本发明涉及动物模型构建,尤其是涉及一种脑积水动物实验模型的评估方法。
背景技术:
1、脑积水是一种常见的神经外科疾病,因脑室中的脑脊液分泌过多或者吸收障碍,从而导致脑室扩张,压迫周围脑组织,使患者产生运动、认知功能障碍等一系列脑部功能问题。建立长期、稳定、有显著行为学特征的动物模型是研究脑积水发病机制及治疗干预措施的先决条件。高岭土注射基底池和小脑延髓池是一种常用的造模方法,但是获得的脑积水模型多是急性或亚急性模型,对于进展缓慢的脑积水类型以及脑积水长期发展进程的研究缺乏,需要一种能实现慢性脑积水研究的适宜模型。目前关于此类模型研究较少,且对于实验动物的高岭土注射方式、注射剂量,相关文献报道不一,此外还缺少对行为学、影像学指标等的多时间点长期验证。提出一种稳定、操作简便的符合慢性脑积水特征的脑积水实验动物模型的评估方法将有助于脑积水的相关实验研究。
技术实现思路
1、本发明的目的是提供一种脑积水动物实验模型的评估方法,通过评估脑积水实验动物模型体重、旷场、新物体识别和mri多项指标能准确表征动物的脑积水状态,并且造模成功率高,造模方法简单,节约实验成本。
2、为实现上述目的,本发明提供了一种脑积水动物实验模型的评估方法,包括如下步骤:
3、(1)构建脑积水动物实验模型,取200~250g的雌性sd大鼠,使用微量剂量器以2ul/s的速度将高岭土/生理盐水混悬液注射到大鼠头部,注射剂量为30ul、60ul、90ul;
4、(2)在构建脑积水动物实验模型前以及构建脑积水实验动物模型后一段时间内,分别评估大鼠的状态、运动能力、焦虑程度、认知能力;
5、(3)在构建脑积水动物实验模型后一段时间内,对大鼠头部进行影像学评估;
6、(4)评估模型成功率。
7、优选的,所述步骤(1)中,构建脑积水动物实验模型的具体步骤如下:
8、a、取200~250g的大鼠,使用3%的异氟烷对大鼠进行持续吸入麻醉,并监测心率以及时调整麻醉参数;
9、b、首先对大鼠的头顶进行备皮,沿头顶中线皮肤做一个切口,在冠状缝和矢状缝之间标记钻孔位置;
10、c、然后用手术钻将颅骨点状减薄,直至针能轻易穿透颅骨,使用微量剂量器以2ul/s的速度将25%的高岭土/生理盐水混悬液注射到双侧蛛网膜下腔,注射剂量为30ul、60ul、90ul;
11、d、用棉球按压注射部位半分钟,再用骨蜡封堵骨孔,最后用fhx3-0缝线缝合皮肤切口,并用生物组织专用胶涂抹切口;
12、e、术后,使用壳聚糖喷雾连续喷三天用于抗菌及促进伤口愈合。
13、优选的,所述注射剂量为60ul。
14、优选的,所述步骤(2)中,在构建脑积水动物实验模型前以及构建脑积水实验动物模型后7周内,每周对大鼠的状态、运动能力、焦虑程度、认知能力进行评估。
15、优选的,所述步骤(2)中,所述大鼠的状态通过体重测试进行评估,运动能力和焦虑程度通过旷场实验进行评估,认知能力通过新物体识别实验进行评估。
16、优选的,所述步骤(3)中,在构建脑积水动物实验模型后一个月和四个月,对大鼠头部进行磁共振加权成像。
17、优选的,所述步骤(4)中,通过核磁共振成像计算得出的埃文斯指数评估模型成功率。
18、本发明所述的一种脑积水动物实验模型的构建方法的优点和积极效果是:
19、1、本发明通过评估体重、旷场、新物体识别和mri多项指标能准确表征动物的脑积水状态,并且造模成功率高,造模方法简单,节约实验成本。
20、2、本发明提出高岭土蛛网膜下腔的较佳注射剂量(60ul),可用于建立一种稳定、操作简便、成模率高的符合脑积水特征的脑积水实验动物模型,是研究脑积水发病机制及干预治疗措施的重要实验对象,具有重大科研意义。
1.一种脑积水动物实验模型的评估方法,其特征在于,包括如下步骤:
2.根据权利要求1所述的一种脑积水动物实验模型的评估方法,其特征在于:所述步骤(1)中,构建脑积水动物实验模型的具体步骤如下:
3.根据权利要求1或2所述的一种脑积水动物实验模型的评估方法,其特征在于:所述注射剂量为60ul。
4.根据权利要求1所述的一种脑积水动物实验模型的评估方法,其特征在于:所述步骤(2)中,在构建脑积水动物实验模型前以及构建脑积水实验动物模型后7周内,每周对大鼠的状态、运动能力、焦虑程度、认知能力进行评估。
5.根据权利要求1所述的一种脑积水动物实验模型的评估方法,其特征在于:所述步骤(2)中,大鼠的状态通过体重测试进行评估,运动能力和焦虑程度通过旷场实验进行评估,认知能力通过新物体识别实验进行评估。
6.根据权利要求1所述的一种脑积水动物实验模型的评估方法,其特征在于:所述步骤(3)中,在构建脑积水动物实验模型后一个月和四个月,对大鼠头部进行磁共振加权成像。
7.根据权利要求1所述的一种脑积水动物实验模型的评估方法,其特征在于:所述步骤(4)中,通过核磁共振成像计算得出的埃文斯指数评估模型成功率。