专利名称：用于减少胆固醇以及脂质含量的物质的制作方法
技术领域：
本发明涉及减少哺乳动物、特别是人类血清胆固醇及脂质含量的物质。
已知脂质和胆固醇影响人类健康，例如体重超重问题和心血管疾病。已经作了许多尝试减少食物中所含脂质和胆固醇的不利作用。一种可供选择的方法是特殊的低脂肪或不含脂肪的膳食。另一种解决办法是给予特殊药物或使用特殊的食品添加剂。
美国专利4223023公开了将标准壳聚糖用作食品添加剂以及可口服给药降低脂质吸收的制剂。
WO98/34625描述了凝胶样分散剂和/或散剂形式的微晶壳聚糖降低脂质和胆固醇的作用，其中所述微晶壳聚糖的特征为对于降低胆固醇其平均分子量高于1,000道尔顿、优选10,000-300,000道尔顿，对于降低脂质其分子量高于10,000道尔顿、优选50,000-700,000道尔顿，而且其脱乙酰程度高于60％。此公开内容描述了微晶壳聚糖降低胆固醇和脂质含量的一般活性。
所有广为人知的基于壳聚糖的减肥和降低胆固醇药物其活性以及作用的有效性是非选择性的。
本发明的目的是应用微晶壳聚糖有效地、特异地以及选择性地降低胆固醇及脂质含量。为达到此目的，适合口服给药形式的所述物质的主要特征为具有两个部分的平均分子量不同的微晶壳聚糖。这两部分微晶壳聚糖同时存在于通过混合这两种成分制备的同一制品中，每个微晶壳聚糖部分具有各自特征性的分子量分布和平均值。较低平均分子量的微晶壳聚糖部分具有降低胆固醇水平、特别是有害LDL胆固醇的作用，而加入同一制剂中的具有较高平均分子量的部分具有降低脂质的作用。这两种微晶壳聚糖也有可能在其它性质上还有差异。按照一个优选实施方案，所述制品微晶壳聚糖与协同活性物质组合以增强对胆固醇和脂质的降低作用。
至少两个部分的所述微晶壳聚糖为散剂和/或凝胶样分散剂形式，并且将其与协同活性物质例如有机酸如抗坏血酸和/或碳酸盐如碳酸钠、碳酸钙和/或碳酸镁组合以提高该物质在机体中的有效性并增加胆固醇和脂质的降低。
按照本发明的一个优选实施方案，微晶壳聚糖与协同活性物质以1∶0.001-0.001∶1重量比、优选1∶0.01-0.01∶1组合。
按照本发明的一个优选实施方案，所述混合的选定聚合物部分的多分散性低于4.0。用于降低胆固醇含量的第一个部分的平均分子量低于140kD、优选20-140kD。用于降低脂质含量的第二个部分的平均分子量高于140kD，优选160-400kD，最优选200-400kD，因此它具有减肥作用。所述两个部分的微晶壳聚糖的重量比为1∶99999-99999∶1，优选1∶4999-4999∶1。最实用实施方案的重量比为1∶19-19∶1，优选1∶9-9∶1。
将所述微晶壳聚糖与添加剂组合，该添加剂的特征为与这类能够与胆固醇和脂质形成复合物的天然聚合物质具有高度协同作用。所述协同添加剂在微晶壳聚糖存在下可改善特别形式的壳聚糖活性、保护所述哺乳动物机体系统以及对去除脂溶性维生素A和维生素E起保护作用，所述添加剂包括有机酸如抗坏血酸和/或适当的碳酸盐如碳酸钠、碳酸钙和/或碳酸镁组成。微晶壳聚糖具有高度丰富(highlydeveloped)的固有表面、大量正电荷以及较强的生成氢键和离子键的性能，并能与所述协同活性物质形成复合物。所述碳酸盐有助于所给予的制剂在胃肠道发挥有益的作用，并通过接触胃酸性环境时释放的二氧化碳使微晶壳聚糖充分地分散在胃中。此外，通过适当选择不同碳酸盐之间的平衡可调节所述制剂的pH。
按照本发明，微晶壳聚糖降低胆固醇和/或脂质的作用速率的选择与其成分含量以及低于4.0的多分散度有关。用酶使以粘度平均分子量在140kD以下、优选20-140kD限定的第一部分微晶壳聚糖较快降解产生适量的低聚氨基糖(oligoaminosaccharide)，该低聚氨基糖具有假定结构而且能够以高结合率与胆固醇、特别是其低密度部分LDL(低密度脂蛋白)结合。用粘度平均分子量140kD以上、优选160-400kD、最优选200-400kD限定的第二部分微晶壳聚糖，使脂质含量降低。所用上述各部分的适当比例的微晶壳聚糖使得一方面具有选择性、特异性地降低胆固醇的作用，另一方面又具有降低脂质作用。
按照本发明所述包含微晶壳聚糖的物质在患者用其治疗四周后，使总胆固醇含量与初始水平相比降低6％以上，LDL胆固醇含量降低15％以上。
含微晶壳聚糖物质的优势与其从散剂到凝胶样分散剂的多种可能形式有关。使用本发明所述物质时不必特殊膳食。
所述物质的基本组分可和药学上可接受的载体一起包含于可口服给药单位中。因此所述物质可为胶囊剂、片剂或丸剂形式。
采用以下方法确定微晶壳聚糖的性质- 按照“Chitin’，Pergamon Press，Oxford，1977中所述方法测定粘度平均分子量。- 按照“Cellulose Chemistry and Technology”，第11卷，第633页，1977中所述方法测定脱乙酰程度。- 按照凝胶渗透色谱法测定多分散性及各部分含量。
按照所述标准方法测定总胆固醇、LDL及HDL胆固醇甘油三酯以及维生素A和维生素E含量。
在以下实施例中对本发明作进一步解释，这些实施例不限制权利要求的范围。实施例1使用硬明胶胶囊剂降低胆固醇和脂质含量，所述胶囊剂包含400mg微晶壳聚糖粉(其特征为测定粘度平均分子量为137kD、脱乙酰程度为76％以及多分散度为3.84)和70mg协同活性物质(包括3.8mg抗坏血酸、18.8mg碳酸钠、25.8mg碳酸钙以及21.6mg碳酸镁)。51名身体质量指数(body mass index)为28.0-34.99的健康女性接受按照Declaration of Helsinki and Tokyo和当地伦理委员会审核的实验方案进行的体内测试。还按照Good Clinical Practice规则进行所述试验。要求患者保持包括饮食习惯在内的每日生活常规。使用作为安慰剂的包含淀粉的相同胶囊作比较。所述方法日剂量为2.4g微晶壳聚糖(每次3粒胶囊，每天2次)。对安慰剂应用同样体系。所述患者的特征见表1。
表1.治疗前患者特征(数据为均数±SD)患者治疗组壳聚糖/范围安慰剂/范围合计例数 24 27 51年龄(岁) 41.1±7.8/24-5741.3±7.1/19-5541.3±7.3身高(cm) 165.1 165.2 165.1体重(kg) 83.33±9.2/71-105 84.63±7.8/71-101 84±8.4身体质量指数 30.39±2.1/28-35 30.81±2.2/28-35 30.61±2fs-chol.tot.(mmol/l) 5.55±0.9 5.48±0.8 5.51±0.9fs-HDL(mmol/l)1.33±0.3 1.34±0.4 1.37±0.4fs-Trigl.(mmol/l) 1.24±0.6 1.40±0.6 1.33±0.6fs-LDL(mmol/l)3.65±0.9 3.45±0.7 3.55±0.8四周后的治疗参数见表2。表2.四周后的治疗参数参数 壳聚糖 安慰剂患者例数 24 27fs-chol.tot.(mmol/l) 5.23＋0.85.41＋0.8差别 -0.32-0.07fs-HDL(mmol/l) 1.48＋0.41.54＋0.5差别 +0.15+0.14fs-LDL(mmol/l) 3.18±0.83.27±0.7差别 -0.47-0.18fs-Trigl.(mmol/l)1.26＋0.61.34＋0.8差别 +0.2-0.06四周长时间的检测结果，用微晶壳聚糖治疗的患者血清平均总胆固醇降低0.32mmol/l，而以所述安慰剂治疗组只降低0.07mmol/l。微晶壳聚糖治疗组低密度胆固醇(LDL)降低0.48mmol/l，而所述安慰剂组只降低0.18mmol/l。
将0.1重量份微晶壳聚糖粉与99.9重量份微晶壳聚糖部分混合，所述微晶壳聚糖粉的特征为测定粘度平均分子量为300kD、脱乙酰程度为84.7％以及多分散度为3.42，所述微晶壳聚糖部分的特征为测定粘度平均分子量为123kD、脱乙酰程度为84.8％以及多分散度为3.67。所述混合的微晶壳聚糖粉的特征为测定粘度平均分子量为122kD、脱乙酰程度为84.8％以及多分散度为3.65。以胶囊剂形式应用400mg上述混合物及另外70mg实施例1中所述活性协同物质降低胆固醇和脂质含量。所用方法同实施例1。患者特征及8周后的治疗结果见表3.表3.患者特征及8周后的治疗参数参数壳聚糖 安慰剂治疗前治疗后 治疗前治疗后患者例数 1111 1414年龄，岁 38±8 -44±5 -身高，cm 165±7-165±6-身体质量指数 32±2 32±233±2 33±2fs-chol.tot.(mmol/l) 5.75±1.0 5.37±0.95.41±0.6 5.19±0.8差别 - -0.38- -0.22fs-HDL(mmol/l) 1.43±0.291.45±0.32 1.27±0.431.36±0.51差别 - +0.02- +0.09fs-LDL(mmol/l) 3.79±0.943.49±0.64 3.31±0.823.23±0.79差别 - -0.30- -0.08fs-Trigl.(mmol/l)1.20±0.451.40±0.39 1.33±0.491.33±0.43差别 - +0.2 - 08周长时间的检测结果，用微晶壳聚糖治疗的患者血清总胆固醇降低0.38mmol/l，而安慰剂组只降低0.22mmol/l。第一组低密度胆固醇LDL降低0.30mmol/l，而第二组只降低0.08mmol/l。同时试验前及试验8周后分析脂溶性维生素A和维生素E。该检测结果见表4。
表4.脂溶性维生素A和维生素E维生素类型壳聚糖治疗安慰剂治疗维生素A(μM/l)治疗前2.44±0.4 2.31±0.3治疗后2.41±0.3 2.29±0.3维生素E(μM/l)治疗前24.80±5.424.00±3.8治疗后24.60±5.424.91±4.1
脂溶性维生素检测结果证实，对于其含量而言，所用微晶壳聚糖是完全安全的。
按照S.Demarger Andre和A.Domard在Carbohydrate Polymers22(1993)117-126中描述的改进方法使用几种微晶壳聚糖(MCCh)粉样品(干重0.15g并具有相似的脱乙酰程度DD＝80-85％，以测定粘度平均分子量Mw＝20-180kD为特征)、与实施例1中所述组合物配制的MCCh制剂(测定粘度平均分子量为130kD，MCCh干重为0.15g)以及含标准壳聚糖(DD＝74％及Mw＝125kD)的市售“脂肪阻断剂”检测脂肪结合效率。
脂肪结合效率以结合脂肪总量相对于初始脂肪酸的百分率计算，见下表5。
表5.不同壳聚糖形式的脂肪结合效率壳聚糖类型Mw脂肪酸结合效率kD ％MCCh 20 44.4MCCh 16554.2MCCh 14557.0MCCh 18052.6MCCh制剂 13031.8含标准壳聚糖的市售12517.6“脂肪阻断剂”所示检测结果表明，总脂肪结合效率揭示所述MCCh作用与其平均分子量相关。与所述含标准壳聚糖的市售“脂肪阻断剂”相比，MCCh与实施例1组合物配制的制剂的总脂肪结合效率提高81％以上。
提高所述平均分子量使更多的脂质(75-87％)被吸收，且最佳Mw范围为200kD-400kD。
权利要求
1.用于降低胆固醇及脂质含量的物质，该物质基于固体剂或凝胶样分散剂形式的微晶壳聚糖，其特征在于以散剂和/或凝胶样分散剂形式使用的所述微晶壳聚糖包含至少两个平均分子量不同的部分的混合物。
2.权利要求1要求保护的物质，其特征在于所述混合的选定聚合物部分的多分散度低于4.0。
3.权利要求1或2要求保护的物质，其特征在于第一部分的平均分子量低于140kD、优选20-140kD以使胆固醇含量降低，而所述第二部分的平均分子量高于140kD、优选160-400kD、最优选200-400kD以降低与减肥作用有关的脂质含量。
4.权利要求1-3任一项要求保护的物质，其特征在于散剂和/或凝胶样分散剂形式的所述微晶壳聚糖与协同活性物质组合以增强所述胆固醇和脂质的降低，所述协同活性物质为例如有机酸如抗坏血酸和/或碳酸盐如碳酸钠、碳酸钙和/或碳酸镁。
5.权利要求4要求保护的物质，其特征在于所述微晶壳聚糖与碳酸钠、碳酸钙以及碳酸镁组合。
6.权利要求1-5任一项要求保护的物质，其特征在于所述两个部分的微晶壳聚糖的重量比为1∶99999-99999∶1。
7.权利要求6要求保护的物质，其特征在于所述两个部分的微晶壳聚糖的重量比为1∶4999-4999∶1。
8.权利要求7要求保护的物质，其特征在于所述两个部分的微晶壳聚糖的重量比为1∶19-19∶1，优选1∶9-9∶1。
9.前述任意一项权利要求要求保护的物质，其特征在于所述微晶壳聚糖与协同活性物质以重量比1∶0.001-0.001∶1、优选1∶0.01-0.01∶1组合。
10.前述任意一项权利要求要求保护的物质，其特征在于所述物质为可口服给药的胶囊剂、片剂或丸剂形式。
全文摘要
本发明涉及降低胆固醇及脂质含量的物质,该物质基于固体剂或凝胶样分散剂形式的微晶壳聚糖。所述微晶壳聚糖为散剂和/或凝胶样分散剂形式,它包含分子量不同的两个部分的混合物,一个部分降低所述胆固醇(LDL)含量,另一个部分降低所述脂质含量。将微晶壳聚糖进一步与协同活性物质组合以增强所述胆固醇和脂质的降低,所述协同活性物质为例如有机酸如抗坏血酸和/或碳酸盐如碳酸钠、碳酸钙和/或碳酸镁。
文档编号A61K31/715GK1331703SQ99814701
公开日2002年1月16日 申请日期1999年10月25日 优先权日1998年10月23日
发明者H·斯特鲁斯茨克, H·波梅尔, M·乌尔夫, E·塞伊奈特约基, P·伊利塔洛, E·沃里约基, H·海克利 申请人:诺瓦索有限公司