一种外泌体缓释多孔微球及其制备方法与流程

文档序号:36727145发布日期:2024-01-16 12:35阅读:来源:国知局

技术特征:

1.一种外泌体缓释多孔微球的制备方法,包括以下步骤:

2.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤1)中pasp溶液的浓度为15mg/ml,用量为10~20ml;cacl2溶液为cacl2溶解于ph=7.6,1mm tris溶液中,使得cacl2的浓度为0.1mol/l,cacl2溶液用量为200ml。

3.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤1)中paa溶液的浓度为25mg/ml,用量为20~40ml;na2hpo4·12h2o溶液为na2hpo4·12h2o溶解于ph=7.1,50mm hepes溶液中,使得na2hpo4·12h2o的浓度为0.06mol/l,用量为200ml。

4.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤1)中螯合后的cacl2溶液和na2hpo4·12h2o溶液的共混比例为1:1~1:2。

5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤2)碳酸氢铵溶液中nhap的质量浓度为10-50mg/ml;碳酸氢铵溶液的质量分数为1-5%,用量为5ml。

6.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤2)油相中plga的质量分数为1~5%;pdlla-peg-pdlla的质量分数为1~5%;所述步骤2)中制备w/o乳液时内水相和油相的混合体积比为1:1-1:5。

7.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤2)中pva溶液的质量分数为1~5%;所述步骤2)中制备w/o/w乳液时w/o乳液和pva溶液体积比为1:5-1:10。

8.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤3)中nhap/plga多孔微球与da的质量比为2:1~10:1;所述步骤3)中tris-hcl缓冲液中nhap-plga的浓度为5mg/ml;所述步骤3)中tris-hcl缓冲液ph值为8~9。

9.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤4)中磷酸盐缓冲液的ph值为7~8。

10.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于,所述步骤4)磷酸盐缓冲液中nhap/plga-pda的浓度为5~10mg/ml;所述步骤4)磷酸盐缓冲液中exo溶液的浓度为1-5mg/ml。


技术总结
本发明提供了一种外泌体缓释多孔微球的制备方法,本发明首先制备了一种高分散稳定性的纳米羟基磷灰石(nHAP),可提高纳米羟基磷灰石的生物相容性以及稳定性;并通过双乳液法制备了多孔微球,然后将多巴胺(DA)原位聚合在微球表面,在微球表面形成一层PDA生物涂层,提高Exo在微球上的装载效率和释放周期,得到nHAP/PLGA‑PDA多孔微球;最后通过在多孔微球上负载Exo,得到nHAP/PLGA‑PDA@Exo缓释微球。本发明制备的nHAP/PLGA‑PDA@Exo外泌体缓释微球可以作为微支架通过微创手术或注射的方式填充到骨缺损位置,通过微球降解过程中释放的干细胞外泌体及钙离子,促进骨的再生和修复。

技术研发人员:薛其俊,丰祝刚
受保护的技术使用者:南京思元医疗技术有限公司
技术研发日:
技术公布日:2024/1/15
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