专利名称：：治疗不育症的lhrh－拮抗剂的制作方法本申请是在1996年2月7日提交的60/011,282号临时申请的基础上作出的，该临时申请的内容结合在此作为参考。本发明涉及LHRH-拮抗剂的用途，该LHRH拮抗剂用于治疗男性及女性不育症。怀孕失败的原因被认为是男性及女性不育症的结果。当前，已存在多种不同的辅助生殖技术。这些技术可诱导卵泡的多级、同步生长，得到可受精的卵母细胞。目前标准的疗法是通过给以大剂量的HMG(人绝经期促性腺激素)诱导卵泡的多级发育。这会导致卵巢过激。应用这些技术，在卵母细胞达到适度成熟的基础上，通过给以HCG(人绒毛膜促性腺激素)诱导排卵，以获得足量的卵母细胞。于是可以开始进行临床基本措施的准备工作。其准备工作为通过经腹腔或经阴道穿刺回收卵母细胞，再将卵母细胞以不同技术在体内或体外受精，然后将胚胎在子宫中复位。通常，通过额外的HCG或黄体酮给药才能开始怀孕。如今，这种方法已在临床上用于治疗男性及女性不育症。在过激过程中频繁出现的并发症有A约25％的病人黄体化激素(LH)呈早熟状态，会发生早熟突变，同时卵泡破裂，随后导致治疗失败；B外源性促性腺激素诱发卵巢过激综合征，重者需住院治疗并有生命危险。为避免早熟的LH突变，目前使用LHRH拮抗剂作为公用药物。连续给以这些药物，通过垂体细胞的脱敏作用以及内源性促性腺激素受体水平的下调，能完全抑制内源性促性腺激素。其次，通过外源性注射可控制促性腺激素水平，通过提高雌甾二醇水平可使垂体不应于LH的释放刺激。不利之处在于1)抑制和下调所需的治疗期长；2)产生雌激素戒断症状；3)正常的月经周期失调；4)需要经常进行激素测定，以判定抑制的起始时间；5)卵巢兴奋需要大剂量的HMG。过激综合征的发病机理尚不完全清楚，不过可以认为其与HCG的使用有关，HCG是用来诱导排卵和维持黄体期的。一份最近的研究涉及LHRH拮抗剂Cetrorelix的用途(INN)。在首先进行的临床试验中，短期使用Cetrorelix的疗法完全避免了兴奋周期中早熟的LH突变，该方法也无需使用HMG。该拮抗剂由于立即抑制促性腺激素，也就避免了激动期的产生，而这正是人们所不希望看到的，同时还避免了由激动剂引起的雌激素戒断症状。治疗的持续时间亦显著缩短。此外，研究表明，在卵泡中期单一注射拮抗剂，将充分抑制早熟的LH突变。以上治疗方式尽管有所改进，仍然存在这样的缺陷，即在对病人进行治疗时，很可能要使用大剂量的外源性促性腺激素，以过度激发卵泡的多级发育，这会导致某些严重的不良后果。本发明可减少严重的不良后果，提高病人的顺应性，并降低成本。最近的Cetrorelix研究数据也表明，在治疗男性及女性不育症方面已取得崭新的、令人惊奇的进步。在Cetrorelix的动物实验和临床研究中，通过多级或单一注射可引起正常未激活的卵泡生长停止。该作用是在极低剂量水平观测到的。低剂量水平在正常的、而不是由外源性促性腺激素诱导的周期中为控制排卵时间提供了新的可能，且并不影响卵泡生长的成活力。在涉及用LHRH拮抗剂治疗卵泡生长不充分的情况下，低剂量或短期的促性腺激素或其它营养化合物给药会对这些结果进行代偿。其次，停止LHRH拮抗剂给药治疗后，还能进行正常排卵。或者，如果必要的话，用外源性操作条件诱导排卵。排卵的诱导是通过给以标准的HCG或者给以LHRH和/或LHRH激动剂类似物进行的。所述疗法的各种选择背离现有原始记录的唯一的条件是，这些方法优于用一种LHRH拮抗剂防治LH突变。Cetrorelix的动物和临床研究表明，垂体对LHRH或激动剂类似物的应答性在这些治疗条件下被保护起来了。如果没有进行该治疗，在激动剂对LH突变防治进行预处理后，由于受体水平下调，垂体就不能产生应答。此外，使用除HCG以外的排卵诱导剂能降低卵巢过激综合征的发病率。基于上述结果，在包括精子注射在内的辅助生殖技术中，通过测定排卵时间来利用正常的、非促性腺激素诱导的治疗周期可能还是第一次，排卵时间的测定是由Cetrorelix给药的持续时间和剂量决定的。尤其是在与ICSC(细胞质内精子注射)法共同使用时，拮抗剂依赖的治疗方式简化了对不育(低生育力的)男性进行的提高生育力的治疗。由于是直接注射男性的具有受精能力的配子，这种方法的成功率较高，因此可以仅获得一个受精卵泡。此外，以所述方式使用诸如Cetrorelix的LHRH拮抗剂可使病人免受严重的卵巢过激之苦，并显著降低治疗周期的成本。本发明的LHRH拮抗剂可结合辅助生殖技术使用，尤其是体外受精的技术，例如在玻璃试管内受精及精子注射技术。具有所需LHRH拮抗活性的化合物包括LHRH类似物，诸如Ganirelix，Antarelix，AzalineB，Ramorelix，A-76154，Nal-Glu，88-88，尤其是Cetrorelix，或具有LHRH拮抗活性的截断结构的肽，或具有LHRH拮抗活性的肽模拟物，例如D-23980和D-24824，或一种具有拮抗活性的二环(1-4、4-10)LHRH类似物。本发明的LHRH拮抗剂可经皮下给药，剂量范围为0.001-0.2毫克/千克。有两种剂量方案都能防止任何早熟的LH突变。按这两种剂量学给药后，高质量的卵泡和卵母细胞带来了高受精率，因此怀孕率也较高。迄今为止，按下述这两种疗法，已有44名健康的婴儿出生。单一剂量制仅需一次3毫升注射。这对病人来说是很方便的。目前，防止早熟LH突变的持续时间可达6.5天。3天后建议进行激素水平监测，因为万一延长HMG给药时对HMG应答较低，以及如果LH水平升高，都要进行第二次注射。多级剂量方案要求每日注射1毫升，注射3至7天，有时直至10或14天。这不如单一或双重注射那么方便。不过从另一方面来说，不需要对激素水平进行规则地监测，在极少数情况下，如果必要，甚至可能延长HCG给药。总之，从医学观点上来讲，两种疗法具有相似的功效、安全性和可行性，因此，每一位妇科学家在考虑了每个病人的具体情况后都应能选择出一种剂量方案来。II期临床试验结果见表I。共对235名病人进行了治疗。在接受COS/ART法治疗的病人中没有发现早熟的LH突变，该疗法采用0.25毫克或更高的多级剂量，或者3毫克或更高的单一剂量。在多级剂量方案中，Cetrorelix的平均给药时间为6天。1996年5月底已有25名婴儿出生(7名为多级剂量法；18名为单一/双重剂量法)。表I</tables></tables>使用Cetrorelix的受控促卵巢成熟法(COS/ART)的主要优点是1.新颖的治疗原理a)防止早熟的LH突变b)均一、连续的卵泡同步生长c)均一、连续的雌甾二醇生成d)最佳卵泡发育所需的LH水平非常低2.疗程短，3至7天、最多14天a)卵泡发育过程中暴露时间短b)卵泡发育过程中药物作用小3、立即而非突发的激素应答4、在HMG给药前14至21天无需预处理5、与正常的月经周期吻合良好a)没有改变生理学上的月经周期方式b)诱导前没有激素戒断症状6、诱导排卵后，没有或仅有极短的残留效应7、在胚胎转移中及转移后没有残留效应8、在诱导开始前没有卵巢囊肿形成9、HMG用量的削减表II(流程图)显示了使用HMG和Cetrorelix的典型疗程的起始及过程，在该疗程中对病人按ART采用受控卵巢排卵过速的方法。评价法一览表II(流程图)</tables>X1＝注射hMG的第一天(d1)在确认来月经、没有怀孕(早晨进行)之后hCG→忽略不计(≤10国际单位/升)；P≤1纳克/毫升(≤3.81纳摩尔/升)；FSH≤10国际单位/升；没有卵巢囊肿(≥2厘米φ引起E2≥50微微克/毫升(≥185微微摩尔/升))。hMG的第一天＝月经周期的第2或3天！X2＝依赖于卵泡成熟的hMG给药的前一天(见X3)。X3＝注射10,000国际单位hMG日至少有一个卵泡的平均直径由超声波(USS)测量达到20毫米、或观察到E2≥1,200微微克/毫升(≥4,405微微摩尔/升)就开始注射。X4＝注意一旦在诱导阶段中有12个卵泡以上≥15毫米φ或E2≥4,000微微克/毫升(≥14,684微微摩尔/升)→禁止注射hCG！→周期取消！X5＝按照中心法则维持黄体期按中心法则注射hCG或者按中心法则经阴道给以黄体酮(如3×200毫克/天)！X6＝任何有关早熟的研究终止都应有资料证明(如脱落的情况)。X7＝在医院或以外、在注射hCG当天抽取2次血样(早晨和hCG给药以后)供激素测定。超声波(USS)(X)按中心法则在注射hMG后的第6天至注射hCG当天之间进行！USS应在注射hCG当天进行。实施例对238名病人皮下注射CetrorelixAcetat-Lyophilisat。134名病人按多级剂量方式给药，104名病人按单一或双重剂量方式给药。多级剂量为0.25毫克/天或更高。单一剂量为3毫克或更高。按上述剂量，在接受采用辅助生殖技术的受控卵巢排卵过速(COS/ART)的方法治疗的病人中没有发现早熟的LH突变。根据卵泡发育的不同，多级剂量给药时间为3至最多10天。结果，共有71人怀孕＝30.0％按多级剂量方式的134人中有38人怀孕＝28.4％按单一/双重剂量制的104人中有33人怀孕＝31.7％按此疗法，已有44名婴儿出生，也就是说，按多级剂量的有15名，按单一/双重剂量的有29名出生。另有16人正在怀孕。详见图1。图1显示，早熟的LH突变被完全防止了。而且，FSH分泌物维持在自然水平，因此不会影响到个体雌激素的生成。权利要求1.一种LH-RH拮抗剂在制备用于治疗不育症的方法的药物中的用途，该方法是给以一种LH-RH拮抗剂，并通过给以外源性促性腺激素诱导卵泡生长，该外源性促性腺激素中含有一定量的LH-RH拮抗剂，该LH-RH拮抗剂的含量低至能仅抑制内源性LH，使FSH维持在自然水平，且个体雌激素的生成不会受到影响。2.根据权利要求1的用于治疗不育症的方法中的制剂，该方法是给以一种LH-RH拮抗剂，并通过给以外源性促性腺激素诱导卵泡生长，所述拮抗剂为Cetrorelix。3.根据权利要求2的制剂，所述卵泡的生长是用除外源性促性腺激素以外的物质激发的。4.根据权利要求2的制剂，在所述LH-RH拮抗剂、优选为Cetrorelix作用于天然LH产生抑制作用后，卵泡的发育不是由外部因素激发(例如加入促性腺激素)，而是由内源性促性腺激素维持。5.根据权利要求2的制剂，所述Cetrorelix在多级给药剂量学中的皮下给药量范围为0,1至5毫克/天。6.一种LH-RH拮抗剂在制备用于受控促卵巢成熟法的药物中的用途，该方法中Cetrorelix在月经周期的第1至10天、优选为第4至8天给药，排卵可在月经周期的第8至18天之间诱导。7.根据权利要求1的药物，所述LH-RH拮抗剂经单一或双重皮下给药，剂量范围为1毫克至10毫克，优选为2毫克至6毫克。8.用于受控促卵巢成熟法的药物，该方法中优选LH-RH拮抗剂Cetrorelix如权利要求7所述在月经周期的第6至10天给药，排卵可在月经周期的第9至16天之间诱导。9.根据权利要求6的药物，所述排卵由rec.LH诱导。10.根据权利要求6的药物，所述排卵由天然LHRH诱导。11.根据权利要求6的药物，所述排卵由LHRH激动剂诱导。12.根据权利要求6的药物，所述排卵由HCG诱导。13.根据权利要求8的药物，所述天然LHRH或LHRH激动剂通过在黄体期给与来防止HCG产生负效应以避免黄体期兴奋。14.根据权利要求8的药物，所述rec.LH、天然LHRH或LHRH激动剂用来避免过激综合征的产生。全文摘要一种治疗不育症的方法,该方法为1)以一种LH－RH拮抗剂、优选为Cetrorelix给药,给药剂量能使其选择性地抑制内源性黄体化激素(LH),而不抑制促卵泡成熟激素(FSH)分泌物,和2)通过以外源性促性腺激素给药来诱导卵泡生长。选择性抑制LH可以使FSH分泌物维持在自然水平,就不会影响到个体雌激素的生成。文档编号A61K38/08GK1199642SQ97111580公开日1998年11月25日申请日期1997年5月16日优先权日1997年5月16日发明者P·伯查德,R·弗雷德曼,P·德洛伊,K·狄里奇,J·艾格尔申请人:Asta药物股份公司