聚多酚纳米粒及其制备方法、聚多酚纳米制剂及其在脑卒中治疗的应用

本发明属于纳米制剂，尤其涉及一种聚多酚纳米粒及其制备方法、聚多酚纳米制剂及其在脑卒中治疗的应用。

背景技术：

1、脑卒中是由于脑部血管破裂或阻塞导致神经功能缺损的脑血管疾病，属于神经系统疾病。脑卒中包括缺血性脑卒中和出血性脑卒中，其中缺血性脑卒中约占脑卒中的80％，是卒中的主要类型。脑卒中是世界范围内高致死率和致残率的疾病之一。脑部的缺血缺氧会造成脑血管的狭窄、闭塞，血流中断超过4～6分钟可造成不可逆损伤，即神经细胞坏死或凋亡形成的梗死核心区，同时还存在濒临死亡的细胞组成的半暗带。随着疾病的发生，核心区不断扩张，4.5h之后能挽救的区域很少，因此3～4.5h是卒中的黄金时期，称之为治疗时间窗。目前临床上治疗缺血性脑卒中的方法是静脉溶栓与机械取栓，目的是使血流复通，但由于治疗时间窗狭窄，手术中产生再灌注损伤，易引发出血性梗死等问题，此类方法的临床应用受到限制。因此，减少再灌注损伤，改善治疗时间窗限制是目前缺血性脑卒中治疗的重要挑战。

2、神经保护治疗可以保护神经细胞免受缺血性损伤，修复结构问题，并在卒中后恢复脑功能，是缺血性卒中治疗的重要策略。神经保护剂是能够通过抑制神经损伤过程或激活细胞存活途径来减缓或预防梗死进展的化合物。其中，多酚通过各种信号通路和靶分子发挥神经保护作用，在治疗卒中方面显示出较大潜能。多酚属于酚类化合物，广泛存在于动植物中。按照化学结构，多酚可分为类黄酮、二苯乙烯和木酚素。其中，类黄酮约占多酚的60％，2-苯基色酮骨架上的羟基取代基可去除活性氧自由基，并通过神经保护、抗炎、抗氧化等多途径治疗缺血性脑卒中(nutrients.2021；13(6):1967)。多酚具有抗氧化性的多酚羟基，同时可激活多条细胞保护性分子通路，从而减轻性脑卒中的氧化损伤。但由于单药外周给药存在水溶性差、靶向性差、循环短、血脑屏障穿越能力低等问题，使其临床价值有限。相较于小分子多酚，药物递送系统可以实现靶向给药与多种药物联用，具有生物相容性和安全性，可用于脑卒中治疗的系统给药和局部干预。目前，基于多酚的脂质体，聚合物纳米粒、胶束、细胞膜包覆等纳米递送系统已被广泛开发应用。但纳米递送系统的复杂组成增加制备过程的复杂性，无法避免体内治疗产生的免疫原性，同时药物对血脑屏障的渗透有待提高，再者药物合成周期长，有机溶剂残留且影响药物活性，不仅费时费力还具有一定危险性，并且在这些应用中，多酚的负载量有限，不能极大发挥其抗氧化作用，且不能实现药物的尺寸可控。因此，开发基于多酚的新型纳米递送系统用于缺血性脑卒中具有巨大潜力与挑战。

3、多酚聚合是一种常见的自然现象。在红葡萄酒陈酿过程中，氧气有助于多酚聚合使葡萄酒变得醇厚；多巴胺自聚产生颜色变化。多酚自身具有多功能基团，可通过共价或非共价相互作用与蛋白质、金属等进行化学物理交联。但目前，国内外还没有公开任何关于聚多酚纳米制剂及其在治疗脑卒中的应用的研究报道。

技术实现思路

1、有鉴于此，本发明要解决的技术问题在于提供一种制备方法简单且尺寸可控的聚多酚纳米粒及其制备方法、聚多酚纳米制剂及其在脑卒中治疗的应用。

2、本发明提供了一种聚多酚纳米粒的制备方法，包括以下步骤：

3、s1)将多酚、醇溶剂与非质子极性溶剂混合，得到多酚溶液；

4、s2)将碱性溶液与多酚溶液混合，然后加入小分子交联剂反应后，得到聚多酚纳米粒；所述小分子交联剂选自醛类物质和/或氨基酸。

5、优选的，所述多酚选自类黄酮、二苯乙烯类与木酚素类中的一种或多种；

6、所述类黄酮选自葛根素、儿茶素、槲皮素、杨梅素、木犀草素、绿原酸、没食子酸、山奈酚、丹皮酚、黄芩素、芸香素、芦丁、原花青素与芹菜素中的一种或多种；

7、所述二苯乙烯类选自白藜芦醇、丹酚酸、虎杖甙、紫檀芪、赤松素、买麻藤素、桑皮苷与丹叶大黄素中的一种或多种；

8、所述木酚素类选自桧脂素、表去甲络石甙元、罗汉松脂苷、紫杉脂素、丁香脂素与襄五脂素中的一种或多种；

9、所述醛类物质选自甲醛、乙醛、糠醛、戊二醛、2-甲基丙醛、异戊醛、2-甲基丁醛、庚醛与3-甲硫基丙醛中的一种或多种；

10、所述氨基酸选自丙氨酸、缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、脯氨酸、苯丙氨酸、色氨酸、蛋氨酸、甘氨酸、丝氨酸、苏氨酸、半胱氨酸、酪氨酸、天冬酰胺与谷氨酰胺中的一种或多种。

11、优选的，所述醇溶剂选自甲醇和/或乙醇；所述非质子极性溶剂选自n,n-二甲基甲酰胺、丙酮、乙腈与二甲基乙酰胺中的一种或多种；所述醇溶剂与非质子极性溶剂的体积比为10：(1～5)。

12、优选的，所述碱性溶液的ph值为8～10；

13、所述多酚与小分子交联剂的质量比为20：1～1：20。

14、优选的，所述碱性溶液中还包括生物相容性高分子材料；所述生物相容性高分子材料与多酚的质量比为10：90～90：10。

15、优选的，所述多酚溶液中多酚的质量浓度为0.01～0.05g/ml；

16、所述碱性溶液与多酚溶液的体积比为(3～10)：1；

17、所述碱性溶液中的碱为氢氧化铵；

18、所述生物相容性高分子材料选自聚乙烯吡咯烷酮、聚乙二醇、聚环氧乙烷、聚乙烯亚胺、聚丙烯酰胺与聚丙烯酸中的一种或多种。

19、优选的，所述步骤s2)中混合的时间为5～40min；

20、步骤s2)中反应具体为：搅拌反应后进行加热反应；所述搅拌反应的时间为1～7天；所述加热反应的温度为20℃～100℃；所述加热反应的时间为0～24h。

21、本发明还提供了一种上述制备方法制备的聚多酚纳米粒。

22、本发明还提供了一种聚多酚纳米制剂，包括上述制备方法制备的聚多酚纳米粒。

23、本发明还提供了上述的聚多酚纳米粒或聚多酚纳米制剂在制备治疗脑卒中药物中的应用。

24、本发明提供了一种聚多酚纳米粒的制备方法，包括以下步骤：s1)将多酚、醇溶剂与非质子极性溶剂混合，得到多酚溶液；s2)将碱性溶液与多酚溶液混合，然后加入小分子交联剂反应后，得到聚多酚纳米粒；所述小分子交联剂选自醛类物质和/或氨基酸。与现有技术相比，本发明基于多酚可与小分子交联剂进行化学交联的优势，将多酚作为活性单体进行化学偶联，使其成为主要成分，反应在室温即可进行，整个制备过程绿色高效、步骤简单、药物快速合成且具有生物安全性，保证多酚自身的反应活性，降低免疫原性，同时，通过反应条件的变化，该聚多酚纳米制剂实现尺寸可控，可扩展应用到脑出血、动脉粥样硬化、癌症等疾病的治疗中。

技术特征：

1.一种聚多酚纳米粒的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述多酚选自类黄酮、二苯乙烯类与木酚素类中的一种或多种；

3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述醇溶剂选自甲醇和/或乙醇；所述非质子极性溶剂选自n,n-二甲基甲酰胺、丙酮、乙腈与二甲基乙酰胺中的一种或多种；所述醇溶剂与非质子极性溶剂的体积比为10：(1～5)。

4.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述碱性溶液的ph值为8～10；

5.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述碱性溶液中还包括生物相容性高分子材料；所述生物相容性高分子材料与多酚的质量比为10：90～90：10。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述多酚溶液中多酚的质量浓度为0.01～0.05g/ml；

7.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，所述步骤s2)中混合的时间为5～40min；

8.一种权利要求1～7任意一项制备方法制备的聚多酚纳米粒。

9.一种聚多酚纳米制剂，其特征在于，包括权利要求1～7任意一项制备方法制备的聚多酚纳米粒。

10.权利要求1～7任意一项制备方法制备的聚多酚纳米粒或权利要求8所述的聚多酚纳米粒或权利要求9所述的聚多酚纳米制剂在制备治疗脑卒中药物中的应用。

技术总结
本发明提供了一种聚多酚纳米粒的制备方法，包括以下步骤：S1)将多酚、醇溶剂与非质子极性溶剂混合，得到多酚溶液；S2)将碱性溶液与多酚溶液混合，然后加入小分子交联剂反应后，得到聚多酚纳米粒；所述小分子交联剂选自醛类物质和/或氨基酸。与现有技术相比，本发明基于多酚可与小分子交联剂进行化学交联的优势，将多酚作为活性单体进行化学偶联，使其成为主要成分，反应在室温即可进行，整个制备过程绿色高效、步骤简单、药物快速合成且具有生物安全性，保证多酚自身的反应活性，降低免疫原性，同时，通过反应条件的变化，该聚多酚纳米制剂实现尺寸可控，可扩展应用到脑出血、动脉粥样硬化、癌症等疾病的治疗中。

技术研发人员：石强,孟伟,马志方,刘磊
受保护的技术使用者：中国科学院长春应用化学研究所
技术研发日：
技术公布日：2024/2/29