对照组-a
给药组
)/(a
对照组-a
空白组
)]，存活率％＝100％-抑制率％。
[0057]
试验结果：
[0058]
表2二硫缩醛类化合物在不同浓度下对血管内皮细胞的存活率
[0059][0060][0061]
试验结论：
[0062]
本发明的化合物s1，s2，s3，s4和s5对苯肾上腺素(pe)预收缩血管环具有显著的血管舒张活性。如表1所示，在10mm浓度下，化合物s1，s2，s3，s4和s5对血管环的舒张率分别为83.29％，84.28％，81.00％，87.28％和89.45％，其ec
50
值分别为652.7μm，478.1μm，411.8μm，544.4μm和903.0μm。这五种化合物在不同浓度下的血管舒张率图分别如图1-图5所示。
[0063]
血管内皮细胞毒性实验证实，血管内皮细胞在二硫缩醛类化合物不同浓度下的存活率都较高，说明这五个二硫缩醛类化合物对血管内皮细胞抑制率较低，即对血管内皮细胞毒性小。在低浓度胁迫条件下，血管内皮细胞存活率表现良好，在不同浓度下的存活率数据如表2所示，出现超过100％的数据，说明这类物质在低浓度条件下，可能对血管内皮细胞具有促进生长的作用。
[0064]
上述试验结果表明，本技术请求保护的二硫缩醛类化合物具有显著的血管舒张活性，同时具有潜在毒性小的优势，具有用于制备具有血管舒张活性功能的药物的潜能。
[0065]
应当理解，虽然本说明书按照实施方式加以描述，说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见，本领域技术人员应当将说明书作为一个整体，形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式，也应当属于本发明的保护范围。