口服组合物的制作方法

本发明涉及用于口服给药的益生菌组合物。特别地，本发明涉及具有有益效果(诸如改善健康，特别是口腔健康)的益生菌组合物，以及给药所述组合物的方法。

背景技术：

1、口腔(例如口)为众多且多样的微生物菌群提供保护。当平衡被破坏时以及当在固有细菌中出现不均衡时，可发生病状(例如龋或牙周炎)。益生菌是可向宿主赋予健康益处的活的微生物。益生菌疗法的有益效果部分通过调节与宿主有关的现有微生物菌群，从而获得平衡且健康的微生物-宿主关系来实现。对于口腔，益生菌组合物可有助于恢复平衡的细菌群落，从而改善口腔健康。

2、龋是通常通过童年期的看护者传播的普遍存在的传染病，其持续整个寿命或直到完全无牙。主要通过抗微生物预防性方法(如刷牙或用牙线洁牙)来管理龋，由于所述方法的抗微生物作用，其大致上是有效的。近期龋病学中的进展使得对于龋形成的更广泛的微生态环境有了更好的理解，这对于将新的基于微生物的预防性治疗策略和技术应用于龋管理提供了机会。

3、龋中涉及的引发病原性细菌的感染为变异链球菌属细菌，最值得注意的是包封在由蔗糖自生成的不溶性表多糖的生物膜内的变异链球菌(streptococcus mutans)。该粘附的噬斑提供致病菌成长并由碳水化合物产生多种有机酸(其逐渐溶解牙矿物)的生态位。现在对于龋进展更当代的理解包括微生物环境、生态和环境因素，其中微生物区系生态学上的改变或失衡使龋易于形成。为此，已提议益生菌疗法具有成为调节变异链球菌(s.mutans)和口腔微生物区系的有效手段的潜能(caglar 2005a；saha 2012；tagg2003)，并且已有大量单个菌株用作益生菌潜能的临床研究(2001；taipale 2012；keller2011；stecksén-blicks 2009；burton 2013；caglar 2008；caglar 2006；caglar 2005b)。

4、不同菌株对抗龋的表面上的机制各不相同。例如，一些菌株通过与变异链球菌聚集而具有抗变异链球菌的活性，而其它的通过分泌特异的细菌素来直接杀死或抑制变异链球菌，以及其它的仍移居到噬斑，并与变异链球菌竞争其生态位。因此可能存在结合这些机制的互补性协同效应。再例如，两种益生菌菌株可分泌不同的细菌素，由于所述细菌素在变异链球菌中不同的生物化学靶，其可比其任一本身具有更高的结合变异链球菌杀死效果。

5、在某些情况中，可通过向组合物中加入益生元来增强益生菌组合物。益生元“饲喂”微生物菌群，以增强有益的细菌亚群；益生菌向微生物菌群的种群添加有益的培养物。术语“合生素”描述包含益生元和益生菌的组合物，例如包含果糖寡糖(fos)(益生元)和双歧杆菌(益生菌)的组合物。本领域中的研究投入到成分类型之间的协同作用，以获得对于可如何通过互补性益生元成分的存在来增强益生菌的生长和存活的更好的理解。

6、尽管已知大量的益生菌组合物，但各组合物具有独特的特性和特定的健康益处。在于2012年7月22日提交的共同拥有的美国临时申请ussn 61/674,390中记载了一种对于口腔健康具有益处的益生菌组合物的实例，所述申请公开了包含唾液链球菌(streptococcus salivarius)(blis)和至少五种乳杆菌(lactobacillus)细菌的益生菌组合。

7、然而，一直存在对于改善的益生菌组合物制剂的需求，特别是对于导致改善的口腔健康、改善的口腔集群、改善的功效、改善的贮存期、对于不同和特定的口腔疾病的功效以及其它改善中的一种或多种的制剂以及给药或使用其的方法。

技术实现思路

1、本发明的一个方面提供用于口腔卫生的组合物，其包含口腔卫生有效量的益生菌，所述益生菌包含瑞士乳杆菌(lactobacillus helveticus)菌株。

2、本发明的第二方面提供用于口腔卫生的组合物，其包含口腔卫生有效量的益生菌，所述益生菌包含瑞士乳杆菌菌株和胚芽乳杆菌(lactobacillus plantarum)菌株。

3、本发明的第三方面提供用于口腔卫生的组合物，其包含口腔卫生有效量的益生菌，所述益生菌包含瑞士乳杆菌菌株和长双歧杆菌(bifidobacterium longum)sd5846。

4、本发明的第四方面提供用于治疗或预防龋的组合物，其包含龋预防有效量的益生菌，所述益生菌包含胚芽乳杆菌sd5870。

5、本发明的第五方面提供用于治疗或预防龋的组合物，其包含龋预防有效量的益生菌，所述益生菌包含长双歧杆菌sd5846。

6、本发明的第六方面提供上述益生菌用于口腔卫生的用途。

7、本发明的第七方面提供上述益生菌用于制备用于口腔卫生的药物的用途。

8、本发明的第八方面提供治疗或预防个体中口腔病况或疾病的方法，其包括向所述个体口服给药上述益生菌。

9、本发明的第九方面提供市售包装品，其包含上述益生菌及其用于口腔卫生的说明。

10、所述益生菌包含瑞士乳杆菌菌株，或基本上由其组成。所述益生菌可包含瑞士乳杆菌菌株和一种或多种其它益生细菌，或基本上由其组成，所述一种或多种其它益生细菌优选为乳杆菌、双歧杆菌和/或链球菌属，更优选一种或多种其它乳杆菌，更优选一种其它乳杆菌。所述益生菌可包含瑞士乳杆菌菌株和胚芽乳杆菌菌株(特别是胚芽乳杆菌sd5870，商业上称作胚芽乳杆菌lp-2001)，或基本上由二者组成。术语“基本上由...组成”表示不存在其它益生细菌，或者其它益生细菌以无关紧要的量存在。所述瑞士乳杆菌菌株优选包括瑞士乳杆菌lafti l10、瑞士乳杆菌r0052或其混合物。所述瑞士乳杆菌菌株更优选包括瑞士乳杆菌lafti l10。

11、为了特定地治疗或预防龋，作为另外的选择，所述益生菌可包含胚芽乳杆菌sd5870或长双歧杆菌sd5846。所述益生菌优选包含胚芽乳杆菌sd5870与唾液链球菌m18和唾液链球菌k12中之一或二者的组合。优选地，所述益生菌基本上由胚芽乳杆菌sd5870组成，或者基本上由胚芽乳杆菌sd5870与唾液链球菌m18和唾液链球菌k12中之一或二者组成，使得不存在其它益生细菌，或者其它益生细菌以无关紧要的量存在。

12、口腔卫生包括预防或治疗口腔的病况或疾病。这样的病况或疾病包括例如龋(蛀牙)、口臭、龈炎、包括口疮性口炎(口疮)的口腔溃疡、念珠菌病和牙周病。在本发明的一个方面中，口腔中的变异链球菌群落被抑制，得到更好的口腔卫生。在一特别优选的实施方案中，龋被预防。可使用本发明的个体包括例如哺乳动物。个体可包括灵长类、人或驯养动物。驯养动物的一些实例为犬、猫和马。

13、以所述组合物的总重量计，所述组合物可包含约0.0001重量％至约100重量％的益生菌。任选地，所述益生菌可为所述组合物的约0.001重量％至约50重量％，或者约0.001重量％至约10重量％，或者约0.001重量％至约5重量％。所述组合物中益生菌的口腔卫生有效量一些程度上取决于个体的年龄、益生细菌的类型、给药频率、剂型、给药方法和个体的共生口腔微生物区系的变异性。例如，约107至1011个菌落形成单位(cfu)的益生菌剂量通常为适合的；特别是对于锭剂，优选每个锭剂约108至1010个cfu的益生菌剂量，最优量取决于所述组合物中益生菌的一种或多种菌株以及给药频率(可为每天1个锭剂至4个锭剂)。益生菌的给药可在任意方便的时间进行，例如在刷牙期间或刷牙之后，或者在膳食期间或膳食之后。

14、组合物包含膳食益生菌，并且可包含本领域通常已知的其它成分，例如一种或多种再矿化剂、益生元、载体、稀释剂、赋形剂等。所述其它成分优选药学上可接受的，或者至少对于口腔中使用可接受的。

15、变异链球菌通过分泌溶解矿物质钙和磷酸盐来产生腐蚀牙基质的作用。在酸分泌数月后，去矿化会扩展至釉质，并最终扩展至牙本质。尽管在该阶段是可逆的，但进一步的进展会导致龋洞形成，并使牙修复成为必需。唾液具有重要的作用，其不仅作为令人不愉悦的酸的天然缓冲剂，而且是用于牙的再矿化的钙和磷酸盐的来源，这自然地阻滞或者甚至逆转病理。则龋形成是通过致病菌的去矿化与再矿化的动态平衡。干预和预防性治疗经常集中于通过加入用于再矿化效果的药剂来使所述平衡向再矿化倾斜。再矿化剂包括例如酪蛋白磷酸肽-无定形磷酸钙(cpp-acp)、β-磷酸三钙、无定形磷酸钙的纳米颗粒(nacp)、羟基磷灰石(hydroxyapitite)、甘油磷酸钙或者钙与磷酸盐的其它变体。可以所述组合物的1-10wt％，优选1-4wt％的量加入所述再矿化剂。还向许多牙科制品中添加氟化物，因为其是再矿化的有效催化剂，并且其掺入结晶结构，得到比最初的更有抗性的牙表面。值得注意的是，酪蛋白磷酸肽-无定形磷酸钙(cpp-acp)(参见美国专利7,491,694，将其公开内容通过援引加入本文)是特别有效的，因为源自乳蛋白质的结合肽将磷酸钙结合并稳定化为容易被生物利用的溶解的无定形形式。预计防止去矿化的益生菌制剂与再矿化剂(特别是cpp-acp)的组合在龋的预防性治疗中会具有甚至更高的有效性。

16、在某些情况中，将益生元包含入组合物中增强了益生菌的有效性。益生元主要起到饲喂微生物菌群的作用。术语“合生素”描述包含益生元和益生菌的组合物。可用于本发明的益生元的一些实例包括例如单糖、二糖和寡糖，诸如甘露糖、果聚糖、果糖寡糖(fos)、木寡糖(xylooligosaccharide)(xos)、聚葡萄糖和半乳寡聚糖(gos)、乳果糖、塔格糖、菊糖、麦芽糖糊精、拉克替醇及其混合物。通常，所使用的益生元的量远大于益生菌的量，例如克量的益生元可用于毫克量的益生菌。

17、用于口服组合物的载体、稀释剂和赋形剂是本领域通常已知的，并且包括例如吸收剂、酸化剂、碱化剂、粘合剂、缓冲剂、包衣、着色剂、控释剂、控释载体、稀释剂、崩解剂、泡腾剂、调味剂、助流剂、滑润剂、增塑剂、溶解度增强剂、湿润剂、表面活性剂、防腐剂、甜味剂、增香剂等。一些具体实例包括乳糖、葡萄糖、果糖、蔗糖、山梨糖醇、甘露醇、淀粉、阿拉伯树胶、磷酸钙、藻酸盐、黄蓍胶、明胶、硅酸钙、聚乙烯吡咯烷酮、纤维素(例如微晶纤维素)、水糖浆、水、水/乙醇、水/乙二醇、水/聚乙二醇、丙二醇、甲基纤维素、羟苯甲酯、羟苯丙酯、滑石、硬脂酸镁、矿物油或脂质物质(例如硬脂)或者其适合的混合物。

18、赋形剂的特别优选的种类是代糖，其用作对于血糖水平具有减少的或可忽略的作用的甜味剂。优选地，所述代糖是非生龋的。这样的代糖包括例如糖醇(例如异麦芽酮糖醇(isomalt))、甜叶菊、阿司帕坦、三氯蔗糖(sucralose)、纽甜(neotame)、乙酰氨基磺酸钾和糖精。甜叶菊和异麦芽酮糖醇是特别值得注意的。甜叶菊是基于甜菊醇糖苷，并包含植物甜叶菊(stevia rebaudiana)的提取物。异麦芽酮糖醇是两种二糖的等摩尔混合物，所述两种二糖各自包含两种糖，葡萄糖和甘露醇((α-d-吡喃葡糖苷基(glucopyranosido)-1,6-甘露醇)，以及葡萄糖和山梨糖醇(α-d-吡喃葡糖苷基-1,6-山梨糖醇)。异麦芽酮糖醇特别地改善了本发明的组合物的稳定性。某些代糖(例如异麦芽酮糖醇)还可被认为是益生元。

19、可将本发明的组合物向个体以口服剂型口服给药或者以局部剂型给药。适合的剂型包括例如片剂(例如泡腾片剂和/或多层片剂)、丸剂、散剂、锭剂(包括多层锭剂)、药囊剂、扁囊剂、酏剂、混悬剂、乳剂、溶液剂、糖浆剂、气雾剂、胶囊剂、糊剂(例如牙膏)、食品和糖果(例如口香糖)。这样的剂型的配制是本领域公知的。本发明的组合物具有在至少24个月的时间，甚至在至少30个月的时间，于室温(20-25℃)下维持有效cfu数的益生菌菌株的良好的稳定性。在某些储存条件(例如在2-8℃的冷藏条件)下和/或在不同递送系统(例如药囊剂/药筒(powder stick))中，贮存期可延长至超过36个月。

20、所述组合物可以市售包装品连同所述组合物用于口腔卫生的说明的形式在市场上提供。市售包装品包括例如瓶、罐、塑料定型包装、盒等。可提供例如视觉或音频形式的说明，如在文字中、在图片中，在声音和/或视频记录介质上，或其组合。

21、会描述本发明的其它特征，或者本发明的其它特征在随后的详细描述期间会变得清楚。