一种长链非编码RNA在PD-L1单克隆抗体治疗中的应用

本发明属于生物，具体涉及一种长链非编码rna在pd-l1单克隆抗体治疗中的应用。

背景技术：

1、全世界每年大约有160多万新发肺癌病例被确诊，在许多发展中国家，因肺癌导致的死亡逐年上升。肺癌分为多种类型，其中以非小细胞肺癌(non-small cell lungcancer,nsclc)占绝大多数。nsclc的生长和转移与免疫微环境息息相关，多种免疫细胞和免疫分子参与了nsclc肿瘤的发生发展。程序性死亡受体-配体1(programmed cell death-ligand 1,pd-l1)是重要的免疫检查点分子之一，约一半以上的nsclc细胞表面表达pd-l1。pd-l1通过抑制t细胞功能和促进肿瘤细胞免疫逃逸而导致预后不良。抑制pd-l1可协同t细胞的刺激信号，延长t细胞的激活时间和抗肿瘤免疫反应。筛选负向调控pd-l1的分子可为nsclc的免疫治疗提供新的方法和策略。

2、长链非编码rna(long noncoding rnas,lncrnas)在蛋白质分子的转录、翻译和翻译后修饰中起关键作用。有研究表明某些lncrna可正向调控pd-l1水平从而促进肿瘤细胞的免疫逃逸、影响肿瘤细胞的生长和转移。然而，可负向调控pd-l1的lncrnas的相关研究十分匮乏。探索负调控pd-l1的lncrnas对nsclc的临床治疗具有深远意义。

技术实现思路

1、本发明所要解决的技术问题是如何负向调控pd-l1的表达和/或如何制备治疗非小细胞肺癌的产品和/或如何获得非小细胞肺癌的治疗靶点。

2、为了解决上述技术问题，本发明首先提供了长链非编码rna或调控所述长链非编码rna表达的物质或调控所述长链非编码rna活性或含量的物质的应用。所述应用可为下述任一种：

3、p1、长链非编码rna或调控所述长链非编码rna表达的物质或调控所述长链非编码rna活性或含量的物质在开发抑制、治疗、辅助治疗和/或协同治疗肿瘤的产品中的应用；

4、p2、长链非编码rna或调控所述长链非编码rna表达的物质或调控所述长链非编码rna活性或含量的物质在制备抑制、治疗、辅助治疗和/或协同治疗肿瘤的产品中的应用；

5、p3、长链非编码rna或调控所述长链非编码rna表达的物质或调控所述长链非编码rna活性或含量的物质在开发抑制或辅助抑制程序性死亡受体-配体1表达的产品中的应用；

6、p4、长链非编码rna或调控所述长链非编码rna表达的物质或调控所述长链非编码rna活性或含量的物质在制备抑制或辅助抑制程序性死亡受体-配体1表达的产品中的应用；

7、p5、长链非编码rna或调控所述长链非编码rna表达的物质或调控所述长链非编码rna活性或含量的物质在制备增强t细胞的杀伤活性产品中的应用。

8、所述长链非编码rna可为如下a1)或a2)或a3)的长链非编码rna：

9、a1)序列为序列表中序列1的rna分子，该长链非编码rna的名称为linc02418；

10、a2)序列为序列表中序列3的rna分子，该长链非编码rna的名称为4930573i07rik；

11、a3)将序列表中序列1或序列3所示的核苷酸序列经过一个或几个碱基的取代和/或缺失和/或添加得到的且具有相同功能的由a1)或a2)衍生的或与a1)或a2)所示的rna分子具有90％以上的同一性的rna分子。

12、上述应用中，所述肿瘤可为非小细胞肺癌肿瘤。所述非小细胞肺癌可为肺腺癌。

13、与上文所述长链非编码rna的编码基因相关的生物材料下述任一种应用：

14、p1、所述生物材料在开发抑制、治疗、辅助治疗和/或协同治疗肿瘤的产品中的应用；

15、p2、所述生物材料在制备抑制、治疗、辅助治疗和/或协同治疗肿瘤的产品中的应用；

16、p3、所述生物材料在开发抑制或辅助抑制程序性死亡受体-配体1表达的产品中的应用；

17、p4、所述生物材料在制备抑制或辅助抑制程序性死亡受体-配体1表达的产品中的应用；

18、p5、所述生物材料在制备增强t细胞的杀伤活性产品中的应用。

19、其中，所述生物材料可为b1)-b7)中的任一种：

20、b1)权利要求1中所述长链非编码rna的编码基因；

21、b2)含有b1)所述核酸分子的表达盒；

22、b3)含有b1)所述核酸分子的重组载体、或含有b2)所述表达盒的重组载体；

23、b4)含有b1)所述核酸分子的重组微生物、或含有b2)所述表达盒的重组微生物、或含有b3)所述重组载体的重组微生物；

24、b5)含有b1)所述核酸分子的转基因细胞系、或含有b2)所述表达盒的转基因细胞系。

25、上述应用中，b1)所述核酸分子可为如下b1)、b2)或b3)所示的编码基因：

26、b1)编码序列是序列表中序列2的核苷酸的cdna分子或dna分子；

27、b2)编码序列是序列表中序列4的cdna分子或dna分子，

28、b3)与b1)或b2)限定的cdna或dna分子杂交且编码具有相同功能的蛋白质的cdna分子或dna分子。

29、上述应用中，所述肿瘤可为非小细胞肺癌肿瘤。所述非小细胞肺癌可为肺腺癌。

30、为了解决上述技术问题，本发明还提供了组合物。所述组合物的活性成分可含有抗程序性死亡受体-配体1的抗体和b，所述b可为上文中所述长链非编码rna和/或上文中所述长链非编码rna的编码基因和/或上文中所述生物材料。

31、为了解决上述技术问题，本发明还提供了b在制备增强抗程序性死亡受体-配体1的抗体的抗肿瘤活性产品中的应用。所述b可为上文中所述长链非编码rna和/或上文中所述长链非编码rna的编码基因和/或上文中所述生物材料。

32、所述抗肿瘤活性可体现为抑制肿瘤的增长。所述抗体可为单克隆抗体或多克隆抗体。

33、上文中所述长链非编码rna作为肿瘤标志物在制备检测肿瘤的产品中或制备检测肿瘤对于治疗反应的产品中的应用也属于本发明的保护范围。

34、以上文中所述长链非编码rna或上文中所述长链非编码rna的编码基因作为治疗靶点的物质在制备和/或开发治疗肿瘤的药物中的应用也属于本发明的保护范围。

35、所述物质可为上述生物材料。

36、上文所述产品可为药物或装置。

37、上文所述的组合物或上文所述的应用中，所述肿瘤可为非小细胞肺癌肿瘤。所述非小细胞肺癌可为肺腺癌。

38、上文所述的长链非编码rna和/或上文所述的生物材料也属于本发明的保护范围。

39、本发明公开了一种长链非编码rna(long noncoding rnas,lncrnas)linc02418及其在非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,nsclc)中的应用。本发明利用nsclc细胞系h1703进行了linc02418过表达，结果发现过表达linc02418后细胞的程序性死亡受体-配体1(programmed cell death-ligand 1,pd-l1)表达水平降低，显示linc02418的水平与pd-l1的表达呈负相关。利用由外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell,pbmc)活化所得t细胞对h1703细胞进行共同孵育，结果显示，过表达h1703细胞中的linc02418后t细胞的杀伤作用显著增强。在小鼠体内进行肿瘤接种并给予pd-l1单克隆抗体治疗，结果显示linc02418的过表达与pd-l1单克隆抗体具有协同治疗nsclc的作用。临床样本分析显示，在人肺腺癌组织中linc02418的表达水平与pd-l1呈负相关。本发明针对linc02418的发现将为nsclc提供新的治疗靶点。

40、本发明发现，在nsclc细胞中lncrna分子linc02418与pd-l1水平呈负相关，是pd-l1的负向调控分子，具有抑癌作用。linc02418可与pd-l1单克隆抗体发挥协同治疗nsclc的作用。综上所述，作为一种lncrna，linc02418可通过调控pd-l1为治疗nsclc提供靶点。