一种载多西他赛胶束的温敏水凝胶制备方法及应用与流程

本发明属于生物医药，具体而言属于一种载多西他赛胶束的温敏水凝胶的制备方法及应用。

背景技术：

1、膀胱癌是泌尿系统最常见的恶性肿瘤之一，在尿路上皮癌中占90％以上，每年导致全球近17万人死亡。根据是否侵入肌肉层，膀胱癌可分为肌层浸润性膀胱癌和非肌层浸润性胱癌两大类，其中非肌层浸润性胱癌占70％。nmibc患者经尿道膀胱肿瘤切除术后，再辅以膀胱灌注，以达到防止肿瘤复发的目的，这也是当前nmibc的主流治疗方式。

2、传统的膀胱灌注方式是在无菌操作条件下，经导尿管向患者膀胱内灌注无菌生理盐水或药物，以达到检查或治疗的目的。但药物直接暴露，会刺激膀胱黏膜，易导致化学性膀胱炎。并且，膀胱的生理功能造成药液易被稀释和代谢；尿路上皮的尿钙、膀胱表面黏膜层等作为膀胱的通透性屏障，也进一步阻碍了药物的吸收，所以传统的膀胱灌注需要长期、多次给药才能起效，这也导致患者的依从性较差。

3、纳米载体、水凝胶载药库的发展都为膀胱癌的治疗带来了新的机遇。纳米载药系统可以改善药物的水溶性和药物在体内的动力学特征，但单独的纳米递药系统易受体内环境影响，不稳定；医用水凝胶不含有毒化学物质，可生物降解性，是生物医学的理想材料，但目前的制备方法所制得的水凝胶对疏水性药物的荷载量有限、与膀胱接触时间短。

4、有鉴于此，特提出本发明。

技术实现思路

1、本发明的第一目的在于提供一种单载药温敏水凝胶的制备方法，通过对制备方法的改进，可以粘附膀胱表皮，增加药物与膀胱接触的时间，使得凝胶侵蚀时才释放药物，可以起到缓控作用。

2、本发明的第二目的在于提供上述单载药温敏水凝胶的制备方法的所制备的温敏水凝胶，可粘附于膀胱表皮，通过直接接触释放药物发挥药效，该凝胶可利用膀胱空腔脏器的生理解剖特点进行膀胱内灌注给药，操作方便无创，患者顺应性强。

3、本发明的第三目的提供了一种上述单载药温敏水凝胶制备方法制备的单载药温敏水凝胶以及所述的单载药温敏水凝胶在制备治疗肿瘤的药物中的用途，应用在膀胱肿瘤治疗的药物制剂或术后局部递药系统中。

4、为实现本发明的上述目的，特采用以下技术方案：

5、一种单载药温敏水凝胶的制备方法，包括：

6、多西他赛与ac载体在甲醇中超声混合均匀，得到二者的有机溶液，将所得的有机溶液中的甲醇旋干，并通过薄膜水化法制备载多西他赛胶束溶液；

7、将所述多西他赛胶束溶液，过滤，通过冷冻干燥法得到多西他赛胶束粉末制剂；

8、将适量的泊洛沙姆p407、聚乙二醇400以及羟丙基甲基纤维素加入磷酸缓冲盐溶液中，冰浴下搅拌，待其充分溶胀，得到空白水凝胶溶液；

9、将所述多西他赛胶束粉末制剂用磷酸缓冲盐溶液溶解，在冰浴搅拌条件下加入到所述空白水凝胶溶液中，混合均匀，得到单载药温敏水凝胶。

10、优选地，作为进一步具体的实施方式，所述甲醇纯度为100％，所述羟丙基甲基纤维素的型号为ⅱ型4000m·pa·s；

11、优选地，作为进一步具体的实施方式，所述超声时间为2-5min。

12、优选地，作为进一步具体的实施方式，所述ac载体与多西他赛的质量比为1:1-2:1，优选1.5:1。

13、优选地，作为进一步具体的实施方式，述多西他赛与ac载体在20℃-30℃的条件下进行混合。

14、优选地，作为进一步具体的实施方式，所述多西他赛与ac载体的有机溶液中，多西他赛的浓度为3mg/ml-5mg/ml。

15、优选地，作为进一步具体的实施方式，所述的泊洛沙姆p407与羟丙基甲基纤维素质量比为(200:1)-(100:1)。

16、优选地，作为进一步具体的实施方式，所述多西他赛胶束粉末制剂使用适量的磷酸缓冲盐复溶。

17、优选地，作为进一步具体的实施方式，所述多西他赛胶束的复溶液与空白水凝胶的体积比例为5:95-10:90。

18、优选地，作为进一步具体的实施方式，所述多西他赛胶束复溶液与空白水凝胶的搅拌时间约为2min-5min，且为温和搅拌。

19、本发明以纯度为100％的甲醇作为溶剂，在20-30℃的条件下与多西他赛和ac载体混合，可以使多西他赛与ac载体的在分子层面混合更加均匀，能够使分子结合更为紧密，使得所制的载药胶束更为均匀。本发明选择ac载体与多西他赛的质量比在(1:1)-(2:1)范围内，1.5:1时为最优方案，当ac载体的量过多时，会使得单个胶束的载药量降低，当多西他赛的量过多时，会导致包封不完全。在制备过程中二者的比例在(1:1)-(2:1)范围内时能够达到本发明的目的，多西他赛与ac载体的质量比还可以为(1.1:1)、(1.2:1)、(1.3:1)、(1.4:1)、(1.6:1)、(1.7:1)、(1.8:1)或(1.9:1)。在制备过程中由于胶束水溶液长期储存容易聚集沉淀、导致变质，因此本发明将多西他赛的胶束溶液制备为粉末制剂，便于保存，同时可以延长其有效期，并且也方便每次实验时定量取用。

20、本发明所述ac载体材料，分子量为513.8。是发明人根据oasmia公司专有的xr-17技术，改造化合物后合成的新载体。其稳定性高，与多西他赛相结合，不但可以增加疏水性药物的载药量，同时能够增加给药后药物的渗透性能，专利号为cn112321465a。

21、多西他赛是m期特异性药物，能够显著抑制癌细胞的dna复制，并促进了肿瘤细胞中的细胞凋亡。泊洛沙姆p407是医用凝胶中的一种，在低温环境下(15℃以下)为溶液状态，体温环境下能较快地转变为胶凝状态，并且对皮肤具有粘附作用。它的生物相容性好，皮肤粘附性强，能够增加药物与皮肤接触的有效时间，避免药物释放过快，防止水溶性药物直接暴露，本发明在低温的条件下进行搅拌，可以使各组分溶解更充分，同时使得所制出的凝胶更加均匀。

22、在泊洛沙姆p407与羟丙基甲基纤维素质量比为(200:1)-(100:1)的情况下制剂的胶凝时间适宜，既不会因为凝胶过快而无法灌注至给药部位，也不会因为凝固过慢而漏出。

23、在制备过程中，多西他赛胶束复溶液与空白凝胶的混合需要在冰浴环境下温和搅拌。由于药物在凝胶中的扩散性能较差，静置不易混合均匀，因而搅拌是必须的，但搅拌时间过长、力度过大可能会影响胶束结构，因此需要温和搅拌约2min-5min最佳。

24、本发明还提供了一种上述载药温敏水凝胶制备方法制备的温敏水凝胶，可粘附于膀胱表皮，通过直接接触释放药物发挥药效。

25、本发明还提供了一种上述载药温敏水凝胶制备方法制备的单载药温敏水凝胶以及所述的单载药温敏水凝胶在制备治疗肿瘤的药物中的用途，其中，所述肿瘤为膀胱癌，所述单载药温敏水凝胶应用于肿瘤术后灌注治疗或术后局部递药。

26、与现有技术相比，本发明的有益效果在于：

27、(1)本发明的单载药水凝胶系统具有可灌注性，可作为药物储库进行膀胱灌注，使所载药物以稳定可控的速率、合适的浓度在膀胱肿瘤局部缓慢释放，实现精准给药，一方面充分发挥药效、杀伤肿瘤细胞；另一方面可极大地降低静脉用药引起的全身毒副作用；

28、(2)本发明制备方法简单、实用性强，易于推广。