一种增强肿瘤放射治疗及免疫治疗疗效的制剂

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种增强肿瘤放射治疗及免疫治疗疗效的制剂。

背景技术：

1、肿瘤严重危害人们的健康。手术、放射治疗和免疫治疗是常见的肿瘤治疗方法。提高放射治疗和免疫治疗的疗效，对于改善病人的生存质量、提高病人的生存时间具有非常重要的意义。

2、铁死亡是铁依赖的脂质过氧化驱动的细胞程序性死亡。放疗及免疫治疗均可通过诱导肿瘤细胞铁死亡来发挥抑制肿瘤的作用。抑制铁死亡显著削弱肿瘤放疗及免疫治疗疗效。因此，利用化合物或药物或多肽有效诱导肿瘤细胞铁死亡可显著增强肿瘤放疗及免疫治疗疗效。然而目前大部分肿瘤细胞发生铁死亡的能力低，如何增强肿瘤细胞的铁死亡敏感性对肿瘤治疗意义重大。

3、arl8b(全称adp-ribosylation factor like protein 8b；也被命名为arl10c或gie1)是与溶酶体结合来调控细胞自噬的小g蛋白，和另一个小g蛋白arl8a(全称adp-ribosylation factor like protein 8a；也被命名为arl10b或gie2)的结构高度相似，正常生理条件下，在全身各器官内这两个蛋白都有表达，在已知的大多数肿瘤细胞内这两个蛋白质也都有表达。人arl8b介导溶酶体在微管轨道上向细胞外围的驱动蛋白1依赖性运动。arl8b介导的驱动蛋白驱动的运动性也与调节nk细胞中的溶解颗粒极化、巨噬细胞中的溶酶体管化、细胞扩散和迁移有关。此外，arl8b通过募集hops复合体的亚基来调节向溶酶体的膜交通，hops复合体是一种介导内溶酶体融合的多亚基束缚复合体。arl8b与肿瘤的发展密切相关。有研究表明arl8b介导的溶酶体运动以及随后的溶酶体胞吐增强放疗耐受细胞的侵袭转移，靶向抑制arl8b显著减弱肿瘤细胞的侵袭转移。trpml1蛋白主要定位于溶酶体，是溶酶体的钙离子通道。

4、近些年的研究表明trpml1与肿瘤的发生发展密切相关。肿瘤细胞内的活性氧（ros）激活trpml1，而后trpml1通过增强自噬介导ros的清除来维持肿瘤细胞的氧化还原平衡，继而促进肿瘤进展。在三阴性乳腺癌中trpml1高表达，trpml1通过激活mtorc1信号通路介导肿瘤的进展，敲低trpml1显著抑制三阴性乳腺癌细胞的生长。此外，hras突变的肿瘤依赖trpml1存活，靶向抑制trpml1选择性杀伤hras突变的肿瘤。

技术实现思路

1、本发明的目的在于克服现有技术的至少一个不足，提供一种增强肿瘤放射治疗及免疫治疗疗效的制剂。

2、发明人研究发现，arl8b与trpml1结合可显著抵抗常规铁死亡诱导剂erastin或rsl3介导的肿瘤细胞铁死亡，提示靶向抑制或阻断arl8b与trpml1结合可能增强肿瘤细胞铁死亡。

3、本发明所采取的技术方案是：

4、本发明的第一个方面，提供：

5、一种增强肿瘤放射治疗或免疫治疗疗效的制剂，所述制剂可以抑制或阻断arl8b与trpml1结合。

6、在一些制剂的实例中，所述制剂包括靶向arl8b和/或trpml1的多肽。

7、在一些制剂的实例中，所述多肽的序列为gfnmrkvtkg。

8、在一些制剂的实例中，所述多肽的末端修饰有穿膜序列。

9、在一些制剂的实例中，所述穿膜序列为irgd。

10、在一些制剂的实例中，所述多肽的序列为gfnmrkvtkg，所述多肽的末端修饰有穿膜序列。

11、在一些制剂的实例中，所述多肽的序列为gfnmrkvtkg，所述多肽的末端修饰有穿膜序列，所述穿膜序列为irgd。

12、在一些制剂的实例中，还包括至少一种铁死亡诱导剂。

13、在一些制剂的实例中，所述铁死亡诱导剂选自erastin或rsl3。

14、本发明的第二个方面，提供：

15、一种增强肿瘤放射治疗或免疫治疗疗效制剂的筛选方法，包括：

16、s1) 将候选分子作用于细胞，检测其是否可以抑制或阻断arl8b与trpml1的结合；

17、s2) 根据候选分子对arl8b与trpml1结合的抑制或阻断效果，确定其是否具有增强肿瘤放射治疗或免疫治疗疗效的作用。

18、在一些筛选方法的实例中，如果候选分子作用于细胞能减少细胞内arl8b与trpml1的结合，且减少的幅度在50％及以上，则判定该候选分子可能具有增强肿瘤放射治疗或免疫治疗疗效的作用。

19、本发明的第三个方面，提供：

20、一种增强肿瘤放射治疗或免疫治疗疗效制剂的筛选方法，包括：

21、s1) 将候选分子作用于arl8b或trpml1，评价其与arl8b或trpml1的结合能力；

22、s2) 基于候选分子与arl8b或trpml1的结合能力，确定其是否具有增强肿瘤放射治疗或免疫治疗疗效的作用。

23、本发明的第四个方面，提供：

24、本发明第一个方面所述制剂在制备肿瘤放射治疗或免疫治疗增效剂中或增强铁死亡诱导剂诱导铁死亡作用制剂的应用。

25、在一些应用的实例中，所述肿瘤选自arl8b和/或trpml1高表达的肿瘤。

26、在一些应用的实例中，所述铁死亡诱导剂选自erastin或rsl3。

27、本发明的有益效果是：

28、本发明一些实例的制剂，可以有效阻断或抑制arl8b与trpml1结合，增强肿瘤细胞铁死亡，增强肿瘤放射治疗及免疫治疗疗效。

29、本发明一些实例的制剂，与铁死亡诱导剂联用，可以更好地诱导肿瘤细胞发生铁死亡。

30、本发明一些实例的筛选方法，为开发新的肿瘤放射治疗及免疫治疗增效剂提供了新的思路。

技术特征：

1.一种增强肿瘤放射治疗或免疫治疗疗效的制剂，其特征在于，所述制剂可以抑制或阻断arl8b与trpml1结合。

2.根据权利要求1所述的制剂，其特征在于，所述制剂包括靶向arl8b和/或trpml1的多肽。

3.根据权利要求2所述的制剂，其特征在于，所述多肽的序列为gfnmrkvtkg。

4.根据权利要求2或3所述的制剂，其特征在于，所述多肽的末端修饰有穿膜序列。

5.根据权利要求4所述的制剂，其特征在于，所述穿膜序列为irgd。

6.一种增强肿瘤放射治疗或免疫治疗疗效制剂的筛选方法，包括：

7.根据权利要求6所述的筛选方法，其特征在于，如果候选分子作用于细胞能减少细胞内arl8b与trpml1的结合，且减少的幅度在50％及以上，则判定该候选分子可能具有增强肿瘤放射治疗或免疫治疗疗效的作用。

8.一种增强肿瘤放射治疗或免疫治疗疗效制剂的筛选方法，包括：

9.权利要求1～5任一项所述制剂在制备肿瘤放射治疗或免疫治疗增效剂中或增强铁死亡诱导剂诱导铁死亡作用制剂的应用。

10.根据权利要求9所述的应用，其特征在于，所述肿瘤选自arl8b和/或trpml1高表达的肿瘤。

技术总结
本发明公开了一种增强肿瘤放射治疗及免疫治疗疗效的制剂。发明人研究发现，ARL8B与TRPML1结合可显著抵抗常规铁死亡诱导剂Erastin或RSL3介导的肿瘤细胞铁死亡，提示靶向抑制或阻断ARL8B与TRPML1结合可能增强肿瘤细胞铁死亡。本发明一些实例的制剂，可以有效阻断或抑制ARL8B与TRPML1结合，增强肿瘤细胞铁死亡，增强肿瘤放射治疗及免疫治疗疗效。本发明一些实例的制剂，与铁死亡诱导剂联用，可以更好地诱导肿瘤细胞发生铁死亡。本发明一些实例的筛选方法，为开发新的肿瘤放射治疗及免疫治疗增效剂提供了新的思路。

技术研发人员：朱孝峰,邓蓉,张海亮,胡冰心,叶志鹏,刘姗,李智玲
受保护的技术使用者：中山大学肿瘤防治中心（中山大学附属肿瘤医院、中山大学肿瘤研究所）
技术研发日：
技术公布日：2024/1/15