一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法

本发明涉及黄酮类物质提取，尤其涉及一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法。

背景技术：

1、蔓越莓是杜鹃花科越橘属红莓苔子亚属常绿灌木，主要生长在北半球凉爽地带酸性泥炭土壤中。蔓越莓是一种高活性功能型小浆果，鲜红色果实中富含黄酮类物质、花青素、原花青素等物质。黄酮类物质作为重要的抗氧化剂，还具有重要的生理及保健功能,对包括癌症、肥胖、肿瘤、心脑血管疾病及老年痴呆等的多种慢性疾病及老年疾病均具有重要的预防和治疗作用。因此，开发从蔓越莓中提取高含量黄酮的工艺非常重要。

2、现有技术一种玉竹叶黄酮苷提取物及其制备方法和用途，公告号为：cn105663670a，公开记载了从玉竹叶中提取黄酮苷的方法，该方法中，直接将玉竹叶进行回流提取，未将玉竹叶进行一定的处理，导致从玉竹叶中提取黄酮苷的量不高。又如现有技术中，关于黄酮的提取中采用乙醇溶液浸泡和索氏提取相结合的方法，先通过乙醇溶液将植物样品中的黄酮逐渐萃取出来，然后在利用索氏提取进行反复蒸馏和收集，这样的做法可以提高黄酮的得率，但是溶于乙醇溶液的不只是黄酮，因此，上述方法虽然提取出了较多量的黄酮，但是黄酮的纯度较差。

技术实现思路

1、本发明克服了现有技术的不足，提供一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法。

2、为达到上述目的，本发明采用的技术方案为：一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，包括以下步骤：

3、s1、将蔓越莓去籽后，抽汁得到蔓越莓汁和残渣，并将残渣干燥后球磨粉碎，蔓越莓汁超滤后得到第一富集液；

4、s2、将s1中的粉末加入硼砂水溶液，加热过滤得到滤饼和第二富集液；

5、s3、将滤饼加入其体积8～10倍量的体积分数为50～80％含醇溶液，调节ph至7.5～8.0，充分混合后，置于超声波提取器中进行超声波处理，提取1.5～2h，重复若干次后，得到第三富集液；

6、s4、将第一富集液、第二富集液和第三富集液混合后，加入浓盐酸溶液，调节ph至4～5，再次加入2％硫酸溶液，抽滤得到沉淀；

7、s5、将沉淀水洗至中性，通过乙醇回流提取，得到黄酮醇提取物。

8、本发明一个较佳实施例中，在s3中，在滤饼中加入其体积8～10倍量的体积分数为50～80％含醇溶液，充分混合后，置于超声波提取器中进行超声波处理，提取1.5～2h，提取温度为40℃～60℃。

9、本发明一个较佳实施例中，含醇溶液的体积分数为75％的乙醇。

10、本发明一个较佳实施例中，在所述s3中，利用含醇溶液进行醇提的数量至少为2次。

11、本发明一个较佳实施例中，在所述s4中，将多种富集溶液混合后，在60℃～70℃下，采用37％的浓盐酸调节ph至4～5，静置后抽滤，蒸馏水洗至中性后抽滤；再采用体积为10倍量的2％的硫酸溶液，调节ph至2～3，加热微沸1～2h后，冷却静置后过滤。

12、本发明一个较佳实施例中，在所述s2中，向硼砂水溶液中加入酶，其中酶是纤维素酶和果胶酶；纤维素酶和果胶酶的酶活力比值为1：1.5，其中，硼砂水溶液和酶的比例不小于500u/mg。

13、本发明一个较佳实施例中，在所述s2中，粉末和硼砂的质量比为20～30：1，硼砂水溶液为每100ml水与0.5～1g的硼砂制备形成。

14、本发明一个较佳实施例中，在所述s1中，球磨为使用平均直径为4～6mm的研磨球,用量为每升溶液中加入60～80颗研磨球，300～350rpm的转速下球磨，时间为2～3h

15、本发明一个较佳实施例中，使用三效浓缩器浓缩，并使用低温真空干燥机，干燥重结晶得到黄酮类物质纯品，其中三效浓缩器中各效的真空度和蒸发温度分别为：一效：0.04mpa，70℃；二效：0.06mpa，60℃；三效：0.08mpa，50℃。

16、本发明一个较佳实施例中，在所述s5中，95％乙醇回流提取的温度为75～85℃，回流时间为0.5～1h。

17、本发明解决了背景技术中存在的缺陷，本发明具备以下有益效果：

18、(1)本发明提供了一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，该方法利用了预处理、水提取、醇提取、酸提取、浓缩干燥的工艺步骤，按照一定的步骤和严格ph的控制，利用黄酮类物质对于冷热、酸碱的溶解性的不同，实现对蔓越莓中活性成分的依次提取；采用一套提取工艺路线，提取过程极大简化，成本也极大降低。

19、(2)本发明中将ph调节至碱性，一方面可以活化细胞壁上的纤维，使得舒展后的纤维具有更大的比表面积，使得含醇溶液的提取效率提高，另一方面碱性容易使得细胞壁中的黄酮类物质溶解，进一步加速提取效率。

20、(3)本发明采用两种复合酶的协同酶解作用，同时配合低ph和较低温度的提取，减少了活性物质的降解；利用黄酮类物质溶于碱性溶液，不溶于酸性溶液的特性，采用两次阶梯酸进行提取，可以快速将富集液中的黄酮类物质沉淀。

21、(4)本发明在硼砂水溶液中加入酶，其中酶可以是纤维素酶、果胶酶等，其主要作用为：促进细胞壁的变形或破坏，使得以结合态形式存在于细胞壁中的黄酮类物质容易在后续中析出。

技术特征：

1.一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，其特征在于：在s3中，在滤饼中加入其体积8～10倍量的体积分数为50～80％含醇溶液，充分混合后，置于超声波提取器中进行超声波处理，提取1.5～2h，提取温度为40℃～60℃。

3.根据权利要求2所述的一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，其特征在于：含醇溶液的体积分数为75％的乙醇。

4.根据权利要求2所述的一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，其特征在于：在所述s3中，利用含醇溶液进行醇提的数量至少为2次。

5.根据权利要求1所述的一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，其特征在于：在所述s4中，将多种富集溶液混合后，在60℃～70℃下，采用37％的浓盐酸调节ph至4～5，静置后抽滤，蒸馏水洗至中性后抽滤；再采用体积为10倍量的2％的硫酸溶液，调节ph至2～3，加热微沸1～2h后，冷却静置后过滤。

6.根据权利要求1所述的一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，其特征在于：在所述s2中，向硼砂水溶液中加入酶，其中酶是纤维素酶和果胶酶；纤维素酶和果胶酶的酶活力比值为1：1.5，其中，硼砂水溶液和酶的比例不小于500u/mg。

7.根据权利要求1所述的一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，其特征在于：在所述s2中，粉末和硼砂的质量比为20～30：1，硼砂水溶液为每100ml水与0.5～1g的硼砂制备形成。

8.根据权利要求1所述的一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，其特征在于：在所述s1中，球磨为使用平均直径为4～6mm的研磨球,用量为每升溶液中加入60～80颗研磨球，300～350rpm的转速下球磨，时间为2～3h。

9.根据权利要求1所述的一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，其特征在于：使用三效浓缩器浓缩，并使用低温真空干燥机，干燥重结晶得到黄酮类物质纯品，其中三效浓缩器中各效的真空度和蒸发温度分别为：一效：0.04mpa，70℃；二效：0.06mpa，60℃；三效：0.08mpa，50℃。

10.根据权利要求1所述的一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，其特征在于：在所述s5中，95％乙醇回流提取的温度为75～85℃，回流时间为0.5～1h。

技术总结
本发明公开了一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，包括：将蔓越莓抽汁得到蔓越莓汁和残渣，并将残渣干燥后球磨粉碎，蔓越莓汁超滤后得到第一富集液；将S1中的粉末加入硼砂水溶液，加热过滤得到滤饼和第二富集液；将滤饼加入含醇溶液，调节pH至碱性，得到第三富集液；将多种富集液混合后，加入浓盐酸溶液，调节pH至4～5，再次加入2％硫酸溶液，抽滤得到沉淀；将沉淀水洗至中性，通过乙醇回流提取，得到黄酮醇提取物。该方法利用了预处理、水提取、醇提取、酸提取、浓缩干燥的工艺步骤，按照一定的步骤和严格pH的控制，利用黄酮类物质对于冷热、酸碱的溶解性的不同，实现对对于蔓越莓中活性成分的依次提取，提取过程极大简化。

技术研发人员：高岳,解鹏,汪思源,杨亚楠
受保护的技术使用者：苏州农业职业技术学院
技术研发日：
技术公布日：2024/1/13